常见曲霉鉴定1

第一节
霉菌鉴定的意义
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霉菌分类鉴定的意义
在食品中能分离出各种霉菌， 但它们很可能没有什么意义，因为 其中多数来源于外界的偶然污染。 仅有非常有限的几个霉菌属可使经 过加工并正常生产工艺包装的食品 腐败。
毛霉显微形态
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犁头霉 显微形态
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共头霉 显微形态
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待鉴定菌株的分离和纯化
常用方法有直接点种法、 划线法、稀释平板法。稀释平板 法同常规检验，除了培养基用具 选择性的外，还要求每皿中长出 的霉菌菌落在十个左右，太多则 影响分离效果。
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待鉴定菌株的分离和纯化
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青霉、曲霉用察氏琼脂培养
尽管Dox氏和Thom氏均称自己 修改后的配方青霉、曲霉生长良好， 重复性高，但国家标准仍以原配方为 鉴定培养基。我们认为Dox氏配方可 以试用。
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锁状联合（担子菌的独有特征）
担子菌纲
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担孢子与子囊孢子的形成示意图
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第三步，找不到有性 繁殖方式的菌株，一般归 入半知菌类。这时候需要 观察无性繁殖的状态。首 先检查是否有分生孢子器 或分生孢子盘。符合的霉 菌主要是茎点霉、毛盘孢、 盘圆孢属。完全不产生孢 子的就是丝核菌。
来自百度文库
霉菌分类鉴定培养基
对于镰刀菌属的菌种，必要时要 选用六种以上的不同培养基来分别显 示它的不同培养特征。对有特殊要求 的霉菌，培养时也应满足其条件，低 水活度食品如果酱、粮食中的嗜干霉 菌，应使用大量添加蔗糖或食盐的高 渗培养基。如高盐察氏琼脂。
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乳酸品红液和乳酸苯酚棉蓝染色液
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乳酸苯酚棉蓝染色液使用效果
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霉菌分类鉴定时间
直接采用霉菌和酵母计数后的 平板进行霉菌分类鉴定是可行的。 但仅仅培养5 d～7 d时，菌种的形 态特征不明显，不容易观察。通常 于培养7 d～14 d时鉴定。
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霉菌分类鉴定染色液
制片时染色液是必需的。常用两 种：乳酸品红染色液（百万分之一酸 性品红的乳酸溶液），染色速度快， 尤其是幼龄组织上色快。胞壁组织清 晰，适于显微摄影。
然后用显 微镜由低倍镜、 高倍镜至油镜 观察，注意菌 丝形态、孢子 梗和有性器官 形态等。
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常见霉菌分类鉴定程序
菌落颜色，包括分生孢子、孢子 梗、菌丝颜色；分生孢子梗形态与菌 丝区别、着生位置、单生或丛生或束 状；分生孢子类型、表面结构、形态、 着生位置和产生方式；分生孢子器的 有无及形态，……。这是鉴定时一定 要仔细观察的指标。
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常见霉菌分类鉴定程序
第四步，没有分生孢子器或分生 孢子盘的种类，就要观察分生孢子梗 散生还是成束或者并列。
真菌的分类系统
①真菌超微结构的研究，主要是电 镜应用
②生理生化的研究 ③医学真菌学、药用真菌学研究 ④真菌毒素研究 ⑤真菌分类学及真菌地位研究 ⑥食用真菌人工培养开发
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真菌的分类系统
目前，真菌学仍然是微生 物学的薄弱环节，还有待进一 步深入研究。在系统学方面， 受到公认的分类体系不多。
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常见霉菌分类鉴定程序
鉴定时先肉 眼观察平板 上生长的单 个菌落，注 意其颜色、 质地等。
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常见霉菌分类鉴定程序
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霉菌分类鉴定的意义
当然，如果不按照标准的生 产程序进行食品生产，那么许多 外界污染的霉菌都将在食品中大 量繁殖，这种情况下，就谈不上 优势菌群问题了，也不必进行霉 菌的分类鉴定。处理方法只有一 个，恢复正常的生产程序。
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青霉、曲霉用察氏琼脂培养
青霉和曲霉在察氏琼脂上颜色 和形态分化较好。通用的察氏培养基 有三种：原配方、Dox修改和Thom 修改配方。三者的差别在于硝酸钠添 加量分别是3.0 g、3.5 g和2.0 g。
常见霉菌的分类鉴定
福建省疾病预防控制中心 马群飞
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目录
• 霉菌鉴定的意义 • 霉菌鉴定的依据 • 霉菌鉴定的基本材料 • 常见霉菌分类鉴定程序 • 现行国家标准的曲霉分群
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常见霉菌分类鉴定程序
第二步：观察是否有有性繁殖。这是子 囊菌、担子菌和一般霉菌的最重大差别。
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子囊菌纲
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霉菌分类鉴定染色液
乳酸苯酚棉蓝染色液（10 g石炭 酸溶于10 mL热蒸馏水，再加入甘油 20 mL、乳酸10 mL，最后，加棉蓝 cotton blue 0.22 g即成），折光率好， 背景微蓝，细胞不变形，杀菌防腐防 腐，且不易干燥，保持时间较长。 1896年 Amann 氏发明。
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真菌分类系统
酵母分类以荷兰Lodder J.主编 《 The Yeast -A Taxonomic Study》 (罗德，酵母菌—分类研究)1970年再 版本为比较完整的系统。
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真菌分类系统
全世界已知真菌有上千属， 十万种。五十年来，对于真菌的 研究飞速发展，主要研究热点问 题集中在以下几个方面。
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第四节
常见霉菌分类鉴定程序
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霉菌鉴定一般程序
霉菌分类的困难关键在于培养 特征的观察和描述。使用检索表时一 定要对每一分类特征判断清楚，以免 因一次错误而误入歧途。经常进行霉 菌分类鉴定的单位或部门需要专人负 责这项工作，临时人员是无法胜任的。
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第三节
霉菌分类鉴定的基本材料
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霉菌分类鉴定培养基
霉菌培养时常因不同的培养基而在 生理和形态方面表现出极大的差异，故 描述菌种时应注明鉴定培养基。最为常 用的是察氏琼脂（Czapek Agar）和马 铃薯葡萄糖琼脂（PDA），通常青霉、 曲霉用察氏琼脂培养，其他霉菌则应选 用PDA。
另外，如采用倾注法，长在琼 脂深处的霉菌发育不良，无法观察 其菌落特征。可改用表面涂布法。 此方法手续繁琐，但所得种类较多。
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待鉴定菌株的分离和纯化
直接点种法将食物小颗粒直接种于 分离培养基上，25℃培养2 d～3 d后，用 接种针挑取孢子或菌丝，转接于适当的 琼脂斜面上待鉴定。此方法分纯效果略 逊。
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常见霉菌的分类
我们统称的霉菌（小型丝状真 菌），绝大多数都分布在半知菌类里 面。 • 藻状菌纲 全部都是 • 子囊菌纲 少数 • 担子菌纲 极少数 • 半知菌类 除了酵母外，全部都是
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常见霉菌的分类
丝状真菌没有完整的分类系 统。常用Smith系统。
• 藻状菌纲 • 子囊菌纲 • 担子菌纲 • 半知菌类
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霉菌分类鉴定的依据
目前国内最常用的鉴定 依据，就是中国科学院微生物 研究所主编的《常见与常用真 菌》，1973年，科学出版社
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待鉴定菌株的分离和纯化
划线法是用无菌水洗涤样品， 用接种环沾取液体在分离培养基上 划线分离。此法最简便，但可能遗 落部分菌株。
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霉菌分类鉴定的意义
霉菌中的多数种类不会产生有害 的霉菌毒素，危害较小，而少数菌株 即使污染数量不多，产生的霉菌毒素 却有极大的危害，因此单纯的霉菌计 数并不能反映食品的安全性，只有知 道了食品的污染菌菌相，才能更准确 地判断。分类鉴定的意义就在于此。
常见霉菌分类鉴定程序
第一步：观察菌丝是否有分隔。这是 最低等霉菌和高等霉菌的最重大差别。
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藻状菌纲的 毛霉、根霉 是最常见的 种类。
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第二节
霉菌分类鉴定的依据
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霉菌分类鉴定的依据
霉菌和酵母这种称谓仅是为 了方便起见，将小型真菌有真正 菌丝的称为霉菌，没有菌丝的称 酵母，并没有分类学上的依据。 霉菌的分类鉴定十分繁琐。