质粒小量提取试剂盒说明书

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高纯度质粒小量快速提取试剂盒操作方法及步骤说明书

高纯度质粒小量快速提取试剂盒操作方法及步骤说明书

杭州昊鑫生物科技股份有限公司 htpp://HighPure Plasmid Mini Kit高纯质粒小量快速提取试剂盒目录号:PL03试剂盒组成、储存、稳定性:试剂盒组成保存50次(PL0301)100次(PL0302)200次(PL0303)平衡液室温5ml 10ml 20ml RNaseA(10mg/ml)-20℃150µl 250µl 500µl 溶液P1 4℃15 ml 25 ml 50 ml 溶液P2 室温15 ml 25 ml 50 ml 溶液P3 室温20 ml 35 ml 70 ml去蛋白液PE 室温16ml 31.5 ml 63 ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇漂洗液WB 室温15 ml 25ml 50ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇洗脱缓冲液EB 室温10ml 15ml 20ml吸附柱AC 室温50个100个200个收集管(2ml)室温50个100个200个本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。

储存事项:1.第一次使用时,将试剂盒所带的全部RNase A加入溶液P1后(终浓度100ug/ml)置于2-8℃保存。

如果溶液P1中RNase A失活,提取的质粒可能会有微量RNA 残留,在溶液P1中补加RNase A即可。

2.环境温度低时溶液P2中SDS可能会析出浑浊或者沉淀,可在37℃水浴加热几分钟,即可恢复澄清,不要剧烈摇晃,以免形成过量的泡沫。

3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。

产品介绍:本试剂盒采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞,离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA,再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除,最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。

产品特点:1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。

质粒小提试剂盒使用说明书

质粒小提试剂盒使用说明书

质粒小提试剂盒I简明步骤(PD1211)(详细内容请参考英文说明书)I.实验前准备II.注意事项RNase A: 使用前将提供的所有RNase A瞬时离心后加入Buffer A1, 使用后将Buffer A1/RNase A置于4o C保存。

质粒拷贝数:纯化中低拷贝的质粒时,使用2倍的菌液体积,2倍的Buffer A1,B1,N1, 相同体积的Wash Buffer和Elution Buffer.转化菌:若为-70o C甘油冻存的菌,请先涂布平板培养后,再重新挑选新的单个菌落进行培养。

切勿直接取冻存的菌种进行培养。

DNA Wash Buffer*: 使用前请将8 mL (PD1211-00)或48 mL(PD1211-01)或216 mL (PD1211-02) or 90 mL (PD1211-03) 96-100% 乙醇加入DNA Wash Buffer。

Buffer B1: 在低于室温时会沉淀,请于50o C左右水浴加热至沉淀完全溶解,溶液澄清,使用后保证Buffer B1瓶盖旋紧。

在室温下(22-25o C)进行所有离心操作。

III.操作步骤1.接种新鲜的单个菌落到1-5 mL的LB培养基(含适量抗生素),37o C震荡培养14-16小时。

室温下10,000 x g离心1分钟,收集菌体,并尽可能的吸去上清。

注:残留的液体培养基容易导致菌液裂解不充分,第5步离心后沉淀较松,不能有效吸取上清。

注:本说明书中的操作程序适用于标准LB (Luria Bertani)培养基培养12-16 小时后,OD600(细菌密度)在2.0-3.0之间的菌液。

若采用的是富集培养基,例如TB 或2×YT,请注意保证OD600不超过3.0。

2.加入250 µL Buffer A1(确保已加入RNase A),用移液枪或涡流震荡充分悬浮细菌细胞。

注:细菌细胞如果没有充分悬浮均匀,将导致菌体裂解不完全,从而降低产量。

(完整word版)质粒提取试剂盒说明书(word文档良心出品)

(完整word版)质粒提取试剂盒说明书(word文档良心出品)

E.Z.N.A Plasmid Miniprep Protocol 质粒小规模提取试剂盒Product Number D6942 and D6943,D6944注意:1.使用之前,把试剂盒中的一小管RNA酶加入溶液Ⅰ. 4℃保存2.加60ml 100%乙醇到DNA Wash Buffer Concentrate中.室温保存除试剂盒外还需准备:可达到13000×g的离心机无核酸酶的离心管无菌去离子水或TE缓冲液纯乙醇操作规程:(提取过程在室温下进行):1.在10-20ml试管中,将携带有所需质粒的E.coli接种到5ml LB培养基LB(含氨苄青霉素50μg/ml),37cº振荡培养12-16h。

需特别指出的是:endA阴性的E.coli菌株用于常规质粒提取,如DH5α和JM109.2. 取1.5~5ml菌液室温10000×g离心1min,去上清3. 加250µl溶液Ⅰ(含RNase A),涡漩振荡器震荡至菌体完全悬浮。

(用移液枪吹打进行重悬浮)4.加入250µl溶液Ⅱ,温和颠倒离心管4~6次,获得澄清的裂解液。

最好室温孵育2min,剧烈混合会使剪切染色体DNA,降低质粒纯度。

(储存溶液Ⅱ应拧紧瓶盖)5.加350µl溶液Ⅲ,温和颠倒数次混合,至出现白色絮状沉淀6.室温13000×g离心10min,紧凑的白色沉淀就会形成,迅速进行到下一个步骤7.特别小心吸取上清,移至洁净的装配好容积2ml离心管的吸收柱中。

要保证没有吸入沉淀和细胞碎片。

室温10000×g离心1min,至裂解物完全通过吸收柱8.弃滤过液,加500µl Buffer HB,10000×g离心1min,清洗吸收柱,除去残余蛋白质保证DNA的纯度以备后续试验使用。

如果接下来的步骤对质粒纯度要求不高,如酶消化法等其它筛选方法,此步可省略9.弃滤过液,再用100%乙醇稀释的750µl Wash Buffer清洗吸收柱,10000×g离心1min,弃过滤液。

高纯度质粒小提试剂盒使用说明书

高纯度质粒小提试剂盒使用说明书

高纯度质粒小提试剂盒 Pure Mini Plasmid Kit(目录号:HS0103)产品包装试剂盒成分 50 preps Buffer P1 15 ml Buffer P2 15 ml Buffer P3 20 ml Buffer PD 30 ml RNase A(10 mg/ml)150 ul Buffer PW 60 ml Buffer EB 10 ml Spin Columns PA 50个 Collection Tubes (2 ml)50个(注意:使用前将全部RNase A 溶液加到Buffer P1中混合均匀,2 ~ 8℃保存)保存条件本试剂盒在室温(15 ~ 25℃)干燥条件下,可保存12个月;更长时间的保存可置于2 ~ 8℃。

若溶液产生沉淀,应在使用前置于37℃下溶解沉淀。

单独包装的RNase A 在室温可稳定保存12个月。

加入RNase A 后的Buffer P1应置于2 ~ 8℃保存,可稳定保存6个月。

产品简介本试剂盒用于高纯度质粒DNA 的小量制备与纯化。

菌体经碱裂解、高盐、低pH 处理,质粒可从菌体中释放出来,并特异、高效地被离心柱硅胶膜(Spin Columns PA )吸附。

通过去蛋白液(Buffer PD )和漂洗液(Buffer PW )的清洗可去除蛋白及其他杂质,在低盐、高pH 条件下洗脱,最后得到高纯度的质粒DNA 。

北京厚生博泰科技有限公司Beijing Hooseen Biotech Co., Ltd.使用本试剂盒可从1 ~ 5 ml过夜培养的菌液中纯化得到高达20 ug的高纯度质粒DNA,可在30 min之内完成提取任务。

所得质粒可直接用于酶切、转化、PCR、测序、低敏感细胞株的转染等各种常规分子生物学操作。

产品特点1. 快速:步骤少,操作简便,节约时间。

2. 简便:离心吸附柱不需要预平衡,漂洗液Buffer PW 和去蛋白液Buffer PD不需要另加乙醇,即开即用。

质粒小提试剂盒使用说明书

质粒小提试剂盒使用说明书

质粒小提试剂盒 Mini Plasmid Kit(目录号:HS0101)产品包装(注意:使用前将全部RNase A 溶液加到Buffer P1中混合均匀,2 ~ 8℃保存)保存条件本试剂盒在室温(15 ~ 25℃)干燥条件下,可保存12个月;更长时间的保存可置于2 ~ 8℃。

若溶液产生沉淀,应在使用前置于37℃下溶解沉淀。

单独包装的RNase A 在室温可稳定保存12个月。

加入RNase A 后的Buffer P1应置于2 ~ 8℃保存,可稳定保存6个月。

产品简介本试剂盒用于质粒DNA 的小量制备与纯化。

菌体经碱裂解、高盐、低pH 处理,质粒可从菌体中释放出来,并特异、高效地被离心柱硅胶膜吸附。

通过漂洗液PW 的清洗可去除杂质,在低盐、高pH 条件下洗脱,最后得到纯度较高的质粒DNA 。

使用本试剂盒可从1 ~ 5 ml 过夜培养的菌液中纯化得到高达20 ug 的高纯度质粒DNA ,在30 min 之内完成提取任务。

所得质粒可直接用于酶切、转化、PCR 、测序等各种常规分子生物学操作。

北京厚生博泰科技有限公司Beijing Hooseen Biotech Co., Ltd.产品特点1. 快速:步骤少,操作简便,节约时间。

2. 简便:离心吸附柱不需要预平衡,漂洗液不需要另加乙醇,即开即用。

3. 高质:OD260/280在1.7 ~ 1.9之间。

4. 稳定:正确保存条件下一年内提取效果不发生变化。

操作步骤1. 取1 ~ 5 ml过夜培养的菌液,室温12,000 rpm离心1 min,尽量将上清去除干净。

(注意:根据菌液的浓度决定取液量,浓度高时取1 ml菌液离心即可,浓度低时可多收集一次)2. 加入250 ul Buffer P1,用枪头充分吹打使菌体重悬均匀。

(注意:是否将RNase A溶液加到Buffer P1中并混合均匀;菌体沉淀是否悬浮充分,如有未彻底悬浮的菌块会影响裂解,导致提取的质粒浓度及纯度降低)3. 加入250 ul Buffer P2,温和颠倒混匀6 ~ 8次,直到溶液变得清亮粘稠。

宁波基内生物技术 小量质粒提取试剂盒说明书

宁波基内生物技术 小量质粒提取试剂盒说明书

【注意事项】(1)溶液Ⅱ和溶液Ⅲ均应避免长时间与空气接触,使用后立即盖紧瓶盖,否则会因溶液失效而导致菌体裂解效率效果下降。

漂洗液PW含有乙醇成分,用后立即盖紧瓶盖,避免乙醇成分的挥发。

(2)菌体裂解、中和过程中,剧烈混合会造成基因组DNA断裂,导致提取的质粒DNA有基因组DNA污染,请按说明书操作。

(3)溶液Ⅱ作用细菌太久,一方面导致基因组DNA断裂成较短的DNA,不易和其他成分一起沉淀,造成基因组DNA污染。

另一方面会使质粒DNA 出现切口和断裂,间接导致质粒的质量下降。

裂解步骤所用时间不应超过5分钟。

(4)溶液Ⅱ加入后,溶液会变清亮,若无清亮现象,应加大溶液Ⅱ的用量。

(5)含质粒的转化菌的培养时间不应超过16小时。

过度培养一方面导致抗生素失效,选择压力降低,质粒丢失,无质粒细菌增多。

另一方面长时间的培养条件会导致细菌崩解。

(6)尽管本试剂盒可以抽提较大的质粒(>10kb),但不推荐使用。

如果一定要使用,请参考以下方法:加大菌体使用量(使用5~10ml过夜培养物),同时按照比例增加溶液Ⅰ、溶液Ⅱ、溶液Ⅲ的用量;溶解液TE应在60℃预热,洗脱时延长放置时间或用50~100ul TE洗脱2次。

【生产企业】宁波基内生物技术有限公司【医疗器械生产企业许可证编号】浙食药监械生产许20080119号【生产地址】宁波镇海区庄市街道中官路777号【注册地址】宁波镇海区庄市街道中官路777号【联系方式】电话:*************传真:*************小量质粒提取试剂盒说明书宁波基内生物技术有限公司【产品名称】通用名称:小量质粒提取试剂盒商品名称:Geneinn小量质粒提取试剂盒英文名称:Kit for small scale plasmid preparation【产品代码】GN00014【包装规格】50次/盒,100次/盒【预期用途】应用本试剂盒制备的质粒DNA纯度高,可以用于酶切、PCR、测序、细菌转化等实验。

高纯度质粒小量提取试剂盒 说明书

高纯度质粒小量提取试剂盒 说明书

大班数学活动教案:拼图教案1. 教学背景学生年龄:4-5岁学生已具备的知识和技能:会数数、认识一到十的数字、知道形状与颜色的区别2. 教学目标2.1 知识目标1.学生能把简单的拼图拼好,并准确地说出拼图所属的几何形状。

2.学生能通过拼图,巩固对一到十个数字的认识。

2.2 技能目标1.提升学生的动手能力,能够按照图示,拼好拼图。

2.培养学生的观察能力,能够观察拼图的几何形状和数字,准确地做出判断。

2.3 情感目标1.养成学生对数学活动的兴趣,让学生体验到学习数学的快乐。

2.培养学生的合作意识,学生能够在小组内合作完成拼图。

3. 教学过程3.1 导入环节教师问学生:“你们在家里会玩拼图吗?”学生回答时,教师让学生展示一下自己的拼图,然后教师说:“好的,今天我们就来学习大一点的拼图,准备好了吗?”3.2 活动环节一:拼图过程1.分组:教师将学生分成小组,每组三到四名学生。

2.活动准备:教师为每个小组提供一份数字拼图图纸,和相应的拼图,每张图纸上有一到十个数字和图形,学生需要根据图纸上的数字和图形拼出对应的图片。

3.活动过程:教师告诉学生,现在开始拼图,让学生自由组合句子,优美表达以及敢于发言。

学生在拼图过程中,要注意拼图的位置和相互之间的关系,有效进行小组合作,完成自己的任务。

3.3 活动环节二:讲解数字与形状教师在学生完成拼图后,根据每个组完成拼图的情况,问学生完成拼图的过程,并带学生回顾每个数字都对应的几何形状,如数字一对应的图形是直线,数字五对应的图形是五边形等。

3.4 活动环节三:游戏比赛教师让每个小组选一名代表出来,分别进行拼图比赛,以时间最短和完成度最高的小组为胜者,并为获胜小组颁发奖励。

4. 教学反思这次的数学活动,让学生在拼图的过程中,不仅锻炼了学生的动手能力和观察力,还让学生对数字和几何形状有了更深刻的认识。

同时,我们也培养了学生的合作意识,让他们感受到集体的力量。

在今后的数学活动中,我们将进一步发扬数学活动的魅力,让学生在活动中感受到更多的乐趣。

质粒DNA小量提取试剂盒说明书

质粒DNA小量提取试剂盒说明书

质粒DNA 小量提取试剂盒一、产品简介采用SDS碱裂解法,结合硅胶膜选择性吸附DNA的方法,适合1-4ml细菌培养物中提取多至20 μg质粒DNA。

纯化的质粒DNA适合用于酶切、PCR、测序、转化和转染等分子生物学实验。

二、试剂盒组成和储存组成内容DK301-01 (50次) DK301-02 (200次)RNase A1*30 μl 120 μlBuffer BL 15 ml 60 mlBuffer P1 15 ml 60 mlBuffer P2 15 ml 60 mlBuffer P3 20 ml 90 mlBuffer WA§19 ml 75 mlBuffer WB§16 ml 65 mlDNA吸附柱-B 50套200套1.5 ml离心管50个200个TE※15 ml 30 ml说明书1份1份*RNase A1: 50 mg/ml, -20℃长期保存;第一次使用前将RNase A1全部加入Buffer P1中,于4℃保存。

§Buffer WA和Buffer WB,使用前按试剂瓶所示体积加入无水乙醇或者95%乙醇,混合均匀。

※TE:10 mM Tris-HCl, 0.1 mM EDTA, pH 8.0(25°C)。

除RNase A1和Buffer P1(已加入RNase A1)外,其他组成成分于室温储存。

三、注意事项1.Buffer P3和Buffer WA含刺激性化合物,避免沾染皮肤、眼睛和衣服、谨防吸入口鼻。

若沾染皮肤、眼睛,立即使用大量水或生理盐水冲洗沾染处,必要时寻求医疗咨询。

2. 使用后应及时盖紧试剂瓶盖子,以免影响下次使用效果。

3. 操作步骤A2和B2,充分悬浮细菌,无可见的块状菌团,不然会影响裂解效果。

4. 操作步骤A3和B3,缓慢翻转离心管,以免机械力打断基因组DNA而导致最后纯化的质粒DNA中有基因组DNA污染,同时避免打断质粒DNA,保持其完整性。

质粒小量提取质粒小量提取试剂盒

质粒小量提取质粒小量提取试剂盒

质粒小质粒小量提取量提取量提取试剂盒试剂盒(Plasmid Miniprep Kit )目录号目录号::ZP101 版本版本::2014-10-15 试剂盒内容: 试剂盒组成ZP101-1 (50次) ZP101-2 (100次) ZP101-3 (200次) RNaseA (10 mg/ml) 150 μl 300 μl 600 μl 溶液1 15 ml 30 ml 60ml 溶液2 15 ml 30 ml 60 ml 溶液3 20 ml 40 ml 80 ml去蛋白液W1 30 ml 60 ml 120 ml 漂洗液W2 15 ml 2X15 ml 2X30 ml 洗脱缓冲液TE 15 ml 15 ml 30ml 吸附柱 50个 100个 200个 收集管(2 ml) 50个 100个 200个 说明书 1份 1份 1份 储存条件: 本试剂盒在室温(15-25℃)干燥条件下,可保存1年;更长时间的保存可置于2-8℃。

若溶液产生沉淀,应在使用前置于37℃下溶解沉淀。

单独包装的RNase A 在-20℃可稳定保存1年以上。

加入RNase A 后的溶液1应置于2–8℃保存,可稳定保存半年。

产品简介: 本试剂盒采用碱裂解法裂解细菌,再通过离心吸附柱在高盐状态下特异性地结合溶液中的DNA。

离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料,高效、专一吸附DNA。

本说明书操作步骤适用于从1-5 ml过夜培养的大肠杆菌LB(Luria-Bertani) 培养液中,快速提取多至40 μg纯净的高拷贝质粒DNA。

使用本试剂盒提取的质粒DNA 可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、连接、转化、文库筛选、体外翻译等。

注意事项:请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。

1. 按1:100的比例向溶液1中加入RNaseA,混匀,置于2–8℃保存。

2. 第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在漂洗液W2中加入无水乙醇。

新景质粒DNA小量试剂盒说明书

新景质粒DNA小量试剂盒说明书
3. 用于细菌培养的培养基所占容器的体积不应大于1/4。
4. 将LB培养基中的NaCl含量提高到10g/L,每毫升LB细菌培养物的质粒回收效率能提 高2 μg左右。
2. 菌体溶解
快速收集的菌体(12000 rpm 离心30秒)通常会堆积得比较紧密而不易悬浮,可以 改用3000 rpm 离心5分钟收集菌体,以便于后续悬浮步骤的操作。
Buffer W2 会洗去残留在膜上的 Buffer W1,确保纯净的质粒 DNA 吸附在纯化柱上。 质粒 DNA 结合、洗涤的过程中只需要使溶液滤过纯化柱即可,因此对离心速度和 离心时间并无严格的要求。如果使用国产离心机,可以将离心速度改为 8000 rpm 以降 低噪音;如果使用进口离心机,则可以选用离心机中的“short run”或“quick”模式运行 以节约操作时间。
质量保证
杭州新景生物试剂开发有限公司保证提供的产品是通过质量检验的合格产品。如果 用户在使用中发现产品不能满足实验要求,请立即停止使用产品,并联络我公司技术支 持获取帮助;或者直接联络我公司当地代理商,提出产品更换要求(注意:如果经过鉴 定是因为客户的错误操作所导致的实验失败,我公司只能提供相应的补救措施,保留不 予更换的权利)。
化质粒 DNA,Buffer W1 洗涤步骤不能省略,残留在纯化柱上的微量蛋白(主要是内源 性的非特异性核酸内切酶Ⅰ)会严重影响后续的酶切反应。下表是常见宿主菌的 endA 基因型。
如果从 DH5α、DH10B 等限制性内切酶缺陷型(endA-)宿主菌中纯化质粒 DNA, Buffer W1 洗涤步骤可以省略。但如果从 5ml LB 细菌培养物中分离纯化质粒,残留在纯 化柱上的蛋白会增多,也不应省略 Buffer W1 的洗涤步骤。
Copy number 500–700 300–500 300–400 >1000 15–20 10–12 ~5

Axygenmini-prepare质粒提取试剂盒说明书

Axygenmini-prepare质粒提取试剂盒说明书

Axygenmini-prepare质粒提取试剂盒说明书AxyPrep质粒DNA⼩量试剂盒本试剂盒采⽤改进的SDS碱裂解法,结合DNA制备膜选择性地吸附DNA的⽅法达到快速纯化质粒DNA的⽬的。

适合于从1-4 ml细菌培养物中提取多⾄20 µg⾼纯的质粒DNA,⽤于测序、体外转录与翻译、限制性内切酶消化、细菌转化等分⼦⽣物学实验。

⼀、试剂盒组成、贮存、稳定性Cat. No. AP-MN-P-4 AP-MN-P-50 AP-MN-P-250制备次数 4 preps 50 preps 250 preps250 制备管 4 502502 ml离⼼管 4 502501.5 ml离⼼管 4 50RNase A 10µl30µl150µlBuffer S1 2 ml 15 ml 75 mlBuffer S2 2 ml 15 ml 75 mlBuffer S3 2.5 ml 21 ml 105 mlBuffer W1 2.8 ml 28 ml 135 mlBuffer W2 concentrate 2.4 ml 24 ml 2×72 mlEluent 1 ml 5 ml 25 ml说明书 1 1 1 RNase A:50 mg/ml,室温可贮存6个⽉,长期贮存于-20°C。

Buffer S1:细菌悬浮液。

加⼊RNase A后,混合均匀,4°C贮存。

Buffer S2:细菌裂解液(含SDS/NaOH),室温密闭贮存。

Buffer S3:中和液,室温密闭贮存。

Buffer W1:洗涤液,室温密闭贮存。

Buffer W2 concentrate:去盐液。

使⽤前,按试剂瓶上指定的体积加⼊⽆⽔⼄醇(可⽤100%⼄醇或95%⼄醇)。

混合均匀,室温密闭贮存。

Eluent:2.5 mM Tris-HCl,pH 8.5,室温密闭贮存。

⼆、注意事项Buffer S2、Buffer S3和Buffer W1含刺激性化合物,操作时要戴乳胶⼿套和眼镜,避免沾染⽪肤、眼睛和⾐服,谨防吸⼊⼝⿐。

全能型质粒小提试剂盒简明说明书(BW-PD1228)

全能型质粒小提试剂盒简明说明书(BW-PD1228)

全能型质粒小提试剂盒简明说明书(BW-PD1228)Ver:1904产品简介本试剂盒适用于从1-12mL大肠杆菌培养液中提取质粒,用于所有可能的下游应用。

您可从以下四个方案中任选一个操作。

该试剂盒的特色,●最高得率:每次至多可获得120µg质粒(方案Ⅱ)●处理快速:10min(方案Ⅲ)●高纯度:转染级别(方案Ⅳ)●环境友好型:没有离液盐(方案Ⅲ)●对研究人员安全:无离液盐(方案Ⅲ)产品构成Catalog#-00-01-02 Preps1050250 Mini Columns(White ring)1050250 Lysate Clearance Columns(Green ring)210502mL Collection Tubes1050250 Buffer A15mL27mL135mL Buffer B15mL27mL135mL Buffer N16mL33mL165mL Buffer N33mL12mL60mL Buffer KB6mL30mL150mLBuffer RET1mL6mL30mLDNA Wash Buffer*3mL15mL3×24mLEndoFree Elution Buffer2mL9mL45mLRNase A(20mg/mL)25µL135µL675µLUser Manual111要点●RNase A:20mg/mL。

室温下(15-25℃)可稳定贮藏一年。

使用前将提供的所有RNase A瞬时离心后加入Buffer A1,使用后将Buffer A1/RNase A置于4℃保存。

●DNA Wash Buffer:使用前请将12mL(BW-PD1228-00)或60mL(BW-PD1228-01)或96mL(BW-PD1228-02)96-100%乙醇加入至每个DNA Wash Buffer瓶内。

●Buffer B1:低于室温时会沉淀,请于37℃水浴加热至沉淀完全溶解,溶液澄清。

质粒小量提取试剂盒磁珠法说明书

质粒小量提取试剂盒磁珠法说明书

质粒小量提取试剂盒(磁珠法)说明书货号:DM1100规格:50T/100T保存:磁珠可以在室温下(15-25℃)运输,但请在4℃冰箱中保存。

RNase A 需-20℃保存,以保证其活性。

其余试剂可以室温保存,更长时间的保存可置于2-8℃。

试剂盒内容:产品说明:本试剂盒采用碱裂解法裂解细胞,再通过具有独特分离作用的磁珠和缓冲液系统在高盐状态下特异性地结合溶液中的质粒DNA。

使用本试剂盒提取的质粒DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、连接、转化、文库筛选、体外翻译、转染一些常规的传代细胞等。

使用前请先在漂洗液中配置70%乙醇。

若溶液产生沉淀,使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间,必要时可在37℃水浴中预热10min溶解沉淀,摇匀后使用。

操作步骤:1. 裂解取1~5 mL菌液至EP管中,12000 rpm离心2分钟,尽量吸净上清。

在菌体沉淀中加入250 μl裂解液R1和2.5μl RNase A,吸打或振荡至彻底悬浮菌体;加入250 μl裂解液R2,立即温和颠倒离心管5-10次混匀,室温静置2-4 min;加入350 μl裂解液R3,立即温和颠倒离心管5-10次充分混匀(此时底部可能会出现大量白色絮状沉淀属于正常现象)。

置于离心机12000rpm,4℃离心5-10 min。

2. 结合尽量取净上清于新的1.5 mL EP管中,加入等量异丙醇以及振荡混匀的50 μL磁珠,颠倒混匀1 min,静置3 min。

将EP管置于磁铁上进行磁分离,吸弃废液(吸净管盖及管底残液)。

3. 洗涤加入600 μL 漂洗液(使用前请预先配置70%乙醇),轻柔混匀1-2 min,然后磁分离,吸净管盖及管底的残液;重复本步骤一次。

4. 洗脱室温晾干5~10 min至乙醇挥发完全,加入50~100 μL洗脱液,缓慢抽吸混匀,56℃水浴10 min。

每隔2~3 min轻摇EP管几下混匀。

然后磁分离,小心吸取上清液至新的EP管中,进行下步实验。

质粒小量提取纯化试剂盒 说明书

质粒小量提取纯化试剂盒 说明书

质粒小量提取纯化试剂盒使用说明书产品简介GBpure Plasmid试剂盒是质粒DNA提取领域中的突破性进展,它有效结合了细胞裂解,杂质去除,及质粒纯化等功能。

无需过柱,不用酚氯仿抽提,直接获得高质量的质粒DNA。

我们独特的试剂系统能确保所提质粒DNA高产量,高质量。

本试剂纯度高,采用人性化设计,可按用户需求灵活制定容量大小。

产品特色●简单:添加GBpure Plasmid使细胞裂解,释放DNA,及杂质去除有效结合起来。

●方便:无需过柱,无需过滤,无需高效液相色谱法,无需超速离心机,无需特殊设备。

●无毒性:无酚、氯仿,无饱和正丁醇,无溴化乙锭,无氯化铯,无盐酸胍。

●快速:一分钟完成菌体沉淀,五分钟完成颗粒细菌碎片,10分钟完成沉淀质粒DNA,从培养细菌到提取质粒DNA只需30分钟。

●高纯度:A260/A280 = 1.7-1.8. 所得质粒DNA无任何抑制剂,可应用于所有分子生物学的操作。

●延展性: 一盒GBpure Plasmid试剂盒可以进行:miniprep, midiprep,或maxiprep;无需购买额外的试剂盒。

●高产量: 您可以从1 (mini), 10 (midi), 100 (maxi) ml的过夜培养基中获得大约5μg, 50 μg, 500 μg的DNA质粒。

●实惠:一盒GBpure Plasmid 售价 RMB 500/ 50 minipreps,即 RMB10/miniprep ,质优价廉。

产品内容与储存条件室温保存。

有效期12个月。

操作方法1.取1 ml过夜培养菌液,装入1.5 ml离心管中,室温12,000 × g离心1 min沉淀菌体,完全弃除上清。

2.加入300 μl Buffer P1,充分混匀震荡菌体沉淀10-15 sec,使其完全分散开,至无絮块存在。

3.加入300 μl Buffer P2,轻轻颠倒离心管3-5次,室温放置1 min,使细菌完全裂解,此时溶液应呈透明。

Plasmid Mini Kit 质粒小提试剂盒 说明书

Plasmid Mini Kit 质粒小提试剂盒 说明书

Version 02152011 Plasmid Mini Kit质粒小提试剂盒Cat. No. CW0511保存: 室温组分说明Cat. No. CW0511C CW0511AKit Size 100 200Buffer P1 30 ml 60 mlBuffer P2 30 ml 60 mlBuffer N3 40 ml 80 mlBuffer PS 30 ml 60 mlBuffer PW(concentrate) 25 ml 50 mlBuffer EB 10 ml 30 mlRNase A(10 mg/ml) 300 μl 600 μlSpin Column CM 100 200Collection Tube(2 ml) 100 200产品简介本试剂盒提供一种简单快捷提取质粒的方法,快速获得大量的质粒DNA。

采用碱裂解法裂解细胞,新型硅基质膜高效专一性结合质粒DNA,独特的缓冲液系统洗去杂质,无需酚抽提和乙醇沉淀。

本试剂盒在保证提取量和纯度的前提下,大大简化提取步骤,可从1-5 ml菌液中纯化多达30 μg的高拷贝质粒DNA。

得到的DNA可直接用于PCR、酶切、测序、转化等生物学实验。

注意事项1.Buffer P1在使用前先加入RNase A(将试剂盒中提供的RNase A全部加入),混匀,置于2–8℃保存。

2.第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer PW中加入无水乙醇。

3.使用前请检查Buffer P2、Buffer N3是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀现象,可在37℃水浴几分钟,即可恢复澄清。

4.注意不要直接接触Buffer P2和Buffer N3,使用后应立即盖紧盖子。

5.提取的质粒量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。

6.所有离心步骤均为使用常规台式离心机室温下进行离心。

自备:无水乙醇,离心管操作步骤1.取1-5 ml过夜培养的菌液,加入离心管(自备)中,12,000 rpm(~13,400×g)离心1分钟,尽量吸弃上清。

EZ-10质粒提取试剂盒说明书

EZ-10质粒提取试剂盒说明书

EZ-10柱式质粒小量抽提试剂盒产品编号:B610413 包装规格:50/100 次试剂盒组成组分 50 次 100 次 RNase A Solution I Solution II Solution III Wash Solution Elution Buffer EZ-10 Column 2.0 ml Collection Tube 操作手册2.1mg 14ml 14ml 20ml 12ml 5ml 50 50 1份4.2mg 28ml 28ml 40ml 24ml 10ml 100 1001份a.RNase A 以干粉形式运输。

使用前,加入1ml solution I 到RNase A 中,彻底溶解后将RNase A 溶液全部加入到Solution I 中并混合均匀。

含RNase 的Solution I 如经常使用应保存于4°C ,不经常使用则保存于-20°C 。

b. Solution II 保存过程可能会形成沉淀。

如有沉淀,则将溶液于37ºC 温浴使沉淀溶解。

c.使用前,12ml Wash Solution (B610413,50次)中应加入48ml 96-100%的乙醇,或24ml Wash Solution(B610413,100次)中应加入 96ml 96-100%的乙醇。

如果是其他体积的wash solution ,只需要加入足够的乙醇使得比例为4:1 (无水乙醇:Wash Solution= 4:1)。

d. Elution Buffer 为2.0 mM Tris-HCl ,pH 8.0~8.5。

回收率相当于TE buffer pH 8.0或水的120%。

保存方法除RNase A 外,试剂盒的其他组分可室温保存。

RNase A 应保存于4ºC 。

试剂盒在室温下可稳定保存12 个月。

为长期保存,请将试剂盒置于低温环境中。

原理本试剂盒用于质粒DNA 小量抽提纯化,方法简单高效。

质粒小量提取试剂盒说明书

质粒小量提取试剂盒说明书

质粒小量提取试剂盒说明书货号:D1100规格:50T/100T保存:常温保存,复检期一年。

(注:RNase A 以附件形式发货,收到未使用前请-20℃保存)试剂盒内容:试剂盒组成D1100-50T D1100-100T RNase A 200μL 400μL 溶液Ⅰ15mL 30mL 溶液Ⅱ15mL 30mL 溶液Ⅲ20mL 40mL 漂洗液Ⅰ24ml 48ml 漂洗液Ⅱ15mL 15mL×2洗脱液15mL 30mL 吸附柱50个100个收集管50个100个说明书1份1份产品说明:本试剂盒采用碱裂解法裂解细胞,根据离心吸附柱在高盐状态下特异性地结合溶液中的DNA 的原理特异性提取质粒DNA 。

离心吸附柱中采用的硅基质材料能高效、专一地吸附DNA ,可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。

使用本试剂盒提取的质粒DNA 可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR 、测序、连接和转化等试验。

使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶体上的标签。

溶液Ⅰ在使用前先加入RNaseA (将试剂盒中提供的RNaseA 全部加入),混匀,置于2-8℃保存。

如非指明,所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。

操作步骤(仅供参考):1、取1-5mL 细菌培养物,12000rpm 离心1min ,尽量吸除上清(菌液较多时可以通过多次离心将菌体沉淀收集到一个离心管中)。

2、向留有菌体沉淀的离心管中加入250μL 溶液Ⅰ(请先检查是否已加入RNaseA ),使用移液器或旋涡振荡器彻底悬浮细菌细胞沉淀。

注意:如果菌块未彻底混匀,会影响裂解导致质粒提取量和纯度偏低。

3、向离心管中加入250μL 溶液Ⅱ,温和地上下翻转6-8次使菌体充分裂解。

注意:混匀一定要温和,以免污染细菌基因组DNA ,此时菌液应变得清亮粘稠,作用时间不要超过5min ,以免质粒受到破坏。

4、向离心管中加入350μL 溶液Ⅲ,立即温和地上下翻转6-8次,充分混匀,此时会出现白色絮状沉淀。

GENMED 小量质粒抽提试剂盒 产品说明书(中文版)

GENMED 小量质粒抽提试剂盒 产品说明书(中文版)

GENMED SCIENTIFICS INC. U.S.A GMS60007.1 v.A GENMED小量质粒抽提试剂盒产品说明书(中文版)主要用途GENMED小量质粒抽提试剂是一种旨在通过化学和生物裂解细胞、净化、沉淀、萃取来达到脱盐、去蛋白、去杂质小分子的纯化质粒DNA的权威而经典的技术方法。

该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。

其适用于各种质粒/柯斯质粒DNA样品的制备,OD260/280在1.8-2.0之间。

产物可用于各种后续。

产品即到即用,性能稳定,操作方便迅速,提取效率和纯化程度高。

技术背景GENMED小量质粒DNA制备技术综合了酶解、碱裂、净化等液体法优势元素充分有效地使细菌中核酶、PCR反应抑制剂失活,清除非DNA分子,其产量较之离心柱法高达数倍。

产品内容GENMED混匀液(Reagent A)毫升GENMED裂解液(Reagent B)毫升GENMED平衡液(Reagent C)毫升GENMED净化液(Reagent D)微升GENMED沉淀液(Reagent E)毫升GENMED清理液(Reagent F)毫升GENMED保存液(Reagent G)毫升产品说明书1份保存方式保存GENMED混匀液(Reagent A)和GENMED净化液(Reagent D)在℃冰箱里,其余的保存在℃冰箱里,有效保证6月用户自备1.5毫升离心管:用于样品操作的容器微型台式离心机:用于沉淀核酸涡旋震荡仪:用于混匀反应物实验步骤1.加入毫升含质粒的细菌到毫升离心管(注意:确保细菌量OD600= ;如果细菌量不足,影响质粒提取)2.放进微型台式离心机离心秒,速度为g(RPM,例如eppendorf 5415D)3.小心抽去上清液4.加入微升GENMED混匀液(Reagent A),涡旋震荡少许,使细菌颗粒充分混匀5.加入微升GENMED裂解液(Reagent B),轻轻混匀6.加入微升GENMED平衡液(Reagent C),强力涡旋震荡秒7.放进微型台式离心机离心分钟,速度为g(RPM,例如eppendorf 5415D)8.小心移取微升上清液到新的毫升离心管,避免絮状物(注意:如果操作不慎,可以重复实验步骤和,确保避免絮状物)9.加入微升GENMED净化液(Reagent D)10.室温下静置分钟11.加入微升GENMED沉淀液(Reagent E)12.放进微型台式离心机离心钟,速度为g(RPM,例如eppendorf 5415D)13.小心抽去上清液14.加入微升GENMED清理液(Reagent F)15.放进微型台式离心机离心分钟,速度为g(RPM,例如eppendorf 5415D)16.小心抽去上清液17.空气中晾干18.加入微升GENMED保存液(Reagent G)19.放进℃冰箱里备用注意事项1.本产品为100次操作2.GENMED液体法采用特殊酶解和净化技术3.细菌量是个重要因素:通常1毫升细菌可获得3-10微克质粒4.如果需要制备各种数量的细菌质粒/柯斯质粒,可订购中量和大量规格5.如果强化去除残留的RNA,建议使用本公司提供GENMED-RNA清除试剂盒(GMS20059)6.如果需要去除细菌内毒素,建议使用GENMED去内毒素试剂盒(GMS20067)7.本公司提供特级优质质粒提取试剂盒:GENMED质粒DNA氯化铯纯化试剂盒(GMS20025)、GENMED 低内毒素小量质粒抽提试剂盒(GMS60007.2)和GENMED无内毒素小量质粒抽提试剂盒(GMS60007.3)质量标准1.本产品经鉴定性能稳定2.本产品经鉴定提取效率和纯化程度高使用承诺杰美基因秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。

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质粒小量提取试剂盒说明书
货号:D1100
规格:50T/100T
保存:常温保存,复检期一年。

(注:RNase A以附件形式发货,收到未使用前请-20℃保存)
试剂盒内容:
试剂盒组成D1100-50T D1100-100T
RNase A300ul500ul
溶液Ⅰ15ml30ml
溶液Ⅱ15ml30ml
溶液Ⅲ20ml40ml
漂洗液15ml15ml×2
洗脱液15ml30ml
吸附柱50个100个
收集管50个100个
说明书1份1份
产品说明:
本试剂盒采用碱裂解法裂解细胞,根据离心吸附柱在高盐状态下特异性地结合溶液中的DNA的原理特异性提取质粒DNA。

离心吸附柱中采用的硅基质材料能高效、专一地吸附DNA,可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。

使用本试剂盒提取的质粒DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、连接和转化等试验。

使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶体上的标签。

溶液Ⅰ在使用前先加入RNaseA (将试剂盒中提供的RNaseA全部加入),混匀,置于2-8℃保存。

如非指明,所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。

操作步骤:
1、取1-5ml细菌培养物,12000rpm离心1min,尽量吸除上清(菌液较多时可以通过多次离心将菌体沉淀收集到一个离心管中)。

2、向留有菌体沉淀的离心管中加入250ul溶液Ⅰ(请先检查是否已加入RNaseA),使用移液器或旋涡振荡器彻底悬浮细菌细胞沉淀。

注意:如果菌块未彻底混匀,会影响裂解导致质粒提取量和纯度偏低。

3、向离心管中加入250ul溶液Ⅱ,温和地上下翻转6-8次使菌体充分裂解。

注意:混匀一定要温和,以免污染细菌基因组DNA,此时菌液应变得清亮粘稠,作用时间不要超过5min,以免质粒受到破坏。

4、向离心管中加入350ul溶液Ⅲ,立即温和地上下翻转6-8次,充分混匀,此时会出现白色絮状沉淀。

12000rpm离心10min,用移液器小心地将上清转移到另一个干净的离心管中,尽量不要吸出沉淀。

注意:溶液Ⅲ加入后应立即混合,避免产生局部沉淀。

如果上清中还有微小白色沉淀,可再次离心后取上清。

5、将上一步所得上清液加入吸附柱中(吸附柱加入收集管中),室温放置2min,12000rpm离心1min,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。

6、向吸附柱中加入700ul漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。

7、向吸附柱中加入500ul漂洗液,12000rpm离心1min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。

8、12000rpm离心2min,将吸附柱敞口置于室温或50℃温箱放置数分钟,目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除,否则漂洗液中的乙醇会影响后续的实验如酶切、PCR等。

9、将吸附柱放入一个干净的离心管中,向吸附膜中央悬空滴加50-200ul经65℃水浴预热的洗脱液,室温放置2min,12000rpm离心1min。

10、为了增加质粒的回收效率,可将得到的洗脱液重新加入吸附柱中,室温放置2min,12000rpm离心1min。

注意事项:
1、使用前请先检查溶液Ⅱ和溶液Ⅲ是否出现混浊,如有混浊现象,可在37℃水浴中加热几分钟,待溶液恢复澄清后再使用。

溶液Ⅱ、溶液Ⅲ和漂洗液使用后应立即拧紧盖子。

2、洗脱缓冲液体积不应少于50ul,体积过小影响回收效率;洗脱液的pH值对洗脱效率也有影晌,若需要用水做洗脱液应保证其pH值在8.0左右(可用NaOH将水的pH值调至此范围),pH值低于7.0会降低洗脱效率,DNA产物应保存在-20℃,以防DNA降解。

3、如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb的大质粒,应加大菌体使用量,使用5-10ml过夜培养物,同
时按照比例增加溶液Ⅰ、溶液Ⅱ和溶液Ⅲ的用量,吸附和洗脱时可以适当的延长时间,以增加提取效率。

4、DNA 浓度及纯度检测:得到的质粒DNA 纯度与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。

得到的DNA 可用琼脂糖疑胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。

DNA 应在OD 260处有显著吸收峰,OD 260值为1相当于大约50ug/ml 双链DNA、40ug/ml 单链DNA。

OD 260/OD 280比值应为1.7-1.9,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用去离子水,比值会偏低,因为pH 值和离子存在会影响吸光值,但并不表示纯度低。

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