维生素E含量测定方法

高效液相色谱法对维生素E粉、E油含量的测定

色谱条件

色谱柱：采用C18柱(长150 mm，内径，粒径4-5μm)

流动相：甲醇(色谱醇)+水(去离子水) 比例：(98 + 2 )

流速： ml/min

检测波长:285 nm

柱温: 25±2 ℃

进样量：20 μL

溶液制备

标准溶液的制备：

本实验室的标准品为液体油状物，因此用注射器抽取直接滴加到容量瓶中称量，把容量瓶放在分析天平托盘上然后滴加，称取维生素E标准品约(准确至,置50mL棕色量瓶中,加甲醇适量溶解并稀释至刻度,摇匀。

绘制标准曲线

把制成 mg/mL的溶液作为贮备液。分别准确移取、、、、5mL 至10mL的棕色量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀；得到浓度分别为、、、、ml的五种溶液，分别经μm 滤膜滤过,滤液作为标准溶液。

用100μL的进样针分别从制备的不同浓度的标准溶液抽取60μL溶液，注意不能带有气泡，注入液相色谱仪,按色谱条件操作,从——ml依次进样，记色谱峰面积以标准品溶液浓度(C)为纵坐标,峰面积(A)为横坐标,按照外标法过5点绘制标准曲线。

样品溶液的制备：

维生素E粉样品溶液的制备

制备步骤为：研磨→称量→水浴溶解→定容→过滤

1.研磨把试样E粉倒入研钵中适量，用研磨棒轻度研磨至颜色有变化为止。

2.称量把称量纸放到分析天平上然后置零，把研磨好的试样用药匙转移到称量纸

上，称取维生素E 粉约1g(约相当于维生素E 0.5g ，准确至0.0002g),置50mL 棕色量瓶中。

3. 水浴溶解 加甲醇适量,置超声波水浴器中助溶20 min 。

4. 移取定容 冷却至室温,用甲醇稀释至刻度,充分摇匀，从制备好的溶液中移取1mL

到10mL 的容量瓶中，用甲醇稀释至刻度,充分摇匀;再从制备好的10mL 容量瓶中的溶液中移取放置到10mL 容量瓶中，用甲醇稀释至刻度,充分摇匀。

5. 过滤 把制备好的溶液经μm 滤膜滤过,滤液作为样品溶液。

维生素E 油样品溶液的制备

用注射器直接抽取E 油样品滴加到放在分析天平上的容量瓶中，称维生素E 油样品约20mg,(准确至,置50mL 棕色容量瓶中,加甲醇适量溶解，置超声波水浴中助溶10min,冷却至室温,用甲醇稀释至刻度,充分摇匀；经μm 滤膜滤过,滤液作为样品溶液。

测定步骤

用100L 的进样针抽取60μL 的维生素E 粉、E 油的样品溶液,注入液相色谱仪，按色谱条件操作,得到色谱峰面积(A i )，每批次样品溶液做三个平行样，根据标准曲线上各点的峰面积(A st )，用外标法计算。

计算和结果的描述

计算公式

维生素E 的含量X 2以质量分数(%)表示

X 2=m st ×P st ×A i m i ×A st

×100%

式中：

X 2——样品中维生素E 的含量﹙%﹚

m st ——标准品的质量﹙g ﹚

m i ——样品的质量﹙g ﹚

P st ——维生素E 标准品的含量﹙%﹚

A i——样品溶液中维生素E的峰面积A st——标准溶液中维生素E的峰面积