实验五_离体小肠平滑肌的生理特性与药物作用的观察_(2)
离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察
离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察实验目的:学习一种离体组织器官实验方法;观察离子成分,酸碱度,温度,乙酰胆碱,肾上腺素等药物对离体家兔小肠平滑肌的作用;分析平滑肌活动的某些生理特性及理化环境改变对它的影响。
实验原理:消化道平滑肌具有自动节律性,较大的伸展性,对化学物质,温度及牵张刺激较为敏感等生理特性。
将离体的组织,器官置于模拟的内环境中,可在一定时间内保持其功能,从而为我们检测它们的生理学和药理学特性提供了便利的条件。
功能和维持的时间长短与模拟内环境的精确性和稳定性有关。
实验动物:家兔,体重2.0~~2.5kg,雌雄不拘。
实验器材:台氏液,0.01%肾上腺素溶液,0.01%乙酰胆碱溶液,0.01%阿托品溶液,1mol/L盐酸溶液,1mol/L氢氧化钠溶液。
恒温平滑肌槽,小烧杯,丝线,温度计,张力换能器,污物杯,双凹夹。
实验步骤:1..处死动物2.制备肠段标本注意事项:1.肠管勿牵拉过紧或过松,且连线必须垂直,且不得与浴槽的管壁,通气塑料管接触,以免摩擦。
2.浴槽中液体的量以高过肠段为准,并保持液面高度一致。
3.药物应滴在肠管附近,药物要事先预热至38度。
各药用量系参考剂量,若效果不明显,可以增补加药,但不可一次过多,以免引起不可逆反应。
4.每次加药出现反应后,必须立即更换浴槽内的台氏液至少三次,待肠管恢复稳定活动后,再观察下一项目。
实验结果:1.正常情况下,离体小肠平滑肌在台氏液中可以自由缓慢收缩,但其节律性不规则。
在浴槽中加入乙酰胆碱后可见离体肠管活动增强,描计曲线出现收缩频率变快,幅度增加。
出现上述现象是因为消化道平滑肌产生动作电位的离子基础与钙离子的内流有关,乙酰胆碱可与肌膜上的M受体结合,使得两类通道开放:一类为电位敏感性钙离子专用通道,另一类为特异性受体活化钙离子专用通道。
前一类对Ach敏感,小剂量Ach即引起开放;后一类对Ach相对不敏感,只有大剂量才会引起开放。
这两类通道开放都使得肌浆中钙离子增高,进而激活肌纤蛋白—肌凝蛋白—ATP系统,使平滑肌收缩,肌张力增加。
离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用观察实验报告
离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用观察一、实验目的: ①进一步熟悉BL-410/420多媒体生物信号记录分析系统;②学习离体肠肌的实验装置和使用方法;③观察并记录传出神经系统药物以及酸碱对离体小肠平滑肌收缩的影响二、实验对象:家兔离体小肠肠管。
三、实验原理:消化道平滑肌具有自动节律性运动的特性,其产生机理源于其肌肉细胞本身的自发缓慢放电并受中枢神经系统及体液因素的调节,所以可以取离体的小肠肠管并放置于人工创造的正常生理环境下,利用BL-410/420多媒体生物信号记录分析系统和换能器系统分别研究传出神经系统药物以及酸碱对小肠平滑肌收缩的影响。
四、实验记录与分析㈠图(一)图(一)表示小肠由38度台氏液到室温下其平滑肌收缩曲线变化情况从图(一)可以看出小肠所处温度降到室温时明显减弱,因为平滑肌收缩需要酶催化,而温度在一定范围内下降时钠钾泵及离子通道的酶的催化活性也会降低,这就可以影响钠钾钙等离子的转运,继而影响去极化和复极化的速度,进而动作电位的产生速率和幅度就会下降,所以平滑肌的收缩程度会减弱。
㈡图(二)图(二)表示在38度台氏液加入肾上腺素后小肠平滑肌收缩曲线的变化情况由图(二)可知加入肾上腺素后小肠平滑肌收缩明显减弱,这是因为肾上腺素与小肠平滑肌肌膜上的β肾上腺素能受体结合,可导致使膜超极化,从而使膜去极化达到阈电位的幅度增加,所以其动作电位的产生频率下降,所以小肠平滑肌的收缩幅度减弱。
㈢图(三)图(三)表示在正常38度台氏液里滴加乙酰胆碱的小肠平滑肌收缩曲线变化情况由图(三)可知在正常38度台氏液里滴加乙酰胆碱后小肠平滑肌收缩明显增强,这是应为乙酰胆碱与小肠平滑肌肌膜上的M受体结合后,可以在膜去极化未达到一定的电位时提前激活更多的慢钙通道,使大量的钙离子内流,进而使动作电位产生的频率增加,所以小肠的平滑肌收缩增强。
㈣图(四)图(四)表示在正常38度台氏液先滴加阿托品,三十秒后再加乙酰胆碱的小肠收缩变化情况由图(四)可知小肠平滑肌的收缩无明显的变化,这是因为阿托品作为平滑肌肌膜上M受体抗结剂与M受体结合了,在滴加阿托品三十秒后再滴加乙酰胆碱,乙酰胆碱不能与小肠平滑肌肌膜上的M受体结合,就不能引起小肠平滑肌的兴奋性效应,所以其收缩没什么明显改变。
实验五 离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察 (2)
实验五离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察【实验目的】学习一种离体组织器官实验方法;观察离子成分、酸碱度、温度、乙酰胆碱、去甲肾上腺素对离体家兔小肠平滑肌的作用;分析平滑肌活动的某些生理特性及理化环境改变对它的影响。
【实验原理】消化道平滑肌具有自动节律性、较大的伸展性,对化学物质、温度及牵张刺激较为敏感等生理特性。
【实验材料】实验动物:家兔,2.0-2.5kg实验药品:台式液、0.01%去甲肾上腺素溶液、0.01%乙酰胆碱溶液、0.01%阿托品溶液、1.0%氯化钙溶液、1mol/l盐酸溶液、1mol/l氢氧化钠溶液。
实验器材:恒温平滑肌槽、小烧杯、污物杯、张力换能器、双凹夹、温度计、BL-420生物信号系统、丝线等。
【实验步骤】1.恒温浴槽的准备工作;2.标本制备;3.仪器连接与设置;4.启动计算机,打开BL-420生物信号系统,调节参数,开始记录。
观察项目1.自动节律性收缩,描记一段离体小肠平滑肌的收缩曲线,观察其节律性收缩及张力水平。
2.观察胆碱能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。
(1)乙酰胆碱的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的乙酰胆碱溶液1~2滴,观察肠管张力和收缩有何变化。
作用产生后,洗涤三次,进行下一项实验。
(2)阿托品的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的阿托品溶液2~3滴,两分钟后,再加入0.01%的乙酰胆碱溶液1~2滴,观察肠管张力和收缩有何变化。
与(1)比较结果后,洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
3.观察肾上腺素能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。
去甲肾上腺素的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的去甲肾上腺素2~3滴,观察肠管张力和收缩有何变化。
然后洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
4.观察钙离子对肠断收缩的影响向浴槽标本管中加入1%的氯化钙溶液2~3滴,观察肠管平滑肌的反应。
然后洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
5.观察酸碱度对肠断收缩的影响向浴槽标本管中加入1mol/l的盐酸溶液1~2滴,观察平滑肌的反应,待作用出现明显后,在此基础上,加入1mol/l的NaOH溶液1~2滴,观察平滑肌的反应。
离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用观察实验报告(精选课件)
离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用观察实验报告离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用观察一、实验目的:①进一步熟悉BL-410/420多媒体生物信号记录分析系统;②学习离体肠肌的实验装置和使用方法;③观察并记录传出神经系统药物以及酸碱对离体小肠平滑肌收缩的影响二、实验对象:家兔离体小肠肠管。
三、实验原理:消化道平滑肌具有自动节律性运动的特性,其产生机理源于其肌肉细胞本身的自发缓慢放电并受中枢神经系统及体液因素的调节,所以可以取离体的小肠肠管并放置于人工创造的正常生理环境下,利用BL-410/420多媒体生物信号记录分析系统和换能器系统分别研究传出神经系统药物以及酸碱对小肠平滑肌收缩的影响。
.四、.五、实验记录与分析㈠图(一)图(一)表示小肠由38度台氏液到室温下其平滑肌收缩曲线变化情况从图(一)可以看出小肠所处温度降到室温时明显减弱,因为平滑肌收缩需要酶催化,而温度在一定范围内下降时钠钾泵及离子通道的酶的催化活性也会降低,这就可以影响钠钾钙等离子的转运,继而影响去极化和复极化的速度,进而动作电位的产生速率和幅度就会下降,所以平滑肌的收缩程度会减弱。
..㈡图(二)图(二)表示在38度台氏液加入肾上腺素后小肠平滑肌收缩曲线的变化情况由图(二)可知加入肾上腺素后小肠平滑肌收缩明显减弱,这是因为肾上腺素与小肠平滑肌肌膜上的β肾上腺素能受体结合,可导致使膜超极化,从而使膜去极化达到阈电位的幅度增加,所以其动作电位的产生频率下降,所以小肠平滑肌的收缩幅度减弱。
..㈢图(三)图(三)表示在正常38度台氏液里滴加乙酰胆碱的小肠平滑肌收缩曲线变化情况由图(三)可知在正常38度台氏液里滴加乙酰胆碱后小肠平滑肌收缩明显增强,这是应为乙酰胆碱与小肠平滑肌肌膜上的M受体结合后,可以在膜去极化未达到一定的电位时提前激活更多的慢钙通道,使大量的钙离子内流,进而使动作电位产生的频率增加,所以小肠的平滑肌收缩增强...㈣图(四)图(四)表示在正常38度台氏液先滴加阿托品,三十秒后再加乙酰胆碱的小肠收缩变化情况由图(四)可知小肠平滑肌的收缩无明显的变化,这是因为阿托品作为平滑肌肌膜上M受体抗结剂与M受体结合了,在滴加阿托品三十秒后再滴加乙酰胆碱,乙酰胆碱不能与小肠平滑肌肌膜上的M受体结合,就不能引起小肠平滑肌的兴奋性效应,所以其收缩没什么明显改变。
实验五-离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察-(2)
实验五离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察【实验目的】学习一种离体组织器官实验方法;观察离子成分、酸碱度、温度、乙酰胆碱、去甲肾上腺素对离体家兔小肠平滑肌的作用;分析平滑肌活动的某些生理特性及理化环境改变对它的影响。
【实验原理】消化道平滑肌具有自动节律性、较大的伸展性,对化学物质、温度及牵张刺激较为敏感等生理特性。
【实验材料】实验动物:家兔,2.0-2.5kg实验药品:台式液、0.01%去甲肾上腺素溶液、0.01%乙酰胆碱溶液、0.01%阿托品溶液、1.0%氯化钙溶液、1mol/l盐酸溶液、1mol/l氢氧化钠溶液。
实验器材:恒温平滑肌槽、小烧杯、污物杯、张力换能器、双凹夹、温度计、BL-420生物信号系统、丝线等。
【实验步骤】1.恒温浴槽的准备工作;2.标本制备;3.仪器连接与设置;4.启动计算机,打开BL-420生物信号系统,调节参数,开始记录。
观察项目1.自动节律性收缩,描记一段离体小肠平滑肌的收缩曲线,观察其节律性收缩及张力水平。
2.观察胆碱能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。
(1)乙酰胆碱的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的乙酰胆碱溶液1~2滴,观察肠管张力和收缩有何变化。
作用产生后,洗涤三次,进行下一项实验。
(2)阿托品的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的阿托品溶液2~3滴,两分钟后,再加入0.01%的乙酰胆碱溶液1~2滴,观察肠管张力和收缩有何变化。
与(1)比较结果后,洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
3.观察肾上腺素能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。
去甲肾上腺素的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的去甲肾上腺素2~3滴,观察肠管张力和收缩有何变化。
然后洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
4.观察钙离子对肠断收缩的影响向浴槽标本管中加入1%的氯化钙溶液2~3滴,观察肠管平滑肌的反应。
然后洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
5.观察酸碱度对肠断收缩的影响向浴槽标本管中加入1mol/l的盐酸溶液1~2滴,观察平滑肌的反应,待作用出现明显后,在此基础上,加入1mol/l的NaOH溶液1~2滴,观察平滑肌的反应。
离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用观察实验报告
离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用观察实验报告实验目的:观察离体小肠平滑肌的生理特性,了解一些药物对小肠平滑肌的作用。
实验方法:1.准备材料:离体小肠标本、灌流系统、温度控制器、理化计量设备、药物溶液。
2.准备离体小肠标本:将小肠标本取出并迅速放入离体灌流系统,确保保持血液供应。
3.设置温度:将温度控制器设置为37℃,确保与体内相似的环境。
4.注入缓冲液:利用灌流系统,将预先准备好的缓冲液注入到小肠中,将小肠与体外隔离。
5.观察平滑肌收缩:记录小肠平滑肌的基础张力,观察平滑肌的自发收缩情况。
6.注入药物:将不同种类的药物(如乙酰胆碱、肾上腺素、乙酰胆碱拮抗剂等)注入到小肠中,观察其对平滑肌的作用。
实验结果:1.平滑肌自发收缩:在正常生理条件下,离体小肠平滑肌表现出自发性节律收缩。
这种节律性收缩称为控制收缩,并对肠腔内物质的运动起到辅助作用。
2.乙酰胆碱的作用:注入乙酰胆碱后,小肠平滑肌出现持续的收缩,强度较基础张力增加,肠蠕动加剧。
3.肾上腺素的作用:注入肾上腺素后,小肠平滑肌发生松弛,张力减小,肠蠕动减弱。
4.乙酰胆碱拮抗剂的作用:注入乙酰胆碱拮抗剂后,乙酰胆碱对平滑肌的作用被阻断,小肠平滑肌恢复到基础张力水平。
实验讨论:离体小肠平滑肌的生理特性是自发性的节律性收缩。
这种自发性收缩是由离体小肠上皮细胞产生的电刺激引起的。
乙酰胆碱是一种神经递质,能够通过与肠道上乙酰胆碱受体结合,促使平滑肌收缩。
而肾上腺素则是一种交感神经传递物质,能够与肠道上肾上腺素受体结合,引起平滑肌松弛。
乙酰胆碱拮抗剂可以抑制乙酰胆碱与肠道上乙酰胆碱受体结合,从而阻断乙酰胆碱对平滑肌的作用。
通过这些实验观察,我们可以了解到不同药物对离体小肠平滑肌的作用。
这对于研究消化道肌肉运动的机制以及寻找相关药物治疗消化道疾病具有一定的指导意义。
结论:离体小肠平滑肌表现出自发性节律收缩特性。
乙酰胆碱能够促使平滑肌收缩,肾上腺素能够引起平滑肌松弛。
实验五_离体小肠平滑肌的生理特性与药物作用的观察_(2)
实验五_离体⼩肠平滑肌的⽣理特性与药物作⽤的观察_(2)实验五离体⼩肠平滑肌的⽣理特性及药物作⽤的观察【实验⽬的】学习⼀种离体组织器官实验⽅法;观察离⼦成分、酸碱度、温度、⼄酰胆碱、去甲肾上腺素对离体家兔⼩肠平滑肌的作⽤;分析平滑肌活动的某些⽣理特性及理化环境改变对它的影响。
【实验原理】消化道平滑肌具有⾃动节律性、较⼤的伸展性,对化学物质、温度及牵刺激较为敏感等⽣理特性。
【实验材料】实验动物:家兔,2.0-2.5kg实验药品:台式液、0.01%去甲肾上腺素溶液、0.01%⼄酰胆碱溶液、0.01%阿托品溶液、1.0%氯化钙溶液、1mol/l盐酸溶液、1mol/l氢氧化钠溶液。
实验器材:恒温平滑肌槽、⼩烧杯、污物杯、⼒换能器、双凹夹、温度计、BL-420⽣物信号系统、丝线等。
【实验步骤】1.恒温浴槽的准备⼯作;2.标本制备;3.仪器连接与设置;4.启动计算机,打开BL-420⽣物信号系统,调节参数,开始记录。
观察项⽬1.⾃动节律性收缩,描记⼀段离体⼩肠平滑肌的收缩曲线,观察其节律性收缩及⼒⽔平。
2.观察胆碱能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作⽤。
(1)⼄酰胆碱的作⽤:向浴槽标本管中加⼊0.01%的⼄酰胆碱溶液1~2滴,观察肠管⼒和收缩有何变化。
作⽤产⽣后,洗涤三次,进⾏下⼀项实验。
(2)阿托品的作⽤:向浴槽标本管中加⼊0.01%的阿托品溶液2~3滴,两分钟后,再加⼊0.01%的⼄酰胆碱溶液1~2滴,观察肠管⼒和收缩有何变化。
与(1)⽐较结果后,洗涤三次,待其活动稳定后,进⾏下⼀项实验。
3.观察肾上腺素能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作⽤。
去甲肾上腺素的作⽤:向浴槽标本管中加⼊0.01%的去甲肾上腺素2~3滴,观察肠管⼒和收缩有何变化。
然后洗涤三次,待其活动稳定后,进⾏下⼀项实验。
4.观察钙离⼦对肠断收缩的影响向浴槽标本管中加⼊1%的氯化钙溶液2~3滴,观察肠管平滑肌的反应。
然后洗涤三次,待其活动稳定后,进⾏下⼀项实验。
离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用观察实验报告
离体小肠仄滑肌的死理个性及药物效率瞅察之阳早格格创做一、真验手段: ①进一步认识BL-410/420多媒介死物旗号记录分解系统;②教习离体肠肌的真验拆置战使用要领;③瞅察并记录传出神经系统药物以及酸碱对于离体小肠仄滑肌中断的效率二、真验对于象:家兔离体小肠肠管.三、真验本理:消化讲仄滑肌具备自动节律性疏通的个性,其爆收机理源于其肌肉细胞自己的自收缓缓搁电并受中枢神经系统及体液果素的安排,所以不妨与离体的小肠肠管并搁置于人为创制的仄常死理环境下,利用BL-410/420多媒介死物旗号记录分解系统战换能器系统分别钻研传出神经系统药物以及酸碱对于小肠仄滑肌中断的效率.四、真验记录与分解㈠图(一)图(一)表示小肠由38度台氏液到室温下其仄滑肌中断直线变更情况从图(一)不妨瞅出小肠所处温度落到室温时明隐减强,果为仄滑肌中断需要酶催化,而温度正在一定范畴内下落时钠钾泵及离子通讲的酶的催化活性也会落矮,那便不妨效率钠钾钙等离子的转运,既而效率来极化战复极化的速度,从而动做电位的爆收速率战幅度便会下落,所以仄滑肌的中断程度会减强.㈡图(两)图(两)表示正在38度台氏液加进肾上腺素后小肠仄滑肌中断直线的变更情况由图(两)可知加进肾上腺素后小肠仄滑肌中断明隐减强,那是果为肾上腺素与小肠仄滑肌肌膜上的β肾上腺素能受体分离,可引导使膜超极化,从而使膜来极化达到阈电位的幅度减少,所以其动做电位的爆收频次下落,所以小肠仄滑肌的中断幅度减强.㈢图(三)图(三)表示正在仄常38度台氏液里滴加乙酰胆碱的小肠仄滑肌中断直线变更情况由图(三)可知正在仄常38度台氏液里滴加乙酰胆碱后小肠仄滑肌中断明隐巩固,那是应为乙酰胆碱与小肠仄滑肌肌膜上的M受体分离后,不妨正在膜来极化已达到一定的电位时提前激活更多的缓钙通讲,使洪量的钙离子内流,从而使动做电位爆收的频次减少,所以小肠的仄滑肌中断巩固.㈣图(四)图(四)表示正在仄常38度台氏液先滴加阿托品,三十秒后再加乙酰胆碱的小肠中断变更情况由图(四)可知小肠仄滑肌的中断无明隐的变更,那是果为阿托品动做仄滑肌肌膜上M受体抗结剂与M受体分离了,正在滴加阿托品三十秒后再滴加乙酰胆碱,乙酰胆碱出有克出有及与小肠仄滑肌肌膜上的M受体分离,便出有克出有及引起小肠仄滑肌的镇静性效力,所以其中断出什么明隐改变.㈤图(五)图(五)为正在仄常38度台氏液里滴加盐酸几秒后再滴加氢氧化钠的小肠中断直线变更情况由图(五)可知正在滴加盐酸后小肠仄滑肌中断明隐减强,那是果为加进盐酸后,小肠所处环境的氢离子浓度降下,氢离子不妨效率缓钙通讲的启搁,是钙离子内流缩小,从而效率动做电位爆收的频次;其余氢离子能与钙离子比赛钙调蛋黑分离的位面,使肌凝蛋黑ATP酶活性下落、肌纤蛋黑对于钙离子的敏感性下落,肌量网释搁钙离子的量缩小,能搞扰肌肉的代开战肌丝滑止的死化历程,所以小肠的仄滑肌中断隐著减强.当过几秒后加进氢氧化钠后中战了氢离子,使小肠所处的环境回复仄常,所以其中断缓缓趋于仄常.。
离体小肠平滑肌生理
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支配消化道的外来神经
NE(-)运动、分泌 (-)运动、 (-)运动 Ach(+)运动、分泌 (+)运动、 (+)运动
交感神经
副交感神经
【实验目的】 实验目的】
1.学习一种离体组织器官实验方法。 .学习一种离体组织器官实验方法。 2.观察温度、乙酰胆碱、肾上腺素 .观察温度、乙酰胆碱、 等药物对离体小肠平滑肌的作用。 等药物对离体小肠平滑肌的作用。 3.观察并分析平滑肌活动的某些生 . 理特性及理化环境改变对它的影响。 理特性及理化环境改变对它的影响。
【实验动物】 实验动物】
家兔, 体重? , 家兔, 体重?kg, 雌/雄 雄
【实验材料】 实验材料】
1.器材 .
恒温平滑肌槽、 小烧杯、 污物杯、 恒温平滑肌槽 、 小烧杯 、 污物杯 、 张力换能 平皿、眼科剪、眼科镊各一把、丝线、 器、平皿、眼科剪、眼科镊各一把、丝线、温 度计、 度计、BL-420系统 系统
仪器连接 与设置
启动计算机
“实验”菜单中选择 实验” 实验 消化” “消化”中“消化 道平滑肌生理特性” 道平滑肌生理特性”
项
调节参数, 调节参数,开始记录
【观察项目】 观察项目】
1.自动节律收缩 . 2. 观察胆碱能受体激动剂对肠段收缩的影响 及阻断剂的作用 3.观察温度对肠段收缩的影响 4.观察肾上腺素能受体激动剂对肠段收缩的 . 影响及阻断剂的作用
实验四
离体小肠平滑肌生理 特性及药物作用的观察
药理学教研室 王钰莹
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消化道平滑肌的生理特性
①兴奋性较低,收缩缓慢。 兴奋性较低,收缩缓慢。 自动节律性。 ②自动节律性。 紧张性。 ③紧张性。 较大伸展性。 ④较大伸展性。 对电刺激不敏感,但对牵张、 ⑤对电刺激不敏感,但对牵张、温度和化学 刺激特别敏感。 刺激特别敏感。来自【实验材料】 实验材料】
实验四家兔离体小肠平滑肌生理特性及药物作用的观察
实验四家兔离体小肠平滑肌生理特性及药物作用的观察实验目的:1. 了解兔小肠平滑肌的收缩特性;2. 观察不同剂量乙酰胆碱和异丙肾上腺素对小肠平滑肌的作用;3. 观察肉桂胺和地奥心明对小肠平滑肌的作用。
实验原理:1. 平滑肌收缩原理:平滑肌细胞中的钙离子可以进入肌浆高敏感度钙离子离子通道,钙离子进入细胞内后可激活肌球蛋白轻链激酶(MLCK),MLCK会通过磷酸化肌球蛋白轻链,使其与肌球蛋白重链结合,进而激活肌原纤维的收缩。
平滑肌的松弛则是通过激活肌球蛋白酶磷酸化酶(MLCP),使已经磷酸化的肌球蛋白轻链脱磷酸而实现的。
2. 乙酰胆碱和异丙肾上腺素作用机制:乙酰胆碱是一种促进胆碱能神经传递的神经递质,通过激活M3胆碱能受体激活平滑肌细胞内的MLCK,激活肌原纤维收缩而引起平滑肌收缩。
而异丙肾上腺素则是一种肾上腺素类神经递质,在平滑肌细胞内通过激活β2-肾上腺素能受体作用于肌浆高敏感度钙离子离子通道(L型钙通道),引起离子通道开放,钙离子进入细胞内,激活MLCK,MLCK活化肌原纤维,导致平滑肌收缩。
3. 肉桂胺和地奥心明作用机制:肉桂胺是一种抑制钙离子离子通道开放的钙离子通道阻滞剂,通过抑制平滑肌细胞内的钙离子进入细胞内而阻止平滑肌收缩。
而地奥心明则是一种肾上腺素能受体激动剂,与β2-肾上腺素能受体结合,促进L型钙通道开放,增加平滑肌细胞内的钙离子进入,从而导致平滑肌收缩。
实验步骤:1. 实验前准备:将兔子解剖,取出小肠,并将其中的粘膜和黏膜去除,切成宽约0.5cm,长约 3-4cm 的小块,用泡沫贴片固定于组织浴盆内。
组织浴盆中加入平衡液,使小块与平衡液分离,并置于37℃水浴2至3小时。
2. 实验操作:将小肠平滑肌组织块连接至力记录器,穿孔测压管插入,测压管注射平衡液,保持压力稳定后进行实验记录。
a. 观察小肠平滑肌的基础收缩情况,记录其基础张力;b. 每隔2分钟注射一次乙酰胆碱,初步测定其作用剂量,以其作用达到峰值的最小剂量为标准剂量,记录其作用前和作用峰值的收缩程度,记录对应的张力值;c. 注射不同剂量异丙肾上腺素,观察其作用,记录其作用时的收缩程度和张力;d. 注射肉桂胺,观察其作用,记录其作用时的收缩程度和张力;e. 注射地奥心明,观察其作用,记录其作用时的收缩程度和张力。
离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察
离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察实验五离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察[目的]了解体外组织器官检测方法;观察离子组成、pH值、温度、乙酰胆碱肾上腺素等药物对离体家兔小肠平滑肌的作用;分析平滑肌活动的某些生理特性及理化环境改变对它的影响。
【实验原理】消化道平滑肌具有自动节律和很强的延展性,可以刺激化学物质、温度和拉伸较为敏感等生理特性。
将离体的组织、器官至于模拟的内环境中,可在一定时间内保持其功能,从而为我们检测它们的生理学和药理学特性提供了便利的条件。
功能和维持的时间长短与模拟内环境的精确性和稳定性有关。
[实验步骤]1.恒温浴槽的准备工作2.标本制备3.仪器连接与设置4.启动计算机开始记录[观察项目]1.自动节律收缩2.观察胆碱能受体激动剂对肠收缩的影响和阻断剂的影响(1)乙酰胆碱的影响(2)阿托品的影响3.观察肾上腺素能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用(1)肾上腺素的作用(2)去甲肾上腺素的作用4.观察钙离子对肠断收缩的影响5.观察温度对肠断收缩的影响6.观察酸碱度对肠断收缩的影响[结果分析]1.观察胆碱能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用(1)乙酰胆碱的作用向浴中加入乙酰胆碱后,离体肠道的活性增强,范围增大。
目前认为乙酰胆碱能与肌膜上的M受体结合,开放两种通道:一种是潜在敏感的Ca2+专用通道,另一种是特异性受体激活的Ca2+专用通道。
第一类通道对乙酰胆碱敏感,小剂量乙酰胆碱引起开放;后一种通道对乙酰胆碱相对不敏感,只有高剂量乙酰胆碱能引起开放。
这两种通道的开放增加了肌浆中的Ca2+,然后激活肌原纤维-肌球蛋白ATP系统,使平滑肌收缩,肌张力增加。
(2)阿托品的作用将阿托品溶液加入浴样管中,2分钟后加入乙酰胆碱(ACh)。
结果发现,小肠管的张力和收缩力没有显著变化。
原因是阿托品是一种乙酰胆碱阻滞剂,使乙酰胆碱的作用消失。
因此,添加乙酰胆碱后没有效果。
因此,当两者都加入时,曲线没有明显变化。
离体小肠平滑肌的生理性及药物作用的观察
消化道平滑肌的生理特性作者:宋利婷(2011222681)组员:2011222709张芮2011222702曾惜2011222698杨袁虹一:实验目的1、观察哺乳动物小肠平滑肌的一般生理特性;2、以及改变某些理化因素对小肠平滑肌的自律性活动和紧张性的影响,学习离体肠试验方法。
二:实验原理消化道平滑肌的特性和骨骼肌不同,其兴奋性交骨骼肌低,具有自动节律性,较大的延展性,对牵张,温度,和化学刺激比较敏感,将离体小肠至于适宜的环境中,仍能进行自律性活动,并随环境的变化表现出不同的反应。
三:实验材料实验对象:兔图(1):正常情况原因:消化道平滑肌在离体后,置于适宜的环境中,仍能进行节律性运动图(2)室温下小肠平滑肌的收缩情况由图可看到,加入室温下的水后,小肠平滑肌收缩活动明显受抑制,原因:小肠活动对温度变化刺激敏感,温度降低抑制小肠收缩活动图(3)待其恢复到38度左右时加入两滴肾上腺素由图可知,加入肾上腺素后,小肠平滑肌收缩严重受到抑制原因:肾上腺素主要终止于壁内神经丛中的胆碱能神经元抑制其释放乙酰胆碱,引起消化道运动减弱,腺体分泌抑制和血流量减少。
图(4)加入肾上腺素后洗三遍待其恢复正常后加入两滴乙酰胆碱由图可知,加入乙酰胆碱后,小肠收缩活动明显被促进原因:肠道内神经元副交感节后纤维主要乙酰胆碱能纤维,兴奋时末梢释放乙酰胆碱,对消化去哦观其兴奋作用,能够增加消化道运动和腺体分泌。
图(5)洗三遍后先加入两滴阿托品,然后再加入两滴乙酰胆碱,观察由图可知,加入阿托品后小肠收缩活动并没有明显变化,再加入乙酰胆碱小肠活动也没有明显变化,与图(5)进行对比,可知阿托品对乙酰胆碱有抑制作用。
原因:阿托品可阻断乙酰胆碱对消化器官的兴奋作用。
图(6)洗三遍以后加入两滴氯化钙溶液,观察由图可知加入氯化钙后小肠收缩活动并没有明显变化。
原因:钙离子的加入对小肠平滑肌的收缩和紧张都有促进作用,一方面钙离子浓度的升高导致及接头处神经递质的释放,另一方面使渗透压增加。
影响小肠运动的因素[资料]
离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用观察(一)观察温度对肠段收缩的影响在浴槽标本管中先加入25℃的台氏液,然后换为38℃的台氏液,记录小肠平滑肌的收缩曲线如上图。
结果:台氏液的温度由25℃升高到38℃,可观察到收缩频率变快,收缩幅度幅度增加。
分析:(1)实验中可观察到小肠平滑肌进行的是缓慢而不规则的节律性收缩。
慢波可决定小肠平滑肌的收缩节律,但其产生的离子基础,目前尚不十分清楚,泵活动暂时受到抑制时,则膜发生去极化;钠泵活动恢复,时膜电位回到原来的水平。
哇巴因抑制钠泵活动后,小肠平滑肌慢波随即消失。
(2)实验中标本管台氏液的温度37℃—38℃为宜,低于或者高于此温度都会影响实验结果。
由于肠管平滑肌对温度变化十分敏感,当温度降低时,可造成代谢水平降低,兴奋性减弱,频率变慢,收缩幅度减小;当温度高于四十摄氏度时,一定温度范围内可使酶活性增加,各离子通道活性增加,收缩频率加快,幅度增加。
还有温度本身也是一种刺激可使得代谢活动增强,因此可使肌张力增加。
(二)观察胆碱能受体激动剂对肠断收缩的影响在浴槽标本管中加入乙酰胆碱溶液2滴后记录到小肠平滑肌的收缩曲线如图所示实验结果:加入乙酰胆碱后可观察到离体肠段的收缩活动大大增强,收缩频率加快和幅度增加,基线上移。
实验分析:产生上述现象与小肠平滑肌细胞膜上钙离子内流有关,乙酰胆碱可与细胞膜上的M受体结合使得两类钙通道开放,即电位敏感性钙离子专用通道和特异性受体活化钙离子专用通道,前者对乙酰胆碱敏感,后者对乙酰胆碱相对不敏感。
两类通道开放都可使得肌浆中钙离子浓度升高,进而发生钙离子与钙调蛋白结合→肌球蛋白激酶活化→A TP分解释放能量→横桥获能处于高自由能→横桥获能处于高自由能→横桥牵动细肌丝滑动→平滑肌收缩,肌张力增强。
在浴槽中加入2~4滴阿托品后再加入2滴乙酰胆碱记录到小肠平滑肌的收缩曲线如图所示。
结果:加入阿托品后理论上收缩曲线应该不变,可能是由于台氏液并未完全更换,加入阿托品之前小肠活动没有恢复稳定所致。
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实验五离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察
【实验目的】
学习一种离体组织器官实验方法;观察离子成分、酸碱度、温度、乙酰胆碱、去甲肾上腺素对离体家兔小肠平滑肌的作用;分析平滑肌活动的某些生理特性及理化环境改变对它的影响。
【实验原理】
消化道平滑肌具有自动节律性、较大的伸展性,对化学物质、温度及牵刺激较为敏感等生理特性。
【实验材料】
实验动物:家兔,2.0-2.5kg
实验药品:台式液、0.01%去甲肾上腺素溶液、0.01%乙酰胆碱溶液、0.01%阿托品溶液、1.0%氯化钙溶液、1mol/l盐酸溶液、1mol/l氢氧化钠溶液。
实验器材:恒温平滑肌槽、小烧杯、污物杯、力换能器、双凹夹、温度计、BL-420生物信号系统、丝线等。
【实验步骤】
1.恒温浴槽的准备工作;
2.标本制备;
3.仪器连接与设置;
4.启动计算机,打开BL-420生物信号系统,调节参数,开始记录。
观察项目
1.自动节律性收缩,描记一段离体小肠平滑肌的收缩曲线,观察其节律性
收缩及力水平。
2.观察胆碱能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。
(1)乙酰胆碱的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的乙酰胆碱溶液1~2滴,观察肠管力和收缩有何变化。
作用产生后,洗涤三次,进行
下一项实验。
(2)阿托品的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的阿托品溶液2~3滴,
两分钟后,再加入0.01%的乙酰胆碱溶液1~2滴,观察肠管力和收缩有
何变化。
与(1)比较结果后,洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项
实验。
3.观察肾上腺素能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。
去甲肾上腺素的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的去甲肾上腺素2~3
滴,观察肠管力和收缩有何变化。
然后洗涤三次,待其活动稳定后,进
行下一项实验。
4.观察钙离子对肠断收缩的影响
向浴槽标本管中加入1%的氯化钙溶液2~3滴,观察肠管平滑肌的反应。
然后洗涤三次,待其活动稳定后,进行下一项实验。
5.观察酸碱度对肠断收缩的影响
向浴槽标本管中加入1mol/l的盐酸溶液1~2滴,观察平滑肌的反应,待作用出现明显后,在此基础上,加入1mol/l的NaOH溶液1~2滴,观察平滑肌的反应。
【实验结果】
1.乙酰胆碱对肠断收缩的影响:小肠平滑肌收缩活动加强。
2.阿托品和乙酰胆碱对肠断收缩的影响:小肠平滑肌收缩活动不受影响。
3.去甲肾上腺素对肠断收缩的影响:小肠平滑肌收缩活动减弱。
4.钙离子对肠断收缩的影响:小肠平滑肌收缩活动加强。
5.酸碱度对肠断收缩的影响:小肠平滑肌收缩活动先减弱后恢复。
【注意事项】
1.肠管勿牵拉过紧或过松,且连线必须垂直 ,且不得与浴槽的管壁等接触,以
免摩擦。
2.浴槽中的液体的量应以高过肠断为准,并保持液面高度一致。
3.药物应滴在肠管附近,药物作用若不明显,可以不加药物,但不可一次过多。
4.每次加药出现反应后,应必须立即更换浴槽的台式液至少三次,待肠管恢复
稳定活动后,再观察下一个项目。
【实验思考】
1.哺乳动物离体器官或组织在灌流液中保持良好状态应具备的条件?
温度:本实验控制恒定温度37度;湿度:要时刻记住用相应的润湿液润湿,本次试验用哺乳动物的台氏液;PH:要与哺乳动物体液相似;避免不必要的刺激:不要用手或者是金属触碰;离子成分与浓度:要与相关的动物体液相似,本实验是台氏液。
2.每一项实验结果的分析及原因解释:
①滴加乙酰胆碱后小肠平滑肌收缩明显增强,这是因为乙酰胆碱与小肠平滑肌肌膜上的M受体结合后,可以在膜去极化未达到一定的电位时提前激活更多的慢钙通道,使大量的钙离子流,进而使动作电位产生的频率增加,所以小肠的平滑肌收缩增强;②先加阿托品再加乙酰胆碱后对小肠平滑肌的收缩不影响。
因为阿托品是乙酰胆碱的抑制剂,故先加阿托品再加乙酰胆碱,乙酰胆碱对小肠平滑肌的收缩不影响;③加入去甲肾上腺素后,可见离体肠管活动减弱,去甲肾上腺素,
主要有α和β肾上腺素能受体,去甲肾上腺素与β2肾上腺素受体结合占优势,引起平滑肌的舒,故平滑肌收缩活动减弱。
④加入CaCl2后,离体肠管活动增强。
这是因为加入氯化钙后,细胞外液Ca2+浓度升高,则Ca2+流增加,使得细胞液中Ca2+浓度升高,Ca2+与钙调蛋白结合增加,促进了横桥的激活,因而收缩力增加。
⑤滴加盐酸后小肠平滑肌收缩明显减弱,因为加入盐酸后,小肠所处环境的氢离子浓度升高,氢离子可以影响慢钙通道的开放,是钙离子流减少,进而影响动作电位产生的频率,另外氢离子能与钙离子竞争钙调蛋白结合的位点,使肌凝蛋白ATP酶活性下降、和肌丝滑行的生化过程,以小肠的平滑肌收缩显著减弱。
几秒后加入氢氧化钠后中和了氢离子,使小肠所处的环境恢复正常,所以其收缩慢慢趋于正常。
3.维持哺乳动物离体小肠平滑肌活动和维持离体蛙心活动所需的条件的不同:心脏使用的是任氏液,而小肠使用的是台式液,心脏可以直接暴露在空气中,而小肠需要浸泡再台式液中,心脏可以在普通室温下进行实验,而小肠需要在接近37℃的水温下且要不断通气才有较为强烈的收缩活动。
4.钙离子在平滑肌收缩中起的作用:
当平滑肌细胞受刺激而兴奋时,钙离子由膜外进入膜,并在胞基质一种磷酸激酶的作用下,使肌凝蛋白磷酸化,从而诱发肌浆网中的钙离子进一步释放,肌钙蛋白分子的C亚单位与钙离子结合,导致肌凝蛋白和肌动蛋白相结合,造成平滑肌收缩。
5.去甲肾上腺素、乙酰胆碱对小肠平滑肌和心肌的作用的不同:
去甲肾上腺素对心肌的作用是正性的变时、变力、变传导作用,对小肠平滑肌的作用是减弱小肠平滑肌的活动;乙酰胆碱对心肌是负性的变时、变力、变传导作用,对小肠平滑肌则是加强平滑肌的活动。