动物细胞工程2

动物细胞工程 2一、单选题1．下图是一种“生物导弹”的作用原理示意图，没有与肿瘤细胞结合的“生物导弹”一段时间后被机体清除。

阿霉素是一种抗肿瘤药，可抑制DNA和RNA的合成，对正常细胞也有一定毒性。

下列说法不正确的是A．单克隆抗体是由杂交瘤细胞合成和分泌的B．活化阿霉素能抑制细胞中的DNA复制和转录过程C．在治疗中，应先注射非活化磷酸阿霉素再注射生物导弹D．单克隆抗体特异性强，能减轻阿霉素对正常细胞的伤害2．下列有关生物工程描述不正确的有①依据植物体细胞的全能性，可利用花药离体培养获得单倍体幼苗②依据基因重组原理，可利用茎尖进行组织培养获得脱毒苗③依据基因突变原理，可利用射线处理愈伤组织获得作物新品种④制备单抗时先利用特定的抗原蛋白饲喂小鼠，再从小鼠脾脏中分离B淋巴细胞⑤制备单抗时为避免病毒感染，应用聚乙二醇诱导骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合⑥体外培养杂交瘤细胞需要在培养液中添加动物血清和抗生素⑦制备单抗时经过选择培养基初次筛选的杂交瘤细胞即可进行体内或体外培养A．三项B．四项C．五项D．六项3．去年12月，上海发现了H7N9病毒感染者，用该病毒的核衣壳蛋白为抗原，采用细胞工程制备单克隆抗体。

下列叙述正确的是A．用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体B．体外培养单个效应B细胞可以获得大量针对H7N9病毒的单克隆抗体C．将等量效应B细胞和骨髓瘤细胞混合，经诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞D．利用该单克隆抗体与H7N9病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断该病毒感染者4．某实验室做了下图所示的实验研究。

下列相关叙述，不正确的是A．经过程①形成诱导干细胞，提高了细胞的全能性B．过程②是诱导干细胞结构和遗传物质发生稳定性差异的过程C．每个Y细胞只产生一种抗体，过程③需用选择培养基进行筛选D．过程④产生的单抗在排出细胞时不需细胞膜上的载体蛋白协助5．将携带抗P基因、不带抗Q基因的鼠细胞去除细胞核后，与携带抗Q基因、不带抗P基因的鼠细胞融合，获得的胞质杂种细胞具有P、Q两种抗性。

该实验证明了A．抗Q基因位于细胞核中B．该胞质杂种细胞具有无限增殖能力C．抗P基因位于细胞质中D．该胞质杂种细胞具有全能性二、多选题6．犬细小病毒(CPV)单克隆抗体(Cpv McAb)可抑制病毒对宿主细胞的侵染及病毒的复制，进而杀灭幼犬体内病毒。

下列相关叙述，正确的是A．在Cpv McAb的制备过程中用到了动物细胞培养和动物细胞融合技术B．给幼犬注射CPV后，CPV的抗体检测呈阳性，说明发生了体液免疫反应C．在获得能分泌Cpv McAb的杂交瘤细胞的过程中需进行一次筛选D．对杂交细胞培养时，需要无菌无毒环境，且温度、气体环境等条件要适宜7．下列关于细胞工程的有关叙述，正确的是A．利用花药离体培养得到单倍体植株，从紫草的愈伤组织中提取紫草素，利用细胞工程培育“番茄-马铃薯”杂种植株，都利用了植物组织培养技术，而利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗得到多倍体植株没有采用植物组织培养技术B．在进行组织培养时，由根尖细胞形成愈伤组织的过程中，可能会发生细胞脱分化，染色体变异或基因突变，而不可能发生细胞分化和基因重组C．动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，诱导融合的方法，所用的技术手段，所依据的原理均相同，都能形成杂种细胞和杂种个体D．单克隆抗体的制备采用了动物细胞融合技术和动物细胞培养技术8．如图为某哺乳动物生殖过程示意图（b为卵细胞）。

下列相关叙述中正确的是A．动物个体①②的产生分别属于有性生殖和无性生殖B．动物个体②的产生表明，动物细胞核也具有全能性C．按照动物个体②的产生方式，后代的性别比例仍为1:1D．图中a、b、c三种细胞的产生方式，仅c为有丝分裂三、非选择题9．2018年《细胞》期刊报道，中国科学家率先成功地应用体细胞对非人灵长类动物进行克隆，获得两只克隆猴——“中中”和“华华”。

回答下列问题：（1）“中中”和“华华”的获得涉及核移植过程，核移植是指_____________。

通过核移植方法获得的克隆猴，与核供体相比，克隆猴体细胞的染色体数目_______（填“减半”“加倍”或“不变”）（2）哺乳动物的核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植，胚胎细胞核移植获得克隆动物的难度____（填“大于”或“小于”）体细胞核移植，其原因是________________。

（3）在哺乳动物核移植的过程中，若分别以雌性个体和雄性个体的体细胞作为核供体，通常，所得到的两个克隆动物体细胞的常染色体数目____________（填“相同”或“不相同”），性染色体组合____________（填“相同”或“不同”）。

10．研究表明，HER2／neu是一种原癌基因，它表达的H蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达。

抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长，目前已成为有效的生物治疗手段。

（1）原癌基因的作用是____________________。

（2）H蛋白是一个跨膜蛋白，结构如图所示。

制备免疫小鼠用的H蛋白（抗原）时，应构建胞外区基因，转入原核细胞表达并提纯。

选择胞外区的原因是________________。

为了扩增出大最胞外区需要用到PCR技术。

常规PCR技术一般包括变性、退火、延伸等步骤，退火的目的是_______________。

设计引物是PCR技术的关键步骤之一，某同学设计的两组引物如下表所示。

_________（填“引物对A”或“引物对B”）设计不合理，并说出不合理的理由：___________________________________________。

（3）制备抗H蛋白单克隆抗体时，需将H蛋白注射到小鼠体内。

这样做的目的是_______________________制备抗H蛋白单克隆抗体时，需要用到细胞融合技术，该技术的主要优点是________________________。

（4）治疗乳腺癌时，方法之一是单独使用抗H蛋白单克隆抗体，试写出治疗乳腺癌的另一种方法_________________________________。

11．癌胚抗原（CEA）是某些癌细胞表面产生的一种糖蛋白，临床上通过制备CEA的单克隆抗体来诊断癌症。

回答下列问题。

(1)一般不直接用单个的B淋巴细胞培养形成细胞群的办法来生产单克隆抗体。

原因是____________。

(2)制备CEA的单克隆抗体时，给小鼠注射的CEA相当于_______，能使小鼠产生免疫反应。

(3)杂交瘤细胞的扩大培养，既可在体外培养，也可注射到小鼠_______内培养。

体内培养与体外培养相比，其优点是_________________________________________________。

(4)已知小鼠正常细胞中合成DNA有D和S两种途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。

而小鼠骨髓瘤细胞中没有S途径，只有D途径。

将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞在试管中混合，加聚乙二醇促融，获得融合细胞（一般只考虑细胞两两融合），经过多次筛选后生产单克隆抗体。

请回答：①试管中除融合的杂种细胞外，还有______种融合细胞。

②某同学设计了一种方法，尝试从培养液中分离出杂种细胞。

方法：用______________的培养液培养融合细胞，收集能增殖的细胞。

原理：_______________________12．资料1:小鼠制备的抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体做成的“早早孕试剂盒”，检测早孕的准确率在90%以上。

资料2:葡萄糖异构酶在工业上应用广泛，为提高其热稳定性，朱国萍等人在确定第138位甘氨酸为目标氨基酸后，用有效方法以脯氨酸替代甘氨酸，结果其最适反应温度提高了10—12℃，使蛋白质空间结构更具刚性。

资料3:巴西是全球最大的甘蔗生产国，但是甘蔗易受螟虫的侵害。

2017年6月8日，巴西向世界宣布，全球首款能抵抗螟虫的转基因甘蔗已培育成功，并且批准该品种进入市场。

（1）资料1中，在该“单抗”的生产过程中，将_________________作为抗原对小鼠进行接种后，从脾脏中提取B淋巴细胞，并设法将其与鼠的骨髓瘤细胞融合，再用特定的选择培养基进行筛选，选出融合的杂种细胞，对该细胞还需进行克隆化培养和_________检测，经多次筛选，就可获得足够数量的符合需要的_________________。

（2）资料2中提到的生物技术属于____工程的范畴。

在该实例中，直接需要操作的_________________(选填“肽链结构”、“蛋白质空间结构”、“基因结构”)。

（3）资料3中获得转基因甘蔗的过程中，核心步骤是________________________，为了避免目的基因和运载体的自身连接成环和反向连接，应该采取的措施是___。

13．埃博拉病毒（EBO）呈纤维状，EBO衣壳外有包膜，包膜上有5种蛋白棘突（VP 系列蛋白和GP蛋白），其中GP蛋白最为关键，能被宿主细胞强烈识别。

请回答下列问题：（1）基因疫苗指的是DNA疫苗，要获得编码GP蛋白抗原的基因疫苗，首先要提取出病原的RNA，并将RNA____________形成DNA。

要大量获得表达特异抗原的基因，可采用____________进行扩增。

（2）以GP蛋白作为疫苗比基因疫苗更安全，其原因是GP蛋白自身没有感染力，但保留有__________。

为了从牛分泌的乳汁中生产GP蛋白，在基因导入牛的___________（受体细胞）前，基因的首端必须含有使其特异性表达的__________________，才能驱动转录过程，这种通过分泌乳汁来生产所需要的药品的转基因动物称为____________。

转基因牛是否培育成功，可以通过_____________技术从分子水平进行检测。

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