海水—无机磷的测定—磷钼蓝萃取分光光度法

FHZDZHS0067 海水无机磷的测定磷钼蓝萃取分光光度法

F-HZ-DZ-HS-0067

海水—无机磷的测定—磷钼蓝萃取分光光度法

1 范围

本方法适用于海水中活性磷酸盐的测定。

2 原理

在酸性介质中，活性磷酸盐与钼酸铵反应生成磷钼黄，以抗坏血酸还原为磷钼蓝，用醇类有机溶剂萃取，于波长700nm处测定吸光度。

硫化物含量大于1mg/L时，对本法有明显的影响，此时，在水样酸化后，通氮气10min，将硫化氢驱除，可消除干扰。

砷酸盐含量大于0.5mg/L时，对本法有明显影响。通常海水中砷含量约0.003mg/L，其影响可忽略不计。

硅酸盐含量大于 1.4mg/L时，对本法有影响。河口水和大洋深层水中硅酸盐含量常大于1.4mg/L，应进行校正。

3 试剂

除非另作说明，本法所用试剂均为分析纯，水为二次蒸馏水或等效纯水。

3.1 正已醇[CH3(CH2)5OH]。

3.2 无水乙醇(C2H5OH)。

3.3 硫酸溶液，1+2。

3.4 钼酸铵溶液：溶解28g钼酸铵[(NH4)6Mo7O24·4H2O]于200mL水中。溶液变混浊时，应重配。

3.5 酒石酸锑钾溶液：溶解6g酒石酸锑钾(C4H4KO7Sb·1/2H2O)于200mL水中，贮存于聚乙烯瓶中，溶液变混浊时，应重配。

3.6 混合溶液：搅拌下将45mL钼酸铵溶液加到200mL硫酸（1+2）中，加入5mL酒石酸锑钾溶液，贮存于棕色玻璃瓶中，溶液变混浊时，应重配。

3.7 抗坏血酸溶液：溶解20g抗坏血酸(C6H8O6)于200mL水中，贮于棕色试剂瓶或聚乙烯瓶。在4℃避光保存，可稳定一个月。

3.8 磷酸盐标准溶液

3.8.1 磷酸盐标准贮备溶液，0.300mg/mL-p：称取1.3181g磷酸二氢钾(KH2PO4，光谱纯，预先在110℃～115℃烘1h～2h，置于干燥器中冷却至室温)溶于10mL硫酸（1+2）中，移入1000mL 容量瓶，用水稀释至刻度，摇匀。加1mL三氯甲烷（CHCl3）。此溶液1.00mL含0.300mg磷。

3.8.2 磷酸盐标准使用溶液，3.00μg/mL-P∶移取1.00mL磷酸盐标准贮备溶液（300μg/mL）于100mL容量瓶中，加水并稀释至刻度，摇匀。加两滴三氯甲烷（CHCl3）。此溶液1.00mL含3.00μg磷。有效期为一周。

4 仪器设备

4.1 分光光度计。

5 试样制备

5.1 海水样品用玻璃，塑料或金属采样器采集。水样采集后应马上用0.45μm 滤膜过滤，过滤水样的微孔滤膜要预先用0.5mol/L 盐酸浸泡12h ，再用纯水洗至中性后使用，水样过滤后应立即测定，若不能立即测定.应置于冰箱中保存，但也应在48h 内测定完毕。详见GB17378.3—1998。

5.2 试样量

测定水样用量250mL 。

6 操作步骤

6.1 工作曲线的绘制

6.1.1 取5个500mL 锥形分液漏斗，加入250mL 水，分别移入0、0.25、0.50、1.00、2.00mL 磷酸盐标准使用溶液（3.00μg/mL-P ），混匀。此标准系列各点的浓度为0、3.00、6.00、12.0、24.0μg/L-P 。

6.1.2 加5mL 混合溶液，5mL 抗坏血酸溶液，混匀。放置10min ，加入25.0mL 正已醇，振荡2min ，静置10min ，弃去水相，把有机相放入25mL 具塞比色管中，加1.0mL 无水乙醇，混匀。放置5min 。

将萃取液倒入5cm 吸收皿中，以正已醇作参比，于波长700nm 处测定吸光度A i 和A o （标准空白）。

6.1.3 以吸光度(A i －A o )为纵坐标，相应的磷酸盐浓度(μg/L-P)为横坐标，绘制标准曲线。

6.2 水样测定

6.2.1 量取250mL 经0.45μm 滤膜过滤的海水样，置于500mL 锥形分液漏斗中，按第6.1.2各操作步骤测定水样吸光度A W 。

6.2.2 同时量取250mL 二次蒸馏水或等效纯水于500mL 锥形分液漏斗中，按第6.1.2各操作步骤测定空白吸光度A b 。

7 结果计算

由(A w －A b )值查标准曲线或用线性回归方程计算得水样中活性磷酸盐浓度（μg/L-P ）：

()()b a A A L g b w p −−=

/µρ (1)

式（1）中： ρp —水样中活性磷酸盐浓度，（μg/L-P ）；

A w —水样吸光度；

A b —空白吸光度；

a —标准曲线截距；

b —标准曲线斜率。

当水样中硅酸盐含量大于 1.4mg/L-si 时，应进行校正。首先由公式（2）求出硅酸盐增加

的吸光度A si：

A si=F si×ρsi (2)

式（2）中：

F si—用本方法测定硅酸盐工作曲线的斜率；

ρsi—水样中硅酸浓度，mg/L-si。

然后，由（A w－A b－A si）值从测定活性磷酸的标准曲线上查得水样中磷的浓度（μg/L）。

8 精密度和准确度

3个实验室测定同一天然海水加标样品。相对误差：1.8%。重复性（r）：0.15μg/L，重复性相对标准偏差：2.1%；再现性(R)：0.13μg/L，再现性相对标准偏差：2.4%。

9 参考文献

[1] GB17378.4—1998 中华人民共和国国家标准海洋监测规范第4部分：海水分析[S]. 北

京：中国标准出版社. 1999，161—162.