TaqMan探针合成
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TaqMan探针合成
Taqman荧光探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个荧光报告基团和一个荧光淬灭基团。
探针完整时,报告基团发射的荧光信号可被淬灭基团吸收,荧光监测系统检测不到荧光信号;PCR扩增时,Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解,使荧光报告基团和荧光淬灭基团分离,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,荧光监测系统通过实时检测系统中荧光信号,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步产物的完全同步,从而实现定量。
TaqMan探针工作原理
随机形态-不发荧光阴性杂交形态-不发荧光阳性杂交形态-发发光
标记TaqMan探针的常见荧光基团
报告基团英文名称中文名称Em max Abs max M.W 颜色。