法医毒物分析
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第一节毒物与中毒
1、毒物分析:法医毒物分析是以分析化学尤其是现代仪器分析技术为基础,以能损害生命正常活动的毒物为对象并对其进行定性和定量判定,从而服务于国家法制建设的一门应用性学科。
2、毒物(toxicant):凡是对机体通过化学或物理化学作用而损害生命正常活动,引发功能障碍或器质性病变乃至造成死亡的物质称之为毒物。
3、毒物的来源:自然界植物、动物、矿物、菌类人工合成工业产品、副产物、废弃物(不包含微生物和生物体产生的毒素)。
4、中毒:生物体受到一定量的毒物作用而引起功能性和器质性改变后出现的疾病状态称为中毒(poisoning),由毒物所产生的中毒反应称为毒性作用。
5、毒性作用条件
(1)毒物的成分
(2)起作用的剂量安全剂量中毒量致死量
中毒量:毒物引起个体中毒并出现中毒症状的剂量;造成死亡的剂量称为致死量(LD)某一毒物能引起某种动物的群体全部死亡的最小剂量成为全数致死量(LD100);引起半数动物死亡的剂量称为半数致死量(LD50)
(3)作用途径与方式摄入途径吸收和分布特性给药的浓度和速度
(4)受作用的生物体同生物体的种属有关
(5)个体因素年龄、性别、体重、健康状态、身体素质以及生活习性
6、毒品(drug, illicit drug)
毒品是属于法学范畴的概念,它是由法律规定要受严格管制的一些药毒物。《中华人民共和国刑法》第357条中规定,毒品是指鸦片、海洛因、甲基苯丙胺(冰毒)、吗啡、大麻、可卡因以及国家规定管制的其他能够使人形成瘾癖的麻醉药品和精神药品。毒品定义的三要素非法性(法律属性)、危害性(社会属性)、成瘾性(自然属性)
7、药物滥用
是指非医疗目的、不正常的连续大量使用有依赖性(dependence)药物。
8、毒物的分类
分类原则依据毒物的理化性质、毒理作用、用途以及来源进行分类
常见种类
气体毒物 CO H2S (中毒速度最快)
挥发性毒物CN- C3HOH C2H5OH
合成药毒物巴比妥类吩噻嗪类(临床药物最多)
天然药毒物乌头类颠茄类(生物碱最多)
金属毒物砷/汞/钡/铬/铊/铅(最难排出体外)
农药鼠药有机磷/氨基甲酸酯、毒鼠强(中毒案例较多)
水溶性毒物强酸/强碱/NO2-
9、分析方法:
形态学方法、毒理学方法、免疫分析法、理化分析法、仪器分析法
10、法医毒物分析的基本任务:是对各种检材中有关毒物进行分析鉴定,判明有无毒物、何种毒物、多少毒物以及毒物与事件的关系等,为澄清当事人在事件中是否负有法律责任提供依据,为涉及中毒案件提供侦破线索和证据。
11、法医毒物分析的特点:
(1)分析目的不确定(验证、侦查、研究)
(2)分析案件复杂(隐瞒事实、意外事故、非毒物引发的事件、毒物种类、社会不良因素)
(3)检材多样且特别(多样性、一次性、数量有限)
(4)分析方法综合(分析的目的与检材的特性)
(5)肩负法律责任
12、法医毒物分析基本程序(详细见课本)
接受任务----取材----制定分析方案----分析---检验结果
接收任务(掌握案情、了解取材情况、核对检材)
检验过程(制定方案、处置检材、分析)
检验结果(真实、可靠)
第二章、检材及检材处理
1、检材的处理主要有预处理及进一步根据毒物的类别不同进行毒物的分离。检材预处理是检材处理的第一步主要是指进行检材制备、调节酸碱度,除去蛋白质及结合物解离等。
2、体外检材(Specimen in vivo):主要是指那些未经过体内吸收、分布、代谢等过程,其中毒物在形态、气味、酸碱性、溶解度和化合状态等方面尚全部或部分地保留其原有形状和性质的检材。吞服不久的呕吐物或洗胃液、急死的胃内容物,其中尚有未被消化吸收的药毒物,也属于体外检材。
3、体内检材(Biomateral)主要指取自生物活体或尸体的检验材料,如尿、血及内脏组织
等。
4、检材处理:是指对检材中的待测毒物进行分离、纯净化、浓缩富集、衍生化等处理,使
检材中的毒物成为适合于各种分析方法所要求的形式。
5、预处理:1、检材制备2、调整酸碱度3、去除蛋白质:有机溶剂沉淀法、盐析法、等电
点沉淀法、酶解法4、结合物的解离:酸碱水解法、酶水解法
6、有机毒物提取方法:检材制备、调节酸碱度、去除蛋白质及结合物、萃取(液-液萃取、
固相萃取、固相微萃取等)
7、结合物的解离:有些毒物在体内会与蛋白质或葡萄糖醛酸、硫酸等形成结合物,需要
通过水解的方式使结合状态的毒物释放出来以利于提取。
(1)酸水解法:于检材中加入酸溶液并加热,可水解释放出结合状态的毒物。
(2)酶水解法:在一定pH值及常温条件下,酶能使生物检材如组织、血液中呈结合状态的毒物释放出来。
8、液-液提取法
当两种互相不混溶的溶剂共存时,溶质在这两种溶剂中分配的溶解量不同。利用这一性质将溶质从一种溶剂中转移到另一种溶剂中的过程称为液‐液萃取。萃取或反萃取的效率主要取决于分配比。
9、固相萃取:(solid phase extraction, SPE)又称液固提取法
是利用待检毒物与杂质在柱中固定相和洗脱液之间吸附或分配作用或不同组分分子大小等方面的差异进行分离。根据固定相填料的种类不同可分为正相固相萃取、反相固相萃取、离子交换固相萃取等。
10、固相萃取类型
(1)正相固相萃取:采用极性固定相和中等极性至非极性的洗脱剂,适用于极性毒物的分离。
(2)反相固相萃取:固定相的极性小于洗脱液的极性,即采用非极性的固定相和中等极性或极性洗脱液。该系统适用于分离非极性毒物。
(3)离子交换固相萃取:离子交换固相萃取适用于分离带有电荷的毒物,根据填料及