法医鉴定试剂盒Identifiler中文用户手册

AmpFlSTR® Identifiler™PCR扩增试剂盒

中文用户手册

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目录

1 引言 (3)

1 试剂盒概况 (3)

2 试剂盒特点 (3)

3 试剂盒位点 (3)

4 试剂盒成分 (4)

5 保存方法 (4)

6 订购信息 (5)

7 软件配置 (5)

2 310和377升级 (6)

1 310 升级 (6)

2 377升级 (8)

3 PCR扩增 (10)

1 试剂配制 (10)

2 DNA制备 (10)

3 PCR反应 (10)

4 310操作(Mac系统) (11)

1 软件要求 (11)

2 运行设置 (11)

3 光谱校正 (12)

4 电泳操作 (12)

5 GeneScan数据分析 (13)

6 Genotyper基因分型 (13)

7 关机步骤 (13)

5 3100操作 (14)

1 软件要求 (14)

2 光谱校正 (14)

3 PCR扩增 (15)

4 电泳样品准备 (15)

5 电泳参数 (15)

1引言

1．A mpFlSTR Identifiler试剂盒概况

新一代法医鉴定及亲子鉴定试剂盒A m p F l S T R I d e n t i f i l e r P C R扩增试剂盒是一个多重短串联重复序列（S T R）检测试剂盒。它采用美国应用生物系统公司（ABI）最新的五色荧光、一个泳道技术，可以同时扩增和同时检测16个STR位点（15个4核苷酸重复位点加上A m e l o g e n i n性别判定标记）。5色荧光中，6-F A M（兰色）、V I C（绿色）、N E D（黄色）和P E T（红色）用于标记样品，L I Z（橙黄色）用于标记G e n e S c a n-500分子量内标。

AmpFLSTR Identifiler PCR扩增试剂盒包含美国C o m b i n e d D N A I n d e x S y s t e m(C O D I S)所要求的全部13个位点，另外增加2个位点：D2S1338和D19S433。它整合了ABI公司先前推出的Profiler Plus、COfiler和SGM Plus试剂盒中的全部STR位点，满足目前所有国际罪犯数据库的要求，如CODIS、ENFSI、Interpol以及SGM Plus体系。

2．A mpFlSTR Identifiler试剂盒特点

♦单管同时扩增16个位点

包括15个个体识别位点以及一个性别鉴定位点Amelogenin。

♦采用与以往试剂盒完全相同的引物序列

所有位点扩增产物与ABI现有Profiler Plus, COfiler 及SGM试剂盒扩增结果完全一致，罪犯DNA数据库工作可以在不同试剂盒中自由切换。

♦五色荧光技术

五色荧光技术实现了一色荧光标记分子量内标，其余四色荧光标记待测样品，在维持扩增产物大小不变的条件下，有效地提高了单个泳道可以分辨的片段数。

♦扩增产物小

全部16个位点的PCR扩增产物均小于350 bp，扩增效率及重现性高，支持DNA降解样品的扩增。

♦提供完备的解决方案

由试剂、仪器、软件、技术支持等构成完整的体系。

3．AmpFlSTR Identifiler试剂盒位点

位点名称染色体定位Identifiler Allelic Ladder

的等位基因

染料

标记

对照DNA

9947A

D8S1179 8 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17,

18, 19

6-FAM 13

D21S11 21q11.2-q21 24, 24.2, 25, 26, 27, 28, 28.2, 29,

29.2, 30, 30.2, 31, 31.2, 32, 32.2,

6-FAM 30

33, 33.2, 34, 34.2, 35, 35.2, 36,

37, 38

D7S820 7q11.21-22 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 6-FAM 10, 11 CSF1PO 5q33.3-34 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 6-FAM 10, 12 D3S1358 3p 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 VIC 14, 15 TH01 11p15.5 4, 5, 6, 7, 8, 9, 9.3, 10, 11, 13.3 VIC 8, 9.3 D13S317 13q22-31 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 VIC 11

D16S539 16q24-qter 5, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 VIC 11, 12

D2S1338 2q35-37.1 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23,

24, 25, 26, 27, 28 VIC 19,

23

D19S433 19q12-13.1 9, 10, 11, 12, 12.2, 13, 13.2, 14,

14.2, 15, 15.2, 16, 16.2, 17, 17.2 NED 14,

15

vWA 12p12-pter 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19,

20, 21, 22, 23, 24 NED 17,

18

TPOX 2p23-2per 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 NED 8

D18S51 18q21.3 7, 9, 10, 10.2, 11, 12, 13, 13.2, 14,

14.2, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21,

22, 23, 24, 25, 26, 27 NED 15,

19

Amelogenin X: p22.1-22.3

Y: p11.2

X, Y PET X D5S818 5q21-23 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16 PET 11

FGA 4q28 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25,

26, 26.2, 27, 28, 29, 30, 30.2,

31.2, 32.2, 33.2, 42.2, 43.2, 44.2,

45.2, 46.2, 47.2, 48.2, 50.2, 51.2 PET 23,

24

4．AmpFlSTR Identifiler试剂盒成分

AmpFlSTR Identifiler试剂盒的一个包装足以进行200次25-µl反应体系的PCR扩增，并包括相应的使用许可。

成分描述体积

AmpFlSTR PCR reaction Mix 2管，在含有0.05%叠氮酸钠的缓冲液中溶有

MgCl2，脱氧三磷酸核苷酸和牛血清白蛋白。

1.1 mL/管

AmpFlSTR Identifiler

Primer Set

1管，含有荧光标记和未标记的引物。 1.1 mL

AmpliTaq Gold DNA Polymerase 2管，5 U/µL。 50

µL/管

AmpFlSTR Control DNA 9947A 1管，0.10 ng/µL女性人细胞株DNA溶于

0.05%叠氮酸钠和缓冲液中。

0.3 mL

AmpFlSTR Identifiler

Allelic Ladder

1管。50 µL 5．保存方法

成分保存条件