实验五真菌标本采集与制作

实验五、真菌标本采集与制作（

腐生菌、寄生菌和共生菌的认识）

一、实验目的

1、了解和掌握腐生菌、寄生菌和共生菌的生活习性和采集、保存方式

2、掌握真菌标本的采集和保存方式

二、实验材料

1、植物病原真菌干标本

2、大型真菌干标本

3、大型真菌浸渍标本

三、实验内容

1．真菌的分布

根据真菌生境和生活方式不同可将其分为：

（1）水生真菌：

在水中腐生于动植物尸体上，有的寄生于动植物上，危害水中动物，如水蕾属（Saprolegnia）。

（2）地生真菌：

这类真菌的种类较多，生活环境不同，庭院、公园、草原等地都可生长。

（3）木生真菌：

有的寄生于活立木上，危害林中树木，形成森林病害；有的腐生于枯立木、倒木或伐木桩上，有利于清除林中垃圾，成为“林中清道夫”。

（4）病害真菌：

这类真菌寄生于人、动物及各种农作物体上，使人、动物及农作物患病。

（5）共生真菌：

真菌与藻类共生形成地衣；密环菌和天麻共生；接合菌、伞菌、担子菌与高等植物形成菌根。

2．真菌标本的采集制作

（1）采集用具

平底背筐，平底手提筐，纸盒若干个（或铝盒、小指管若干个，塑料袋若干个），木箱1～2个，液浸标本筒1～2个，掘根器，刨根器，手锯，短刀，刀片，白纸，纱布，号牌，线或细绳，钢卷尺，湿度计，温度计，pH试纸，测高计等。

（2）采集方法

空气、土壤或动植物体上的真菌多属于霉菌，采集这类真菌常用分离或纯培养方法得到。而伞菌、多孔菌、盘菌、锈菌、黑粉菌、银耳等各种真菌的采集方法如下：

①地生真菌采集：

采集时用手轻轻捏住菌柄基部，缓慢将菌体旋转一周，然后拔出，尽量带出地下部分，抖掉泥土。采集时注意保持菌体的完整性，不要损伤各部，以免给鉴定带来困难。有些菌类的菌柄在土中埋的很深，需用刀或掘根器挖出来。有些伞菌柄的基部，盘菌和腹菌基部，有菌索伸入土中，注意一起采取。

②木生真菌采集：

可用短刨根器和手锯采取，尽可能将基物一小部分和标本一起采下。枯枝上的标本可用剪枝剪采取。

为使标本不受损伤，采集时须做临时处理，采集肉质、蜡质、胶质标本，可放入漏斗形纸袋中（用光滑白纸，按标本大小，现用现做），菌柄向下，放入号牌，包好后放入纸盒中。如脆弱或珍贵的标本，可直接放入盒中，四周用

洁净的植物填充，以免磨伤标本。如采到寄生菌时，须将寄主一起采取，一起放入盒中。小型菌类，如虫草等，直接放入指管内。木质、木栓质、革质标本，可直接分种装入塑料袋内，每种标本袋内要装入号牌。

（3）标本制作

野外采集的标本要当天整理，先把标本分为四类。第一类是肉质、脆弱、含水多、速腐性、易变色、盖面粘或小型标本；第二类是肉厚、致密、坚实、含水少、慢腐性标本；第三类是一年生多孔菌科的革质、半革质、纤维质不易腐性标本；第四类是木质、木栓质的多孔菌标本。标本分好类后，根据标本质地决定其处理、制作和保存方法。真菌标本的制作分为外形和剖面、孢子印制取、干标本和浸制标本四类。

①外形和剖面标本制作：

该方法适用于肉质标本，具体制法如下：

首先取一张稍厚白纸，在纸上涂一层15%的动物胶液，使其干燥。然后将标本纵切为两半，将其中一半菌伞和菌柄内的菌肉挖掉，另一半沿纵轴切成薄片，该薄片应完整的表示出真菌的各部。再将薄片放在涂有动物胶的纸上，上面覆盖纱布，然后压制。使切成薄片的标本粘贴在纸上，干燥后不卷缩。当薄片完全干后，再贴在台纸上。如果是寄生菌，将寄主的部分植物体，经过压制，干后贴在台纸上。

②孢子印制作法：

能做孢子印的菌类，大多属于担子菌。当担子果成熟菌伞张开时，担孢子从菌褶上散落下来，用特备的纸接取，称粘在纸上的孢子为孢子印。由于孢子形态、颜色、菌盖大小、菌褶密度不同，孢子印也不同。所以，孢子印是标本鉴定的依据之一。

制取孢子印时，先用铁丝制成比菌盖稍大的圆圈，铁丝一端弯向圆圈中央，其末端在中央向上弯曲成短柱状；其次备制接取孢子印纸，即将稍厚的白纸涂上15%的动物胶或蛋清，待干后即可使用。

整理标本时，选出制取孢子印的标本。注意选择菌伞已开、但不过熟、菌体完整的标本为好。用刀片将菌柄齐菌盖处切掉，然后将铁丝伸向中央的短柱，插在菌盖中央，菌褶向下。取备好的孢子纸印，放在干净无风处铺平，再将被支起的菌盖连铁丝一起放在涂有动物胶的白纸上。最好罩以玻璃罩，无玻璃罩时，可用纸套在铁丝装置外，以免落入灰尘或吹散孢子。4～24h后，成熟的孢子即可粘贴在白纸上。

③干制标本：

木质、木栓质、革质、半肉质及其它含水较少、不易腐烂的菌类均可制成干标本。即将标本放在通风处风干或放在日光下晒干。标本干后放入纸盒内，加上樟脑粉，以防潮和防除害虫。标本盒上要贴标签，以便查找。寄生或病害标本，可用蜡叶标本的压制方法制作。

④浸制标本：

浸制标本的优点是能保持标本原形，节省时间，便于鉴定。缺点是容易褪色。野外采集大量标本，临时处理，一般用5%甲醛液浸泡即可。长期保存需要换防腐剂。常用的防腐剂有：

凡色淡的标本，如白色、灰色、淡黄色、淡褐色标本等，可用下列配方：

配方1：50%甲醛液30ml

80%酒精70ml

配方2：甲醛10ml

硫酸锌

2.5g

水2000ml

凡颜色深的标本，为保持原色，可放入下述溶液中浸泡：

A液：2%～10%硫酸铜水溶液

B液：

无水硫酸钠21g，浓硫酸1ml，先溶于10ml水中，再加1000ml水。

先将标本放入A液中浸泡24h，取出再用清水浸洗24h后，转入B液中，密封保存。

保留用以制片的标本，常用固定剂为FAA固定液，既起固定作用，又可长期保存。固定时间为18～24h

作业：

采集真菌标本

伞菌制作为水渍标本