抗生素类药物的分析(好)
第十二章 抗生素类药物的分析
第一节
概述
通过鉴别、检查、含量测定（效价测定） 通过鉴别、检查、含量测定（效价测定）判 断抗生素质量的优劣 1、鉴别试验 用理化方法或生物学方法证明是何种抗生素
第一节 概述
2、检查 用理化方法或生物学方法证明是何种抗生素 （1）．影响产品稳定性的指标 ）．影响产品稳定性的指标 ）．控制有机和无机杂质的指标 （2）．控制有机和无机杂质的指标 ）．与临床安全性密切相关的指标 （3）．与临床安全性密切相关的指标 ）．其他指标 （4）．其他指标
第二节
ß-内酰胺类抗生素的分析 -
一、结构与性质
）、性质 性质： （二）、性质： 旋光性： 3、旋光性： 青霉素族、头孢菌素族都含有手性碳， 青霉素族、头孢菌素族都含有手性碳，具 有旋光性
﹡﹡ S 1
6 7 5
2 3
﹡ S ﹡ 1
O
7 6 8 N 4 5
O
N
4
2 3
﹡
第二节
ß-内酰胺类抗生素的分析 -
第二节
ß-内酰胺类抗生素的分析 -
二、鉴别试验
（三）化学鉴别法 1、钾、钠盐的反应
焰色→ 焰色→鲜黄色 Na+ 焰色→ 焰色→紫色
K+
第二节
ß-内酰胺类抗生素的分析 -
二、鉴别试验
（三）化学鉴别法 2、呈色反应 羟肟酸铁反应： （ 1） . 羟肟酸铁反应：青霉素及头孢霉素在 碱性中与羟胺作用， 碱性中与羟胺作用， ß-内酰胺环破裂生成羟肟 酸；在稀酸中与高铁离子呈色
α − 氨 →蓝 色 基 紫
△
三 茚 酮
第二节
ß-内酰胺类抗生素的分析 -
二、鉴别试验
（三）化学鉴别法 2、呈色反应 − 斐林试剂反应： 似肽键， （3）.斐林试剂反应： CONH−似肽键，可产生双 缩脲，开环分解，使碱性酒石酸铜还原显紫色， 缩脲，开环分解，使碱性酒石酸铜还原显紫色， 如阿莫西林 与重氮苯磺酸反应：侧链含有酚羟基时， （4）.与重氮苯磺酸反应：侧链含有酚羟基时， 能与重氮苯磺酸试液偶合呈色
抗生素类药物的分析
酮溶液,于105℃加热15分钟后，检视，供试品溶液所
显主斑点的颜色与位置应与对照品溶液所显主斑点的
增强而向高波数方向位移
VC=O
1815~1740cm-1
3470cm-1 O-H
1780cm-1
例 青霉素钠Ch.P.（20 Nhomakorabea0）【鉴别】（2）本品的红外光吸收图谱应与对
照的图谱（光谱集222图）一致。 例 青霉素钾 Ch.P.（2010）
【鉴别】（2）本品的红外光吸收图谱应与对
照的图谱（光谱集223图）一致。
（3）C3位有游离羧基
2. 头孢菌素类
（1）侧链（RCO-）+母核（7-ACA）
（2）分子中含二个手性碳原子（C6、
C7）
RCO NH 侧链 O N S CH2R1 COOH
（3）C4位有游离羧基
（二）性质
1. 酸性 青霉素和头孢菌素分子中有游离
羧基有酸性，大多数青霉素类药物的
pKa在2.5～2.8之间，能与碱反应形成 盐。
对照溶液的制备 取头孢尼西对照品适量，精密 称定，加水溶解并定量稀释制成每1ml中含头孢 尼西0.1mg的溶液。 测定法 取本品约0.2g，精密称定，置10ml量瓶 中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀。立即精密 量取100~200μl，注入液相色谱仪，以流动相A 为流动相进行测定，记录色谱图。另精密量取 对照溶液100~200μl注入液相色谱仪，以流动相 B为流动相，同法测定。按外标法以峰面积计算， 含头孢尼西聚合物以头孢尼西计不得过0.4%。
抗生素类药物的分析
氯霉素Chloramphenicol
【鉴别】显色反应 吸取供试品溶液、对照 品溶液、空白溶液各1ml，加1%氯化钙溶液 3ml与锌粉50mg，置水浴上加热10min，倾 取上清液，加苯甲酰氯约0.1ml，立即强力 振摇1min，加三氯化铁试液0.5ml与氯仿2ml, 振摇。供试品溶液和对照品溶液水层均显紫 红色，空白溶液水层未显紫红色。
大环内酯类抗生素 Macrolide Antibiotics
一 概述
⒈ 简介 由链霉菌产生的弱碱性抗生素（红霉素、 阿奇霉素）。 抗菌特点：对G+和某些G-、支原体作 用强 结构特征 • 内酯结构的十四元或十六元大环 • 通过内酯环上的羟基和去氧氨基糖或6去氧糖缩合成碱性甙
红霉素 Erythromycin 一、结构和性质 ⒈ 来源红色链丝菌产生，包括A、B和C， 三者的区别如下
氯霉素 Chloramphenicol
【检查】 残留溶剂 （甲醛、乙醇） 高效液相色谱：加二甲亚砜溶解并稀释至刻度， 作为供试品溶液；另精密取甲醛、乙醇，加二甲 亚砜溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。 照残留溶剂测定法测定，使用紫外检测器，按外 标法计算，含甲醛、乙醇应符合规定。 毛细管色谱：柱温40-100，常以氮气为载气，采 用火焰离子化检测器。
• • • •
药物的性质 酸性：有机酸（pKa2.65～2.70） 旋光性：青霉素家族分子都有三个手性碳 原子，头孢家族有两个 紫外吸收特性：头孢家族有共轭的母环， 青霉素家族一般有苯环取代基 β-内酰胺环不稳定：四元内酰胺环，张力 比较大
鉴别试验
• 呈色反应： 与羟胺作用生成羟肟酸，与铁离子呈色。 类似于肽键反应，双缩脲反应和茚三酮反应 • 钾钠离子的焰色反应 • 普鲁卡因青霉素有芳伯氨基，可以发生重氮化偶合反应，生成红色染料沉淀。 • 光谱法：包括红外吸收光谱（IR)和紫外吸收光谱 (UV) • 色谱法:与对照品的高效液相色谱（HPLC)和薄层 色谱(TLC)的保留时间和比移值一致
抗生素类药物的分析、糖类药物的分析
抗生素类药物的分析、糖类药物的分析一、最佳选择题1. 属于β-内酰胺类抗生素的药物是A.异烟肼B.四环素C.庆大霉素D.青霉素钾E.阿（江南博哥）奇霉素正确答案：D[解析] 本题考查重点是对抗生素药物类别的掌握。
2. 青霉素钾为钾盐，焰色鉴别反应的颜色应为A.黄色B.无色C.紫色D.绿色E.蓝色正确答案：C[解析] 本题考查重点是对青霉素钾焰色鉴别反应现象的掌握。
青霉素钠(钾)焰色鉴别反应属于一般鉴别试验，钠的火焰显黄色。
钾的火焰显紫色。
3. 阿莫西林中阿莫西林聚合物的检查采用分子排阻色谱法，是根据阿莫西林聚合物与阿莫西林A.分子大小不同而被分离B.电荷大小不同而被分离C.吸附系数不同而被分离D.极性大小不同而被分离E.极性官能团多少不同而被分离正确答案：A[解析] 本题考查重点是对色谱法分离机制的掌握。
按分离机制的不同，色谱法可以分为吸附色谱法、分配色谱法、离子交换色谱法与分子排阻色谱法。
分子排阻色谱法是根据各组分分子大小不同而在色谱柱中被分离。
4. 属于氨基糖苷类抗生素的药物为A.阿莫西林B.头孢羟氨苄C.阿奇霉素D.四环素E.庆大霉素正确答案：E[解析] 本题考查重点是对抗生素药物类别的掌握。
应试指南中收载的抗生素药物属于的类别为：青霉素钠和青霉素钾属于β-内酰胺类中青霉素类抗生素；阿莫西林也属于β-内酰胺类中青霉素类抗生素；头孢羟氨苄属于β-内酰胺类中头孢菌素类抗生素；庆大霉素属于氨基糖苷类抗生素；四环素属于四环素类抗生素；阿奇霉素属于大环内酯类抗生素。
5. 《中国药典》中庆大霉素C组分检查方法是A.气相色谱法B.正相高效液相色谱法C.比色法D.反相高效液相色谱法E.紫外分光光度法正确答案：D6. 阿奇霉素中有关物质检查，《中国药典》采用的方法为A.GCB.IRC.HPLCD.UVE.TLC正确答案：C7. 硫酸庆大霉素的鉴别试验是A.异烟肼反应B.薄层色谱法C.羟肟酸铁反应D.硫色素反应E.三氯化铁反应正确答案：B8. 在《中国药典》中，盐酸四环素含量测定的方法为A.碘量法B.汞量法C.酸碱滴定法D.紫外分光光度法E.高效液相色谱法正确答案：E9. 测定硫酸庆大霉素C组分的方法是A.气相色谱法B.高效液相色谱法C.薄层色谱法D.红外分光光度法E.紫外分光光度法正确答案：B10. 取供试品适量，加硫酸，即显深紫色，再加三氯化铁试液1滴，溶液变为红棕色。
药物分析第10章抗生素类药物的分析PPT课件
抑制蛋白质合成
如大环内酯类和林可霉素类通 过抑制细菌蛋白质合成的起始 阶段，阻断核糖体形成，导致 细菌死亡。
抑制核酸合成
如喹诺酮类通过抑制DNA回旋 酶和拓扑异构酶Ⅳ的活性，干 扰DNA复制和转录，导致细菌
死亡。
抗生素的耐药性
产生钝化酶
某些细菌可以产生钝化酶，使抗生素 失活或降低其活性。
改变药物作用靶位
限度要求
根据不同抗生素类药物的特点， 制定相应的杂质限度要求，确保
药物的质量和安全性。
抗生素类药物的稳定性考察
影响因素
影响抗生素类药物稳定性的因素 包括温度、湿度、光线、氧气、 金属离子等，这些因素可能导致
药物降解或变质。
考察方法
通过加速试验、长期储存试验、影 响因素试验等方法考察抗生素类药 物的稳定性，以确定药物的保存和 使用条件。
质量控制
生物效价测定是抗生素类药物质量控制的重要环节，需要 严格控制实验条件、操作规范和结果判断标准等，以确保 测定结果的准确性和可靠性。
05
抗生素类药物的合理使 用与监管
抗生素类药物的临床应用
抗生素在临床上的应用广泛，主要用 于治疗和预防细菌感染。常见的抗生 素种类包括青霉素类、头孢菌素类、 氨基糖苷类、四环素类等。
色谱法主要包括高效液相色谱 法、气相色谱法和薄层色谱法 等。
免疫分析法
免疫分析法是利用抗原和抗体之间的 特异性结合反应，对抗生素进行定性 和定量分析的方法。
免疫分析法主要应用于抗生素残留检 测和生物样品中抗生素含量的测定等 方面。
免疫分析法具有灵敏度高、特异性强、 操作简便等优点，但需要制备针对不 同抗生素的抗体。
微生物检定法是一种经典的抗生 素分析方法，通过微生物的生长 抑制或杀灭实验，测定抗生素的
抗生素类药物的质量分析方法
抗生素类药物的质量分析方法引言抗生素是一类用于预防和治疗细菌感染的药物。
然而，由于抗生素在生产、运输和储存过程中可能遭受各种因素的影响，因此需要对其质量进行严格的分析和监控。
本文将介绍一些常用的质量分析方法，以帮助我们更好地评估抗生素类药物的质量。
1. 物理性质测试物理性质测试是衡量药物质量的重要手段之一。
以下是一些常见的物理性质测试方法：1.1 外观检查外观检查是最简单和直观的方法之一。
通过观察药物粉末或溶液的颜色、形状、气味等特征，可以初步判断其质量。
1.2 粒度测定粒度测定是通过测量药物粒子的大小分布来评估药物颗粒的均匀程度。
常用的方法包括激光粒度分析法和显微镜观察法。
1.3 溶解度测定药物的溶解度是指在一定温度下，在给定的溶剂中所能溶解的最大量的药物。
通过测定药物在不同条件下的溶解度，可以评估药物的纯度和溶解性。
2. 化学性质分析化学性质分析可以帮助我们确定药物的成分和纯度。
以下是一些常用的化学性质分析方法：2.1 紫外-可见光谱法紫外-可见光谱法是通过测定药物在紫外或可见光区的吸收特性来判断药物的纯度和含量。
该方法操作简单，结果准确可靠。
2.2 气相色谱法气相色谱法是通过将药物样品蒸发成气体，然后通过气相色谱仪进行分离和检测。
该方法适用于分析含量低的化合物，能够准确测定药物中各个成分的含量。
2.3 高效液相色谱法高效液相色谱法是将药物样品与流动相一起通过色谱柱，通过不同成分在固定相上的分离作用来进行分析。
该方法具有分离效果好、分析速度快的优点。
3. 生物学性质测试除了物理和化学性质的测试外，还可以使用生物学性质测试来评估抗生素类药物的质量。
以下是一些常用的生物学性质测试方法：3.1 抗菌活性测定抗菌活性测定是通过对药物对特定细菌的抑制活性进行评估来判断药物的有效性。
常用的方法包括纸片扩散法和克利金墨菌悬浮法。
3.2 细菌内毒素测试细菌内毒素是细菌细胞外毒素，能够引发一系列炎症反应。
通过测定药物样品中的细菌内毒素含量，可以评估药品的安全性和纯度。
第6章 抗生素类药物的分析
第6章抗生素类药物的分析抗生素是指在低微浓度下即可对某些生物的生命活动有特异抑制作用的化学物质的总称。
是细菌、放线菌和真菌等微生物的代谢产物，对各种病原微生物有强大的抑制或杀灭作用。
6.1概述临床应用的抗生素，主要由生物合成-微生物发酵培养、经化学纯化、精制和化学修饰制得。
与化学合成相比，生物合成制备的抗生素，包括临床应用的抗生素，主要由生物合成发酵和提纯两大步骤。
由于发酵工艺过程复杂，不易控制。
6.1.1 抗生素类药物的主要特点1．化学纯度较低。
虽经精制提纯，一般仍含有杂质，存在较多的同系物，较多的异构体，并且降解的产物多。
2．活性组分易发生变异。
微生物菌株的变化、发酵条件的变化均可引起产品质量的变化。
3．稳定性差。
抗生素分子结构中的活泼基团不太稳定，易分解使其疗效降低，或使其失效，有时甚至引起毒副作用。
4．制备过程中易被异物污染的可能性大。
6.1.2 抗生素类药物的常规检查项目为了保证用药的安全有效，各国药典都制定了抗生素标准，规定了抗生素类药物的杂质检查项目和含量测定方法，从而保证测定结果的可靠性。
抗生素类药物的常规检验项目主要包括以下三个方面：1．鉴别试验用化学方法、理化方法以及生物学方法鉴别其属何种抗生素、何种盐或酯类，包括有官能团的显色反应、光谱法、色谱法和生物学法。
2．杂质检查抗生素类药物的检查项目除一般杂质检查外，还有以下一些特殊的检查项目。
1）毒性试验限制药品中引起急性毒性反应的杂质。
2）热原试验限制药品中引起体温异常升高的致热杂质。
3）降压试验限制药品中含有降低血压的杂质。
4）无菌试验检查药品中细菌污染的情况。
5）澄明度检查限制药品中不溶性杂质。
6）水分测定限制药品中水分含量。
7）特殊杂质检查用化学及理化方法检查药品中某些特殊杂质的含量或提取溶剂的残留量。
此外，某些抗生素，如灰黄霉素，其粒度与疗效有关，故规定控制结晶颗粒的大小。
3．效价测定抗生素的有效成分含量测定方法，主要分为微生物学法和化学及物理化学法两大类。
抗生素类药物的分析
• （4）坂口反应
R N=C NH2 NH2
链霉胍
BrO-
R N=C NHBr OHNH2
R N=C N- Br NH2
R N=C=N NH2
OH
O
O
N
BrO-
N
Br
Br
N
R N=C=N NH2
O
RNHCONH N 橙红色
此为链霉素水解产物链霉胍的特有反应。本品水溶液加氢氧化钠试 液， 水解生成链霉胍。链霉胍和8-羟基喹啉（或a-萘酚）分别同次溴酸 钠反应， 其各自产物再相互作用生成橙红色化合物
头孢菌素类母核在260nm有强的紫外吸收
（二）鉴别试验
（1）色谱法 HPLC:规定在含量测定项下的色谱图中，供试品主 峰的保留时间应与对照品主峰的保留时间一致 TLC: 比较供试品与对照品主峰斑点的比移值 是否一致 • 中国药典大多采用HPLC法进行鉴别
（2）光谱法 1．紫外吸收光谱（UV）
根据吸收光谱的特征数值，比如最大吸收波长 、吸收系数，鉴别原料药的真伪 2．红外吸收光谱（IR）
• （5）硫酸盐反应
SO 42 B H +2aBa4S白 O
（6）色谱法
（7）光谱法
（8）molisch试验来自（三）含量测定（链霉素、庆大霉素）
回顾
概述
β-内酰胺类抗生素
氨基糖苷类抗生素
Thank you!
抗生素类药物的分析
主要内容
概述 β-内酰胺类抗生素 氨基糖苷类抗生素
一、概述
（一）抗生素的定义
➢Text ➢Text ➢Text
抗生素是指在低微浓度下即可对某些生命活 动有特异抑制作用的化学物质。
抗生素主要是细菌、放线菌和真菌等微生物 的代谢产物，对各种病原微生物有强大的抑 制或杀灭作用。
抗生素类药物分析
O HO O O N H H S OH CH3
HO
CH COHN NH2
CH3 COOH
,H2O
H2N
N H H
头孢拉定（cefradine）
CH COHN NH2 O
O O O N H H S OH CH3
S N CH3 COOH
H2N
N H H
S CH2
头孢噻吩钠（cefalotin）
O
H H H N S O N H
CH3 CH3 O ONa
青霉素钠
（Benzylpenicillin sodium）
氨苄西林（氨苄青霉素）
（ampicillin）
CH COHN NH2 O
H NH2 H H H N S O N H O
S N
CH3 CH3 COOH
CH3 CH3 ONa
O
阿莫西林（羟氨苄青霉素）
生物检定法（附录Ⅺ A）测定。1000磺苄西林单
位相当于1mg的C16H18N2O7S2。
例 抗生素【含量测定】
Ch.P（2005）
抗生素微生物检定法（附录Ⅺ A） 红霉素、两性霉素B、杆菌肽、硫酸多黏菌 素B、硫酸庆大霉素、硫酸阿米卡星、硫酸卷曲 霉素、硫酸核糖霉素、硫酸链霉素、磺苄西林钠 原料及制剂
（amoxicillin）
HO
CH COHN NH2 O
OH HO O O O N S H H H
S N
CH3 CH3 COOH
CH3 ,3H2O CH3
H2N
N H H
普鲁卡因青霉素（procaine benzylpenicillin）
NH2 CH2 COHN N O
O O H2N H3C N
抗生素类药物分析医学
抗生素类药物分析医学抗生素是一类用于治疗细菌感染的药物，其显著的作用是通过干扰细菌的生长和复制来杀灭细菌。
这使得抗生素成为医学领域中不可或缺的药物之一。
本文将对几种常见的抗生素类药物进行分析，并探讨其在治疗细菌感染中的应用。
首先，我们来介绍青霉素。
青霉素是最早发现的抗生素之一，对流感嗜血杆菌、葡萄球菌等多种细菌有较强的抗菌作用。
青霉素分为天然青霉素和合成青霉素两类。
天然青霉素主要来源于真菌培养物，而合成青霉素则是通过化学合成得到的。
青霉素主要通过破坏细菌细胞壁的合成来发挥作用，其不良反应相对较少，但部分患者可能会出现过敏反应。
除了青霉素外，头孢菌素也是一类常用的抗生素。
头孢菌素是青霉素的衍生物，其抗菌活性更强。
头孢菌素根据其作用谱分为第一代到第四代，第一代适用于皮肤和软组织感染，而第四代为广谱抗生素，可治疗复杂的呼吸道和泌尿道感染。
但头孢菌素与主要途径的不良反应包括过敏反应和对青霉素的交叉过敏。
还有一类广泛使用的抗生素是巴龙霉素。
巴龙霉素是蛋白质合成抑制剂，通过与细菌的核糖体结合抑制蛋白质合成。
巴龙霉素对许多革兰阳性细菌有较强的抗菌活性，但对肠杆菌科细菌作用较弱。
常见的不良反应包括肌肉毒性和肾毒性。
另一个常见的抗生素是四环素。
四环素是一类广谱抗生素，对多种细菌有杀菌作用。
其作用机制是通过抑制细菌的蛋白质合成。
虽然四环素具有广谱性，但由于其广泛使用，许多细菌已经产生了耐药性。
此外，四环素还可能导致牙齿变色和骨骼发育异常。
总体而言，抗生素在治疗细菌感染中起到了非常重要的作用。
然而，抗生素的滥用和错误使用已导致许多细菌产生了耐药性，使得抗生素在某些情况下失去了效果。
因此，在使用抗生素时，医生和患者都应遵循正确的用药指导，避免滥用和误用。
另外，为了减少耐药性的发展，也需要不断研发和创新新的抗生素药物，以应对细菌的变异和抗药性。
此外，除了以上提到的抗生素类药物，还有许多其他类型的抗生素广泛应用于医学领域。
抗生素类药物的分析
抗生素类药物的分析1. 引言抗生素是一类用于治疗由细菌引起的感染疾病的药物。
它们通过抑制或杀死细菌的生长来发挥作用。
抗生素类药物的分析对于研究其疗效、剂量和毒性等方面非常重要。
本文将对抗生素类药物的分析方法进行综述。
2. 抗生素的分类抗生素可以根据其来源、化学结构和作用方式进行分类。
常见的抗生素分类包括β-内酰胺类抗生素、四环素类抗生素、氨基糖苷类抗生素等。
每种类别的抗生素在分析方法上可能存在差异。
3. 抗生素分析方法3.1 色谱分析法色谱分析法是一种常用的抗生素分析方法。
它包括气相色谱法、液相色谱法和超高效液相色谱法等。
这些方法的优点是分离能力强、精确度高、灵敏度好。
例如，在β-内酰胺类抗生素的分析中，液相色谱法常用于测定不同种类抗生素的含量。
3.2 光谱分析法光谱分析法是另一种常见的抗生素分析方法。
它包括紫外-可见吸收光谱分析法、红外光谱分析法、质谱分析法等。
这些方法的优点是快速、简便，并且可以获得抗生素分子的结构信息。
例如，在四环素类抗生素的分析中，红外光谱法可以用来鉴定抗生素的结构。
3.3 生化分析法生化分析法是一种用于检测抗生素活性和毒性的方法。
常用的生化分析方法包括抗生素敏感性试验、最小抑菌浓度试验和细菌生长曲线分析等。
这些方法可以用于评估抗生素的疗效和剂量。
4. 抗生素研发与质量控制抗生素的研发和质量控制是抗生素分析中的重要环节。
研发阶段需要对抗生素进行结构解析、药效评价以及药代动力学和药物相互作用等研究。
质量控制阶段需要对抗生素进行质量指标的确定和检验，以确保其药效和安全性。
常用的质量控制方法包括纯度分析、杂质分析和稳定性分析等。
5. 抗生素分析在临床应用中的意义抗生素分析在临床应用中具有重要意义。
通过对抗生素的定量分析，可以确保患者在用药过程中获得正确的剂量；通过对抗生素的质量控制，可以保证抗生素的疗效和安全性。
抗生素分析还可以用于治疗过程中的药物监测，及时调整剂量和用药方案。
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旋光性
青霉素类 C3 C5 C6
头孢菌素类 C6 C7
﹡﹡ ﹡
﹡﹡
（三）共轭体系
UV
青霉素类
母核无明显UV 多数有苯环取代基
头孢菌素类 母核有共轭体系
（四）β–内酰胺环的不稳定性
不稳定性因素
四元环张力大 (β–内酰胺环) 酰胺键易水解
干燥纯净 稳定
水溶液 不稳定
青 霉 素 酸 类 、 碱 、 青 霉降 失 素解 效 酶
产品稳定性差
分子结构大多不稳定， 降解后疗效下降、失效 或增加毒副作用
发酵液中杂质
无机盐、脂肪、各种蛋白质、各种降 解产物、色素、热原、毒性物质
[检查] 增加 异常毒性、细菌内毒素、 热原、降压物质、无菌
含量测定方法 （一）生物学方法
测定抗生素抑菌或杀菌的能力
优点 缺点
1、与临床效果一致 2、灵敏度高 3、干扰物质少
第二节 β–内酰胺类抗生素
青霉素类
头孢菌素类
青苄西林 （氨苄青霉素）
阿莫西林 （羟氨苄青霉素）
普鲁卡因青霉素
头孢氨苄
头孢羟氨苄
一、结构与性质
（一）羧基
酸性
与碱金属(Na+、K+)成盐
易溶于水
Na
与有机碱(普鲁卡因)成盐
难溶于水
普鲁卡因青霉素
（二）手性C
（控制滴定过程约为15分钟），不计第 一个等当点，计算第二个等当点时消耗 滴定液的量。每1ml硝酸汞滴定液(0.02 mol/L)相当于7.128mg的总青霉素(按 C16H17N2NaO4S计算)。
另取本品约0.5g，精密称定，加 水与上述醋酸盐缓冲液各25ml，振摇使完 全溶解，在室温下，立即用硝酸汞滴定 液(0.02mol/L)滴定，终点判断方法同上.
•
分子排阻色谱法、离子交换
色谱法、
• 反相色谱法
• （二）吸光度检查
四、含量测定
（二） 汞量法 ChP 青霉素类
1.
原理
青霉 素 O H 族 RSH （水解）
pH. Hg
（RS）2Hg
2.
方法
水解 N 醋 酸a盐 O 缓H 冲 液3 H N H O N 滴 3 g 定2 O V 样 总
OH
（偶合）
（二）沉淀反应
1.钠盐反应 ： 遇酸→↓
青 青
霉 霉
素 素 H 钠 钾 青 霉白 素
在过量HCl或 有机溶剂中溶解
2. 有机胺盐反应 （1）重氮化 - 偶合反应 芳伯氨基
普 鲁 卡 因 H 青 普霉 鲁素 青 卡霉 因
重氮化-偶合反应
红
普鲁卡因青霉素 普鲁卡因
每1ml硝酸汞滴定液（0.02mol/L）相当 于7.128mg的降解物（按C16H17N2NaO4S 计算）。
总青霉素的百分含量与降解物的百 分含量之差值即为青霉素的含量。
苯 唑 青 CH u 2+ 霉 苯素 唑 青 A 霉 33n烯 9m
△
Cu2+ pH3.8
50g/ml
max (nm)
E11c%m
氯唑青霉素
341
0.682
双氯青霉素
342
0.653
苯唑青霉素
339
1.328
2、（五）IR法
V C O 18~1 17 5 c4 m 10 β-内酰胺环
抗生素类药物的分析
第一节 概述
抗生素的定义 抗生素是细菌、放线菌和真菌等微
生物的代谢产物，对各种病原微生物有 强大的抑制或杀灭作用。
抗生素的来源
1. 生物合成（发酵） 2. 化学合成或半合成
抗生素类药物的特点
1、化学纯度较低 2、活性成分易发生变异 3、稳定性差
抗生素质量的复杂性
生产工艺复杂
发酵过程不易控制易 受污染
样
pH4.6
品
醋 pH 酸 4 .6 盐 H 滴 N 缓 定g O 冲 V 空 降 液
以未经水解的样品作空白测定
例 青霉素钠 含量测定
取本品约50mg，精密称定，加水 5ml溶解后，加1mol/L氢氧化钠溶液5m ，摇匀，放置15分钟，加1mol/L硝酸溶 液5ml，醋酸盐缓冲液(pH4.6)20ml及水 20ml，摇匀，照电位滴定法(附录Ⅶ A), 用铂电极为指示电极，汞-硫酸亚汞电极 为参比电极，在35～40℃，用硝酸汞滴 定液(0.02mol/L)缓慢滴定，
头孢菌 素 酸 内 、 类 酰 碱 胺 酶 、降 失 胺 类 解 效
二、鉴别
（一）呈色反应 1. 羟肟酸铁反应
β-内酰胺类
内酰 H 胺 N O 类 H H Cl
NaOH
羟肟酸衍生物
呈色
H+ Fe3+/3
Fe3+/3 H+ （红、棕、褐）
2、肽键特征反应
.① 双缩脲反应 β-内酰胺类
CONH
似肽键
内酰胺 （碱 开类 环性 分 解酒 ） 石紫 酸 铜
②. 茚三酮反应
α -氨基
氨 基 茚 三 蓝 酮 紫 色
△
蓝紫色
3. 与重氮苯磺酸反应 头孢哌酮 酚羟基
C H O H 重 （偶 合 氮 ） 苯 橙 磺 黄 酸
NaN2OHCl
（三） K+、Na+反应
焰色→鲜黄色
Na+
+ 醋酸氧铀锌→↓黄
焰色→紫色
K+
+ 0.1%四苯硼钠 + HAc→↓白
（四） 光谱法 1、 UV法 样品、分解产物
mam x,iE 1 n 1 c % m ,,A
头孢氨苄 λmax = 262nm 青霉素V钠
A280nm/A264nm = 1.30～1
1、操作繁琐 2、培养时间长 3、测定误差大
（二）化学及物理化学方法 以理化方法测定主药含量
优点 1. 准确度高 2. 简单、快速
缺点 1. 不一定代表生物效价 2. 易受杂质干扰
分类（按结构）： β–内酰胺类、 氨基糖苷类、 四环素类、 大环内酯类、 氯霉素类、 多肽类、抗肿瘤类 林可霉素类、 其他抗生素类
V C O 17~1 16 0 c9 m 10仲酰胺基
（六） 色谱法 对照品对照法 1、 TLC法
供 对 试 照 品 品 相 同 条 比 件较 Rf和 斑 点
2、 HPLC法
对 供
试 照 品 品 相 同 条 比 件较 tR
三、特殊杂质的检查
• （一）高分子杂质检查