尿中肌酐的测定
肌酐成人标准
肌酐分为尿肌酐和血肌酐,以下是两者的成人标准:
1. 尿肌酐:成人男性正常值为7000-17000μmol/L,女性正常值为5000-15000μmol/L。
2. 血肌酐:男性正常值为53-106μmol/L,女性正常值为44-97μmol/L。
需要注意的是,正常人肌酐波动较大,如过量食用肉类、剧烈运动等情况下,均会有肌酐大幅度升高。
如果肌酐稍微高于正常值也不要太担心,通过低蛋白饮食,避免剧烈运动后,肌酐可能恢复正常。
此外,肾脏疾病早期肾小球滤过率轻度降低时肾功能可代偿,血肌酐可以在正常的范围,一旦出现血肌酐明显升高,通常提示肾脏受损达1/3左右。
应及时到正规医院就诊,根据血肌酐浓度的水平判断肾脏受损的程度,及早开始正规治疗,避免因延误诊治导致尿毒症的发生。
以上信息仅供参考,具体数值可能因不同的检测方法和设备而有所差异,如有需要建议咨询专业医生。
尿肌酐 干化学法
尿肌酐干化学法
尿肌酐是指尿液中的肌酐含量,通常是通过干化学法来测定。
干化学法是一种简单、快速、准确的尿液分析方法,它可以在不需要使用化学试剂和设备的情况下,通过对尿液中的化学成分进行检测,来确定尿液中肌酐的含量。
干化学法的原理是,尿液中的肌酐可以与某些化学试剂发生反应,生成一些颜色变化明显的化合物。
这些化合物的颜色变化可以通过肉眼观察或使用比色计来测定。
常用的干化学法试剂包括:
1. 二苯胺:将尿液与二苯胺混合,如果尿液中含有肌酐,则会生成深紫色的化合物。
2. 甲基红:将尿液与甲基红混合,如果尿液中含有肌酐,则会生成红色的化合物。
3. 溴酚蓝:将尿液与溴酚蓝混合,如果尿液中含有肌酐,则会生成蓝色的化合物。
干化学法的优点是简单易行,不需要使用昂贵的化学试剂和设备,同时可以快速得到结果。
但是,它的准确性和精度相对较低,容易受到环境因素和操作误差的影响。
因此,在进行尿液分析时,需要结合其他分析方法来确定结果的准确性。
苦味酸分光光度法测定尿肌酐的方法改良及成效
广东化工2019年第11期·194·第46卷总第397期苦味酸分光光度法测定尿肌酐的方法改良及成效李燕飞(贺州市疾病预防控制中心,广西贺州542899)Improvement and Effectiveness of Determination of Urocreatinine by Picric AcidDpectrophotometryLi Yanfei(Hezhou Center for Disease Control and Prevention,Hezhou542899,CHina)Abstract:Improvement of Urine-Determination of creatinine-Spectrophotometric method(WS/T97-1996),strictly control the operation time,to overcome the objective problems in experiments,expand the linear range,increase the precision and accuracy of the experiment,and achieve the purpose of improving the detection quality and efficiency.Keywords:urine creatinine;picric acid spectrophotometry;improvement;linearity;precision;accuracy肌酐主要是体内的肌肉代谢产物,也就是蛋白质的代谢产物,主要是经过肾脏排出体外,如果肾脏功能出现异常,尿中的肌酐会减少。
由于肾脏不断造成损伤,其排泄废物的功能有所降低,就造成了肌酐等毒素在体内的聚集,从而出现血肌酐、尿素氮升高,尿肌酐下降,双肾滤过率下降等。
尿肌酐测定方法
尿肌酐测定方法
尿肌酐是一种常用的尿液指标,用于评估肾脏功能。
以下是常用的尿肌酐测定方法:
1. Jaffe法:这是目前最常用的尿肌酐测定方法。
该方法利用
酚与尿液中的肌酐在碱性条件下发生黄色酚酞反应,测量反应产生的黄色产物的吸光度。
由于该方法受到其他物质(如尿酸、葡萄糖等)的干扰,因此必须进行相应的校正。
2. 酶法:这种方法利用肌酸酐氨酸酶(creatinine amidohydrolase)催化反应,将尿液中的肌酐转化为肌酸和氨,通过测量反应中产生的氨量来确定肌酐浓度。
该方法对于尿液中的其他物质干扰较少,但在实验室条件下操作较为复杂。
3. 离子选择电极法:这是一种较为现代化的测定方法,利用离子选择电极对尿中的肌酐进行检测。
该方法操作简便,结果准确可靠。
以上是几种常用的尿肌酐测定方法,每种方法都有其特点和适用范围。
选择合适的方法需根据实验室的设备和研究需求来确定。
在进行尿肌酐测定前,建议咨询专业医生或实验室技术人员的意见。
尿肌酐测定值参考范
尿肌酐测定值参考
尿肌酐是衡量肾脏功能的一个指标,通常通过测定尿液中的肌酐浓度来评估肾脏的滤过功能。
尿肌酐测定值的正常范围可能会因实验室的测定方法和设备而略有差异。
一般来说,正常尿肌酐浓度的参考范围约为 30 到 300 毫克/升(mg/L)。
需要注意的是,尿肌酐浓度受到多种因素的影响,包括个体的年龄、性别、体重和肌肉质量等。
此外,尿液的稀释程度也可能影响尿肌酐的测定结果。
尿肌酐测定通常与血清肌酐测定一起使用,以更全面地评估肾脏功能。
如果有疑虑或需要详细的肾脏功能评估,建议咨询医生进行进一步的检查和诊断。
医生会根据具体情况,结合其他临床信息来综合判断肾脏健康状况。
液相色谱法测定尿中肌酐含量
液相色谱法测定尿中肌酐含量标签:液相色谱;尿肌酐测定肌酐(C4H7N3O)是肌肉在人体内代谢的产物,主要从尿液中排出。
职业卫生对生物材料尿液的监测中,生物限值大都使用肌酐较正,因此,肌酐含量测定的准确性直接影响生物监测指标的准确性。
肌酐的检测方法多为临床检验方法,在职业卫生监测中,尿中肌酐的测定有两种方法,一种是分光光度法,一种是液相色谱法。
分光光度法要用到苦味酸,属易爆物品。
本实验室选用液相色谱法对尿中肌酐进行测定,操作简单,灵敏度高,影响因素少,结果准确。
1材料与方法1.1仪器美国DIONEX高效液相色谱仪(P680高效液相泵,UVD 170U紫外检测器,ASI-100自动进样器,TCC-100柱温箱);变色龙色谱工作站;超声波清洗仪;旋涡混合器等。
1.2试剂肌酐纯度>99.0%;甲醇(进口液相色谱纯);乙酸钠(分析纯),配制成0.05 mol/L的溶液;0.45 μm滤膜等。
1.3色谱条件色谱柱:Agilent Zorbax Extend-C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)柱;流动相:甲醇-0.05 mol/L乙酸钠,比例(5+95),流速0.9 ml/min;柱温:30 ℃;检测器:紫外检测器,波长254 nm;进样量:10 μl。
1.4分析步骤1.4.1试样测定取0.05 ml尿样,用流动相稀释至10 ml,即200倍稀释,旋涡混合器上混合1 min,经0.45 μm滤膜过滤后进样10 μl,以峰面积从标准曲线中定量。
1.4.2标准曲线称取250 mg经110 ℃干燥2 h的肌酐,溶于甲醇并稀释至25 ml,配制成每毫升含10 mg肌酐的标准贮备液。
取标准贮备液,经逐步稀释成每毫升含0,2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 μg肌酐的标准系列,进样10 μl,以峰面积为纵坐标,以肌酐含量为横坐标,绘制标准曲线。
2结果2.1样品处理方法的选择取不同样品0.05 ml各三份,分別以200倍、300倍、500倍进行稀释,大部分样品200倍稀释均在标准曲线线性范围内,而且有较高的灵敏度,300倍和500倍稀释的灵敏度比200倍稀释低,故一般选用200倍稀释,当样品肌酐含量较高时,可适当增加稀释倍数。
尿肌酐的测定(精)
尿肌酐的测定
尿肌酐主要来自血液,经过肾小球过滤后随尿液排除体外,肾小管基本不吸收且排出很少。
对于肾功能不全或尿毒症患者而言,尿肌酐测定与血肌酐刚好相反,尿肌酐越高,一般说明肾脏的排除肌酐毒素功能越强,反之越差。
对于正在接受治疗的肾功能不全或尿毒症期患者
尿肌酐主要来自血液,经过肾小球过滤后随尿液排除体外,肾小管基本不吸收且排出很少。
对于肾功能不全或尿毒症患者而言,尿肌酐测定与血肌酐刚好相反,尿肌酐越高,一般说明肾脏的排除肌酐毒素功能越强,反之越差。
对于正在接受治疗的肾功能不全或尿毒症期患者,如果,尿肌酐排出增多,一般可说明,肾功能好转,病情在向好的方向发展,反之越
差。
正常值:8.4~13.25mmol/24h尿(0.7--1.5g/24小时
尿) 1.病理性增高:肢端肥大症、巨人症、消耗性疾病、伤寒和斑疹伤寒、破伤风等。
2.病理性降低:重度充血性心力衰竭、急慢性肾功能衰竭、老年患者及肌肉萎缩者。
注意:需留取24小时尿样。
高效液相色谱法直接测定尿中尿酸和肌酐
本文推荐了一种基于液相色谱分离,V3n U 24 m
检测的分析方法, 5 在 分钟内可完成对尿中尿酸和 肌酐的同时测定。尿样只需用流动相稀释后便可直 接进样, 操作简便、 干扰少, 是一种特异、 灵敏、 准确
的测定方法 。
结果与讨论 ( 流动相条件 实验结果表明, 一) 增加流动相 甲醇比例或p H值, 尿酸保留缩短, 且灵敏度略有增 加; 而增大缓冲溶液浓度则尿酸保留延长。 但这些参 数的变化对肌酐的结果影响不大。 ( 重复性 对同时含有尿酸11 1-ml 二) .9 05o / L和肌酐 17 1-m l .7 05oL的标准混合溶液重复 9 / 次测定后, 其峰高变异系数分别为17 .%和 27 .%, 同一份尿样重复 9 次测定时, 尿酸和肌酐的变异系 数分别为17 .%和36 .%。 ( 线性及检测限 在选定的实验条件下, 三) 尿 酸和肌酐的色谱峰高与被测浓度均呈良好的线性关
醇中, 检测波长24 。 5n m
制备时采用甲醇洗脱, 流速 5 l i, m/ n 压力 m 48 P, .M a操作参数如下:
制集 备方 收式
仪器和试剂
法 国 GLO I N梯度洗脱 自动分析系统 ( S 配 A PE 型屏幕显示系统,2 数据处理器,0 程 PL 60 74 序软盘和 H L C R M 紫外分光光度检测器) OOH O E , Y -1 WGC8 反相柱( 天津化学试剂二厂填料, 中科院大
ui ai ad eti w r 02 o L n r c c d n c an e e r in e .4m l ad / 03 o L r pcvl wt t ce i n o .5m l , e e i y i h o fi t f / s te h e fc s e vr tn 17 ad 6 ad r oee o aii o . ao f n 3 % t e vrs . n h c i f e 9.- 101 ad .- 15 1 ,e ei l 28 0. % 115 0. n 0 rpcv y s te .
苦味酸法测肌酐实验报告
苦味酸法测肌酐实验报告实验目的:通过苦味酸法测定尿液中肌酐的含量,了解肾功能的状况。
实验原理:苦味酸法是利用肌酐与苦味酸在酸性条件下发生化学反应,生成苦味酸肌酐,其红色产物具有可见吸收波长,利用分光光度计测定其吸光度,从而计算出尿液中肌酐的含量。
实验仪器和试剂:分光光度计、离心机、量筒、离心管、试管、吸管、移液枪、苦味酸试剂盒等。
实验步骤:1.收集早晨首次排尿的尿液样本,并进行标号。
2.将尿液离心5分钟,分离出上清液并转移到干净的试管中。
3. 使用移液枪分别取出1ml上清液,分装到两个试管中。
4.分别向两个试管中加入适量的苦味酸试剂,摇匀混合。
5.置于室温下反应15分钟。
6.使用分光光度计设置红色滤光片,将两个试管的吸光度读数记录下来。
7.根据标准曲线,计算出两个试管中肌酐的浓度。
8.比较两个试管中肌酐的浓度,并结合标准值,评估肾功能的状况。
实验结果:样本A:吸光度为0.2样本B:吸光度为0.4实验数据处理:根据标准曲线,对应吸光度0.2的肌酐浓度为10mg/dL对应吸光度0.4的肌酐浓度为20mg/dL。
样本A的肌酐浓度为10mg/dL样本B的肌酐浓度为20mg/dL。
实验结论:根据实验结果,可以得出样本B的肌酐浓度高于样本A,说明样本B 中的肌酐含量较高。
根据肌酐浓度判断,样本A的肾功能正常,而样本B 的肾功能可能存在问题。
进一步的分析还需要参考其他临床指标来评估。
实验注意事项:1.实验中使用的尿液样本需要新鲜、干净。
2.操作过程中避免交叉污染,使用吸管和试管时要小心。
3.实验中的试剂使用前需要根据说明书正确稀释。
4.操作过程中要注意安全,避免试剂溅入眼睛或皮肤。
5.所有仪器和试剂使用完毕后要进行清洗,保持实验环境整洁。
实验改进:1.在实验过程中可以增加对照组,使用已知肌酐浓度的尿液样本,以验证实验结果的准确性。
2.可以进行多次实验重复检测,以提高结果的可靠性。
3.对实验过程中的操作细节和操作顺序进行反复检查和核实,确保实验的精确性和可重复性。
检验科肾功能常见检测与分析方法
检验科肾功能常见检测与分析方法肾脏是人体重要的排泄器官,负责滤除体内废物和调节体液平衡。
肾功能是评估肾脏健康的重要指标,对于临床诊断和治疗具有重要意义。
本文将介绍一些常见的肾功能检测和分析方法,帮助读者了解和掌握相关知识。
一、血尿素氮测定(BUN)血尿素氮是衡量肾脏排泄功能的关键指标之一。
它是通过测定血清中尿素氮的含量来评估肾小球滤过功能的指标。
正常情况下,肾小球滤过功能好的人,血尿素氮浓度较低;而肾小球滤过功能较差的人,血尿素氮浓度较高。
因此,通过测量血尿素氮的含量,可以初步了解患者的肾脏排泄功能情况。
二、肌酐测定肌酐是一种在肌肉代谢过程中产生的废物,其浓度受到肾小球滤过和肾小管排泄的影响。
通过测定血清中肌酐的含量,可以客观地评估患者的肾脏排泄功能。
肌酐测定可以帮助医生判断患者的肾脏疾病程度,并指导临床治疗。
三、尿常规检查尿常规检查是评估肾脏功能和筛查肾脏疾病的重要手段之一。
常见的尿常规检查项目包括尿液颜色、尿比重、pH值、蛋白质、糖、酮体、潜血、白细胞等指标的测定。
通过尿常规检查,可以初步判断患者的肾小球滤过率和肾小管功能是否正常,对肾脏疾病的筛查和鉴别诊断具有重要意义。
四、肾小球滤过率测定(GFR)肾小球滤过率是评估肾脏功能最可靠的指标之一。
肾小球滤过率反映了肾脏单位时间内清除血液中的物质量,常用于评估肾小球滤过功能的强弱。
目前,常用的肾小球滤过率测定方法有C-G方法、M-G方法和54Cr-EDTA法等。
通过测定肾小球滤过率,可以更准确地了解患者的肾脏功能状况,并根据测得的数值进行相应的治疗。
五、尿肌酐清除率测定尿肌酐清除率是评估肾小管排泄功能的重要指标之一。
通过测定清晨收集的24小时尿液中肌酐的排泄量和相应时间段内血清肌酐的含量,可以计算出尿肌酐清除率,进而评估肾小管排泄功能。
尿肌酐清除率可以较准确地反映患者的肾小管功能状况,对于肾小管功能损伤的鉴别诊断具有重要意义。
六、动态肾脏显像技术动态肾脏显像技术是一种通过注射示踪剂,观察肾脏功能和血液流动情况的影像学检查方法。
尿肌酐的测定-word版
尿肌酐的测定-分光光度法
1、实验目的:掌握碱性苦味酸法测定尿肌酐的原理;熟悉实验操作步骤和分光光度计的使用;了解尿肌酐测定方法的注意事项。
2、实验原理:
肌酐与过量苦味酸在碱性条件下反应生成橙红色苦味酸肌酐。
在波长
490nm处比色定量。
3、仪器与试剂:仪器:分光光度计、乙烯塑料瓶、10mL具塞比色管
试剂:饱和苦味酸溶液(15g/L)、NaOH(100g/L)、碱性饱和苦味酸溶液(V NaOH:V苦味酸=1:10)、HCl(0.1mol/L)、肌酐标准溶液(0.1mg/mL)
4、实验步骤:
4.1 样品采集:按所接触的毒物或其代谢产物所规定的采样时间,用50mL 聚乙烯塑料瓶收集尿样,冷藏运输,4℃下可保存2周。
4.2标准曲线绘制与样品测定
5、计算
ρ
=ρ1×f
肌酐
---尿中肌酐的质量浓度,g/L
ρ
肌酐
ρ1---标准曲线上查得的HA浓度,mg/L
f ---尿液稀释倍数,2
6、注意事项
6.1在0.5h内比色完毕,如时间过久,滤液内其他物质与苦味酸起非特异性反应而影响结果。
6.2温度在15~20℃显色稳定,反应温度应控制在小于30℃。
6.3如测定管显色过深,应稀释尿液后测定,其结果乘以稀释倍数。
6.4成人尿肌酐浓度值正常范围为0.4~1.3g/L。
尿肌酐检测影响因素的探讨
检验医学与临床 2 , 0 1 2 年 1 月第 9 卷第 1 期 L a bM e dC l i n J a n u a r 0 1 2, V o l . 9, N o . 1 y2
·论 著·
2 4h 尿肌酐检测响因素的探讨
倪丽丽 , 陈 晋( 上海市同济大学附属肺科医院 2 ) 0 0 4 3 3
S h a n h a i2 0 0 4 3 3, C h i n a) U n i v e r s i t g y,
【 】 A b s t r a c t b e c t i v e oa n a l z et h e i n f l u e n c eo fd i f f e r e n tp r e s e r v a t i o nc o n d i t i o n sa n dd i f f e r e n t t e s tm e t h o d s O T y j ) U c r a n dt oi n v e s t i a t et h ea r o r i a t ep r e s e r v a t i o nc o n d i t i o na n do t i m a lt e s tm e t h o d . o n2 4hu r i n ec r e a t i n i n e( g p p p p , M e t h o d s h eu r i n es a m l e sw e r ec o l l e c t e ds i m u l t a n e o u s l a n dt h e i n i t i a l a n dp r e s e r v e dU c rw a sd e t e r m i n e du n d e r T p y , t h ec o n d i t i o n so fd i f f e r e n th o l d i n i m e s d i f f e r e n tp r e s e r v a t i v e sa n dd i f f e r e n t t e s tm e t h o d sa n dt h e i n f l u e n c eo f t h e s e gt R e s u l t s n d e r t h e r o o mt e m e r t h r e e f a c t o r so nU c rd e t e r m i n a t i o nw a ss t a t i s t i c a l l n a l z e db n e w a U p ya y yo yANOVA. , U c rh a dn os i n i f i c a n t c h a n e sd u r i n 4ha n dw a s s t e a d o i n l l t h e t i m e . Wh e n f o r m a l d e h d ew a s a d d e d i n a t u r e g g g2 y g ga y , , / t h eU c r l e v e lw a sd e c r e a s e d( P <0. 0 5) a d d i n 2 mm o l L HC La n da d u s t i n op H 4. 0 8, t h e t h eu r i n es a m l e s g1 j gt p ) , U c r l e v e l a l s ow a sd e c r e a s e d( P<0. 0 5 b u td i m e t h l b e n z e n ed i dn o t i n f l u e n c e i t . T h eU c rv a l u ed e t e r m i n e db h e y yt ) c r e a t i n i n ee n z m i cm e t h o dw a s s i n i f i c a n t l l o w e r t h a n t h a t d e t e r m i n e db t h ep i c r i c a c i dm e t h o d( P<0. 0 1 . C o n c l u y g y y h e2 4hu r i n e s a m l e c a nb ep r e s e r v e da t t h e r o o mt e m e r a t u r ew i t h o u t r e s e r v a t i v eb t h e e n z m i cm e t h o d f o r s i o nT p p p y y t h e2 4hU c rd e t e r m i n a t i o n . 【 】 ; ; ; K e o r d s 4h o u ru r i n ec r e a t i n i n e r e a t i n i n ee n z m i cm e t h o d r e s e r v a t i v e s i c r i ca c i dm e t h o d 2 p c p y yw , ) 的测定在临 床 上 主 要 用 于 评 u r i n ec r e a t i t i n e U c r 尿肌酐 ( 同时也可与血肌酐一同计算出内生肌酐 估肾小球的滤过功能 , 可以更好地 评 估 肾 小 球 的 功 能 。 要 获 得 准 确 的 结 果 , 清除率 , 首先必须留取和保存好尿液 , 由于 2 保存 4h 尿 液 留 取 时 间 长 , 困难 , 是否添加防腐剂和采用何种检测方法等多种因素都会导 致2 4hU c r检测结果的误差 。 现在 我 们 统 一 了 留 取 方 法 的 前 提下 , 就2 逐一展开探讨 。 4hU c r检测的影响因素 , 1 资料与方法 1. 1 尿液标本 随 机 选 择 2 0 0 9年1 0月至2 0 1 0年6月上海 市肺科医院住院患者留取 2 4h 尿液 3 8份。 并 1. 2 方法 在同一时 间 嘱 咐 患 者 排 尿 于 一 清 洁 塑 料 桶 中 , 混匀放置 。 根据试验设计需要 采 用 以 下 3 种 方 法 : ( 采集3 1) 8 份尿液在桶中混匀后 , 取出少 量 于 E 分别在室温( P 管中, 1 7~ 放置 2 再进行检测 。( ) 添加 防 腐 剂 。 采 集 好 2 2 8 ℃) 4h 后 , 2 4 各自于桶中分为 3 组 , 先取出少量置于 E h 尿液后 , P 管中放置 在室温下 , 3 组剩余尿液分别按 1∶5 0 比例加入 9 9% 二甲 苯 溶 液, 按 1∶2 用1 / 0 0 的比 例 加 入 4 0% 甲 醛 溶 液 , 2 mm o l L浓盐 酸调节 p 有3 有3 H 至 4. 0 8, 0份 尿 液 加 入 二 甲 苯 溶 液, 5份尿 液加入甲醛溶液 , 有3 加入防腐剂 后 3 份尿液加入浓盐酸溶液 , 放置在室温下保 的尿液混 匀 后 再 分 别 取 出 少 量 置 于 E P 管中, 存2 , 待全部尿液标本留取 完 毕 后 , 将所有的尿液在同一时 4h ) 将未加防腐剂的3 间内进行检测 。( 3 8份采用肌酐酶法和苦 对比两组检测结果 。 味酸法同时进行检测 , 防 1. 3 器材与试剂 容量为 30 0 0m L 带盖的塑料桶 , E P管, 腐剂 ( / 。将 4 0% 甲 醛 、 9 9% 二 甲 苯 溶 液 和 1 2 mm o l L 浓盐酸) 所有的尿液标本同时取出 , 充分混匀后进行 U 仪器为 c r检 测 , 肌酐酶法试剂由德国罗 H I TA CH I 7 1 7 0 s全自动生化 分 析 仪 , 氏诊断有限公 司 提 供 , 肌酐苦味酸法试剂盒由上海科华公司 提供 。 1. 4 统计学处理 使用 S P S S 1 1. 5统计软件对测定结果进行 所 有 数 据 均 建 立 数 据 库, 计 量 资 料 以 x±s 表 示 , 统计分析 ,
尿中肌酐的肌氨酸氧化酶法
尿中肌酐的肌氨酸氧化酶法1 原理尿液中的肌酐在肌酐酶的催化作用下水解生成肌酸,随后肌酸在肌酸酶的催化下水解产生肌氨酸和尿素。
肌氨酸在肌氨酸氧化酶的催化下氧化成甘氨酸、甲醛和过氧化氢,最后偶联Trinder反应形成的醌亚胺色素与肌酐的浓度成正比,可用比色测定。
2 仪器2.1尿样收集瓶,50mL。
2.2精密分析天平,感量0.01mg。
2.3生化分析仪。
2.4移液管,1mL、5mL。
2.5容量瓶,100mL。
3 试剂3.1实验用水:去离子水。
3.2肌酐检测试剂盒(肌氨酸氧化酶法):一般含有肌酸酶和肌氨酸氧化酶等反应酶和4-氨基安替比林等显色剂。
在30µmol/L~1250µmol/L线性范围内,试剂的线性相关系数应满足r ≥0.990。
3.3盐酸溶液(0.1mol/L):取4.2mL盐酸,加水稀释至500mL。
3.4肌酐(C4H7N3O),优级纯。
3.5 肌酐标准贮备溶液[ρ(C4H7N3O)=10.00g/L]:准确称取1.00g肌酐(经110℃干燥2h),室温下盐酸溶液溶解,用移液管移入100mL容量瓶中,并用盐酸溶液定容至刻度。
该贮备液置于冰箱4℃冷藏可稳定保存3个月。
3.6肌酐标准应用溶液[ρ(C4H7N3O)=1.00g/L]:将肌酐标准贮备溶液用纯水稀释至1.00g/L。
该应用液置于冰箱4℃冷藏可稳定保存1个月。
4 样品的采集、运输和保存依据《职业卫生生物监测总则》进行样品采集。
将采集后的尿液在室温下运输。
4℃条件下保存样品有效期为14d。
5 分析步骤5.1参数设置启动生化分析仪,放置肌酐检测试剂盒,按照试剂盒说明书相关规定设定反应温度、反应时间和仪器测定参数。
5.2仪器校正将肌酐标准应用溶液[ρ(C4H7N3O)=1.00g/L]按照肌酐检测试剂盒要求,用水稀释至合适倍数后,放入生化分析仪进行分析,得到稀释后肌酐测定浓度(µmol/L)。
按式(1)计算校正系数。
液相色谱法测定尿中肌酐含量
液相色谱法测定尿中肌酐含量作者:吴燕来源:《中外医学研究》2012年第03期【关键词】液相色谱;尿肌酐测定肌酐(C4H7N3O)是肌肉在人体内代谢的产物,主要从尿液中排出。
职业卫生对生物材料尿液的监测中,生物限值大都使用肌酐较正,因此,肌酐含量测定的准确性直接影响生物监测指标的准确性。
肌酐的检测方法多为临床检验方法,在职业卫生监测中,尿中肌酐的测定有两种方法,一种是分光光度法,一种是液相色谱法。
分光光度法要用到苦味酸,属易爆物品。
本实验室选用液相色谱法对尿中肌酐进行测定,操作简单,灵敏度高,影响因素少,结果准确。
1材料与方法1.1仪器美国DIONEX高效液相色谱仪(P680高效液相泵,UVD 170U紫外检测器,ASI-100自动进样器,TCC-100柱温箱);变色龙色谱工作站;超声波清洗仪;旋涡混合器等。
1.2试剂肌酐纯度>99.0%;甲醇(进口液相色谱纯);乙酸钠(分析纯),配制成0.05 mol/L的溶液;0.45 μm滤膜等。
1.3色谱条件色谱柱:Agilent Zorbax Extend-C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)柱;流动相:甲醇-0.05 mol/L乙酸钠,比例(5+95),流速0.9 ml/min;柱温:30 ℃;检测器:紫外检测器,波长254 nm;进样量:10 μl。
1.4分析步骤1.4.1试样测定取0.05 ml尿样,用流动相稀释至10 ml,即200倍稀释,旋涡混合器上混合1 min,经0.45 μm滤膜过滤后进样10 μl,以峰面积从标准曲线中定量。
1.4.2标准曲线称取250 mg经110 ℃干燥2 h的肌酐,溶于甲醇并稀释至25 ml,配制成每毫升含10 mg肌酐的标准贮备液。
取标准贮备液,经逐步稀释成每毫升含0,2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 μg肌酐的标准系列,进样10 μl,以峰面积为纵坐标,以肌酐含量为横坐标,绘制标准曲线。