交叉配血试验标准化操作规程盐水法作业指导书

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交叉配血试验操作规程

交叉配血试验操作规程一、前期准备1.需准备的仪器和材料有：试剂盘、试剂套装、试管、离心机、试剂架、操作台、试剂粉末、负压孔盖垫、抗人免疫球蛋白（抗人IgG）、标注笔等。

2.确保实验室实验台面整洁干净，并消毒工作区。

3.检查试剂有效期，避免使用过期试剂。

4.根据需求确定所需血浆标本和酶抗全血标本。

二、实验步骤1.将所需血浆标本加入试管中，用离心机离心10分钟，以获得澄清的血浆。

2.将澄清的血浆转移到试剂盘中的相应位置，每个孔位加1mL。

3.将离心后的红细胞沉淀与抗人IgG直接接触15分钟，以充分吸附不特异抗体。

4.加入2mL盐水，搅拌均匀，离心5分钟，去除清液。

5.加入4mL盐水，振荡均匀，1分钟后离心5分钟，去除清液。

6.加入2mL盐水，振荡均匀，1分钟后离心5分钟，去除清液。

7.加入1mL试剂套装中所配的抗人IgG，共悬浮混合24次，再加入5mL盐水，振荡均匀。

8.加入2mL盐水，振荡均匀，1分钟后离心5分钟，去除清液。

9.加入2mL试剂套装中所配的抗人IgG，共悬浮混合24次，再加入5mL盐水，振荡均匀。

10.重复步骤9，使红细胞悬浮，在离心后去除清液。

三、结果判断1.观察试剂盘中悬浮混合的红细胞沉淀情况，判断是否存在凝集现象。

2.凝集现象表明供血者和受血者之间存在血型抗原-抗体反应。

四、安全注意事项1.实验操作过程中注意戴手套、口罩和护目镜，保证操作者和实验样品的安全。

2.在操作前检查仪器和试剂的完好性，并遵循试剂的保存和使用说明。

3.严禁口饮、抽烟和进食，确保操作环境清洁。

4.实验后及时清洗仪器和工作区域，妥善处理废弃物。

5.确保实验室通风良好，防止有害气体和防护物质的浓度超标。

6.在实验操作过程中，严格遵守相关的实验操作规程和实验室安全规定。

以上是交叉配血试验的操作规程，包括前期准备、实验步骤、结果判断和安全注意事项。

按照规程进行操作，可以确保实验结果的准确性和实验人员的安全。

交叉配血试验标准操作规程

交叉配血试验标准操作规程1目的检测供血者与受血者之间的输血相容性，包括主侧配血与次侧配血，确保输血安全。

2职责血库工作人员负责执行3适用范围适用于盐水介质法、手工凝聚胺法和手工微柱凝胶法交叉配血全过程。

4操作规程4.1原理4.1.1盐水介质法IgM类抗体可以在室温盐水介质中发生凝集反应，使用手工试管法可以判断供、受者间血液的相容性。

4.1.2凝聚胺法凝聚胺交叉配血试验就是利用多聚季胺盐类—凝聚胺携带很多正电荷，中和红细胞表面的负电荷，使红细胞之间距离减少，引起正常红细胞可逆性凝集。

无抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，当加入中和液后，则凝集解散，而抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，则不能解散，以此来判断供、受者间血液的相容性。

4.1.3手工微柱凝胶法微柱凝胶卡的微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗人球蛋白试剂，红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后，在离心力的作用下不断向管底沉降，并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集，凝胶颗粒具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒，使其悬浮在凝胶上端，未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。

4.2 试剂与器材4.2.1试剂凝聚胺配套试剂、生理盐水、微柱凝胶卡。

4.2.2 器材血清学离心机、卡式专用离心机、光学显微镜、塑料软试管、试管架、一次性塑料滴管、记号笔、玻片、移液器、一次性移液枪头。

4.3 标本要求4.3.1.患者样本 EDTA抗凝全血或血清，全血量3～5ml，在1760g条件下离心5分钟，离心后无溶血、无凝块、无明显乳糜。

4.3.2.供者标本枸橼酸盐抗凝全血，全血量3～5ml，在1760g条件下离心5分钟，离心后无溶血、无凝块、无明显乳糜。

4.4 操作步骤4.4.1盐水介质法4.4.1.1取两支试管，1支标明“主侧”；另一支标明“次侧”。

4.4.1.2按标记“主侧”管加受血者血浆1滴和供血者2%红细胞悬液1滴；“次侧”管加供血者血浆1滴和受血者2%红细胞悬液1滴。

临床交叉配血操作规程

临床交叉配血操作规程交叉配血试验（凝聚胺法）[原理]凝聚胺试验是利用低离子溶液促进红细胞抗原与血清（浆）中的抗体反应，再利用凝聚胺引起红细胞间非免疫性的凝集，让已有抗体（IgG）反应的红细胞间的距离缩短。

距离缩短后更能引起已反应的抗体和别的红细胞产生反应形成免疫性的凝集。

而由凝聚胺所引起的非免疫性红细胞凝集反应可被后来加入的复悬液所中和而散开，如有免疫反应，凝集就不会散开，为阳性反应。

如没有免疫反应，凝集就会散开，为阴性反应。

交叉配血试验是在盐水介质的基础上加入凝聚胺，检测供患之间是否相合，患者血清（浆）中是否含有具临床意义的红细胞异体抗体。

[试剂组成]1.洁净试管，离心机，显微镜。

2.0.85% 氯化钠溶液：准确称取氯化钠（AR）8.5 g，用蒸馏水溶解并定容至1000 ml。

试剂启用后，有效期为：二周。

3.凝聚胺试剂①低离子介质溶液：含葡萄糖，乙二胺四醋酸-2钠及稳定剂。

②凝聚胺溶液：含凝聚胺，氯化钠及稳定剂。

③复悬液：含柠檬酸钠，葡萄糖及稳定剂。

④阳性对照血清：含抗D血清，氯化钠及稳定剂。

4.抗人IgG 血清。

[试剂保存和稳定性]1.凝聚胺试剂须保存在2-25℃。

2.有效期内可使用。

3.抗人IgG血清低温冰箱保存。

复溶后放2—4℃冰箱保存。

[标本收集和准备]1.抽取受血者静脉血3-4ml（操作中小心防止红细胞破损），放入一已贴标签干燥洁净的试管中为血清管(也可用EDTA-K2抗凝血液)，并将注射器中余下的少量血液配成2%红细胞生理盐水悬液，放入另一已贴标签干燥洁净的试管中为红细胞悬液管。

以上标本有效期为三天；若受血者抽取标本后，输用过血液或血液制品，且输用时间超过12 小时的，必须重新采集标本。

2. 2% 红细胞悬液：用生理盐水洗涤红细胞3次。

根据下表进行红细胞悬液的配制。

悬液浓度（%）压积红细胞（滴）盐水（滴）----------------------------------------------------------------2 1 2ml(40)5 1 0.8ml(16)----------------------------------------------------------------[操作步骤]1.取出3支试管分别标记主，次及对照测试：主测管：加入病人血清（浆）2滴，再加入供血者3-5%红细胞悬液1滴，次测管：加入供血者血清（浆）2滴，再加入病人3-5%红细胞悬液1滴，对照管：加入2滴*4阳性对照血清，再加入供血者3-5%红细胞悬液1滴。

医院交叉配血试验作业指导书

医院交叉配血试验作业指导书交叉配血试验又称不配合性试验，是确保患者安全输血必不可少的试验，完整操作规程应包括：1.查对受血者的血型（包括Rh血型）；2.必要时做ABO正反定型和Rh定型；3.选择合格的血液作交叉配血试验。

2.1盐水介质配血法2.1.1标本处理1) 抽取受血者静脉血3-4ml, ，待凝固后分离血清，并将红细胞配成2%盐水悬液。

2) 将供血者血样以同样方法分离血清，并将红细胞配成2%盐水悬液。

2.1.2操作1)取洁净小试管两支，1支标明受血者血清＋供血者血球；另支标明供血者血清＋受血者血球。

2)按标记主侧管加受血者血清1滴，加供血者红细胞悬液1滴。

次侧管加供血者血清1滴，加受血者红细胞悬液1滴。

混匀，以1000r/min离心1min，轻轻侧动试管，观察结果。

室温较低时，应将试管保温，以防冷凝集素引起的凝集反映。

2.1.3结果判断及报告1) ABO同型配血,主侧和次侧均无溶血及凝集表示无输血禁忌，可以输血。

2) 两人值班时，交叉配血试验由两互相核对；一人值班时，操作完毕后自已复核，并填写配血试验结果。

2.1.4附注受血者配血试验的血标本必须是输血前3天之内的。

2) 血库要逐项核对输血申请单、受血者和供血者血样，复查受血者和供血者ABO血型（正、反定型），并常规检查患者Rh（D）血型（急诊抢救患者紧急输血时Rh(D)检查可除外），正确无误时可进行交叉配血。

3) 凡输注全血、浓缩红细胞、红细胞悬液、洗涤红细胞、冰冻红细胞、浓缩白细胞、手工分离浓缩血小板等患者，应进行交叉配血试验。

机器单采浓缩血小板应ABO血型同型输注。

4) 凡遇有下列情况必须按《全国临床检验操作规程》有关规定作抗体筛选试验：交叉配血不合时；对有输血史、妊娠史或短期内需要接收多次输血者。

2.2改良低离子聚凝胺试验法2.2.1原理红细胞血型抗厡及相应的抗体,经低离子介质(LIM)快速孵育至敏后,加入由聚凝胺等带正电荷的大分子聚合物组配的促凝剂,以减弱红细胞静电斥力,缩短红细胞间距,加速分子运动,帮助红细胞血型抗厡相应的抗体紧密搭桥,再利用机械离心力的作用,呈现出肉眼可见的凝集状,这种凝集反应中存在的非特异性免疫凝集因素,可以被附加的假凝集清除液迅速清除,而特异性的免疫凝集对附加的假凝集清除液不敏感,能维持较长时间的凝集状,由此可特异性的检出相应的血型抗厡或抗体。

盐水介质法交叉配血试验操作规程

盐水介质法交叉配血试验操作规程一.【原理】红细胞上携带有ABO抗原，当和相应的抗体结合（如A型红细胞遇到含有抗A的B型血清）之后，就会产生肉眼可见的凝集。

所以当受血者和供血者细胞经混合并离心后，如有ABO不配合问题，就会很快显示出来，所以常称为“立即离心”（immediate spin，IS）配血试验。

用来检测供者红细胞与受血者血清之间的ABO相容性。

二.【器材】0.9％生理盐水，离心机，塑料小试管三.【操作】1．用生理盐水将受血者红细胞制备2％～5％盐水悬液。

（如取分离血清后受血者底层红细胞50ul与生理盐水1mL配成5％受血者盐水悬液）2．从供血者血液保存袋上的辫子中获取少量血样，分离血清，生理盐水三洗红细胞（取红细胞以后，往红细胞内加入无菌生理盐水混匀，离心去除残余白细胞，反复洗涤3次，去除上面的血浆和其他细胞，但是使用生理盐水洗涤红细胞时，不能用力摇晃试管，以免引起红细胞破裂，导致溶血等情况，溶血会影响红细胞的使用。

），并用生理盐将供血者红细胞制备2％-5％盐水悬液。

（如取分离血清后供血者底层红细胞50ul 与生理盐水1mL 配成5％供血者盐水悬液）3．取洁净塑料小试管2支，1支标明受血者血清（PS）＋供血者细胞（DC）或主侧：另1支标明供血者血清（Ds）＋受血者细胞（PC）或“次侧”。

4．按标记“主侧”管加受血者血清2滴（100uL），加供血者红细胞悬液1滴（50uL）。

“次侧”管放供血者血清2滴（100uL），加受血者红细胞悬液1滴（50uL）。

混匀，离心机离心1分钟，轻轻晃动试管，肉眼观察结果。

四.【结果判定】1．肉眼观察，如果试管中出现任何红细胞凝集或溶血，则判读为阳性，无凝集为阴性。

2．对于不能明显判定为阴性而并未达到阳性凝集的反应，可通过显微镜进一步判读，镜下有红细胞凝集的为阳性反应，无凝集的为阴性。

3．如果试验在室温进行，若有凝集产生，可置37℃放置2分钟后观察凝块是否散开，以排除冷凝集素造成的凝集影响测定结果。

交叉配血操作作业指导书

交叉配血实验操作作业指导书1.目的检测供血者与受血者之间的输血相容性，包括主侧配血与次侧配血，确保输血安全。

2.原理微柱卡的每一个微管中装填有孔径均一的凝胶和抗人球蛋白试剂（抗－IgG和抗补体C3），红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合后，在离心力的作用下不断向管底沉降，并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集，凝胶具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶，使其悬浮在凝胶层上端，未凝集的红细胞则可以通过凝胶之间的微小空隙到达微管底部。

3.样品3.1样品类型：血清和血浆标本均可用于交叉配血3.2患者准备（1）应避免高脂食物或未知药物影响，可能的情况下，在大量用药前采集标本（2）对于溶血性贫血、异血型造血干细胞移植或器官移植、多次输入异型血液等特殊输血患者，每次输血前均需采集配血标本3.3容器和添加剂类型（1）患者样本：EDTA抗凝全血。

全血量在3ml～5ml，用标本离心机在1000g/min条件下，离心5min，离心后无溶血、无凝块、无明显乳糜。

紧急情况下可以使用抗凝动脉血。

（2）供者标本枸橼酸盐抗凝全血，血液中心提供的献血员标本，将合血辫剪开，放入空白试管，在标本离心机1000g/min下离心5min，离心后应无溶血、无凝块及明显乳糜。

4.环境和安全控制4.1实验环境（1）环境温度：18℃～30℃（2）环境相对湿度：15%～80%RH（无冷凝）（3）实验室的噪音、防震、防尘、防腐蚀、防磁与屏蔽等方面的环境条件应符合检验项目和检测仪器设备对环境条件的要求，室内采光良好。

4.2人员安全（1）操作人员二级防护（2）所有血液样本及与血液接触的材料均视为传染性物质（3）对设备进行清洁或清除污染、处理样本、处置废弃试剂卡、处理稀释样本管等遵照实验室生物危害注意事项。

5.方法学微柱凝胶法6.程序性步骤标记交叉配血卡（血袋编号、病人姓名）→受血者EDTA抗凝血离心备用→剪下供血者（血袋辫子）离心备用→吸取受血者50ul血浆至主侧微管内（仅暴露实验所需反应腔）→供血者（血袋辫子）50ul血浆至次侧微管内→用低离子强度溶液分别配比0.5%-0.8%受血者、供血者（血袋辫子）红细胞悬液→在主侧加入供血者（血袋辫子）50ul红细胞悬液→次侧加受血者50ul红细胞悬液→ 37℃孵育15min →专用离心机900r2min转1500r3min →取出配血卡判读结果。

交叉配血盐水介质法实验方法和步骤

交叉配血盐水介质法实验方法和步骤下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。

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血型鉴定、交叉配血操作规程

⾎型鉴定、交叉配⾎操作规程ABO、Rh-D⾎型鉴定操作规程1.⽬的：规范ABO、Rh-D检测的操作过程2. 标本采集：静脉采⾎2ml抗凝⾎,避免溶⾎试剂3. 试剂：长春博讯⽣物技术有限责任公司4.⽅法原理【原理】:标准⾎清中的完全抗体(lgM)抗A、抗B、和抗D能和红细胞表⾯相应的抗原在盐⽔介质中发⽣特异性的凝集反应。

根据红细胞凝聚类型可鉴别出A、B、O、AB四型和RHD阴性或阳性。

5. 操作:⼀、玻⽚法(⼀般只能做正定型)【正定型】:1、取⼀张玻⽚,⽤蜡笔或记号笔将其分为三等份,从左到右每⼀等份左上⾓标明A、B、D,2、对应加⼊抗A和抗B抗D标准⾎清⼀滴;3、分别加PC(患者10—15%红细胞悬液);4、⽤洁净⽵签将试剂和红细胞充分混匀,混合物约2cm2⼤⼩;5、轻轻地连续倾斜转动玻⽚2—5分钟,观察并记录; 【解释】:A端凝集为A型⾎;B端凝集为B型⾎;A、B 端均凝集则为AB型;A、B端均不凝集则为O型;D端凝集则为RH阳性者,⽆凝集则为RH阴性。

备注:玻⽚法可作为ABO⾎型初筛或复检;不适⽤于抗体鉴定和交叉配⾎;不适合检测ABO亚型。

⼆、试管法(盐⽔介质)【原理】:标准的A型和B型红细胞能和受检者⾎清(⾎浆)中相应的抗体发⽣特异性结合,形成⾁眼可见的凝集反应,从⽽可推断出受检者的⾎型。

【材料】:1、标准A型和B型红细胞悬液(浓度4%,商品有售,亦可⾃⾏新鲜配制);2、受试者⾎清或⾎清;3、洁净康⽒试管。

【正定型】:1、取⼆⽀洁净试管分别记上抗A和抗B;2、对应加⼊抗A和抗B⾎清1滴;3、分别加⼊病⼈红细胞悬液1滴(浓度为2%-5%);4、混匀,室温放置5分钟,1000rpm离⼼1分钟,取出观察结果【解释】:轻摇试管,检查是否凝集,抗A、抗B管均凝集,受试者为AB型⾎;抗A、抗B管均不凝集,则为O 型⾎;抗A管凝集则为A型⾎;抗B管凝集则为B型⾎。

【反定型】:1、取⼆⽀试管分别记上AC和BC;2、分别加⼊病⼈⾎清;3、对应加⼊A和B型试剂红细胞;4、混匀室温放置5分钟,1000rpm离⼼1分钟,取出观察结果;【解释】:⾸先检查上清液有⽆溶⾎,然后轻摇试管,检查是否凝集,A、B管均凝集受试者为O型⾎;A、B管均不凝集则为AB型⾎;A管凝集则为B型⾎;B管凝集则为A型⾎。

交叉配血试验标准化操作规程(盐水法)作业指导书

交叉配血试验标准化操作规程（盐水法）一、目的为保证临床输血的相容性，确保临床输血安全，对红细胞悬液、洗涤红细胞、浓缩红细胞、少白细胞红细胞等进行交叉配血试验。

二、方法采用盐水介质试管法；三、原理交叉配血试验也称配合性试验,只是检查不配合性,使受、供者血液间没有可测的不相配合的抗原、抗体成分。

盐水介质交叉配血试验常称立即离心配血试验，将人红细胞血型抗原与相应的抗体发生的凝集反应在盐水介质中进行，只有在任何步骤中不产生溶液血或凝集时方可将供血者的血液或血液成分给受血者输注。

试验通常包括：（一、）主侧交叉配血试验：受血者血清对供血者红细胞，是检测受血者血清中是否存在与供血者红细胞发生反应的抗体；（二、）次侧交叉配血试验：受血者红细胞对供血者血清，是检测供血者血清中是否存在与受血者红细胞发生反应的抗体；四、适用范围适用于输血前需进行交叉配血试验的血液及血液成分。

五、仪器设备普通离心机；血型专用离心机；六、0.9%氯化钠注射液（四川科伦药业股份有限公司）批准文号：国药准字H51021158；有效期：自生产日期之日起三年；七、检测样本要求1、标本类型：静脉血(EDTA－K2真空紫头采血管1支+ 普通红头真空采血管1支)。

2、标本储存和运输：新鲜血2～8℃贮存时间不超过72小时。

3、标本拒收状态：标识不准确、标本稀释、细菌污染，严重溶血等不能测定。

八、操作步骤1、将受血者与献血者的红细胞血清分离；2、分别配制受血者与献血者红细胞配成3 % RBC悬液3% RBC悬液配制：1滴压积RBC + 1.6 ml（40滴）生理盐水3、取一次性试管2支，1支标明主侧：受血者血清（PS）+供血者细胞（DC）；另1支标明次侧：供血者血清（DS）+受血者细胞（PC）。

4、主侧管加受血者血清5滴和供血者红细胞悬液5滴。

次侧管加供血者血清5滴和受血者红细胞悬液5滴。

混匀，以1000r/min离心2min，轻轻侧动试管，观察结果。

冬季室温较低，应将试管保温，以防冷凝集素引起凝集反应影响结果判断。

盐水法配血操作规程

盐水法配血操作规程盐水法配血是一种常用的配血方法，通过在供者血样与受者红细胞悬液中加入不同浓度的盐水溶液来观察凝集反应，判断供者与受者血型是否相容。

下面是盐水法配血的操作规程。

一、实验前准备1. 准备好所需试剂和仪器设备，如盐水溶液、试管、试管架、洗瓶、一次性手套、试管盒等。

2. 校对血型试剂，确保其有效期内，并按照说明书稀释好。

二、操作步骤1. 标记试管用玻璃笔或细标签标记试管，并分别写上供者和受者的信息。

2. 制备供者血样取一滴供者的血液于洗净的试管内，加入一滴净化水，用试管尾轻轻混匀。

3. 制备受者红细胞悬液取一滴受者的血液于洗净的试管内，加入适量的盐水溶液，用试管尾轻轻混匀。

4. 加盐水溶液以1:2、1:4、1:8的比例分别将0.9%的盐水溶液加入供者和受者的试管中，使总体积约为1ml。

轻轻摇动试管，使溶液充分混合。

5. 静置观察把试管放入试管架上，静置5分钟，观察凝集情况。

6. 结果判定观察供者与受者试管中是否出现凝集现象，根据凝集的程度判断血型的相容性。

- 无凝集：相容，可进行输血。

- 片状凝集：相容，可进行输血，但需留意可能存在特殊抗体。

- 线状凝集：不相容，不可进行输血。

7. 清理试管将用过的试管放入洗瓶中，用水冲洗干净，清理试管架。

8. 记录结果根据观察结果，将配血结果记录在相关数据表格中，包括供者和受者的血型信息、凝集情况以及对应的相容性。

三、注意事项1. 操作时要严格按照标准操作规程进行，避免操作失误。

2. 手套和试管架等工具要彻底清洁干净，确保实验的准确性和结果可靠性。

3. 配血试验要进行双重确认，避免操作失误和结果错误。

4. 注意个人防护，避免接触到供者的血液，以避免传染病的传播。

5. 根据实际需要，可进行不同浓度溶液的稀释和配制，以满足不同试验的要求。

通过盐水法配血操作规程，可以判断供者与受者的血型相容性，为临床输血提供可靠的依据，确保输血安全性和有效性。

交叉配血操作规程

交叉配血操作规程[原理]凝聚胺试验是利用低离子溶液促进红细胞抗原与血清（浆）中的抗体反应，再利用凝聚胺引起红细胞间非免疫性的凝集，让已有抗体（IgG）反应的红细胞间的距离缩短。

距离缩短后更能引起已反应的抗体和别的红细胞产生反应形成免疫性的凝集。

而由凝聚胺所引起的非免疫性红细胞凝集反应可被后来加入的复悬液所中和而散开，如有免疫反应，凝集就不会散开，为阳性反应。

如没有免疫反应，凝集就会散开，为阴性反应。

交叉配血试验是在盐水介质的基础上加入凝聚胺，检测供患之间是否相合，患者血清（浆）中是否含有具临床意义的红细胞异体抗体。

[试剂组成]1.洁净试管，离心机，显微镜。

2.0.85% 氯化钠溶液：准确称取氯化钠（AR）8.5 g，用蒸馏水溶解并定容至 1000 ml。

试剂启用后，有效期为：二周。

3.凝聚胺试剂①低离子介质溶液：含葡萄糖，乙二胺四醋酸-2 钠及稳定剂。

②凝聚胺溶液：含凝聚胺，氯化钠及稳定剂。

③复悬液：含柠檬酸钠，葡萄糖及稳定剂。

④阳性对照血清：含抗D 血清，氯化钠及稳定剂。

4.抗人IgG 血清。

[试剂保存和稳定性]1.凝聚胺试剂须保存在2-25℃。

2.有效期内可使用。

3.抗人IgG 血清低温冰箱保存。

复溶后放2—4℃冰箱保存。

[标本收集和准备]1.抽取受血者静脉血3-4ml（操作中小心防止红细胞破损），放入一已贴标签干燥洁净的试管中为血清管(也可用EDTA-K2 抗凝血液)，并将注射器中余下的少量血液配成2%红细胞生理盐水悬液，放入另一已贴标签干燥洁净的试管中为红细胞悬液管。

以上标本有效期为三天；若受血者抽取标本后，输用过血液或血液制品，且输用时间超过12 小时的，必须重新采集标本。

2. 2% 红细胞悬液：用生理盐水洗涤红细胞3 次。

根据下表进行红细胞悬液的配制。

悬液浓度（%）压积红细胞（滴）盐水（滴）----------------------------------------------------------------2 1 2ml(40)5 1 0.8ml(16)----------------------------------------------------------------[操作步骤]1.取出3 支试管分别标记主，次及对照测试：主测管：加入病人血清（浆）2 滴，再加入供血者3-5%红细胞悬液1 滴，次测管：加入供血者血清（浆）2 滴，再加入病人3-5%红细胞悬液1 滴，对照管：加入2 滴*4 阳性对照血清，再加入供血者3-5%红细胞悬液1 滴。

S013交叉配血试验标准化操作规程(盐水法)

S013交叉配血试验标准化操作规程(盐水法).docS013交叉配血试验标准化操作规程（盐水法）1. 引言本文档旨在提供交叉配血试验（盐水法）的标准化操作规程，确保试验的准确性和一致性，保障患者输血安全。

2. 目的规范交叉配血试验的操作方法。

确保试验结果的准确性和可靠性。

为临床输血提供科学依据。

3. 适用范围本规程适用于医疗机构中进行交叉配血试验的所有工作人员。

4. 术语和定义交叉配血试验：指在输血前，对献血者和受血者的血液进行相容性测试的过程。

盐水法：一种常用的交叉配血试验方法，通过盐水介质检测红细胞凝集反应。

5. 试验原理简述盐水法交叉配血试验的基本原理，包括红细胞凝集反应和抗体检测等。

6. 试验材料和设备6.1 试验材料新鲜抗凝血（EDTA或肝素）生理盐水标准血清学试剂6.2 试验设备离心机显微镜试管和试管架移液器和吸头7. 操作步骤7.1 样本准备收集献血者和受血者的血液样本。

离心分离血浆和红细胞。

7.2 盐水介质制备按照标准比例制备生理盐水介质。

7.3 主侧试验将受血者血清与献血者红细胞混合。

离心观察是否有凝集反应。

7.4 次侧试验将献血者血清与受血者红细胞混合。

离心观察是否有凝集反应。

7.5 结果判断根据凝集反应的有无和强度判断试验结果。

8. 结果记录和报告详细记录试验过程和结果。

按照规定格式编写试验报告。

9. 安全和质量控制9.1 安全措施遵守实验室安全规程。

采取必要的个人防护措施。

9.2 质量控制定期进行试验方法的验证和评估。

记录和分析试验误差。

10. 附录10.1 试验操作流程图提供交叉配血试验操作的流程图。

10.2 试验记录表格提供试验记录的示例表格。

10.3 试验报告模板提供试验报告的示例模板。

11. 结论本规程为交叉配血试验（盐水法）提供了一套标准化的操作流程，有助于提高试验的准确性和一致性，确保患者输血安全。

医院交叉配血试验标准操作规程

交叉配血试验标准操作规程1、目的为规范交叉配血试验的技术操作，保证临床输血安全有效，依据《输血实验室管理程序》4.1.7(2)条款的要求制定本规程。

2、适用范围适用于医疗机构输血科（血库）进行交叉配血试验。

3、职责医疗机构输血科（血库）技术人员负责交叉配血试验。

4、原理使受血者血清（血浆）和红细胞分别与献血者红细胞和血清（血浆）反应，采用盐水介质法、凝聚胺法、抗球蛋白法及微柱凝胶法等检测供、受者之间是否存在相应的红细胞血型抗原抗体反应，判定受血者与献血者血液之间红细胞血型免疫的相容性。

5、所需设备和试剂5.1设备普通离心机，血型血清学专用离心机，电热恒温水浴箱，普通显微镜。

5.2试剂凝聚胺试剂盒，抗球蛋白试剂。

6、检测环境条件6.1室温应控制在18～27℃，湿度应保持30%～70%。

7、步骤与方法7.1受血者、献血者血标本处理7.1.1将受血者血标本离心分离血清（血浆）及红细胞，取2支试管，分别标记受血者的唯一性标识，吸取离心后血标本血清（血浆）到一支已标识的试管内；吸取红细胞30μl 到另一支已标识的试管内，加生理盐水1ml稀释成3%的红细胞悬液。

7.1.2受血者ABO和RhD血型鉴定，执行《试管法鉴定ABO和RhD血型标准操作规程》。

7.1.3受血者红细胞不规则抗体筛选及鉴定，执行《红细胞不规则抗体筛选及鉴定标准操作规程>。

7.1.4根据受血者ABO和RhD血型鉴定结果选择ABO和RhD相容血液成分，剪取献血者血袋上一段留样管，取1支试管标记献血者唯一性标识，将剪下的血标本盛入标识的试管中，离心分离血清（血浆）及红细胞；另取2支试管分别标记献血者唯一性标识，吸取献血者血标本血清（血浆）到一支已标识的试管内；吸取献血者血标本红细胞3μl到另一支已标识的试管内，加生理盐水1ml稀释成3%的红细胞悬液。

7.1.5复检献血者ABO和RhD血型。

7.2盐水介质法交叉配血试验7.2.1取试管2支，分别标记为“主侧”、“次侧”，主侧加受血者血清（血浆）2滴、献血者3%红细胞悬液1滴，混匀；次侧加献血者血清（血浆）2。

盐水介质交叉配血SOP

杭州余杭邦尔医院检验科血库标准操作规程盐水介质配血法标准操作规程1（1）首先对患者血样充分离心后，吸出血清于另一试管中并标记。

（2）取试管12支,分别标记患者细胞、患者抗A、抗B、抗D、AC、BC、OC、主侧、次侧、献血者抗A、抗B、献血者细胞管。

对患者血样进行ABO血型（正反定性）和Rh血型检定，主侧管加受血者血清2滴，献血者2%~5%红细胞悬液1滴；次侧管加献血者血清2滴，受血者2%~5%红细胞悬液1滴，对献血者血辫进行ABO血型复查，以1000g离心15秒，观察结果2.结果判断ABO同型配血，主侧和次侧均无凝集及溶血现象。

为盐水介质配血结果阴性，可将原标本接着做聚凝胺法(具体方法见聚凝胺法)或抗人球蛋白法配血。

3.附注3.1冬季室温较低，应将试管保温以防止冷凝集引起的凝集反应。

3.2献血者血型因初复检已确定，可只做正定型，但务必要做。

3.3患者血清中纤维蛋白没完全析出时，要放置到37℃水浴箱中15分钟，然后再离心。

以防未完全析出的纤维蛋白影响判断结果。

3.4 交叉配血试验中发现不配合时，首先应考虑受血者和献血者的ABO定型是否错误，必要时进行抗体筛选，注意有无特异性同种抗体。

或者病人的血清在室温，37℃或抗人球蛋白血清中凝集所有的其它红细胞，造成交叉配血的困难，应进一步作有关试验进行鉴定。

3.5 在每次输血之后，受血者和献血者样本应在2℃~6℃保存10天。

如果病人在输血中发生不良反应或在输血后数天内发生迟发性溶血性反应时，保存的病人和献血员的血样就有可能要重新或追加试验，必要时从发生溶血性输血反应的病人重新采取血样与输血前病人血样同时检查以资比较。

7.6 各医院前来配血时，要有输血申请单方可配血。

4.相关文件《中国输血技术操作规程》编制人王渊审核人钟剑版本号第二版颁布日期2018年1月1日文件编号YHBE/SOP-XK-02 页码第 1 页。

交叉配血试验标准化操作规程(盐水法)作业指导书

二、方法采用盐水介质试管法；三、原理交叉配血试验也称配合性试验,只是检查不配合性,使受、供者血液间没有可测的不相配合的抗原、抗体成分。

2、标本储存和运输：新鲜血2～8℃贮存时间不超过72小时。

3、标本拒收状态：标识不准确、标本稀释、细菌污染，严重溶血等不能测定。

4、主侧管加受血者血清5滴和供血者红细胞悬液5滴。

次侧管加供血者血清5滴和受血者红细胞悬液5滴。

混匀，以1000r/min离心2min，轻轻侧动试管，观察结果。

冬季室温较低，应将试管保温，以防冷凝集素引起凝集反应影响结果判断。

ABO血型系统交叉配血实验操作规程

ABO血型系统交叉配血实验操作规程
（盐水试管法）
1 严格认真核对用血申请单与血样上患者姓名，科别，床号，病历号，血型是否相符，并对照检查供血者血型，血液成分及血袋编号，观察血液外观质量，如血袋是否破损，是否溶血使混浊，起泡，血浆是否有乳糜、絮状物、红细胞层呈紫红色是否超过保存期限等。

2 将受血者血样放置在试管架上（靠左侧）将离心后的供血者血样放置在右侧。

3 取一次性试管两支各加生理盐水1ml,然后一支中加入受血者红细胞1滴，另一支加入供血者红细胞1滴，各自制成3-5%的红细胞悬液备用（分别置于各自血样后面）。

4 取透明的一次性硬塑试管两支，分别标上主次侧及配血序号主侧试管排列在受血者血样后面，次侧试管排列在供血者血样后面。

5 用一次性滴管，将受血者血清1滴加入主侧试管内再将受血者红细胞悬液1滴加入次侧试管内，再取一支滴管将供血者血清1滴加入次侧试管内将供血者红细胞悬液1滴加入主侧试管内。

6 将主，次侧两支试管轻轻混匀置离心机以1000miml分钟，取出试管在白色背景下观察上清液有无溶血，若无溶血时，再轻摇试管观察红细胞有无凝集，若有可疑情况应进一步加做聚凝胺配血。

7 正确规范的书写配血报告单，再仔细与用血申请单受血者血样标签，血袋上供血者姓名，血型，编号等核查无误后做好登记。

07 盐水介质交叉配血操作规程---作业指导书

操作人员3.1.1负责对检测标本进行盐水介质交叉配血的具体操作并编写实验报告单。

仪器管理人员3.2.1负责相关仪器的日常保养。

3.2.2负责相关仪器的维护。

质量监督员负责操作过程监督，仪器室内质量控制。

科室主任或授权者负责检测报告审核。

实验原理IgM为天然抗体，在盐水介质中能直接连接含对应抗原的红细胞，使之发生肉眼可见的凝集。

盐水介质直接离心法可用于检测待检标本血清中存在的IgM型血型抗体，也可采用型抗体试剂来检测待检红细胞上的相应抗原。

患者ABO血型鉴定，见《ABO血型定型试管法操作规程》。

患者Rh（D）定型，见《Rh血型鉴定试管法操作规程》。

患者血清进行抗体筛选实验，见《抗体筛选试管法操作规程》。

盐水介质交叉配血实验6.5.1患者标本准备6.5.1.1分离血清，标记为PS（patient serum）。

6.5.1.2配制3%-5%患者红细胞生理盐水悬液，标记为PC（patient cell）。

6.5.2献血员标本准备6.5.2.1分离血清，标记为DS（donor serum）。

6.5.2.2配制3%-5%献血员红细胞生理盐水悬液，标记为DC（donor cell）。

6.5.3交叉配血（按1个供血者为例）。

取小试管2支，分别标明主、次，即主侧配血管和此侧配血管。

在主侧配血管中分别加PS 2滴，DC 1滴，在次侧配血管分别加DS 2滴，滴，混匀，1000转离心1min。

6.5.4观察结果。

先观察试管上层液有无溶血，再斜持试管轻轻摇动或轻轻弹动，观察管底反应物有无凝集（必要时用显微镜观察）。

盐水交叉配血法

献血者之间的交叉配血：
如献血者都已做过筛选，献血者之间不必进行交叉配血。
献血者之验）。如受血者需要供血量大时，献血者之间的交叉配血可编组进行。如将献血者按3人编为一组，（即：1、2、3号为一组，4、5、6号为一组，以此类推）。再将每组内三个献血者血清、红细胞分别等量混合进行配血。如某组献血者血清与献血者红细胞交叉配血出现凝集，则需将该组三名献血者的血清分别与此红细胞作配血（方法用聚凝胺法），进一步查明引起配血不合的血清属于哪一个献血者，在输血时禁忌将此血输给受血者。
4、按标记“主侧”管加受血者血清3滴和供血者红细胞3滴。“次侧”管加供血者血清3滴和受血者红细胞3滴。
5、混匀，以1000r/min离心1min，轻轻侧动试管，观察结果。
注意：冬季室温较低，应将试管保温，以防冷凝集引起地凝集反应影响结果判断。
结果判断
1、主侧：无凝集无溶血
2、次侧：无凝集无溶血
按同型相输的原则必须符合以上两条配血结果符合，方可发放血液。
注意事项：
交叉配血试验中发现不配合时，
首先应考虑受血者和献血者的ABO定型是否错误，必要时进行Rh血型鉴定及抗体筛检。
其次应注意有无特异性同种抗体，特异性未知的同种抗体存在或者受血者的血清在室温、37℃或抗球蛋白血清中凝集所有的其它红细胞，造成交叉配血的困难，应进一步作有关试验进行鉴定。
受血者、献血者的标本，在每次输血之后，在2-6℃保存3-7天。如果受血者在输血中发生不良反应时，或在输血后数天内发生迟发性、溶血性反应时，保存的受血者和献血者的血样就有可能要重做或追加试验，必要时从发生溶血性输血反应的受血者重新采取血样与输血前血样同时检查以资比较。
输血科
文件编号：
盐水交叉配血法
版序：
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