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培养基成分及配制课件

培养基成分及配制课件

2
硼酸
3
硫酸锰
4
硫酸锌
5
钼酸钠
6
硫酸铜
7
氯化钾
KI H3BO3 MnSO4.4H2O ZnSO4.7H2O Na2MoO4.2H2O CuSO4.5H2O CoCL2.6H2O
用量(mg/L)
0.83 6.2 22.3 8.6 0.25 0.025 0.025
培养基成分及配制课件
1.大量元素
2021/8/25 培养基成分及配制课件
29
2021/8/25 培养基成分及配制课件
3. 肌醇(环己六醇)
促进糖类物质的相互转化和活性物质作用的发挥 促进愈伤组织生长以及胚状体和芽的形成 对组织细胞繁殖、分化的促进作用 使用浓度100 mg/L
注:用量过多则促褐变
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2021/8/25 培养基成分及配制课件
4. 氨基酸
是很好的有机氮源,可直接被细胞吸收利用。 培养基中最常用的氨基酸是甘氨酸,其他的如精氨酸、
在离体培养条件下,不同种植物的组织对营养有不 同的要求,甚至同一种植物不同部位的组织对营养 的要求也不相同,只有满足了它们各自的特殊要求, 它们才能很好地生长。因此,没有一种培养基能够 适合一切类型的植物组织或器官。
3
2021/8/25 培养基成分及配制课件
在建立一项新的培养系统时,首先必须找 到一合适的培养基,培养才有可能成功。在植 物组织培养历史进程中,事实上也紧密地伴随 着培养基的研制史。
谷氨酸、谷酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺、丙氨酸等也常 用。
31
2021/8/25 培养基成分及配制课件
5. 天然复合物
为了特殊的培养目的,在一部分培养基中还添加了 一些特殊成分,如水解酪蛋白,水解乳蛋白,酵母提取 物,胰蛋白胨,椰乳,西红柿汁,香蕉粉,橘子汁,可 可汁等天然复合物以及活性炭,渗透调节剂等。

培养基及其配制PPT课件

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氯是光合作用水光解的活化剂 微量元素的主要作用是作为酶的辅助因子或激活剂参与代谢
的调节。
第11页,共50页。
缺铁症状:叶面呈绿色网纹状失绿。随病势发展,叶片 失绿程度加重,出现整叶变为白色,叶缘枯焦,引起落 叶。严重缺铁时,新梢顶端枯死。
桃 树
第12页,共50页。
缺铜症状:
新梢顶端叶片的叶尖失绿 变黄,叶片出现褐色斑点至扩 大变成深褐色,引起落叶。
◆对生长,分化等有很好的促进作用 ◆主要分为脂溶性维生素和水溶性维生素
◆常用维生素有VB1和VB6
第18页,共50页。
5、肌醇
◆环己六醇
◆细胞壁的构建材料 ◆参与碳水化合物、磷脂代谢及离子平衡等生理 活动 ◆促进活性物质发挥作用
第19页,共50页。
6、氨基酸 ◆蛋白质的组成成分 ◆有机氮源
◆可直接被细胞吸收利用 ◆培养基中常用的是甘氨酸
❖ 所谓母液是欲配制液的浓缩液。
❖ 意义: ①保证各物质成分的准确性 ②配制时的快速移取 ③便于低温保藏。
第33页,共50页。
母液的配制方法: 单配法:将培养基配方中的各种成分分别配成一定浓
度的母液。一般用mg/ml 。
混配法:将几类营养成分按配方中的用量扩大一定倍
数称量,分别溶解后再混合成母液。
第42页,共50页。
化合物名称
NH4NO3 KNO3 (NH4)2SO4 NaNO3 KCl CaCl2•2 H2O
Ca(NO3)2•4H2O MgSO4•7H2O Na2SO4 KH2PO4 K2HPO4 FeSO4•7 H2O Na2-EDTA Na-Fe-EDTA FeCl3•6H2O Fe(SO4) 3 MnSO4•4 H2O ZnSO4•7 H2O Zn (螯合体) NiCl2•6H2O CoCl2•6 H2O CuSO4•5H2O AlCl3 MoO3

母液的配制ppt课件

母液的配制ppt课件
目前常用的铁盐是硫酸亚铁和乙二胺四乙酸二 钠的螯合物,必须单独配成母液。这种螯合物使 用起来方便,比较稳定,且不易发生沉淀。
母液的配制
3、MS铁盐母液的配制
药品名称
规定用量 扩大 称取量mg 母液定容
mg /L 倍数
体积 ml
FeSO4.7H2O
27.8 100 1390
Na2-EDTA
37.3
100 1865
按照扩大倍 数称量
母液分装
溶解 按顺序混合
定容
保存于冰箱
母液的配制
五、实验方法及步骤 1.大量元素母液的配制
即含N、P、K、Ca、Mg、S六种元素的混合溶液, 一般配成浓度为10倍或20倍的母液。
药品名称
KNO3 NH4NO3 MgSO4·7H2O KH2PO4
规定用量 扩大 mg /L 倍数
1900 10
理论知识:
培养基:是植物组织培养的物质基础,也是组织培养 能否成功的重要因素之一。
培养基的主要成分是植物生长发育所必需的各种营养元素。
(主要成分) 无机盐类:大量元素、、铁盐 有机营养成分:维生素、肌醇、氨基酸等 植物生长调节剂:细胞分裂素类、 生长素类: IAA(吲哚乙酸)、 萘乙酸 (NAA)
母液的配制
母液的配制
2、微量元素母液的配制
药品名称
规定用量 扩大
ml/L
倍数
称取量mg 母液定容 体积 ml
MnSO4·4H2O 22.3
1000 22300
ZnSO4·7H2O 8.6
H3BO3
6.2
1000 8600 1000 6200
1000
KI
0.83
Na2MoO4·2H2O 0.25

实验MS培养基母液和常用试剂的配制课件

实验MS培养基母液和常用试剂的配制课件
▪ 亦可配制成混合母液(不主张采用)。
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规定 浓 称 母液 配1L

用量 缩 取 定容 MS培
种 类
成分
/mg• 倍 L-1 数
量 /mg
体积 养基 /ml 吸取
量/ml
甘氨酸
2.0
100
有 盐酸硫胺素 0.1
5

成 盐酸吡哆素 0.5 200 25 250 5
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3 主要实验用具和仪器
▪ 冰箱、普通天平、分析天平、各种型号的 试剂瓶(棕色和白色)、移液管、量筒、 烧杯、容量瓶、搪瓷杯、药勺、称量纸、 玻棒、标签纸、pH试纸(pH5.4~7.0), 电磁炉等。
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5.2 培养基的配制方法
▪ 配制培养基的最简单的方法是用市售培养 基干粉溶解在蒸馏水里,加上蔗糖、琼脂 和其他必要的补加物,再加入蒸馏水使之 达到最终的容积。最后调节pH值,高压灭 菌,于是制成所需要的培养基。
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▪ 如果没有培养基干粉,则可采用以下两种 方法来配制:
▪ 母液的配制有两种方法:
▪ 一种是配制成单一化合物母液。此法适合 配制多种培养基都需要的同一种母液。
▪ 另一种是配成几种不同化合物的混合母液。 此法在大量配制同种培养基时省时省力。 由于MS 培养基较为常用,故配制MS 培养 基母液。
▪ 配好的母液应放在试剂瓶中贮存。
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第二章培养基配置PPT课件

第二章培养基配置PPT课件

(2)细胞分裂素类(cytokinin,CTK)
✓ 腺嘌吟的衍生物,包括6-BA、Kt、Zt 等。其中Zt活 性最强,但非常昂贵,常用的是6-BA。
• 6—BA(6—苄基腺嘌呤) Kt (kinetin 激动素) • Zt (zeatin 玉米素) ✓ 作用:
• 诱导芽的分化 • 促进侧芽萌发生长 • 促进细胞分裂与扩大(茎增粗),抑制根的分化,延缓
成分大多不清楚,一般尽量避免使用。
➢ 椰乳 使用最多、效果最大。用量为10%—20%(愈伤、细胞培养)。
➢ 香蕉汁 用量为150-200ml/L,缓冲pH值(兰花组培)。
➢ 马铃薯 用量为150—200g/L,缓冲pH值。
➢ 其他 酵母提取液、麦芽提取液、苹果和番茄的果汁等。遇热较稳定,
大多在培养困难时使用,有时有效。
第二章 培养基及其配制
定义:
培养基(culture medium)——根据植物生长所需 营养成分,配制成的供植物生长的人工制作的营养物 质。是植物组织培养的重要基质。
•不同植物的组织对营养有不同的要求,甚至同一种植物不同部 位的组织对营养的要求也不相同 •没有一种培养基能够适合一切类型的植物组织或器官 •找到一合适的培养基,是培养成功的基础。
• (2)活性炭(active carbon) 目的:是利用其吸附能力,减少一些有毒物质的影响; 利于生根。
• 使用浓度:1—5g/L。
• 它的颗粒大小决定着吸附能力:粒度越小,吸附能力越 大;温度低吸附力强,温度高吸附力减弱,甚至不吸附。
优点:操作简便,通气问题易解决,便于观察研究。 缺点:培养物与培养基的接触(即吸收)面积小,各
(1)糖类(碳水化合物 )
碳源,维持培养基的渗透压在1.5-4.1MPa。多使 用蔗糖。

实验1 培养基母液的配制

实验1  培养基母液的配制

实验1、培养基母液的配制一、实验目的1、了解植物组织与细胞培养基的基本类型和组成。

2、掌握植物组织与细胞培养基各种母液的配制方法。

二、实验原理离体植物组织和细胞的生长、分化所需要的营养物质都是由培养基供给。

基本培养基通常包括大量元素、微量元素、有机物以及糖和水,完全培养基是在基本培养基的基础上,附加植物生长调节剂、椰乳、香蕉汁、番茄汁等天然提取物。

迄今为止,基本培养基的配方已有几百种,但较常用的有一二十种,如MS、White、N6、B5等。

实验用的培养基一般是先配成10-100倍的母液,用时再按配方配制培养基。

二、实验用品1、实验器材:冰箱、电炉、电子天平、移液管、量筒、烧杯(1000mL、500mL、50mL)、容量瓶、玻璃棒、试剂瓶(1000mL)、标签纸等。

2、实验试剂:MS培养基配方中的19种试剂,2,4-D,KT,NaOH,HCl,95%乙醇,HgCl2,次氯酸钠,蒸馏水等。

三、实验方法1、大量元素母液的配制按表1-1计算并称取各试剂,用蒸馏水依次溶解,最后定容到1000mL,即为10倍的大量元素母液,倒入试剂瓶,贴好标签,保存于4℃冰箱里。

表1-1 MS培养基大量元素母液试的配制注意1: ①称取量的值(mg)=规定量(mg/L)×扩大倍数×母液体积(L)②每称量一种试剂,都要在备注栏中相应的部分做好标记,比如写上日期和划出“√”。

注意2:①为避免沉淀现象发生,应将Ca 2+、SO42-、Mg 2+和H 2PO 4一等离子错开混合,速度宜慢,边搅拌边混合;②CaCl 2·2H 2O 要在最后单独加入,在溶解CaCl 2·2H 2O 时,蒸馏水需加热沸腾,除去水中的CO 2,以防沉淀。

另外,CaCl 2·2H 2O 放入沸水中易沸腾,操作时要防止其溢出。

③如遇沉淀,缓慢加入(注意搅拌)1mol/L 的Hcl 将其溶解。

2、微量元素母液的配制按表1-2计算并用分析天平称取各试剂,用蒸馏水依次溶解,最后定容到1000mL ,即为100倍的微量元素母液,倒入试剂瓶,贴好标签,保存于4℃冰箱里。

培养基母液的配制ppt课件

培养基母液的配制ppt课件
的水平调整可通过其底部调整螺丝完成。 ②天平接通电源预热至指定时间。
(2)校准 天平使用前要进行校准工作,校准程序可按说明书进行。用内
装校准砝码或外置砝码校准。 当天平较长时间(5d以上)放置不用、天平位置发生移动、测试
环境不理想或为获得精确称量等,均应在使用前进行天平的校准 工作。 (3)称量
11培养基母液配制12培养基母液配制步骤计算称量溶解写标签保存按下表进行计算电子天平百分之一万分方一烧杯药匙蒸馏水量筒玻棒可调式电炉洗瓶容量瓶1000ml500ml100ml母液名称浓缩倍数配制人员姓名时间冰箱13母液成分浓缩倍数x数量gl配制1l培养基吸取母液的毫升数母液1大量元素nh10165100kno19cacl2h44mgso37kh17母液2微量元素ki100008310062mnso223znso086na0025cuso45h2o00025cocl00025母液铁盐feso10027810na373母液4有机物质20020烟酸维生素b301盐酸吡哆醇维生素b601盐酸硫胺素维生素b101甘氨酸0414培养基母液配制计算母液成分浓缩倍数浓度gl配制母液毫升数各成分的质量g母液1nh101651000kno19cacl2h44mgso37kh17母液2ki1000083500062mnso223znso086na0025cuso45h00025cocl00025母液铁盐feso100278500na373母液4有机物20020100烟酸维生素b301盐酸吡哆醇维生素b601盐酸硫胺素维生素b101甘氨酸0415电子天平的使用方法1开机开机前应检查天平的水平仪确定天平处于水平状态
混合。
加热溶解的成分需冷却至室温后再转移至容量瓶 定容。
精选ppt课件2021
16
容量瓶的定容方法

母液的配制

母液的配制
配制培养基时,为了使用方便和用量准确,通 常采用母液法进行配制,即将所选培养基配方中各 试剂的用量,扩大若干倍后再准确称量,分别先配 制成一系列的母液置于冰箱中保存,使用时按比例 吸取母液进行稀释配制即可。
以MS培养基为例,所需配制的母液可分为: MS大量元素母液、MS微量元素母液、MS铁盐母液 和MS有机化合物母液等。另外,还要配制生长物质 母液,在不同类型的培养基中使用。
特别是微量元素、维生素等微量成分,因用量少,不仅 称量麻烦,还容易出现误差,所以配制母液是科学和方便 的方法。使用母液不但可以保证培养基个物质成分的准确 性及配制的方便性,且便于低温保藏,从而提高工作效率。
储备液(母液)
母液是将培养基成分扩大若干倍,一般为10倍、20倍、 100倍甚至更高倍数的浓缩溶液。
按试剂种类和性质将其分别称量、分别溶解、分别配 制、单独保存或几种混合保存,配制培养基时在按比列吸 取即可。
配制母液及培养基时要选用蒸馏水,以免带入杂物质 对培养材料产生不利影响。
实验一 MS培养基贮备液(母液)的配制
一、实验目的
熟悉MS培养基的组成,掌 握贮备液(母液)的配制方法。
二、实验原理:
3、MS铁盐母液的配制
药品名称
规定用量 扩大 称取量mg 母液定容
mg /L 倍数
体积 ml
FeSO4.7H2O
27.8 100 1390
Na2-EDTA
37.3
100 1865
500
铁盐母液的配制方法是:
用电子天平称取硫酸亚(FeSO4.7H2O)和乙二胺四乙酸 二钠(Na2-EDTA),分别用蒸馏水加热溶解,煮沸,使之全 部溶解,溶解后混合后继续煮沸几分钟(约加热5min至溶液
2、微量元素母液的配制
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配制母液 毫升数
1000
500
500 100
各成分的质量(g)
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电子天平的使用方法
(1)开机 ①开机前应检查天平的水平仪,确定天平处于水平状态。天平
的水平调整可通过其底部调整螺丝完成。 ②天平接通电源预热至指定时间。
(2)校准 天平使用前要进行校准工作,校准程序可按说明书进行。用内
装校准砝码或外置砝码校准。 当天平较长时间(5d以上)放置不用、天平位置发生移动、测试
CuSO4.5H2O
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
16.5 19 4.4 3.7 1.7 0.083 0.62 2.23 0.86 0.025 0.0025
CoCl2.6H2O
母液 FeSO4. 7H2O
100
3 (铁
Na2.EDTA.2H2O
盐)
0.0025 2.78 3.73
母液4 肌醇(环已六醇)
200
20
(有 机
物质
烟酸(维生素B3)
相当于土壤,提供离体器官生长所需要的营养、环境和活性物质 与土壤相比较,培养基缓冲性能很小,所以要求培养基各成分浓度精确
.
4
质量体积浓度
.
5
任务二 培养基母液配制
质量体积浓度:用单位体积( 1升或1毫升)溶液中 所含的溶质质量数来表示的浓度叫质 量-体积浓度, 单位常用:g/L或 g/mL 或mg/mL 如:0.9g/L的NaCl溶液——即每一升水中含有0.9克 的氯化钠.
盐酸吡哆醇(维生素B6)
0.1
.
0.1

盐酸硫胺素(维生素B1)
0.1
配制1L培养基 吸取母液的毫升数
(V/X)
100
10
10 5
13
培养基母液配制计算
母液
成分
母液1
母液2
母液 3
(铁 盐)
母液 4
(有 机物质 )
NH4NO3 KNO3 CaCl.2H2O MgSO4.7H2O KH2PO4. KI H3BO4 MnSO4.4H2O ZnSO4.7H2O Na2.MoO4.2H2O CuSO4.5H2O CoCl2.6H2O FeSO4. 7H2O Na2.EDTA.2H2O
写标签
母液名称、浓缩倍数、配制人员姓名、时间
保存
冰箱
.
12
母液
成分
浓缩倍数(X) 数量(g/L)
母液1
NH4NO3
10
(大量 元素)
KNO3
CaCl.2H2O
MgSO4.7H2O
KH2PO4.
母液2
KI
100
(微量 元素)
H3BO4 MnSO4.4H2O
ZnSO4.7H2O
Na2.MoO4.2H2O
母液1中CaCl2.2H2O溶解时需加热溶解。 母液3FeSO4.7H2O和Na2EDTA需分别加热溶解后
混合。
加热溶解的成分需冷却至室温后再转移至容量瓶 定容。
.
16
容量瓶的定容方法
.
17
.
18
本课小结
培养基母液如何配制?
.
19
.
20
作业:
1.培养基配制中所需要的仪器和用具有哪些? 2.培养基配制的程序有哪些? 3.分组配制培养基母液(母液1 1000ml;母液
任务二 培养基母液配制
主题二 培养基及其制备
.
1
任务二培养基母液配制
知识回顾
.
2

活性物质 (植物激素)
培养基
无机盐
大量元素
微量元素 糖
维生素
支持物质
有机物质
肌醇
氨基酸
有机添加物
N、P、K
Ca、Mg、S Fe、Mn、Zn 、B 、Cu 、Mo
.
3
任务二培养基母液配制中浓度问题 及相关计算
知识回顾
2 500ml;母液3 500ml;母液4 100ml。)
4.写成实训报告。
.
21
谢谢
精选文档尽在此间
.
22
CuSO4.5H2O0.05mg/L表示1L培养基中质量为0.05mg,即
10-5 g。
.
6
.
7
什么是培养基母液?
母液:即贮备液,指培养基配制时欲配制液的 浓缩液,一般母液配成比所需浓度放大10-100 倍。
这样不但可以保证各物质成分称量的精准性及 配制时的快速移取,而且浓缩液体积小便于低 温保藏。
或微克/毫升表示或ppm、ppb表示。(ppm称为百万分率, l ppm就是说百万之一或者是1微克/毫升,ppb称为十亿分 率,l ppb就是说十亿分之一或0.001微克/毫升)。
表2-1(P20)大量元素20倍浓缩液NH4NO3 浓度为 33000 mg/L表示1L培养基中质量为33000mg,即33g.
环境不理想或为获得精确称量等,均应在使用前进行天平的校准 工作。
(3)称量 按下显示屏的开关键,待显示稳定的零点后,将被称量物体置
于秤盘上,待数字稳定后,该数字即为被称量物的质量,按动相 关的按键可以实现“去皮”,“增重”,“减重”等称量功能。
(4)称量结束后,应及时清理秤盘,关好天平门。
.
15
肌醇(环已六醇) 烟酸(维生素B3) 盐酸吡哆醇(维生素B6) 盐酸硫胺素(维生素B1)
浓缩倍数
10 100
100 200
浓度g/L
16.5 19 4.4 3.7 1.7 0.083 0.62 2.23 0.86 0.025 0.0025 0.0025 2.78 3.73
20 0.1 . 0.1 0.1
母液配制时比所需浓度放大X倍,在配制培养 基时按配制培养基的体积(V升)的V/X吸取 母液即可。
.
8
.
9
.
10
培养基母液配制
.
11
培养基母液配制步骤
计算
按下表进行计算
称量
电子天平(百分之一、万分方一)烧杯、药匙
溶解
蒸馏水、量筒、玻棒、可调式电炉、洗瓶
定容
容量瓶(1000ml、500ml、 100ml)
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