硅胶柱层析技术
硅胶柱层析法的操作方法
硅胶柱层析法的操作方法硅胶柱层析法是一种常用的分离和纯化技术，主要用于分离、富集和纯化混合物中的化合物。
它基于化合物在固定相（硅胶）和流动相（溶剂）中的亲疏水性差异而实现分离。
下面将详细介绍硅胶柱层析法的操作方法。
1. 实验准备首先，需要准备层析柱、硅胶、溶剂和待分离的混合物。
层析柱是用玻璃制成的管状装置，内部装填有硅胶，通常有不同直径和长度可供选择。
硅胶是用硅酸盐矿物质制成的多孔性固体，有不同颗粒大小和孔径可供选择以适应不同的分离需求。
2. 层析柱装填首先，将层析柱垂直安放在支架上，并使用适当的填料将底部封堵，例如硅胶糊。
然后，将干燥的硅胶颗粒倒入层析柱中，轻轻敲击柱壁使其均匀沉积。
填充的高度应根据需分离化合物的极性和分子量来确定。
最后，将柱顶用玻璃棉堵塞，以防止硅胶颗粒从柱顶溢出。
3. 条件调节层析柱安装完毕后，需要调节运行条件。
首先，根据所选的溶剂系统，选择合适的溶剂和比例，将溶剂混合均匀，以确保溶剂前后在柱内具有相似的极性和极性强度。
其次，填充好柱的硅胶会吸附一些杂质，因此需要进行预洗。
先用适量的纯溶剂通过柱，以洗去杂质，直至柱底完全干燥。
4. 样品加载样品的加载通常分为直接加载和前处理两种方式。
直接加载适用于纯度较高的样品，直接将样品溶解于少量溶剂中，通过注射器将样品溶液缓慢注入到柱顶。
前处理适用于混合物样品，需要通过一定的前处理步骤，例如萃取、溶剂抽提或浓缩，以得到纯度较高的目标化合物，然后再进行样品加载。
5. 层析过程样品加载后，开始进行层析过程。
通常采用重力下滴、低压或高压加速流动相的方法进行柱层析。
流动相会在柱内不断移动，化合物会因为与流动相的亲疏水性差异而发生分离。
这时，需要控制流动相的速度和流动相比例，以使得分离效果最佳。
根据待分离物质的特性和分离效果，可以适当调整流速和流动相比例。
6. 集取分离物分离后的化合物会分布在柱上的不同位置，目标化合物可能会随着柱顶溶剂一起流出柱外。
硅胶柱层析的原理及其应用
硅胶柱层析的原理及其应用1. 硅胶柱层析的原理硅胶柱层析是一种常用的分离和纯化技术，基于样品在固体基质（硅胶）中的分配和吸附行为实现物质的分离。
具体原理如下：1.1 分配行为硅胶柱层析基于物质在两相体系中的分配行为。
在硅胶柱层析中，样品被加载到硅胶柱中，在流动相的作用下，某些组分更喜欢分配到固定相中，而某些组分更喜欢分配到流动相中。
这种不同分配行为导致了物质在硅胶柱中的分离。
1.2 吸附行为硅胶是一种亲水性的材料，并且具有一定的表面吸附能力。
在硅胶柱层析中，一些组分会通过吸附作用而被保留在硅胶上，而另一些组分则会轻易通过硅胶柱，快速被洗脱。
通过控制流动相的成分和流速，可以实现对样品中成分的选择性吸附和洗脱。
2. 硅胶柱层析的应用硅胶柱层析在许多领域中被广泛应用，以下列举了一些常见的应用：2.1 生物制药在生物制药领域，硅胶柱层析被用于蛋白质和抗体的纯化。
硅胶柱能够根据蛋白质的特性，实现对其的选择性吸附和洗脱。
通过硅胶柱层析技术，能够有效地将目标蛋白质从复杂的混合溶液中纯化出来。
2.2 天然产物提取硅胶柱层析也广泛应用于天然产物的提取和分离。
许多植物和微生物中含有大量的有用天然产物，如药物、色素等。
通过硅胶柱层析，能够将这些天然产物从复杂的混合物中分离纯化，提高其纯度和活性。
2.3 食品分析硅胶柱层析在食品分析领域中也有广泛应用。
例如，通过硅胶柱层析可以对食品中的色素、抗氧化剂、防腐剂等进行分离和纯化，从而进行食品安全性评价和质量控制。
2.4 环境监测硅胶柱层析也可以用于环境监测中有机污染物的分离和检测。
许多有机污染物在环境中以复杂的混合物形式存在，通过硅胶柱层析技术，可以将目标有机污染物从样品中有效地分离出来，以定量或定性地分析。
2.5 药物分析在药物分析领域，硅胶柱层析常被用于药物成分的分离和纯化。
通过硅胶柱层析，能够将药物中的杂质和目标成分有效地分离，从而提高样品的纯度和药效。
3. 硅胶柱层析的优势硅胶柱层析具有以下几个优势：•简单易用：硅胶柱层析的操作相对简单，适合实验室规模和设备有限的情况。
硅胶柱层析的方法
硅胶柱层析的方法硅胶柱层析是一种常用的色谱分离技术，它基于样品成分在硅胶柱上的吸附和解吸过程，通过不同组分在硅胶上的吸附和解吸速度差异来实现分离和纯化。
硅胶柱层析的方法主要包括制备硅胶柱、样品处理、样品加载、洗脱和分析收集等步骤。
第一步是制备硅胶柱。
首先，选择合适的硅胶填料，常用的有粉末状硅胶和硅胶凝胶。
粉末状硅胶适用于高效液相色谱（HPLC），硅胶凝胶适用于柱层析。
然后，将硅胶填充到柱子中，通常使用的是玻璃柱，选择直径和长度适当，填充过程需要控制填充的均匀度和压实度，确保硅胶柱的质量。
第二步是样品处理。
根据需要，可以采取不同的处理方法。
例如，如果样品中有杂质或固体颗粒，可以首先使用滤纸或过滤膜进行过滤；如果样品中有有机溶剂，可以先进行浓缩或萃取。
处理后的样品应保持干燥和无杂质，以免对硅胶柱的分离产生干扰。
第三步是样品加载。
将处理后的样品加入硅胶柱中，一般通过重力或压力的方式进行。
样品的进样量应适中，既不能太多导致硅胶柱失效，也不能太少导致分离效果不理想。
如果样品中有多个组分需要分离，可以采用多次加载的方式，每次加载后等待吸附完成再进行下一次加载。
第四步是洗脱。
洗脱是分离和纯化的关键步骤。
一般来说，先用无极性溶剂进行洗脱，逐渐增加溶剂的极性，以使吸附在硅胶上的样品逐渐解吸出来。
洗脱的速度和温度也会影响分离效果，需要根据具体情况进行优化。
在洗脱过程中，可以采集不同洗脱时刻的洗脱液，以便后续的分析和检测。
最后一步是分析和收集。
通过对洗脱液的分析，可以确定各个组分的含量和纯度。
一般可以使用紫外可见光谱分析或其他检测方法进行定量分析。
根据分析结果，可以对样品进行收集，用于进一步的研究或生产应用。
总的来说，硅胶柱层析是一种简单且有效的分离技术。
通过合理选择硅胶填料、样品处理、加载、洗脱和分析等步骤的优化，可以实现对复杂混合物的高效分离和纯化。
在实际应用中，还需要考虑到硅胶柱的选择、操作条件的调整和设备的维护等因素，以保证分析的准确性和重复性。
硅胶柱层析分离原理
硅胶柱层析分离原理硅胶柱层析分离是一种常用的生物化学分离技术，它基于样品成分在硅胶柱中的分配系数不同而实现对样品成分的分离。
硅胶柱层析分离原理主要包括样品分配、吸附和洗脱三个基本过程。
首先，样品分配是指样品成分在硅胶柱中分配系数不同的现象。
当样品混合物通过硅胶柱时，各成分会根据其在固定相和流动相之间的分配系数不同而在硅胶柱中分配不均。
这种分配不均导致了各成分在硅胶柱中的分离。
其次，吸附是指样品成分在硅胶柱固定相表面的吸附现象。
在样品混合物通过硅胶柱时，一些成分会与硅胶表面发生吸附作用，而另一些成分则会继续向前移动。
这种吸附作用也是硅胶柱层析分离的重要原理之一。
最后，洗脱是指通过改变流动相条件来使吸附在硅胶柱上的成分逐步释放出来。
在样品混合物通过硅胶柱后，通过改变流动相的成分或浓度，可以逐步将吸附在硅胶柱上的成分释放出来，从而实现对样品成分的分离。
总的来说，硅胶柱层析分离原理是基于样品成分在硅胶柱中的分配系数、吸附和洗脱三个基本过程来实现的。
通过合理地控制这三个过程，可以实现对样品成分的有效分离，从而达到分析或纯化的目的。
除了以上基本原理外，硅胶柱层析分离还受到一些因素的影响，例如硅胶柱的颗粒大小、流动相的选择和流速等。
合理地选择这些因素，可以提高硅胶柱层析分离的效率和分离效果。
总之，硅胶柱层析分离原理是一种重要的生物化学分离技术，它通过样品成分在硅胶柱中的分配、吸附和洗脱三个基本过程来实现对样品成分的分离。
合理地控制这些过程和影响因素，可以实现对样品成分的有效分离，为生物化学分离提供了重要的技术支持。
硅胶柱层析分离原理
硅胶柱层析分离原理以硅胶柱层析分离原理为标题，我们来探讨一下硅胶柱层析分离的原理和应用。
硅胶柱层析分离是一种常用的分离和纯化技术，广泛应用于化学、生物、制药等领域。
硅胶作为一种多孔吸附材料，具有很强的吸附能力，能够有效地将混合物中的目标物质与其他组分分离开来。
硅胶柱层析分离的原理基于化学吸附和物理吸附的作用。
硅胶具有大量的亲水性羟基（-OH）官能团，这些羟基能够与目标物质之间产生氢键或静电作用力，从而实现分离。
在柱层析过程中，混合物样品首先通过柱子，然后在硅胶填料中发生相互作用。
不同化合物在硅胶表面的亲和力不同，因此会在填料中以不同的速率移动。
通过适当调整溶剂的性质和流速，可以实现目标物质与其他组分的有效分离。
硅胶柱层析分离的过程可以分为三个步骤：装柱、样品加载和洗脱。
首先，我们需要选取合适的硅胶填料，并将其填充到柱子中。
填料的粒径和填充度对分离效果有重要影响，需要根据样品性质和目标分离物质的大小来选择。
填充好柱子后，需要将柱子与溶剂进行平衡，使硅胶充分湿润。
接下来是样品加载的步骤。
我们将待分离的混合物溶液从柱子顶部缓慢地加入，让样品与填料充分接触。
在柱层析过程中，样品中的目标物质会与硅胶发生相互作用，被硅胶吸附下来。
其他组分则会在柱中以不同的速度通过，从而实现了分离。
最后是洗脱的步骤。
在样品加完后，我们需要使用洗脱剂来将目标物质从硅胶上洗脱下来。
洗脱剂的选择要根据目标物质与硅胶的亲和力来确定，通常是通过改变溶剂的性质或使用特定的洗脱溶液来实现。
洗脱后的目标物质可以进一步进行分析或者纯化。
硅胶柱层析分离具有操作简单、分离效果好、适用范围广等优点，因此被广泛应用于化学、生物、制药等领域。
它可以用于分离和纯化天然产物、化学合成产物、生物大分子等。
在制药工业中，硅胶柱层析分离被广泛用于药物的纯化和质量控制。
在生物技术领域，硅胶柱层析分离常用于蛋白质纯化和分析。
此外，硅胶柱层析分离还可以用于环境监测、食品检测等领域。
硅胶柱层析
硅胶柱层析硅胶柱层析技术是一种用于分离和分析分子结构相似或略有不同的有机化合物的有机分离技术。
这种分离技术既可用于混合物的分离纯化，也可用于单组分的准确分析。
硅胶柱层析可以得到高精度的分离分析结果，它与其它分离分析技术相比具有较高的灵敏度，操作方便和分析效率高。
硅胶柱层析分子可以通过两种不同的方式分离：一种是吸附，另一种是偏析。
在吸附过程中，溶质分子被吸附在柱粒子表面上，并且不会溶解，而在偏析过程中，溶质分子会在柱粒子表面上同时进行偏析和均相移动，也就是说，不同结构的分子会以不同的速度移动，从而分离混合物中的分子。
硅胶柱层析过程的主要操作步骤如下：第一步是将硅胶柱放入柱层析装置中；第二步是向硅胶柱中加入待分离分析物；第三步是使用柱层析仪进行柱层析测定，即将分析物在柱中均匀地向下移动；最后一步是收集偏析后的分子产物。
硅胶柱层析技术在有机合成研究和有机分子分析中都有广泛的应用。
它在分离有机混合物、有机废水处理、有机物种鉴定以及其他有机化学应用等方面非常有用。
例如，它可以用于分离混合物中的微量组分；可以用于鉴定相似的有机物；可以用于检测污染物和有毒物质；可以用于分离复杂的有机混合物，如香料中的混合物；还可以用于研究生物分子的三维结构。
此外，硅胶柱层析技术还可以用于食品分析，如可可粉、乳糖、蛋白质分析等，以及药物分析，如抗生素分析、降脂药物分析等。
它甚至可以用于环境分析，如溶解性有机磷、元素烃的分析，在进行环境污染检测中也有重要作用。
硅胶柱层析技术目前已经被广泛应用于各个领域，它具有较高的灵敏度、操作简便、分析效率高以及结果可靠等优点。
硅胶柱层析技术也可以用于大规模分离复杂的物质，这使得它成为有机化学研究中不可或缺的重要技术。
硅胶干柱层析的操作方法
硅胶干柱层析的操作方法
硅胶干柱层析是一种常用的色谱分离和纯化方法，其操作方法如下：
1. 准备硅胶干柱：选择合适的硅胶粒径和填充长度，并在长颈漏斗或塑料柱内均匀填充硅胶。
2. 洗涤硅胶：用适量的洗涤剂或溶剂来洗涤硅胶，去除杂质和表面活性剂。
3. 将待分离混合物按一定的量和浓度溶解于适量的溶剂中，然后以毛细作用引入硅胶干柱的顶部。
4. 打开流速调节装置，控制溶剂以一定的流速通过硅胶干柱。
5. 观察溶剂在硅胶上的下降速度，逐渐减小溶剂流速，使溶质逐渐吸附于硅胶上形成各自的色谱带。
6. 当色谱带出现在硅胶干柱底部时，关闭流速调节装置。
7. 根据需要，可以将各个色谱带收集在不同的试管中，然后进行进一步的分析或纯化。
8. 若需要进行连续分离，可继续添加溶剂，以移动特定的色谱带。
9. 使用无色的溶剂后，关闭流速调节装置，并将硅胶干柱保存在密封好的容器中，防止湿气和污染。
注意事项：
- 操作过程中要注意保持硅胶干柱的垂直和无空隙状态，以避免溶剂漏出或色谱带扩散。
- 操作结束后要及时将硅胶干柱清洗干净，并记录相关操作步骤和结果。
硅胶柱层析技术
柱子可以分为：加压,常压,减压,
▪ 压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱 子的塔板数,所以其他条件相同的时候,常压柱是效率最高的,但是时间 也最长,比如天然化合物的分离,一个柱子几个月也是有的,
▪ 减压柱能够减少硅胶的使用量,感觉能够节省一半甚至更多,但是由于 大量的空气通过硅胶会使溶剂挥发 有时在柱子外面有水汽凝结 ,以及 有些比较易分解的东西可能得不到,而且还必须同时使用水泵抽气 很 大的噪音,而且时间长 ,
3、装柱
将柱底用棉花塞紧,不必用海沙,加入约1/3体积石油醚 氯仿 ,装上蓄液 球,打开柱下活塞,将匀浆一次倾入蓄液球内,随着沉降,会有一些硅胶沾 在蓄液球内,用石油醚 氯仿 将其冲入柱中,
4、压实
沉降完成后,加入更多的石油醚 氯仿 ,用双联球或气泵加压,直至流速恒 定,柱床约被压缩至9/10体积,无论走常压柱或加压柱,都应进行这一步, 可使分离度提高很多,且可以避免过柱时由于柱床萎缩产生开裂,
②小型色谱法.用普通的载薄片制成薄板,把欲分离的物质点载薄板上,放 于小型玻璃缸或广口瓶中展开,干燥后显色,观察斑点分离情况.
4.2.2 展开
薄层色谱的展开方法有上行法,下行法,双向展开法,径向展开法等,
▪ ① 上行法:使展开剂由下向上爬.
▪ ② 下行法:使展开剂由上向下.该法可使用极性较弱的展开剂.
4 溶剂的选择
溶剂的选择也许是整个柱色谱分离操作中最困难之处,也是实验成功的 最关键之处.溶剂通常先利用简便的硅胶薄层色谱进行筛选.
4.1 薄层色谱点样
把样品溶解在一种低沸点的有机溶剂中 如氯仿,丙酮.甲醇.乙醇等 然后 用毛细管或微量点样管将试液点到薄层板上.点样量要适当,一般点样 量少些,则分离叫清晰.但要注意到检测灵敏度.
硅胶柱层析的操作方法及注意事项
硅胶柱层析一、硅胶柱层析的原理利用吸附原理，即利用硅胶对中药混合物中各种成分吸附能力的差异，而使混合物中各成分得以分离的色谱方法。
二、硅胶柱层析的操作方法及注意事项1、装柱操作要点：装柱前柱底要垫一层脱脂棉以防吸附剂外漏。
有干法装柱和湿法装柱两种方法（1）干法装柱：将硅胶通过漏斗装入柱内，中间不应间断，形成一细流慢慢加入管内。
也可用橡皮槌轻轻敲打柱硅胶柱使硅胶装填连续均匀、紧密。
柱装好后，打开下端活塞，然后倒入洗脱剂洗脱以排尽柱内空气，并保持一定液面。
（2）湿法装柱：将最初准备使用的洗脱剂装入柱内，打开下端活塞，使洗脱剂缓慢流出。
然后把硅胶慢慢连续不断地倒入柱内（或将硅胶与适量洗脱剂调成混悬液慢慢加入柱内，），硅胶依靠重力和洗脱剂的带动，在柱内自由沉降，此间要不断把流出的洗脱剂加回柱内保持一定的液面，直至把硅胶加完并在柱内沉降不再变动为止。
然后在硅胶上面加一小片滤纸或少许脱脂棉。
根据加样量控制洗脱剂液面至一定高度。
匀浆法：搅成匀浆。
加入干硅胶体积一倍的溶剂用玻璃棒充分搅拌。
如果洗脱剂是石油醚/乙酸乙酯/丙酮体系，就用石油醚拌；如果洗脱剂是氯仿/醇体系，就用氯仿拌。
如果不能搅成匀浆，说明溶剂中含水量太大，尤其是乙酸乙酯/丙酮，如果不与水配伍走分配色谱的话，必须预先用无水硫酸钠久置干燥。
氯仿用无水氯化钙干燥，以除去1%的醇。
如果样品对酸敏感，不能用氯仿体系过柱。
2、上样将欲分离的样品溶于少量装柱时用的洗脱剂中，制成体积小、浓度高的样品溶液，加入层析柱中硅胶面上。
如样品不溶于装柱时用的洗脱剂，则将样品溶于易挥发的溶剂中，并加入适量硅胶（不超过柱中硅胶全量的1/10）与其拌匀，除尽溶剂，将拌有样品的硅胶均匀加到柱顶（始终保持洗脱剂有一定的液面），再覆盖一层硅胶即可。
上样时注意沿着柱内壁慢慢加入，始终保持硅胶上端表面平整；上样量为硅胶的1/60~1/30。
3、洗脱洗脱剂的选用可通过薄层色谱筛选，一般TLC展开时Rf 值为0.2~0.3的溶剂系统是最佳的洗脱系统，采用梯度洗脱法洗脱。
硅胶柱层析
硅胶柱层析一、硅胶柱层析原理根据物质在硅胶上的吸附力不同而得到分离，一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附，极性较弱的物质不易被硅胶吸附，整个层析过程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸过程。
二、硅胶柱层析流动相极性小的用乙酸乙酯：石油醚系统；极性较大的用甲醇：氯仿系统；极性大的用甲醇：水：正丁醇：醋酸系统；拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸三、硅胶柱层析惯用方法1.称量200-300目硅胶，称30-70倍于上样量；如果极难分，也可以用100倍量的硅胶H。
干硅胶的视密度在0.4左右，所以要称40g硅胶，用烧杯量100ml也可以。
2.搅成匀浆加入干硅胶体积一倍的溶剂用玻璃棒充分搅拌。
如果洗脱剂是石油醚/乙酸乙酯/丙酮体系，就用石油醚拌；如果洗脱剂是氯仿/醇体系，就用氯仿拌。
如果不能搅成匀浆，说明溶剂中含水量太大，尤其是乙酸乙酯/丙酮，如果不与水配伍走分配色谱的话，必须预先用无水硫酸钠久置干燥。
氯仿用无水氯化钙干燥，以除去1%的醇。
如果样品对酸敏感，不能用氯仿体系过柱。
3.装柱将柱底用棉花塞紧，不必用海沙，加入约1/3体积石油醚（氯仿），装上蓄液球，打开柱下活塞，将匀浆一次倾入蓄液球内。
随着沉降，会有一些硅胶沾在蓄液球内，用石油醚（氯仿）将其冲入柱中。
4.压实沉降完成后，加入更多的石油醚，用双联球或气泵加压，直至流速恒定。
柱床约被压缩至9/10体积。
无论走常压柱或加压柱，都应进行这一步，可使分离度提高很多，且可以避免过柱时由于柱床萎缩产生开裂。
5.上样干法湿法都可以。
海沙是没必要的。
上样后，加入一些洗脱剂，再将一团脱脂棉塞至接近硅胶表面。
然后就可以放心地加入大量洗脱剂，而不会冲坏硅胶表面。
6.过柱和收集柱层析实际上是在扩散和分离之间的权衡。
太低的洗脱强度并不好，推荐用梯度洗脱。
收集的例子：10mg上样量，1g硅胶H，0.5ml收一馏分；1-2g上样量，50g硅胶（200-300目），20-50ml收一馏分。
7.检测要更多地使用专用喷显剂，如果仅用紫外灯，会损失较多产品，紫外的灵敏度一般比喷显剂底1-2个数量级。
硅胶柱层析的操作方法及注意事项
硅胶柱层析的操作方法及注意事项硅胶柱层析法是一种常用的化学分析方法，具有操作简便、结果准确等优点，在化学、生物、医药等领域得到广泛应用。
下面我们来介绍硅胶柱层析的操作方法及注意事项。
1.准备样品及配制溶剂：一般需要将待测物质与适当的溶剂混合，使其溶解度较大，且不产生化学反应。
根据分析目的选用不同的溶剂，以保证分离效果。
2.准备硅胶柱：硅胶柱由无色透明的硅胶胶体组成，直径一般为1-2.5厘米，长约10-40厘米。
硅胶柱层析的分离效果，与柱高、柱径、胶体的大小和分布、溶液的流速等因素有关。
在选择硅胶柱时，应该根据实际需要选用合适的柱径和柱高。
3.测试流速：测试不同流速对分离效果的影响。
测试方法为将流速调节为不同值，测定每个流速下所采集的溶液吸收曲线，最终确定出最佳的流速。
4.样品处理：样品从洗脱液中洗脱出来之后，可以使用各种不同的方法进行处理。
例如可以用过滤膜、离心、深度过滤等方法，来去除样品中的离子、颗粒等。
5.动态洗脱：先在洗脱液用水稀释3-5倍，使液面齐平。
关掉泵阀使得管路只循环搅拌。
将占底部10%的甲醇浸入硅胶柱底部粉末颗粒中，然后打开泵阀。
保持洗脱液的温度和相对湿度稳定，然后逐渐开始动态洗脱。
6.收集洗脱液：可以采用分批收集和连续收集两种方法，最终将洗脱液图谱编制。
1.操作前，务必检查所有设备设施是否完好，液体循环是否通畅，以及所有参数（如气温、流速、洗脱液配比等）是否调整合适。
2.在操作时，不能超量进样，以免产生超过硅胶柱承受能力的负荷。
3.在操作中，应注意洗脱溶液的挥发和流动，以避免水分汽化，在操作过程中，应该密封管路和溶液，防止冷凝积聚。
4.硅胶柱层析法有一定的危险性，提供人员应该具备一定的化学实验经验，同时要持续关注硅胶柱的干燥程度，确定每步操作的效果，以保证精度和安全性。
5.在分析过程中，应注意各种简化重复操作，减少操作依赖，以提高生产效率。
总之，硅胶柱层析法是一种常用的化学分析方法，其操作相对简便，可以大量产生准确的结果，因此在化学、生物、医药等领域都有广泛的应用。
硅胶柱层析
硅胶柱层析一、硅胶柱层析原理根据物质在硅胶上的吸附力不同而得到分离，一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附，极性较弱的物质不易被硅胶吸附，整个层析过程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸过程.二、硅胶柱层析流动相极性小的用乙酸乙酯：石油醚系统;极性较大的用甲醇:氯仿系统；极性大的用甲醇：水：正丁醇：醋酸系统;拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸三、硅胶柱层析惯用方法1.称量200—300目硅胶,称30—70倍于上样量;如果极难分,也可以用100倍量的硅胶H。
干硅胶的视密度在0。
4左右,所以要称40g硅胶，用烧杯量100ml也可以。
2。
搅成匀浆加入干硅胶体积一倍的溶剂用玻璃棒充分搅拌。
如果洗脱剂是石油醚/乙酸乙酯/丙酮体系，就用石油醚拌；如果洗脱剂是氯仿/醇体系,就用氯仿拌。
如果不能搅成匀浆,说明溶剂中含水量太大，尤其是乙酸乙酯/丙酮，如果不与水配伍走分配色谱的话,必须预先用无水硫酸钠久置干燥.氯仿用无水氯化钙干燥，以除去1％的醇。
如果样品对酸敏感，不能用氯仿体系过柱。
3。
装柱将柱底用棉花塞紧，不必用海沙，加入约1/3体积石油醚（氯仿)，装上蓄液球，打开柱下活塞,将匀浆一次倾入蓄液球内。
随着沉降，会有一些硅胶沾在蓄液球内，用石油醚（氯仿)将其冲入柱中。
4.压实沉降完成后,加入更多的石油醚，用双联球或气泵加压，直至流速恒定.柱床约被压缩至9/10体积.无论走常压柱或加压柱，都应进行这一步,可使分离度提高很多，且可以避免过柱时由于柱床萎缩产生开裂.5.上样干法湿法都可以。
海沙是没必要的。
上样后,加入一些洗脱剂，再将一团脱脂棉塞至接近硅胶表面。
然后就可以放心地加入大量洗脱剂，而不会冲坏硅胶表面.6.过柱和收集柱层析实际上是在扩散和分离之间的权衡。
太低的洗脱强度并不好，推荐用梯度洗脱.收集的例子:10mg上样量,1g硅胶H，0。
5ml收一馏分；1-2g上样量，50g硅胶(200-300目），20-50ml收一馏分.7.检测要更多地使用专用喷显剂，如果仅用紫外灯，会损失较多产品，紫外的灵敏度一般比喷显剂底1—2个数量级。
硅胶柱层析分离原理
硅胶柱层析分离原理硅胶柱层析分离是一种常用的生物化学分离技术，它利用硅胶柱对混合物中的化合物进行分离，是生物化学实验室中常用的技术之一。
硅胶柱层析分离原理是基于化合物在硅胶柱中的吸附和解吸附过程，通过这一过程实现混合物中化合物的分离。
硅胶柱层析分离的原理可以简单概括为，根据化合物在硅胶柱中的亲和性差异，利用流动相在硅胶柱中的渗透作用，使得混合物中的化合物在硅胶柱中发生吸附和解吸附，从而实现化合物的分离。
在这一过程中，硅胶柱起到了吸附剂的作用，而流动相则是将化合物带入和带出硅胶柱的介质。
硅胶柱层析分离的关键步骤包括样品加载、洗脱和收集。
在样品加载阶段，混合物中的化合物被加入到硅胶柱中，并随着流动相的渗透逐渐被硅胶柱吸附。
在洗脱阶段，通过改变流动相的成分和条件，使得吸附在硅胶柱上的化合物发生解吸附，并被带出硅胶柱。
最后，在收集阶段，收集洗脱后的化合物，完成分离过程。
硅胶柱层析分离的原理可以通过化合物在硅胶柱中的吸附和解吸附过程来解释。
硅胶是一种多孔材料，具有很强的吸附性能。
当混合物中的化合物进入硅胶柱时，它们会与硅胶表面发生相互作用，根据化合物与硅胶的亲和性差异，不同的化合物会以不同的速率被硅胶吸附。
在洗脱阶段，通过改变流动相的成分和条件，使得吸附在硅胶柱上的化合物发生解吸附，并被带出硅胶柱，从而实现了化合物的分离。
总之，硅胶柱层析分离是一种常用的生物化学分离技术，它利用硅胶柱对混合物中的化合物进行分离。
其原理是基于化合物在硅胶柱中的吸附和解吸附过程，通过样品加载、洗脱和收集等步骤，实现了化合物的分离。
硅胶柱层析分离的原理对于生物化学实验室的化合物分离和纯化具有重要意义，是一种非常有效的分离技术。
硅胶柱层析
硅胶柱层析硅胶柱层析是一种常用的化学分析技术，其实际应用范围十分广泛，从石油然、医药和食品行业到环境监测和地质探测等，均有较多的应用实例。
本文主要介绍硅胶柱层析的基本原理和工作原理，以及与传统柱层析相比，硅胶柱层析优势明显的方面。
硅胶柱层析是一种基于分子间相互作用实现分离的化学分析技术，是一种在柱芯内以非常小的有机聚合物分子、离子膜、金属离子和其它活性体等作为分子亲和层，实现被测物质分子与分离剂的作用而实现物质的分离的技术，属于无溶剂柱层析。
硅胶柱层析的分离原理是利用硅胶柱包覆的分子间的物质相互作用，利用不同的溶剂扩散和极性交互作用的强弱，实现物质的分离。
而柱芯分离机构，其正要运用的就是溶剂扩散和极性交互作用的强弱。
传统的柱层析方法，需要将分离剂和溶剂混合，由于分离剂本身具有一定的稳定性，使得其混合可以实现一定程度的分离，但是由于它们可以混合质量的不同，因此很难实现较高的分离精度，而且在实际操作中，因为溶剂渗透的存在，会大大增加实验的复杂性，准确性也会存在一定的问题。
与传统柱层析相比，硅胶柱层析有着许多明显的优势，其中首先要提到的是它不仅能够实现廉价易得的分离，而且还能够达到较好的精细程度，其效率和精确度能够明显提升。
另外，由于它可以大大减少添加溶剂，因此不仅仅能够提高实验效率，而且能够有效的降低实验的复杂性。
最后，当涉及到某些有毒物质的分离时，由于这种技术具有无溶剂的特性，因此可以大大减少对环境的影响，有效的保护实验环境的安全性。
综上所述，硅胶柱层析是一种利用分子间相互作用实现分离的无溶剂化学分析技术，与传统柱层析相比，它具有明显的优势，如廉价易得、效率高、精细程度高、不添加溶剂、减少对环境的影响等。
在某些特殊情况下，传统柱层析方法容易受到溶剂渗透的影响，而硅胶柱层析则能够很好的避免这种情况，因此今后由于硅胶柱层析的广泛应用，将会使得化学分析技术发挥更大的作用。
硅胶柱层析分离的实验原理法与技巧
硅胶柱层析分离的实验原理、方法与技巧一、硅胶柱层析原理硅胶层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而得到分离，一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附，极性较弱的物质不易被硅胶吸附，整个层析过程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸过程。
硅胶柱层析流动相极性小的用乙酸乙酯：石油醚系统；极性较大的用甲醇：氯仿系统；极性大的用甲醇：水：正丁醇：醋酸系统；拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸硅胶柱层析惯用方法1.称量。
200-300 目硅胶，称 30-70 倍于上样量；如果极难分，也可以用 100 倍量的硅胶 H。
干硅胶的视密度在 0.4 左右，所以要称 40g 硅胶，用烧杯量 100ml 也可以。
2.搅成匀浆。
加入干硅胶体积一倍的溶剂用玻璃棒充分搅拌。
如果洗脱剂是石油醚 /乙酸乙酯 /丙酮体系，就用石油醚拌；如果洗脱剂是氯仿 /醇体系，就用氯仿拌。
如果不能搅成匀浆，说明溶剂中含水量太大，尤其是乙酸乙酯/丙酮，如果不与水配伍走分配色谱的话，必须预先用无水硫酸钠久置干燥。
氯仿用无水氯化钙干燥，以除去1% 的醇。
如果样品对酸敏感，不能用氯仿体系过柱。
3.装柱。
将柱底用棉花塞紧，不必用海沙，加入约1/3 体积石油醚（氯仿），装上蓄液球，打开柱下活塞，将匀浆一次倾入蓄液球内。
随着沉降，会有一些硅胶沾在蓄液球内，用石油醚（氯仿）将其冲入柱中。
4.压实。
沉降完成后，加入更多的石油醚，用双联球或气泵加压，直至流速恒定。
柱床约被压缩至 9/10 体积。
无论走常压柱或加压柱，都应进行这一步，可使分离度提高很多，且可以避免过柱时由于柱床萎缩产生开裂。
5.上样。
干法湿法都可以。
海沙是没必要的。
上样后，加入一些洗脱剂，再将一团脱脂棉塞至接近硅胶表面。
然后就可以放心地加入大量洗脱剂，而不会冲坏硅胶表面。
6.过柱和收集。
柱层析实际上是在扩散和分离之间的权衡。
太低的洗脱强度并不好，推荐用梯度洗脱。
收集的例子：10mg 上样量，1g 硅胶 H，0.5ml 收一馏分； 1-2g 上样量，50g 硅胶（200-300 目），20-50ml 收一馏分。
硅胶柱层析分离的实验原理、方法与技巧
硅胶柱层析分离的实验原理、方法与技巧一、硅胶柱层析原理硅胶层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而得到分离，一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附，极性较弱的物质不易被硅胶吸附，整个层析过程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸过程。
硅胶柱层析流动相极性小的用乙酸乙酯：石油醚系统；极性较大的用甲醇：氯仿系统；极性大的用甲醇：水：正丁醇：醋酸系统；拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸硅胶柱层析惯用方法1.称量。
200-300目硅胶，称30-70倍于上样量；如果极难分，也可以用100倍量的硅胶H。
干硅胶的视密度在0.4左右，所以要称40g硅胶，用烧杯量100ml也可以。
2.搅成匀浆。
加入干硅胶体积一倍的溶剂用玻璃棒充分搅拌。
如果洗脱剂是石油醚/乙酸乙酯/丙酮体系，就用石油醚拌；如果洗脱剂是氯仿/醇体系，就用氯仿拌。
如果不能搅成匀浆，说明溶剂中含水量太大，尤其是乙酸乙酯/丙酮，如果不与水配伍走分配色谱的话，必须预先用无水硫酸钠久置干燥。
氯仿用无水氯化钙干燥，以除去1%的醇。
如果样品对酸敏感，不能用氯仿体系过柱。
3.装柱。
将柱底用棉花塞紧，不必用海沙，加入约1/3体积石油醚（氯仿），装上蓄液球，打开柱下活塞，将匀浆一次倾入蓄液球内。
随着沉降，会有一些硅胶沾在蓄液球内，用石油醚（氯仿）将其冲入柱中。
4.压实。
沉降完成后，加入更多的石油醚，用双联球或气泵加压，直至流速恒定。
柱床约被压缩至9/10体积。
无论走常压柱或加压柱，都应进行这一步，可使分离度提高很多，且可以避免过柱时由于柱床萎缩产生开裂。
5.上样。
干法湿法都可以。
海沙是没必要的。
上样后，加入一些洗脱剂，再将一团脱脂棉塞至接近硅胶表面。
然后就可以放心地加入大量洗脱剂，而不会冲坏硅胶表面。
6.过柱和收集。
柱层析实际上是在扩散和分离之间的权衡。
太低的洗脱强度并不好，推荐用梯度洗脱。
收集的例子：10mg上样量，1g硅胶H，0.5ml收一馏分；1-2g上样量，50g硅胶（200-300目），20-50ml收一馏分。
硅胶柱层析技术
1．确定干燥、不含溶剂的待分离粗产品的重量。
2．用薄层色谱(TLC)选取溶剂体系，使Rf的值处于0.2～0.3之间。
3．确定用于样品上柱的方法。
可有三种选择：净试样法，溶液法(湿法)或硅胶吸附法(干法)；对于液体和固体，较为普遍的方法是溶液法(湿法)上样，即将样品溶于溶剂中，然后将溶液加入分离柱。
4．确定合适的硅胶和化合物的比例。
对于简单的分离，通常要求两者的比例为30~50：1(重量比)；但对比较困难的分离，需要的比例高达120：1。
5．选取合适的分离柱——硅胶量决定了分离柱的尺寸，一般选用短而粗的加压柱。
6．选取合适的收集用容器——将硅胶体积除以4，然后选取能装下这个体积的容器就可(20L 的硅胶对应于5 L的组分)。
7．装柱。
戴好活性炭口罩，在(落地)通风橱中装好分离柱，干法和湿法装柱均可，只要能把柱子装实就行。
装完的柱子应该要适度的紧密(太密了淋洗剂走的太慢)，一定要均匀(不然样品就会从一侧斜着下来)。
8．加样。
用少量的溶剂溶解待分离粗品，加样，加完后将下面的活塞打开，待溶剂层下降至石英砂面时，加入淋洗剂，一开始不要加压，等溶样品的溶剂和样品层有一段距离(2～
4cm)，再加压，这样避免了溶剂(如二氯甲烷等)夹带样品快速下行。
9．样品的收集。
一边收集样品，一边进行色谱分析(TLC、LC-MS或HPLC)跟踪柱子的分离进程。
10．将所需纯度的流出组分合并后用旋转蒸发仪进行浓缩。
11．当完全除去溶剂后，进行分析(LC-MS、HPLC、或NMR等)，称重。
12．按相关规程进行清场处理。
柱层层析硅胶cas
柱层层析硅胶cas柱层层析硅胶（Column Chromatography Silica Gel，简称CC硅胶）是一种用于化学分离和纯化的常见技术。
它是在硅酸盐基础上制备的，具有多孔结构和大的比表面积，因此在分离纯化过程中具有良好的吸附能力和选择性。
本文将介绍柱层层析硅胶的原理、操作步骤以及它在化学实验中的应用。
柱层层析硅胶的原理是基于物质在固定相（硅胶）和流动相（溶剂）之间的相互作用力差异实现分离。
固定相是填充在柱中的硅胶，它的粒径和孔径大小可以根据需要选择。
流动相是溶剂，可以通过改变溶剂的组成和性质来调节吸附和洗脱的效果。
在柱层层析过程中，样品溶液首先被加载到柱上，然后通过溶剂的流动，溶液中的不同组分会以不同的速度在固定相上移动，从而实现分离。
柱层层析硅胶的操作步骤如下：1. 准备柱子：选择合适大小的柱子，装入硅胶并均匀填充。
2. 预处理硅胶：用适当的溶剂进行洗涤，去除杂质和水分。
3. 样品加载：将待分离的混合物溶液加载到柱子上，可以使用注射器或滴管缓慢加入。
4. 溶剂流动：选择适当的流动相，缓慢地通过柱子，使样品分离。
5. 分馏收集：通过收集不同时间或体积的洗脱液，分别收集不同组分的纯化产物。
柱层层析硅胶在化学实验中有着广泛的应用。
例如，在有机合成中，它可以用于分离、纯化和提取目标化合物。
柱层层析硅胶的分离效果受到多种因素的影响，如硅胶的粒径和孔径大小、溶剂的选择和流速、样品的性质等。
根据需要，可以调整这些因素以达到更好的分离效果。
柱层层析硅胶还可以用于生物化学实验中的蛋白质纯化和寡核苷酸分离。
在这些应用中，硅胶通常需要经过修饰以增加特异性吸附。
此外，柱层层析硅胶还被广泛应用于药物分析、环境监测和食品检测等领域。
总结起来，柱层层析硅胶是一种常用的化学分离和纯化技术。
它通过固定相（硅胶）和流动相（溶剂）之间的相互作用力差异实现样品的分离。
在化学实验中，柱层层析硅胶被广泛应用于有机合成、生物化学和药物分析等领域。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
2.5.2 正式检测 点样: 取分部收集的冲洗溶液进行分别直接点样,如果冲洗溶液太稀, ①点样: 取分部收集的冲洗溶液进行分别直接点样,如果冲洗溶液太稀,浓 度太小,可先浓缩.点样的容器一般用玻璃毛细管, 度太小,可先浓缩.点样的容器一般用玻璃毛细管,点样斑点的直径一般 为3-5mm. 展开:在普通的展开槽中进行,展开方式常选用上行展开. ②展开:在普通的展开槽中进行,展开方式常选用上行展开. 展开剂:使用冲洗溶液. ③展开剂:使用冲洗溶液. ④显色:一般常用物理检测法和化学检测法.物理检测法中首先有紫外光 显色:一般常用物理检测法和化学检测法. 紫外光常用两种波长(254nm与365nm).其次是碘蒸气显色法. (254nm 法,紫外光常用两种波长(254nm与365nm).其次是碘蒸气显色法.化学 其次是碘蒸气显色法 检出法通常惊醒显色剂直接喷雾.显色剂有通用显色剂和专用显色剂. 检出法通常惊醒显色剂直接喷雾.显色剂有通用显色剂和专用显色剂. 通用显色剂最常见的是硫酸-乙醇或甲醇(1:1)溶液,喷雾后,有的化合物 通用显色剂最常见的是硫酸-乙醇或甲醇(1:1)溶液,喷雾后, (1:1)溶液 立即反应,但多数化合物需加热后经历数分钟才显色,不同化合物的反 立即反应,但多数化合物需加热后经历数分钟才显色, 应不同,所以颜色也往往不同.专用显色剂是指对某个或某一类化合物 应不同,所以颜色也往往不同. 显色的试剂,利用化合物本身的特有性质,或利用其所含的某些官能团 显色的试剂,利用化合物本身的特有性质, 的特殊反应.展开后根据斑点的,可以粗略的估计待分离物的含量的大 的特殊反应.展开后根据斑点的, 小.
柱层析
1、吸附色谱的原理 在一定条件下，硅胶与被分离物质之间产生作用， 在一定条件下，硅胶与被分离物质之间产生作用，这种作用主要是物 理和化学作用两种。 理和化学作用两种。物理作用来自于硅胶表表面与溶质分子之间的范 德华力； 德华力；化学作用主要是硅胶表面的硅羟基与待分离物质之间的氢键 作用。 作用。 2、操作步骤 2.1 硅胶准备 硅胶一般选用250 400目 40-63µm直径的硅胶颗粒 根据∆Rf 250直径的硅胶颗粒) ∆Rf选用 硅胶一般选用250-400目(即40-63µm直径的硅胶颗粒)，根据∆Rf选用 硅胶的用量。 硅胶的用量。 2.2 实验仪器准备 一支玻璃色谱柱,一个铁架台,烧杯,锥形瓶,径口直径较大的玻璃漏斗, 一支玻璃色谱柱,一个铁架台,烧杯,锥形瓶,径口直径较大的玻璃漏斗, 一支玻璃棒, 一支玻璃棒, 等。
4 溶剂的选择 溶剂的选择也许是整个柱色谱分离操作中最困难之处, 溶剂的选择也许是整个柱色谱分离操作中最困难之处,也是实验成功 的最关键之处.溶剂通常先利用简便的硅胶薄层色谱进行筛选. 的最关键之处.溶剂通常先利用简便的硅胶薄层色谱进行筛选. 4.1 薄层色谱点样 把样品溶解在一种低沸点的有机溶剂中(如氯仿,丙酮.甲醇.乙醇等) 把样品溶解在一种低沸点的有机溶剂中(如氯仿,丙酮.甲醇.乙醇等)然 后用毛细管或微量点样管将试液点到薄层板上.点样量要适当, 后用毛细管或微量点样管将试液点到薄层板上.点样量要适当,一般点 样量少些,则分离叫清晰.但要注意到检测灵敏度. 样量少些,则分离叫清晰.但要注意到检测灵敏度. 4.2 展开 4.2.1展开剂选择 4.2.1展开剂选择 选择展开剂时,可采用微量圆环法和小型色谱法进行选择. 选择展开剂时,可采用微量圆环法和小型色谱法进行选择.
2.3.2试样的加入 2.3.2试样的加入 将试样溶于层析时使用的流动相中，再沿色谱管壁缓缓加入。 ①将试样溶于层析时使用的流动相中，再沿色谱管壁缓缓加入。注意勿 使吸附剂翻起。 使吸附剂翻起。 或将试样溶于适当的溶剂中，与少量吸附剂混匀， ②或将试样溶于适当的溶剂中，与少量吸附剂混匀，再使溶剂挥发去尽 后使呈松散状；将混有试样的吸附剂加在已制备好的色谱柱上面。 后使呈松散状；将混有试样的吸附剂加在已制备好的色谱柱上面。如 试样在常用溶剂中不溶解， 试样在常用溶剂中不溶解，可将试样与适量的吸附剂在乳钵中研磨混 匀后加入。 匀后加入。
①微量圆环法:将欲分离的物质,按常规方法点在薄板,两点相距2-3cm,再 微量圆环法:将欲分离的物质,按常规方法点在薄板,两点相距2 3cm,再 用毛细管吸取所实验的溶剂系统,垂直放于样点中心, 用毛细管吸取所实验的溶剂系统,垂直放于样点中心,让溶剂自毛细管 中依中立流出进行展开,干燥后显色.观察斑点的分离情况. 中依中立流出进行展开,干燥后显色.观察斑点的分离情况.背试物质为 未知化和物时,常先用低极性溶剂展开,如式样留在圆点不动, 未知化和物时,常先用低极性溶剂展开,如式样留在圆点不动,则需增加 溶剂的极性或增大洗脱液的量,如移动过快, 溶剂的极性或增大洗脱液的量,如移动过快,则必须用较低极性的溶剂 来调整. 来调整. 小型色谱法.用普通的载薄片制成薄板,把欲分离的物质点载薄板上, ②小型色谱法.用普通的载薄片制成薄板,把欲分离的物质点载薄板上,放 于小型玻璃缸或广口瓶中展开,干燥后显色,观察斑点分离情况. 于小型玻璃缸或广口瓶中展开,干燥后显色,观察斑点分离情况.
硅胶柱层析技术
常说的过柱子应该叫柱层析分 也叫柱色谱。 离，也叫柱色谱。我们常用的是以 硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。 硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。 其实硅胶柱层析技术也可以称 作硅胶吸附柱色谱技术
色谱法，又称层析法。 色谱法，又称层析法。是一种以分配平衡为机理 的分配方法。色谱体系包含两个相， 的分配方法。色谱体系包含两个相，一个是固定 一个是流动相。当两相相对运动时， 相，一个是流动相。当两相相对运动时，反复多 次的利用混合物中所含各组分分配平衡性质的差 最后达到彼此分离的目的。 异，最后达到彼此分离的目的。 色谱法按固定相的状态可分为柱色谱、 色谱法按固定相的状态可分为柱色谱、平板色谱 和棒色谱三种， 和棒色谱三种，而实验室中最常用的是柱层析和 薄层层析，以及它们之间的配合应用。 薄层层析，以及它们之间的配合应用。
3、色谱柱的选择 柱子可以分为：加压，常压，减压。 柱子可以分为：加压，常压，减压。 压力可以增加淋洗剂的流动速度，减少产品收集的时间， 压力可以增加淋洗剂的流动速度，减少产品收集的时间，但是会减低 柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候，常压柱是效率最高的， 柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候，常压柱是效率最高的，但 是时间也最长，比如天然化合物的分离，一个柱子几个月也是有的。 是时间也最长，比如天然化合物的分离，一个柱子几个月也是有的。 减压柱能够减少硅胶的使用量，感觉能够节省一半甚至更多， ①减压柱能够减少硅胶的使用量，感觉能够节省一半甚至更多，但是由 于大量的空气通过硅胶会使溶剂挥发（有时在柱子外面有水汽凝结）， 于大量的空气通过硅胶会使溶剂挥发（有时在柱子外面有水汽凝结）， 以及有些比较易分解的东西可能得不到， 以及有些比较易分解的东西可能得不到，而且还必须同时使用水泵抽 很大的噪音，而且时间长）。 气（很大的噪音，而且时间长）。 加压柱是一种比较好的方法，与常压柱类似， ②加压柱是一种比较好的方法，与常压柱类似，只不过外加压力使淋洗 剂走的快些。压力的提供可以是压缩空气，双连球或者小气泵（ 剂走的快些。压力的提供可以是压缩空气，双连球或者小气泵（给鱼 缸供气的就行）。特别是在容易分解的样品的分离中适用。 ）。特别是在容易分解的样品的分离中适用 缸供气的就行）。特别是在容易分解的样品的分离中适用。压力不可 过大，不然溶剂走的太快就会减低分离效果。 过大，不然溶剂走的太快就会减低分离效果。 常压柱色谱，又称柱层析，是色谱法中最常见的一种。 ③常压柱色谱，又称柱层析，是色谱法中最常见的一种。它的突出优点 分离效率比经典的化学分离方法高的多，与其他色谱法相比， 是，分离效率比经典的化学分离方法高的多，与其他色谱法相比，不 需要昂贵的仪器设备，更换流动相和吸附剂方便，消耗材料少， 需要昂贵的仪器设备，更换流动相和吸附剂方便，消耗材料少，成本 适合分离取样量从克到微克级范围很宽的各种样品， 低，适合分离取样量从克到微克级范围很宽的各种样品，因此在化学 实验室中至今仍被广泛应用。 实验室中至今仍被广泛应用。
2.4洗脱 2.4洗脱 除另有规定外，通常按流动相洗脱能力大小， 除另有规定外，通常按流动相洗脱能力大小，递增变换流动相的品种 和比例，分别分部收集流出液， 和比例，分别分部收集流出液，至流出液中所含成分显著减少或不再 含有时，再改变流动相的品种和比例。 含有时，再改变流动相的品种和比例。操作过程中应保持有充分的流 动相留在吸附层的上面。 动相留在吸附层的上面。 2.5 检测 2.5.1 初步检测 当冲洗溶剂流出一定量后，可对流出液进行初步检测， 当冲洗溶剂流出一定量后，可对流出液进行初步检测，并且将锥形瓶 更换成小试管进行收集。一般只进行初步的快捷检测， 更换成小试管进行收集。一般只进行初步的快捷检测，因此通常是取 一小薄层板，用铅笔和直尺将硅胶板分划成多个小方块， 一小薄层板，用铅笔和直尺将硅胶板分划成多个小方块，并按一定的 次序编号。取一根内径为0.3mm左右的玻璃毛细管蘸取少量流出液， 0.3mm左右的玻璃毛细管蘸取少量流出液 次序编号。取一根内径为0.3mm左右的玻璃毛细管蘸取少量流出液， 点于薄层板的一个小格内，待半点干后， 点于薄层板的一个小格内，待半点干后，然后用物理的或化学的方法 检测。 检测。