氨在肝性脑病中的作用

氨在肝性脑病发病机制中的作用

（一）目的原理

1．观察血氨增高对中枢神经系统的毒性作用有哪些。

2．验证肝脏对氨具有解毒作用。

3．启发、引导同学思考血氨增高对呼吸系统及酸碱平衡的影响，并探讨三者之间的关系。培养同学应用已学过的知识进行横向联系和综合分析能力。

（二）实验材料

1．实验动物成年家兔，雌雄均可

2．实验仪器BI-420F生物机能实验系统

3．实验用药1％普鲁卡因、复方氯化铵溶液、复方谷氨酸钠溶液、生理盐水、1%醋酸。

4．器械兔固定台、搪瓷圆盆、空心塑料导管或胶管（导尿管），粗、细棉线，5、10、50m1注射器，止血钳8把、手术刀1把、剪刀1把，眼科小剪刀1把，眼科镊子1把、气管插管1个、小圆针2个、动脉夹2个

（三）实验方法

1．甲兔肝大部结扎，肠腔内注入复方氯化铵溶液。

（1）将家兔称重后仰卧固定。

（2）以1％普鲁卡因进行局部浸润麻醉，行颈部正中切口，分离气管，插入气管插管，描记呼吸。

（3）以1%普鲁卡因进行局部浸润麻醉，行上腹部正中切口，长约6-8cm。左手按压肝膈面，剪断肝与横膈之间的镰状韧带和肝脏面与胃连接的肝胃韧带（将食指与中指伸至肝脏膈面，分至镰状韧带两侧，下压肝脏，暴露出肝脏下面的镰状韧带，用手指剥离镰状韧带和肝胃韧带，使肝脏呈游离状态，注意不要伤及膈肌和肝脏），再将肝叶上翻，使肝脏的左外叶、左中叶、方形叶和右中叶(注意右中叶上附有胆囊)完全游离。然后以右手食、中指夹持粗棉线沿肝左外叶、

左中叶、方形叶和右中叶之根部绕一周，并结扎以阻

断血流。如果上述肝叶由红色变为暗褐色，证明肝脏

大部分结扎成功。由于供应右外叶及尾状叶之门脉血

管为独立分支，不会同时被结扎，因而得以保留。

（4）沿胃幽门找到十二指肠，在肠系膜对侧肠

壁表面作浆肌层荷包缝合，然后用眼科剪刀作一小切

口，将细胶管沿肠管方向插入5cm，注意：指向空肠

方向，荷包缝合结扎固定，将导管另一端移到腹腔外，

用连续缝合的方法缝合腹腔肌层，用间断缝合的方法

缝合切口皮肤，关闭腹腔。观察动物呼吸、角膜反

射、瞳孔大小、对疼痛刺激的反应性。

（5）每隔5分钟向肠腔内注人2.5％NH4Cl混合

液5ml。观察动物呼吸、角膜反射、抽搐及痉挛发生

所需的时间等变化，家兔出现全身抽搐时停止注射

NH4Cl，计算所用复方氯化铵混合液的总量和每公斤

体重的用量。

（6）自耳缘静脉推注复方谷氨酸钠溶液同时十

二指肠插管内注入1%醋酸(5ml/kg)，（观察中毒症状

是否缓解）直至症状缓解（用量约为20～30ml／kg）。

并可继续观察病情再度恶化乃至死亡之可能性，计算

症状出现后的存活时间以与乙兔相比较。

2．乙兔除不结扎肝脏和不进行实验性治疗外，

其余方法步骤同甲兔。

甲、乙兔结果进行比较

甲兔乙兔

呼吸（次/分）

角膜反射

用药致抽搐时间（分）

复方氯化铵总用量（ml）/每公斤体重的用量

复方谷氨酸钠用量（ml）

（四）注意事项

1. 本实验手术操作及观察指标较多，实验者要

明确分工各负其责，以保证前后结果的可靠性。

2. 由于动物是局部麻醉，所以在手术操作时动

作要轻柔，尽量减少家兔挣扎。尤其牵拉肝脏及胃肠

时，动作宜轻柔，避免过度刺激。

3. 剪镰状韧带时，慎防刺破横膈。游离肝脏时

动作宜轻巧，以免肝叶破裂出血。结扎线应扎于肝叶

根部避免勒破肝叶。在结扎肝叶时松紧要适中，以阻

断血液为限。过紧可能造成肝叶撕裂出血，过松达不

到阻断血流的目的。

4. 手术操作时要注意及时止血，以防失血过多。

5．十二指肠插管要保证插入肠端，如果反向插

入胃端，因胃没有吸收功能而影响实验结果。十二指

肠插管要绝对固定好，以免脱出使复方氯化铵溶液漏

入腹腔，影响实验结果。

（五）液体配置

1.复方氯化铵溶液配制氯化铵25g碳酸氢钠

15g，以5％葡萄糖溶液稀释至1 000m1。

2.复方谷氨酸钠溶液配制谷氨酸钠25g、碳酸氢

钠15g，以5％葡萄糖溶液稀释至1 000ml

(六)思考题

1．肝脏处理氨的方式，通过哪种酶系统?

2．氨对中枢神经系统的毒性作用?

3．血氨增高对呼吸中枢的影响?最易引起哪种类

型酸碱平衡紊乱?该种类型的酸碱平衡紊乱对机体的

影响如何?