临检sop
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临检室操作规程
ABC医院检验科
目录
1.血常规检测 (1)
2.异常白细胞检查(显微镜检查法) (8)
3.异常红细胞检查(显微镜检查法) (12)
4.网织红细胞计数(Ret) (17)
5.ABO血型鉴定 (18)
6.红斑狼疮细胞检查 (20)
7.疟原虫检查 (21)
8.凝血酶原时间(PT)测定 (24)
9.活化部分凝血活酶时间(APTT)测定 (26)
10.血浆纤维蛋白原(Fbg)测定 (28)
11.血浆凝血酶时间(TT)测定 (30)
12.尿微量白蛋白(Μ-ALB)免疫比浊定量 (32)
13.全血C-反应蛋白(B-CRP)免疫比浊定量 (34)
14.尿液检验 (36)
15.粪便检验 (44)
16.脑脊液检验 (48)
17.腔积液检验 (55)
18.前列腺检验 (61)
19.精液检验 (62)
20.阴道分泌物检验 (65)
血常规检测
1.标本采集
新抽取的静脉血或手指末梢血(EDTA-K2抗凝)。
2.仪器设备
血细胞分析仪。
3.操作步骤
3.1上下颠倒试管将内容物充分混匀,检查有无凝血。
3.2将试管正确放入试管架上。
3.3按start键,样品开始吸取。
3.4当ready led 暗(并发出两声短音)移开试管。
3.5当ready led再次亮起时,准备下一个样品,重复上述步骤。
4.实验原理
4.1红细胞计数测定
本实验采用流体力学聚集技术原理分析红细胞。使用电阻抗法进行红细胞计数,红细胞通过小孔时,形成的相应的脉冲的多少即红细胞的数目。
4.2白细胞计数测定
本实验采用半导体激光器,以流式细胞术原理分析白细胞。当全血进入白细胞通道后,通过流式细胞技术半导体激光的照射形成白细胞散射图,从而计算出白细胞的数量。
4.3白细胞分类计数测定
本实验采用半导体激光器,以核酸荧光染色及流式细胞术原理分析白细胞。当全血进入白细胞通道后,通过核酸荧光染色、利用流式细胞技术半导体激光的照射形成白细胞散射图,从而计算出中性细胞、淋巴细胞,单核细脃、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞分类的数量。
4.4血红蛋白测定
被稀释的血液的加入溶血剂后,红细胞溶解,释放血红蛋白,后者与溶血剂结合形成血红蛋白衍生物,进入血红蛋白测试系统,在特定波长(一般在530~550nm)下比色,吸光度的变化与液体中Hb含量成比例,仪器便可显示Hb浓度。
4.5红细胞比积的测定
当红细胞通过计数孔计数时,其体积的大小与之产生的脉冲的大小成正比,血球压积正是基于此原理测出的,血球压积以百分比表示,可由一公式算出,即红细胞总体积或累积容积与1:50000稀释全血体积的比较,其公式如下:HCT=(样本中RBC体积/样本体积)×100
4.6平均红细胞体积测定
由微处理器计算而得:MCV由RBC和HCT计算得出:
MCV(fl)=〔HCT(%)/RBC(106/µl)〕×10
4.7红细胞平均血红蛋白含量(MCH)测定
由微处理器计算而得:MCH由RBC和Hb计算得出:
MCH(pg)=〔Hb(g/dL)/RBC(106/µl)〕×10
4.8红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)测定
由微处理器计算而得:MCHC由HCT和Hb计算得出:
MCHC(g/dl)=〔Hb(g/dL)/HCT(%)〕×100
4.9血小板(PLT)测定
直流电电阻法的直流电测量系统的白细胞检测部件带有口径与细胞大小尺寸相同计数孔的传感器相同计数孔的传感器,与每个传感器相毗连的是一个内电极和一个外电极。传感器和电极插在一种导电的稀释液中。在内外电极之间通过稀释液传导着一恒定的直流电电流(DC)。非导电性的白细胞悬浮在导电的稀释液中,在计数过程中当一个细胞通过计数孔时,使电极间的电阻增加。该电阻是与细胞体积成正比的。从而引起电极间电压差的改变。电压的改变被称为细胞脉冲。此原理是以欧姆定律为基础的。表达式如下:
E=I×R
式中E为电压,I为电流,R为电阻。
由于电流(I)是恒定的,任何原因(如细胞)引起电阻(R)的升高。将导致电压差(E)成正比的改变。这些电压的微小改变被放大,电子干扰或假信号则被滤波电路所消除。经放大的细胞脉冲被传递至PDA(颗粒分布分析)电路以产生直方图。本仪器增加了核酸荧光染色技术,对电阻搞法检测不了的血小板进行染色后可计算出血小板的数量。
5.参考值范围
5.1红细胞计数
男性4.0~5.5×1012/L;女性3.5~5.0×1012/L;新生儿6.0~7.5×1012/L。
5.2白细胞计数
成年人4~5.5×109/L;婴儿(两周岁以下)11~12×109/L;新生儿15~20×109/L。
5.3白细胞分类计数
中性粒细胞0.5~0.70×(50~70%);嗜酸性凿粒细胞0.005~0.05(0.5%~5%)嗜碱性粒细胞0~0.01(0~1%);淋巴细胞0.2~0.40(20%~40%);单核细胞0.03~0.08(3%~8%)。
5.4血红蛋白测定
男性120-160g/L;女性110-150g/L。
5.5红细胞比积的测定
男性0.42~0.49(42%~49%),女性0.37~0.43和新生儿0.49~0.54。
5.6平均红细胞体积测定
成人79~101fl;儿童73~89f1;新生儿可达105fl。
5.7红细胞平均血红蛋白含量(MCH)测定
27~34(pg)
5.8红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)测定
320~360(g/L)
5.9血小板(PLT)测定
(100~300)×109/L
6.临床意义
6.1红细胞计数
贫血、白血病、大量失血及钩虫病等降低。巨幼红细胞贫血时减少更为明显。慢性缺氧(肺气肿和先天性心脏病等)、严重脱水、大面积烧伤、慢性一氧化碳中毒及真性红细胞增多症等时增高。
6.2白细胞计数
6.2.1生理性增多:初生儿、妊娠末期、分娩期、经期、饭后、剧烈运动后、冷水浴后及极度恐惧与疼痛等。
6.2.2病理性增多:大部分化脓性细菌所引起的炎症、尿毒症、严重烧伤、