课课下达标检测四十基因工程

课下达标检测（四十） 基因工程

一、基础题点练

1．(2019·徐州模拟)已知限制性内切酶Xma Ⅰ和Sma Ⅰ的识别序列分别为C ↓CCGGG 和CCC ↓GGG 。有关这两种酶及应用的叙述，错误的是( )

A ．这两种酶作用的底物都是双链DNA

B ．DNA 中出现这两种酶识别序列的几率不同

C ．Xma Ⅰ切割DNA 形成的黏性末端是—GGCC

D ．使用这两种酶时需注意控制反应温度、时间等

解析：选B 限制酶作用的底物是双链DNA 分子；这两种限制酶作用的核苷酸序列相同，所以这两种识别序列在DNA 中出现的的几率相同；根据碱基互补配对原则，CCCGGG 的互补链是GGGCCC ，并根据Xma Ⅰ的切割位点可知，切割后的黏性末端是—CCGG ；温度能影响酶的活性，所以使用酶时需要注意控制反应温度和时间等。

2．如图表示的是三种黏性末端，下列说法正确的是( )

A ．图中所示黏性末端是由同种限制酶切割形成

B ．若图甲中的G 碱基处发生突变，限制酶可能无法识别该切割位点

C ．图中所示黏性末端是限制酶断开氢键形成

D ．目前常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等几类原核生物

解析：选B 产生甲黏性末端的限制酶的识别序列为=====GAATTC CTTAAG

，产生乙黏性末端的限制酶的识别序列为=====CAATTG GTTAAC

，产生丙黏性末端的限制酶的识别序列为=====CTTAAG GAATTC

，可见甲、乙、丙黏性末端是由3种限制酶作用产生的；限制酶具有专一性，能够识别双链DNA 分子的某种特定核苷酸序列，如果甲中的G 发生突变，限制酶可能无法识别该切割位点；图中所示黏性末端是限制酶断开磷酸二酯键形成的；质粒是环状DNA 分子，噬菌体和动植物病毒都没有细胞结构，它们都不属于原核生物。

3．下列关于蛋白质工程的叙述，错误的是()

A．蛋白质工程的基础是基因工程

B．蛋白质工程遵循的原理包括中心法则

C．蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作，定向改变分子的结构

D．蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子

解析：选C蛋白质工程是通过基因修饰或基因合成对现有蛋白质进行改造，或合成新的蛋白质，故蛋白质工程的基础是基因工程；蛋白质工程遵循的原理包括中心法则；蛋白质工程是通过改造基因来实现对蛋白质分子的改造的；蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子。

4．(2019·南通模拟)下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是()

A．鸡的红细胞和菜花均可作为提取DNA的材料，处理方法有所不同B．在切碎的菜花中加入一定量的洗涤剂和食盐，充分研磨，过滤收集滤液

C．将NaCl溶液浓度调至2 mol/L，用单层滤纸过滤获取析出物

D．利用某些蛋白质在酒精中的溶解度大于DNA在酒精中的溶解度的原理，可以提纯DNA

解析：选C鸡的红细胞和菜花均可作为提取DNA的材料，处理方法有所不同，动物细胞只要加蒸馏水使细胞吸水破裂，植物细胞需要加洗涤剂和食盐研磨；在切碎的菜花中加入一定量的洗涤剂和食盐，充分研磨，过滤收集滤液；将NaCl溶液浓度调至2 mol/L，用多层纱布过滤获取滤液；利用某些蛋白质在酒精中的溶解度大于DNA在酒精中的溶解度的原理，可以提纯DNA。

5．下列是利用肝脏细胞粗提取DNA实验的两个关键操作步骤，相关叙述错误的是()

B．步骤1中，冰浴处理的主要原理是低温下DNA水解酶容易变性

C．步骤2中，异戊醇的作用可能是使与DNA结合的蛋白质因变性而沉淀

D．步骤2中，离心后应取上清液，因为DNA在2 mol/L NaCl溶液中溶解度比较大

解析：选B步骤1中，加入柠檬酸钠缓冲液的目的是维持pH的稳定；低温不会使酶变性失活，只能降低酶的活性；步骤2中，DNA在2 mol/L NaCl 溶液中溶解度比较大，因此异戊醇的作用可能是使与DNA结合的蛋白质因变性而沉淀；步骤2中，离心后应取上清液，因为DNA在2 mol/L NaCl 溶液中溶解度比较大。

6．限制酶MunⅠ和限制酶Eco RⅠ的识别序列及其切割位点分别如下：

—C↓AATTG—和—G↓AATTC—

如图表示某一目的基因片段与质粒拼接形成重组质粒的过程，相关叙述错误的是()

A．用限制酶Eco RⅠ切割目的基因，同时用限制酶MunⅠ切割质粒

B．两种限制酶切割后形成的黏性末端的碱基可以互补配对

C．限制酶能使特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开

D．将重组质粒同时用2种限制酶切割则会形成2种DNA片段

解析：选D由图可知，目的基因两侧都是限制酶Eco RⅠ的切割位点，因此应选用限制酶Eco RⅠ切割含有目的基因的外源DNA分子，质粒中含有限制酶MunⅠ和限制酶Eco RⅠ的切割位点，但Eco RⅠ的切割位点位于

标记基因中，用其切割会破坏标记基因，因此为保证重组质粒表达载体的准确构建，应选用限制酶MunⅠ切割质粒；图中两种限制酶切割后形成的黏性末端的碱基可以互补配对；限制酶的作用是使特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开；将重组质粒同时用2种限制酶切割则会形成3种DNA 片段。

二、高考题型练

7．(2019·成都模拟)如图1所示为用P v uⅠ限制酶切下的某目的基因及其上DNA片段示意图；图2所示为三种质粒示意图。图中Ap为氨苄青霉素抗性基因，Tc为四环素抗性基因。Eco RⅠ、P v uⅠ等为限制酶及其切割的位点。复制原点是在基因组上复制起始的一段序列，是指质粒在受体细胞中复制时的起点。

(1)组成片段D的基本骨架与细胞膜的基本骨架相同的元素是____________。

(2)图2中质粒A、质粒C能否作为目的基因运载体最理想的质粒？________(填“能”或“否”)，请说明理由______________________________。

(3)重组质粒成功导入受体细胞的概率一般仅为10－7，用质粒B构建重组质粒，为了筛选出导入了重组质粒的大肠杆菌，在导入完成后，将所有大肠杆菌分别在含有四环素和氨苄青霉素的培养基中培养，大肠杆菌在两种培养基的生长状况不可能的是__________，可能性最大的是________________________________________________。

(4)若想在山羊的乳汁中收获上述目的基因的表达产物，则需要将重组质粒导入至山羊的________(细胞)中。

解析：(1)脱氧核糖和磷酸交替连接构成DNA片段D的基本骨架，脱氧核糖由C、H、O三种元素组成，组成磷酸的元素是H、P、O；磷脂双分子层构成细胞膜的基本骨架，磷脂分子是由C、H、O、N、P组成，可见组