taqman探针原理

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是RNA探针。TaqMan 荧光探针是一种寡核苷酸探 针,荧光基团连接在探针的5’末端,而淬灭剂则在 3’末端。PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一 个特异性的荧光探针,探针完整时,报告基团发射 的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶 的5'-3'外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光 基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接 收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧 光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形 成完全同步。常用的荧光基团是FAM,TET,VIC, HEX。 而新型TaqMan-MGB探针使该技术既可进 行基因定量分析,又可分析基因突变(SNP),有 望成为基因诊断和个体化用药分析的首选技术平台。
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3min,但为了结 95℃ 5 min;(可以 果稳定性,最好5min。)
95℃ 5 s , 58℃ 10 s , 72℃ 10s ; 72℃ 25s ; 25℃ 1s 。
32个循环
纳米taq配制的mix, 扩PPARa定量
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