消毒剂消毒效果确认方案
消毒剂消毒效果确认方案
浓度&级别
编号
有效期至
PH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液
0.1%卵磷脂+0.1%吐温80+0.1%蛋白胨缓冲液
5.3菌种
微生物检验方法验证方案适用。
菌种
传代次数
编号
有效期至
金黄色葡萄球菌
铜绿假单胞菌
大肠埃希菌
枯草芽孢杆菌
白色念珠菌
黑曲霉
5.4培养基
培养基
批号
灭菌批号
有效期至
胰酪大豆胨液体培养基
胰酪大豆胨琼脂培养基
第四组：取消毒剂和中和剂1:1的混合液4.5ml+工作菌液0.5ml，混匀作用10min，取混合液A0.5ml+稀释液4.5ml，混匀作用10min后，用稀释剂进行10倍系列稀释成10-2、10-3。取相应稀释级0.5ml注皿，各平行制备2皿。
第五组：取稀释液4.5ml+工作菌液0.5ml，混匀作用10min，取混合液A0.5ml+稀释液4.5ml，混匀作用10min后，用稀释剂进行10倍系列稀释成10-2、10-3。取相应稀释级0.5ml注皿，各平行制备2皿。
6.1.4菌液准备
6.1.4.1菌液的制备：见XXXX《菌种传代、保藏、使用和灭活标准操作规程》。
6.1.4.2菌液计数确认：将金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌的新鲜培养物用PH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液按10倍梯度稀释成10-6、10-7、10-8三个浓度。枯草芽孢杆菌、白色念珠菌的新鲜培养物用PH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液按10倍梯度稀释成10-5、10-6、10-7三个浓度。
消毒剂消毒效果确认方案
姓名
职位
签名
日期
制定人
格式审核人
消毒剂消毒效果验证方案-精选.
1、验证方案的起草2、验证方案的审批3、验证方案的批准目录1 前言2 职责3 验证的方法及步骤4 异常情况及偏差处理5. 验证结果评价及建议6、再验证周期1.前言消毒剂主要使用在洁净控制区域，用于控制生产环境、设备表面等的微生物污染的一种化学剂。
由于没有一种消毒剂是完全理想的，因此有必要在实际工作中使用两种以上的消毒剂。
交替使用在理论上有利于防止形成相同环境的分离菌或抑制细菌的适应性。
本实验方案针对①75%乙醇、②1%新洁尔灭、③3%甲酚皂杀菌剂、④3%的过氧化氢溶液共4种消毒剂进行抑制或者杀灭微生物的效果确认。
1.1验证的目的本验证的目的在于制定方法及可接受标准，来评价消毒剂对微生物的杀灭效果。
1.3验证的范围75%乙醇、1%新洁尔灭、3%甲酚皂溶液、3%的H2O21.4验证内容：本验证先在实验室对所使用的消毒剂，用六种控制菌做生物指示剂挑战性实验；然后做现场消毒考察实验，即现场消毒后用棉签取样法对消毒后的表面取样，做表面残留微生物限度检查。
通过对指示菌的杀灭对数值和现场消毒后洁净区表面微生物的残留限度来确认消毒剂的消毒效果。
2. 职责2.1验证小组成员：2.2职责2.3验证进度3. 验证方法及步骤3.1实验材料3.3.1 菌株（1）细菌：金黄色葡萄球菌 (ATCC6538)铜绿假单胞菌(ATCC15442)大肠杆菌(ATCC25922)伤寒杆菌(ATCC6539)（2）细菌芽孢：枯草杆菌芽孢(ATCC9372)（3）真菌：白色念珠菌(ATCC10231)3.3.2 培养基无菌大豆胰蛋白胨琼脂培养基(TSA)、营养肉汤培养基。
3.3.3 稀释液：1%蛋白胨-0.03mol/L PBS 溶液3.3.4 中和剂：0.1%卵磷脂+1%吐温 80 溶液； 0. 5%硫代硫酸钠（3%过氧化氢）3.3.5 无菌试管3.3.6 无菌平皿(90mm)3.3.7消毒剂：75%乙醇、1%新洁尔灭、3%甲酚皂溶液、3%的H2O23.3.8移液器及配套无菌吸头:0-100ul，100-1000ul3.2中和剂效力确认①中和剂效力及毒性试验目的在化学消毒试验中，达到规定消毒时间终点时，要求立即终止残留消毒剂的继续作用，以便准确检测出消毒体系中残留存活的微生物及其数量。
医疗器械-消毒剂效果验证方案
..思悦科技发展消毒剂验证方案编制： 审核： 批准：日期： 日期： 日期：页脚文件编号：3 技.PZ.19-131 概述 2 验证目的 3 验证容 3.1 采样时间 3.2 采样方法 3.3 检测方法 3.4 检测记录 3.5 检测结果 4 验证结论目录版本/更改：A/04文件编号：3 技.PZ.19-13版本/更改：A/0验证小组组长姓名消毒剂验证方案职务/职称部门具体工作 容组员1 概述一次性使用无菌医疗器械产品主要是手工操作，在生产过程中，如果手部卫生达不 到要求，含菌量较高，当手触到产品时，手上大量的细菌也会随着手传播到产品上，造 成产品污染。
因此，要对手的卫生进行有效控制并验证，对手部进行消毒杀菌的有效方 法，以保证实现在正常条件下，生产出符合标准的无菌医疗器械产品。
公司手消毒使用 含 0.1％的笨扎溴铵和 75％的酒精；接触产品的器械使用 75%酒精。
2 验证目的制订本方案目的在于分析评价操作人员手的卫生状况对产品带来初始污染的影响， 以确认最佳消毒剂、消毒间隔时间及消毒剂更换周期。
3 验证容3.1 采样时间：分四次采样，第一次在洗完手后立即采样，第二次在消毒后立即采样， 第三次在连续工作 2h 后采样，第四次在连续工作 4h 后采样。
3.2 采样方法：对生产人员手采样，被检人五指并拢，用一浸泡生理盐水的棉签在双手指曲面，从 指根到指瑞往返涂擦 2 次（一只手涂擦面积约 30cm2) ，然后剪去手接触部分棉签，将 棉签放入 10 mL 灭菌生理盐水的采样管送检。
3.3 检测方法：将已采集的样品在 6h 送检，将供试剂（不同倍数稀释液样品）分别注入 2 个培养4文件编号：3 技.PZ.19-13版本/更改：A/0皿（每皿各 1ml），每 1 个平皿倾注营养琼脂培养基约 15ml，混匀，凝固后，与 30-35℃倒置培养 72 小时，计数。
采样结果计算方法：细菌总数（cfu/cm2）=平板上菌落数×稀释倍数 采样面积（cm2）3.4 检测记录：对生产人员连续三天进行监测，选不同工序五人进行检测。
5消毒剂消毒效果验证方案
8. 消毒剂消毒效果验证内容8.1 消毒剂消毒效果的验证8.1.1 菌悬液配制接种金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌新鲜培养物至营养琼脂培养基中，于30～35 ℃培养18～24 h；接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁琼脂培养基中，于23～28 ℃培养24～48 h，上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1 ml 含菌数100cfu（菌落形成单位）的菌悬液。
接种黑曲霉的新鲜培养物至改良马丁琼脂培养基上，23～28 ℃培养5～7 d，加入3～5 ml 0.9％无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱，然后用管口带有无菌棉花的无菌毛细吸管吸出孢子悬液至无菌试管内，用0.9％无菌氯化钠溶液制成每1 ml 含菌数（孢子数）100 cfu 的菌（孢子）悬液。
试验菌悬液应在24 h 内使用。
8.1.2 消毒剂消毒效果验证8.1.2.1 设置三组平行试验，如下图所示分组用量（ml）菌悬液培养基 3.0%过氧化氢水溶液0.9%氯化钠溶液A 1 100 10 0B 0 1 10 100C 1 100 0 18.1.2.2 根据验证菌的特性，分别选择贴于营养琼脂培养基平皿及玫瑰红钠琼脂培养基平皿上，分别于30~35 ℃培养72 h、23~28 ℃培养120 h，记录各平皿上菌落数。
8.1.2.3 每步操作应充分震荡混合，并将每组混合液分为两组，将上述样品混合后，采用薄膜过滤法，按《微生物检查SOP》进行操作，检查微生物数量。
8.1.2.4 回收率的计算要求C组的回收率大于70%时，消毒剂消毒效果验证可认为有效。
8.1.2.5 不符合评估标准，为不合格。
依据数据分析原因，以便总结经验，对验证方案进行修改、完善。
8.1.2.6 依据验证检测记录进行项目结果评估。
见附录4《消毒剂消毒效果验证结果与评估》。
8.2 消毒剂微生物挑战试验8.2.1用已校验的1 mL 移液管吸取＜100 cfu/mL 菌悬液，分别接种至含消毒液10ml的试管中，盖紧试管塞，振荡，室温放置10 min后，将试管内消毒液转至含培养基100ml的瓶中，振荡混匀，采用薄膜过滤法，按《微生物检查SOP》进行操作，检查微生物数量。
消毒剂消毒效果验证方案
文件编号：版本号：消毒剂消毒效果验证方案药业有限公司审批起草审核终审批准文件修订情况目录审批 (2)目录 (3)1.概述 (4)2.目的 (4)3.范围 (4)4.验证机构组成 (4)4.1 验证委员会组成 (4)4.2 验证小组成员及工作职责 (5)5.进度计划 (5)6.培训 (5)7.参考资料 (5)7.1 验证依据 (6)7.2 验证所需文件 (6)8.验证准备 (6)8.1 验证用培养基和稀释液的确认 (6)8.2 所用仪器设备的确认 (6)8.3 所用菌种的确认 (6)8.4 菌液的制备 (6)8.5 消毒剂的配制 (7)9.验证过程 (7)9.1 消毒剂消毒效果确认 (7)9.2 消毒剂的有效期确认 (10)10.异常情况处理 (11)11.结论和建议 (11)12.验证报告会签 (11)13.验证证书 (11)14.再验证 (12)15.附件 (12)1.概述洁净区设施设备长时间放置时，在适宜的温湿度条件下会导致微生物滋生繁殖，因此需要适当的消毒措施来保障设施设备不被污染。
75%浓度下的乙醇分子具有很强的渗透力，能穿过细菌表面的膜，进入细菌内部，使构成细菌生命基础的蛋白质凝固，将细菌杀死。
75%乙醇溶液主要用于墙面、天花板、门窗、机器设备、仪器、操作台、地漏、推车、桌椅等表面以及操作人员双手（手套）的消毒。
本次消毒剂效果验证是指生产过程中使用的消毒剂的消毒效果验证。
生产过程中消毒剂的消毒方式分为两种：浸泡式/液封消毒和表面擦拭/喷洒消毒。
在实验室内对这两种消毒方式进行模拟（表面擦拭/喷洒消毒时选择的材质应与设施设备表面材质相同或相似），根据实验结果判定该种消毒剂的消毒效果。
2.目的本验证确定75%乙醇溶液的消毒效果并确定消毒剂的有效期和更换周期，确保消毒剂在有效期内和更换周期内的消毒效果能够符合要求。
3.范围本验证适用于消毒剂75%乙醇溶液消毒效果、有效期和更换周期的确认。
4.验证机构组成公司成立验证委员会，负责所有验证工作的领导和组织，负责审批验证方案和验证报告、发放验证证书。
消毒剂消毒效果验证方案设计
1、验证方案的起草2、验证方案的审批3、验证方案的批准目录1 前言2 职责3 验证的方法及步骤4 异常情况及偏差处理5. 验证结果评价及建议6、再验证周期1.前言消毒剂主要使用在洁净控制区域，用于控制生产环境、设备表面等的微生物污染的一种化学剂。
由于没有一种消毒剂是完全理想的，因此有必要在实际工作中使用两种以上的消毒剂。
交替使用在理论上有利于防止形成相同环境的分离菌或抑制细菌的适应性。
本实验方案针对①75%乙醇、②1%新洁尔灭、③3%甲酚皂杀菌剂、④3%的过氧化氢溶液共4种消毒剂进行抑制或者杀灭微生物的效果确认。
1.1验证的目的本验证的目的在于制定方法及可接受标准，来评价消毒剂对微生物的杀灭效果。
1.3验证的范围75%乙醇、1%新洁尔灭、3%甲酚皂溶液、3%的H2O21.4验证内容：本验证先在实验室对所使用的消毒剂，用六种控制菌做生物指示剂挑战性实验；然后做现场消毒考察实验，即现场消毒后用棉签取样法对消毒后的表面取样，做表面残留微生物限度检查。
通过对指示菌的杀灭对数值和现场消毒后洁净区表面微生物的残留限度来确认消毒剂的消毒效果。
2. 职责2.1验证小组成员：2.2职责2.3验证进度3. 验证方法及步骤3.1实验材料3.3.1 菌株（1）细菌：金黄色葡萄球菌 (ATCC6538)铜绿假单胞菌(ATCC15442)大肠杆菌(ATCC25922)伤寒杆菌(ATCC6539)（2）细菌芽孢：枯草杆菌芽孢(ATCC9372)（3）真菌：白色念珠菌(ATCC10231)3.3.2 培养基无菌大豆胰蛋白胨琼脂培养基(TSA)、营养肉汤培养基。
3.3.3 稀释液：1%蛋白胨-0.03mol/L PBS 溶液3.3.4 中和剂：0.1%卵磷脂+1%吐温 80 溶液； 0. 5%硫代硫酸钠（3%过氧化氢）3.3.5 无菌试管3.3.6 无菌平皿(90mm)3.3.7消毒剂：75%乙醇、1%新洁尔灭、3%甲酚皂溶液、3%的H2O23.3.8移液器及配套无菌吸头:0-100ul，100-1000ul3.2中和剂效力确认①中和剂效力及毒性试验目的在化学消毒试验中，达到规定消毒时间终点时，要求立即终止残留消毒剂的继续作用，以便准确检测出消毒体系中残留存活的微生物及其数量。
消毒剂消毒效果及有效期验证方案要点
1.概述2.验证范围3.验证目的4.验证参考文件5.验证小组名单6.验证小组职责7.验证内容8.结论与评价9.再验证周期1.概述1.1.本公司的洁净区分为A级、B级、C级和D级，拟定用于洁净区表面消毒的有三种消毒剂：75%乙醇、0.1%新洁尔灭溶液、2%甲酚皂溶液。
本次验证方案将选用以上3种消毒剂分别进行验证试验。
1.3.作用对象一样的消毒剂每月轮换使用，避免表面微生物产生耐药菌株。
在利用消毒剂进行表面擦拭消毒过程中消毒剂的作用时间应不少于10分钟，利用消毒剂进行浸泡消毒的不少于5分钟。
1.4.为了确认消毒剂的消毒效力，通过实验室考察部分和现场考察部分分别进行验证。
实验室考察部分，定量悬浮试验法适用于浸泡或液封方式的消毒方法；表面实验法适用于擦拭或喷洒方式的消毒方法。
洁净区设施表面材质有不锈钢、镀锌板及玻璃三种，故表面试验法选用不锈钢载片、镀锌板及玻璃载片模拟洁净区设施表面进行验证试验。
现场考察试验部分选择冻干车间的配液间（C级洁净区）、灌装间（A/B级洁净区）、灌装间操作人员手部消毒前和消毒后分别进行取样，测定其微生物数量。
1.5.A/B级洁净区使用的消毒剂需经0.22pm除菌过滤。
2.验证范围本验证方案适用于本公司洁净区的墙面、天花板、门窗、机器设备、仪器、操作台、地漏、推车、桌椅等表面以及操作人员双手（手套）的消毒等。
3.验证目的通过消毒剂消毒效果及有效期的确认，科学制订消毒程序，以保证各洁净级别的操作间及设备外表面、人员手部按照规定的消毒程序消毒能够达到消毒防止污染的效果。
4.验证参考文件《药品生产验证指南》（2003版）；《医疗机构消毒技术规范》（2012年版）；《中国药典》（2010年版）；《药品GMP指南-无菌药品》、《现代医药工业微生物实验室质量管理与验证技术》。
5.验证小组名单6.验证小组职责7.验证内容7.1.验证前参与实施验证的人员必须已经接受本方案的培训且考核合格。
见附表1。
消毒剂的消毒效果验证方案
消毒剂的消毒效果验证方案目录1. 目的 (2)2. 范围 (2)3. 参考文件 (2)4. 职责 (2)5. 验证计划 (2)6. 验证内容 (2)7. 验证实施 (2)8. 验证周期 (4)9. 验证结论 (4)1.目的通过对消毒剂的选择及消毒效果进行验证，以确定消毒剂的消毒效果和更换周期，使消毒效果始终保持有效性和稳定性。
2.范围本方案适用于洁净车间、检验室无菌操作人员用于手部消毒的消毒剂型。
3.参考文件3.1.GB15979-2002消毒与灭菌效果的评价方法与标准。
3.2.《中国药典》2020年版四部通则1105非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法。
4.职责4.1.管理者代表：负责验证方案和报告的批准。
4.2.质量部负责人：负责验证方案的审核，协调验证过程，保证验证顺利完成，对验证进行总结和评价。
4.3.生产员：负责方案的实施。
4.4.检验员：负责验证方案起草，质量控制和检测，出具相关记录和报告，验证用耗材、试剂、表单等的准备工作。
5.验证计划5.1.75%酒精溶液消毒效果确认，实施日期：XXXX年XX月XX日-XXXX年XX月XX日。
5.2.0.2%新洁尔灭溶液消毒效果确认，实施日期：XXXX年XX月XX日-XXXX年XX月XX日。
6.验证内容6.1.75%酒精溶液消毒后手部细菌数；6.2.0.2% 新洁尔灭溶液消毒后手部细菌数。
7.验证实施7.1.验证前准备工作操作人员按照洁净区7步洗手法将手洗干净，再将手烘干后取样；再使用喷壶喷出消毒液，双手均匀搓开，晾干后再次取样。
7.1.1.检验器具、试剂：立式压力蒸汽灭菌器、生化培养箱、可调移液器、微生物限度过滤系统、微孔过滤膜(0.45μm)、培养皿、培养基、PBS缓冲液。
7.1.2.实验用品准备培养基的配制：见《培养基配制记录》实验用品处理：将微生物限度仪泵头、移液枪头、镊子，放入不锈钢灭菌盒或用牛皮纸包扎好。
与洁净服一起放入灭菌锅，经高压蒸汽121℃灭菌30min。
消毒剂消毒效果验证方案
1. 概述: 污染药物常见细菌有霉菌、杂菌、致病菌（沙门氏菌、痢疾杆菌、金黄色葡萄球菌）这些细菌来源于制药环境未净化空气, 不洁净门、窗、制药设备、工具及进行工艺操作旳人等, 为减少制药环境中微生物污染, 常采用旳灭菌措施有物理措施和化学措施。
对车间空气进行初、中、高效过滤, 阻留细菌进入车间, 紫外灭菌等均属物理灭菌法。
运用甲醛薰蒸、臭氧来杀灭空气中细菌；以75%乙醇擦拭设备表面；4%来苏儿擦门、窗、墙、地面消毒都属化学灭菌法。
选使用方法定检查措施, 用上述多种消毒剂, 对人员及车间旳空气、门、窗、墙、地面、地漏进行消毒效果旳验证, 优化选择最佳旳清洗消毒剂, 确认消毒剂旳清洁效果。
2．目旳：通过用多种清洗消毒剂对车间人员、空气、门、窗、设备设施进行消毒效果旳验证确认, 优化选择最佳清洗消毒剂。
3. 范围: 本方案合用于清洗消毒剂消毒效果旳验证。
4. 验证内容：4.1消毒剂种类:75%乙醇；0.2%新洁尔灭；0.5%洗必泰、70%乙醇和2%甘油混合液、臭氧；媒酚皂；84消毒液。
4.2消毒对象: 洁净区旳人员、空气、设备、门、窗、墙、地面、地漏、洁具等。
4.3消毒效果试验措施：多种清洁对象按对应旳清洗消毒规程操作后，用预先湿润旳无菌棉签擦抹清洁对象表面任意位置25cm2，将擦拭后旳棉签置入加有适量灭菌生理盐水旳灭菌广口瓶中，振摇15min，取1ml浸出液照微生物程度检查项下细菌、霉菌（酵母菌）计数措施进行试验（药典法），计算菌落数。
4.4清洗消毒剂消毒效果评价原则:空气清洁效果评价原则:在臭氧发生器启动60分钟后:①各洁净区域旳臭氧浓度≥12ppm（原则10～15 ppm）。
②生物指示剂细菌（金黄色葡萄球菌6583株, 菌液浓度1×107个/ml）挑战性试验检查不得有细菌生长。
臭氧灭菌消毒效果见《臭氧灭菌效果验证方案》。
手清洗消毒剂旳杀菌效果评价原则:菌落数<60CFU/25cm2设备清洗消毒剂杀菌效果评价原则:菌落数≤50CFU/25cm2车间门、窗、墙清洗消毒评价原则:菌落数≤50CFU/25cm24.4.5地面、地漏清洗消毒评价原则:4.4.6洁具清洗消毒评价原则:菌落数≤120CFU/25cm24.5清洗消毒剂杀菌效果旳验证确认:4.5.1洁净区空气消毒:空气清洁效果评价原则见本文。
：消毒剂消毒效果验证方案
消毒剂消毒效果验证方案文件编码：CX—MS0202200方案起草：_____________________________方案审核：_____________________________方案批准：_____________________________日期：_____________________________验证方案目录一、概述二、验证目的三、验证判断标准四、验证人员五、消毒剂类别、浓度和用途六、验证方法及结论：（一）洁净区环境空气的消毒灭菌（二）操作人员手部消毒（三）机器、设备、工具容器的消毒（四）墙壁、地面的消毒（五）卫生工具的消毒七、验证结果八、批准一、概述：消毒剂的消毒包括对生产车间洁净区的机器设备、墙壁、地面、工具容器、衡器、卫生工具的消毒及进入洁净区手的消毒。
二、验证目的：按相应的操作规程处理后，确认各生产工序中所用消毒剂的消毒效果。
三、验证判断标准：1、用于熏蒸的消毒剂，按规定用量处理后，生物指示剂细菌挑战性试验检查不得有细菌后长；沉降菌检测菌落数≤10个/皿.2、工作人员手的消毒。
按规定时间用消毒液喷淋后，棉球擦抹后浸出液细菌培养，菌落数≤15CFU/inch2(约60CUF/25cm2)。
3、机器设备、生产用工具容器、衡器的消毒，按消毒规程处理后，用棉球擦抹后浸出液细菌培养，菌落数≤20CFU/inch2（约80CUF/25cm2）。
4、墙壁、地面消毒，按规定处理后，用棉球擦抹后浸出液细菌培养，地面表面细菌≤30CFU/inch2（约120CUF/25cm2）；墙壁表面细菌≤20CFU/inch2（约80CUF/25cm2）。
5、卫生工具（拖把、抹布）的消毒、按规定处理后，剪取25cm2进行细菌培养，菌落数≤30CFU/inch2（约120CUF/25cm2）。
四、验证人员：生产部：负责各种消毒剂的配制和各相关的消毒处理；QC人员：负责活菌检查平皿的准备以及试验后平皿的孵育和结果判断；QA人员：负责监督检查；总工办：负责验证的总结和评价。
消毒剂消毒效果验证
消毒剂（75%、新洁尔灭）消毒效果验证方案编制/日期：审核/日期：批准/日期：洁净室消毒剂消毒效果验证方案一、目的公司对于洁净室的消毒采用：洁净室操作台、设备表面、器具及净化室墙壁、地面、门窗等消毒，用0.2％（1:500）新洁尔灭溶液、1.25％84消毒液擦拭消毒；洁净室人员手部消毒用75％乙醇溶液，0.2％（1:500）新洁尔灭溶液品种每月更换一次消毒液品种。
此次消毒验证主要为针对公司所用消毒液进行消毒有效性的试验，以确保生产环境得以控制。
洁净室的清洁和灭菌是清除微生物的主要手段，但必须保障灭菌的有效性、彻底性，因此必须对洁净室的消毒、灭菌效果进行验证。
洁净室消毒效果的验证是以物理、化学、及微生物方法考察洁净室人员的手部、操作间、器具应用相应消毒剂消毒后消毒效果，确保消毒剂使用的有效性，为生产合格产品提供无菌环境保障。
本公司生产用洁净室分别采用空气杀菌和消毒液消毒。
因此本验证方案分别对各种消毒液进行消毒效果验证。
二、范围1.洁净室操作间（工作台、设备表面、墙壁、地板、门窗）、器具所使用的各种消毒液的消毒效果验证。
涉及消毒剂有：0.2％新洁尔灭溶液、1.25％84消毒液、75％乙醇溶液。
2.洁净室人员手部消毒液使用过程中不同时间的消毒效果验证。
涉及的消毒液有0.2％新洁尔灭溶液、75％乙醇溶液。
三、验证小组成员四、试验用品4.1、待验证消毒剂按照本公司消毒液配制操作细则分别配制：0.2％新洁尔灭溶液、1.25％84消毒液75％乙醇溶液。
五、验证方法5.1.洁净室消毒液消毒效果验证5.1.1可接受标准：GB/T15980-1995一次性使用卫生用品卫生标准YY0033-2000无菌医疗器具生产管理规范5.1.2洁净室清洁消毒按照公司《洁净室工艺卫生管理制度》，分别清洁、消毒洁净工作区百级、万级、十万级操作间的工作台面、设备表面、地板、墙面和门窗等。
5.1.3洁净室采样选取制品暴露时间最长、设备及操作人员最多，无菌要求最高的装配及包装车间作为验证测试重点。
消毒剂消毒效果验证方案
1、验证方案的起草2、验证方案的审批3、验证方案的批准目录1 前言2 职责3 验证的方法与步骤4 异常情况与偏差处理5. 验证结果评价与建议6、再验证周期1.前言消毒剂主要使用在洁净控制区域，用于控制生产环境、设备表面等的微生物污染的一种化学剂。
由于没有一种消毒剂是完全理想的，因此有必要在实际工作中使用两种以上的消毒剂。
交替使用在理论上有利于防止形成相同环境的分离菌或抑制细菌的适应性。
本实验方案针对①75%乙醇、②1%新洁尔灭、③3%甲酚皂杀菌剂、④3%的过氧化氢溶液共4种消毒剂进行抑制或者杀灭微生物的效果确认。
1.1验证的目的本验证的目的在于制定方法与可接受标准，来评价消毒剂对微生物的杀灭效果。
1.3验证的范围75%乙醇、1%新洁尔灭、3%甲酚皂溶液、3%的H2O21.4验证内容：本验证先在实验室对所使用的消毒剂，用六种控制菌做生物指示剂挑战性实验；然后做现场消毒考察实验，即现场消毒后用棉签取样法对消毒后的表面取样，做表面残留微生物限度检查。
通过对指示菌的杀灭对数值和现场消毒后洁净区表面微生物的残留限度来确认消毒剂的消毒效果。
2. 职责2.1验证小组成员：2.2职责2.3验证进度3. 验证方法与步骤3.1实验材料3.3.1 菌株（1）细菌：金黄色葡萄球菌(ATCC6538)铜绿假单胞菌(ATCC15442)大肠杆菌(ATCC25922)伤寒杆菌(ATCC6539)（2）细菌芽孢：枯草杆菌芽孢(ATCC9372)（3）真菌：白色念珠菌(ATCC10231)3.3.2 培养基无菌大豆胰蛋白胨琼脂培养基(TSA)、营养肉汤培养基。
3.3.3 稀释液：1%蛋白胨-0.03mol/L PBS 溶液3.3.4 中和剂：0.1%卵磷脂+1%吐温80 溶液；0. 5%硫代硫酸钠（3%过氧化氢）3.3.5 无菌试管3.3.6 无菌平皿(90mm)3.3.7消毒剂：75%乙醇、1%新洁尔灭、3%甲酚皂溶液、3%的H2O23.3.8移液器与配套无菌吸头:0-100ul，100-1000ul3.2中和剂效力确认①中和剂效力与毒性试验目的在化学消毒试验中，达到规定消毒时间终点时，要求立即终止残留消毒剂的继续作用，以便准确检测出消毒体系中残留存活的微生物与其数量。
消毒剂消毒效果验证方案
1、验证方案的起草2、验证方案的审批3、验证方案的批准目录1 前言2 职责3 验证的方法及步骤4 异常情况及偏差处理5. 验证结果评价及建议6、再验证周期消毒剂主要使用在洁净控制区域，用于控制生产环境、设备表面等的微生物污染的一种化学剂。
由于没有一种消毒剂是完全理想的，因此有必要在实际工作中使用两种以上的消毒剂。
交替使用在理论上有利于防止形成相同环境的分离菌或抑制细菌的适应性。
本实验方案针对①75%乙醇、②1%新洁尔灭、③3%甲酚皂杀菌剂、④3%的过氧化氢溶液共4种消毒剂进行抑制或者杀灭微生物的效果确认。
验证的目的本验证的目的在于制定方法及可接受标准，来评价消毒剂对微生物的杀灭效果。
验证的范围75%乙醇、1%新洁尔灭、3%甲酚皂溶液、3%的H2O2验证内容：本验证先在实验室对所使用的消毒剂，用六种控制菌做生物指示剂挑战性实验；然后做现场消毒考察实验，即现场消毒后用棉签取样法对消毒后的表面取样，做表面残留微生物限度检查。
通过对指示菌的杀灭对数值和现场消毒后洁净区表面微生物的残留限度来确认消毒剂的消毒效果。
2. 职责验证小组成员：职责验证进度3. 验证方法及步骤实验材料（1）细菌：金黄色葡萄球菌 (ATCC6538)铜绿假单胞菌(ATCC15442)大肠杆菌(ATCC25922)伤寒杆菌(ATCC6539)（2）细菌芽孢：枯草杆菌芽孢(ATCC9372)（3）真菌：白色念珠菌(ATCC10231)培养基无菌大豆胰蛋白胨琼脂培养基(TSA)、营养肉汤培养基。
稀释液：1%蛋白胨L PBS 溶液中和剂：%卵磷脂+1%吐温 80 溶液； 0. 5%硫代硫酸钠（3%过氧化氢）无菌试管无菌平皿(90mm)消毒剂：75%乙醇、1%新洁尔灭、3%甲酚皂溶液、3%的H2O2移液器及配套无菌吸头:0-100ul，100-1000ul中和剂效力确认①中和剂效力及毒性试验目的在化学消毒试验中，达到规定消毒时间终点时，要求立即终止残留消毒剂的继续作用，以便准确检测出消毒体系中残留存活的微生物及其数量。
(完整版)消毒剂消毒效果及有效期验证方案
目录1. 概述2. 验证范围3. 验证目的4. 验证参考文件5. 验证小组名单6. 验证小组职责7. 验证内容8. 结论与评价9. 再验证周期1. 概述1.1. 本公司的洁净区分为A 级、B级、C级和D级，拟定用于洁净区表面消毒的有三种消毒剂：75%乙醇、0.1%新洁尔灭溶液、2%甲酚皂溶液。
本次验证方案将选用以上3 种消毒剂分别进行验证试验。
1.2. 消毒剂的种类、消毒对象、消毒方法和有效期见下表：1.3. 作用对象一样的消毒剂每月轮换使用，避免表面微生物产生耐药菌株。
在利用消毒剂进行表面擦拭消毒过程中消毒剂的作用时间应不少于10 分钟，利用消毒剂进行浸泡消毒的不少于5 分钟。
1.4. 为了确认消毒剂的消毒效力，通过实验室考察部分和现场考察部分分别进行验证。
实验室考察部分，定量悬浮试验法适用于浸泡或液封方式的消毒方法；表面实验法适用于擦拭或喷洒方式的消毒方法。
洁净区设施表面材质有不锈钢、镀锌板及玻璃三种，故表面试验法选用不锈钢载片、镀锌板及玻璃载片模拟洁净区设施表面进行验证试验。
现场考察试验部分选择冻干车间的配液间（C 级洁净区）、灌装间（A/B 级洁净区）、灌装间操作人员手部消毒前和消毒后分别进行取样，测定其微生物数量。
1.5. A/B 级洁净区使用的消毒剂需经0.22 μm除菌过滤。
2. 验证范围本验证方案适用于本公司洁净区的墙面、天花板、门窗、机器设备、仪器、操作台、地漏、推车、桌椅等表面以及操作人员双手（手套）的消毒等。
3. 验证目的通过消毒剂消毒效果及有效期的确认，科学制订消毒程序，以保证各洁净级别的操作间及设备外表面、人员手部按照规定的消毒程序消毒能够达到消毒防止污染的效果。
4. 验证参考文件《药品生产验证指南》（2003版）；《医疗机构消毒技术规范》（2012年版）；《中国药典》（2010 年版）；《药品GMP 指南-无菌药品》、《现代医药工业微生物实验室质量管理与验证技术》。
5. 验证小组名单6. 验证小组职责7. 验证内容7.1. 验证前参与实施验证的人员必须已经接受本方案的培训且考核合格。
消毒剂消毒效果验证方案1
消毒剂消毒效果验证方案目录1.目的 (3)2.围 (3)3.职责 (3)3.1. 验证小组组成 (3)3.2. 职责 (3)4.消毒液的配制与使用 (4)4.1. 消毒液的配制 (4)4.2. 消毒液的使用 (4)5.验证容 (4)5.1. 采样部位 (4)5.2. 采样时间 (5)5.3. 取样、检验方法、标准的确定： (5)5.4. 消毒后验证消毒后有效期 (5)6.拟订再验证周期 (5)7.验证结果评定与结论 (5)8.附件 (6)9.培训 (6)消毒剂消毒效果验证方案1.目的验证公司消毒使用的0.1%新洁尔灭、0.2%的新洁尔灭、75％乙醇、3%~5%甲酚皂溶液消毒的效果是否达到要求及消毒后的有效期。
2.围本验证方案适用于车间使用的消毒剂消毒效果的验证。
3.职责3.1.验证小组组成验证小组成员3.2.职责3.2.1.验证小组1.负责起草验证方案。
2.负责本验证的协调工作，以保证本验证方案规定项目的顺利实施。
3.写出验证总结报告。
3.2.2.质量部1.负责审核验证方案。
2.负责取样及对样品的检验。
3.负责生产全过程的监控。
3.2.3.G2制剂车间（G2）1.负责验证方案制定和实施。
2.负责车间洁净区消毒操作。
3.负责收集各项验证记录，并对验证结果进行分析后，起草验证报告，报验证领导小组。
4.消毒液的配制与使用4.1.消毒液的配制4.1.1.75%的乙醇溶液：将95%乙醇与水按重量比为2.7：1混合，搅拌10-20次后，用量筒量取乙醇，用酒精比重计测试，如不在75%，则补加乙醇或水，直至符合所需的规格。
4.1.2.0.1%的新洁尔灭溶液：采购的新洁尔灭溶液一般为5%，配置时，取20ml的5%新洁尔灭溶液，配制成1kg ，搅拌10-20次，即得到0.1%新洁尔灭溶液，密闭保存。
如采购的新洁尔灭溶液的浓度有变化，则按照C浓·V浓=C稀·V 的公式进行计算配制4.1.3.0.2%的新洁尔灭溶液：采购的新洁尔灭溶液一般为5%，配置时，取40ml的5%新洁尔灭溶液，配制成1kg ，搅拌10-20次，即得到0.2%新洁尔灭溶液，密闭保存。
消毒剂消毒效力验证
一、目的确认各洁净级别的操作间及设备外表面按照规定的消毒程序消毒能够达到消毒、防止污染的目的。
二、范围本验证方案适用于本公司洁净区的墙面、天花板、门窗、机器设备、仪器、操作台、地漏、推车、桌椅等表面以及操作人员双手（手套）的消毒等。
三、术语本方案涉及术语：杀灭对数值：微生物数量以对数表示时，消毒后与消毒前比较,以其减少的对数值来表达杀灭效果。
四、内容1概述本公司的洁净区分为A级、C级和D级，拟定用于洁净区表面消毒的有3种消毒剂：75%乙醇、0.1%新洁尔灭溶液、0.2%新洁尔灭溶液。
本次验证方案将选用以上3种消毒剂分别进行验证试验。
作用对象一样的消毒剂每月轮换使用，避免表面微生物产生耐药菌株。
在利用消毒剂进行表面擦拭消毒过程中消毒剂的作用时间应不少于10分钟，利用消毒剂进行浸泡消毒的不少于5分钟。
2确认项目验证项目技术标准确认所用的中和剂对对应的消毒剂有良好的中和作用，对试验用菌中和剂鉴定试验剂及其恢复期培养无害或无不良影响。
定量悬浮试验通过浸泡或液封消毒，确定消毒效力符合要求。
表面试验法通过擦拭消毒，确定消毒效力符合要求。
A级：1CFU/25cm2现场考察试验C级：≤25CFU/25cm2D级：≤50CFU/25cm23.验证用仪器仪表和物品序号1 2 3 4 5 6 7 8 9恒温恒湿培养箱营养琼脂培养基改良马丁琼脂培养基营养肉汤培养基大豆酪蛋白琼脂培养基接触碟改良马丁培养基金黄色葡萄球菌大肠埃希菌枯草杆菌芽孢名称是否已验证并在有设备编号或批号效期内是□否□是□否□是□否□是□否□是□否□是□否□是□否□是□否□是□否□是□否□是□否□是□否□是□否□是□否□10白色念珠菌11121314结论:检查人/日期：复核人/日期：4.验证过程4.1中和剂鉴定试验4.1.1试验目的通过该试验，确认所用的中和剂对对应的消毒剂有良好的中和作用，对试验用菌剂及其恢复期培养无害或无不良影响。
4.1.2菌液的制备及计数4.1.2.1金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草杆菌芽孢菌工作菌液的制备接种金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草杆菌芽孢菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中，30～35℃培养18～24小时。
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消毒剂消毒效果确认方案TABLE OF CONTENTS 目录1 PURPOSE AND SCOPE 目的和围 (4)2 OVERVIEW 概述 (4)3 REGULATIONS, STANDARDS & REFERENCES 法规、标准和参考文献 (4)4 RESPONSIBILITIES AND TRAINING 职责和培训 (4)5 PREPARATION 验证准备 (5)6 VALIDATION TESTS 验证测试 (6)7 DEVIATIONS & CHANGES 偏差和变更 (10)8 ANNEXES 附件 (11)9 VERSION 修订记载 (11)1目的和围1.1目的本方案的目的是为了确认各洁净级别的操作间及设备外表面按照规定的消毒程序消毒能够达到消毒、防止污染的目的，并在消毒剂有效期能确保其消毒效力能符合要求。
1.2围本验证方案适用于QC洁净区的墙面、天花板、门窗、机器设备、仪器、操作台、桌椅等表面以及操作人员双手（手套）所用的消毒。
本文件合并了方案和记录，当验证完成后，本文件将作为确认报告的附件。
2概述2.1本公司拟定用于仪器设备和洁净区表面消毒的消毒剂有：XXXXXX。
本次验证方案将选用以上X种消毒剂分别进行验证试验。
作用对象一样的消毒剂每月轮换使用，避免表面微生物产生耐药菌株。
为了确认消毒剂的消毒效力我们通过定量悬液试验和定量载体试验对消毒效果进行确认。
2.2洁净区设施表面材质有彩钢板、不锈钢和玻璃三种，故定量载体试验选用彩钢板载片、不锈钢载片和玻璃裁片模拟洁净区设施表面进行验证试验。
3法规、标准和参考文献3.1中华人民国国家标准消毒与灭菌效果的评价方法与标准3.2中华人民国药典 2015年版第四部4职责和培训4.1职责4.2Training 培训上表中提及的员工都会参与验证实施，并且会在验证实施前经过培训。
培训记录作为附件附入本方案。
5验证准备5.1仪器/设备本次验证需要使用到的仪器/设备及其信息如下：5.2标准物质、试药和试液5.3菌种微生物检验方法验证方案适用。
5.4培养基6验证测试6.1通用项目6.1.1培养基：按QS-QC-GAM-014《培养基配制标准操作规程》和QS-QC-GAM-013《培养基适用性检查标准操作规程》要求准备相应的培养基，培养基适用性检查记录作为附件附入本方案。
6.1.2消毒液：XXXXX6.1.3稀释剂为：PH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液。
中和剂为：0.1%卵磷脂+0.1%吐温80+0.1%蛋白胨缓冲液6.1.4菌液准备6.1.4.1菌液的制备：见XXXX《菌种传代、保藏、使用和灭活标准操作规程》。
6.1.4.2菌液计数确认：将金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌的新鲜培养物用PH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液按10倍梯度稀释成10-6、10-7、10-8三个浓度。
枯草芽孢杆菌、白色念珠菌的新鲜培养物用PH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液按10倍梯度稀释成10-5、10-6、10-7三个浓度。
取黑曲霉新鲜培养物加入3~5ml含0.05%（ml/ml）吐温80的0.9%无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱，然后用带纱布的移液管吸出孢子悬液至无菌试管。
再用PH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液按10倍梯度稀释成10-5、10-6、10-7三个浓度。
每种菌各个浓度的菌液分别取1ml至平皿中，同法平行制备两个平皿。
金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌的平皿倾注15~20ml 45℃以下的胰酪大豆胨琼脂培养基。
白色念珠菌、黑曲霉的平皿倾注15~20ml 45℃以下的沙氏葡萄糖琼脂培养基。
6.1.4.3胰酪大豆胨琼脂培养基平皿于30~35℃生化培养箱中培养，培养时间不超过3天，每天至少计数一次。
沙氏葡萄糖琼脂培养基平皿于20~25℃生化培养箱中培养，培养时间不超过5天，每天至少计数一次。
根据各个浓度菌液的计数情况推算出1ml浓菌悬液的含菌数。
记录见附件一《菌液含菌数计数记录》6.1.5中和剂确认试验6.1.5.1根据菌液计数所得数据，将新鲜的浓菌液用PH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液按10倍梯度稀释成5*105~5*106CFU/ml的工作菌液。
6.1.5.2将配制好的消毒液用不同的工作菌液进行以下分组试验。
具体操作：第一组：取消毒剂4.5ml+工作菌液0.5ml ，混匀作用10min 后，取混合液A0.5ml+稀释液4.5ml ，混匀作用10min ，取混合液B 或浓度为10-1的混合液B0.5ml 注皿，各平行制备2皿。
第二组：取消毒剂4.5ml+工作菌液0.5ml ，混匀作用10min 后，取混合液A0.5ml+中和剂4.5ml ，混匀作用10min ，取混合液B 或浓度为10-1的混合液B0.5ml 注皿，各平行制备2皿。
第三组：取中和剂4.5ml+工作菌液0.5ml ，混匀作用10min 后，取混合液A0.5ml+稀释液4.5ml ，混匀作用10min ，用稀释剂进行10倍系列稀释成10-2、10-3。
取相应稀释级0.5ml 注皿，各平行制备2皿。
第四组：取消毒剂和中和剂1:1的混合液4.5ml+工作菌液0.5ml ，混匀作用10min ，取混合液A0.5ml+稀释液4.5ml ，混匀作用10min 后，用稀释剂进行10倍系列稀释成10-2、10-3。
取相应稀释级0.5ml 注皿，各平行制备2皿。
第五组：取稀释液4.5ml+工作菌液0.5ml ，混匀作用10min ，取混合液A0.5ml+稀释液4.5ml ，混匀作用10min 后，用稀释剂进行10倍系列稀释成10-2、10-3。
取相应稀释级0.5ml 注皿，各平行制备2皿。
各组高浓度平皿编号为：1＃、2＃，低浓度平皿编号为：3＃、4＃。
第六组：分别取稀释液和中和剂各1.0ml 注入无菌平皿中，胰酪大豆胨琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基各制备2皿。
金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草杆菌芽孢菌、铜绿假单胞菌用胰酪大豆胨琼脂培养基，倒置30～35℃培养3天计数；白色念珠菌、黑曲霉用沙氏葡萄糖琼脂培养基，倒置20～25℃培养5天计数计数，逐日观察。
6.1.5.3结果判定试验结果应符合以下全部条件，判断所选中和剂合格：①第1组无菌生长，或仅有少数试验菌菌落生长。
②第2组菌落数比第1组菌落数多，但明显少于第3、4、5组菌落数。
③第3、4、5组有相似菌落数生长，其每组间菌落数误差率不超过15%。
计算公式如下： 6.1.5.4 记录见附件二《中和剂确认记录》6.2消毒剂消毒效果确认6.2.1.1根据菌液计数所得数据，将新鲜的浓菌液用PH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液按10倍梯度稀释成5*105~5*106 CFU/ml的工作菌液。
6.2.1.2将配制好的消毒液用不同的工作菌液分别进行以下分组试验（试验重复3次）。
具体操作：试验组：取消毒剂4.5ml+工作菌液0.5ml，分别混匀作用8min、10min、12min后，取混合液A0.5ml+中和剂4.5ml，混匀作用10min，取混合液B或浓度为10-1的混合液B1ml注皿，各平行制备2皿。
阳性对照：用稀释液将工作菌液进行10倍系列稀释至10-4、10-5。
取相应稀释级1ml注皿，各平行制备2皿。
阴性对照：分别取稀释液和中和剂各1.0ml注入无菌平皿中，胰酪大豆胨琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基各制备2皿。
金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草杆菌芽孢菌、铜绿假单胞菌用胰酪大豆胨琼脂培养基，倒置30～35℃培养3天计数；白色念珠菌、黑曲霉用沙氏葡萄糖琼脂培养基，倒置20～25℃培养5天计数计数，逐日观察。
6.2.1.3记录见附件三《消毒剂消毒效果确认定量悬液试验记录》6.2.2.1 所用载体：不锈钢、彩钢板、玻璃6.2.2.2将灭菌载体平放于灭菌平皿，每个载体滴注定量菌液(载体回收菌量达5*105～5*106cfu/片) 涂匀，放37℃培养箱待干。
6.2.2.3 将配制好的消毒液用不同的染菌载体分别进行以下分组试验（试验重复3次）。
具体操作：试验组：取消毒剂5ml+染菌载体，分别混匀作用8min 、10min 、12min 后，取与消毒液作用后的染菌载体+中和剂5ml ，震荡50至80次混匀作用10min ，取混合液B 或浓度为10-1的混合液B1ml 注皿，各平行制备2皿。
阳性对照：用稀释液代替消毒液同试验组操作。
将混合液B 用稀释剂进行10倍系列稀释成10-2、10-3。
取相应稀释级1ml 注皿，各平行制备2皿。
阴性对照：分别取稀释液和中和剂各1.0ml 注入无菌平皿中，胰酪大豆胨琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基各制备2皿。
金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草杆菌芽孢菌、铜绿假单胞菌用胰酪大豆胨琼脂培养基，倒置30～35℃培养3天计数；白色念珠菌、黑曲霉用沙氏葡萄糖琼脂培养基，倒置20～25℃培养5天计数计数，逐日观察。
6.2.3 记录见附件四《消毒剂消毒效果确认定量载体试验记录》6.2.4 各组高浓度平皿编号为：1＃、2＃，低浓度平皿编号为：3＃、4＃。
6.2.5 按不同稀释度推算出每个样本存活菌数(cfu/mL)，计算出杀灭率。
杀灭率计算公式如下： 6.3 结果判定：3次试验的杀灭率均≥99.9%判为消毒合格。
7 偏差和变更7.1 偏差登记7.2变更登记8ANNEXES 附件8.1附件一《菌液含菌数计数记录》8.2附件二《中和剂确认记录》8.3附件三《消毒剂消毒效果确认定量悬液试验记录》8.4附件四《消毒剂消毒效果确认定量载体试验记录》9修订记载。