关于去内毒素(内毒素,质粒提取)
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外毒素和内毒素是细菌产生的两大类毒素物质。
外毒素是病原菌在代谢过程中分泌到菌体外的物质。外毒素的化学成分是蛋白质。毒性极不稳定,对热和某些化学物质敏感,容易受到破坏。用3%~4%的甲醛溶液处理,其毒性完全消失。外毒素的抗原性较强,能刺激机体产生抗毒素。
内毒素是革兰氏阴性细菌细胞壁(cell wall)的组成成分、细菌在生活时不能释放出来,当细胞死亡而溶解或用人工方法破坏菌体时才释放出来,因而称为内毒素。
内毒素是磷脂-多糖-蛋白质(phospholid-polysaccharide-protein)复合物,主要成份为脂多糖(lipopolysaccharide,lps)。是细胞壁(cell wall)的最外层成分,覆盖在坚韧细胞壁(cell wall)的粘肽上。内毒素脂多糖分子由菌体特异性多糖、非特异性核心多糖和脂质A三部分构成。其性质较稳定、耐热、毒性比外毒素低、其作用没有组织器官选择性,不同病原菌所产生的内毒素引起的症状大致相同,都能引起机体体温升高、腹泻和出现出血性休克和其他组织损伤现象。
内毒素不是蛋白质,因此非常耐热。在100℃的高温下加热1小时也不会被破坏,只有在160℃的温度下加热2到4个小时,或用强碱、强酸或强氧化剂加温煮沸30分钟才能破坏它的生物活性。
内毒素的毒性作用:较弱,毒性作用大致相同,可引起发热,微
循环障碍,感染性休克,DIC等
内毒素在研究中的一大弊端是降低转染的效率,所以在做细胞转染试验时,要注意质粒中内毒素的含量。
Qiagen公司EndoFree Plasmid Kit 关于内毒素的介绍:
Endotoxin levels in plasmid preparations*