甲苯胺蓝染色液(软骨专用)使用说明书
甲苯胺蓝染色
软骨细胞甲苯胺蓝染色
1%甲苯胺蓝配制
原液：1g甲苯胺蓝粉末+10ml 70%酒精溶解（据说可保存6个月）
工作液：取上述原液1ml+9ml 1% NaCl 溶解，滤纸过滤（用时新鲜配制）
1% NaCl：1gNaCl + 100ml 蒸馏水（用时新鲜配制）
染色步骤：
（1）爬片用PBS洗2次，直接用4% 多聚甲醛固定于6孔板中1h或更长时间（4度）（2）自来水洗15分钟，最好不要直接冲爬片，易脱片
（3）蒸馏水洗5分钟
（4）加1%甲苯胺蓝浸染2h
（5）去除多余染液，我觉得可以用注射器从6孔板中吸走。
有人说用90%酒精的，但一定要慎重。
否则时间稍长，就会将颜色洗脱。
当然洗脱后仍然可以从（4）开始重复。
（6）镜下观察，满意后晾干，中性树胶封片（或者镜下观察）。
软骨染色液（番红O法）步骤及注意事项
软骨染色液（番红O法）步骤及注意事项软骨染色液(番红O法)步骤及注意事项货号：G2540规格：100ml有效期：12个月有效产品简介：软骨组织由软骨细胞、软骨基质和纤维组成，软骨组织及其周围的软骨膜构成软骨。
软骨根据基质内所含纤维素成分不同分为透明软骨、弹性软骨、纤维软骨。
软骨染色方法有很多种，例如甲苯胺蓝法、阿利新蓝法、番红O法等。
番红0软骨染色的原理在于嗜碱性的软骨与碱性染料番红O结合呈现红色。
番红O是一种结合多阴离子的阳离子染料，其显示软骨组织是基于阳离子染料与多糖中阴离子基团（硫酸软骨素或硫酸角质素）结合。
自备材料：10%福尔马林固定液、脱钙液、蒸馏水、Weigert铁苏木素、系列乙醇等。
操作步骤（仅供参考）：1.标本的处理：10%福尔马林固定、脱钙、石蜡切片。
2.常规脱蜡至水。
3.入新鲜配制的Weigert染液染色3-5min。
4.酸性乙醇分化液分化15s。
5.蒸馏水洗10min。
6.（可选）在固绿染色液内浸染5min，蒸馏水洗1min。
7.入Safranin O stain内浸染1-2min，蒸馏水洗1min。
8.分别用95%乙醇、无水乙醇脱水。
9.二甲苯透明，光学树脂封固。
染色结果：软骨基质深红色软骨细胞核蓝色软骨细胞浆红色细胞核灰黑色注意事项：1.需要显示细胞核时，尽量采用铁苏木素染色，其着色力强色调浓，一般的苏木素着色力不强。
2.Weigert苏木素染液不可预先配制后放置，配制好后一般24h 失去染色能力。
3.切片在Safranin O stain中染色不宜过长，否则易导致背景的深红色不易分化掉。
4.Safranin O stain染色后，不宜在低浓度乙醇脱水，否则易褪色。
5.95%乙醇脱水时间不宜过长。
6.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
尼氏染色液(甲苯胺蓝法)说明书
尼氏染色液(甲苯胺蓝法)说明书
货号：G1436
规格：100ml
保存：室温，避光，6个月。
产品简介：
尼氏体(Nissl body)或称尼氏小体是分布于神经细胞胞质内的三角形或椭圆形小块状物质，能被碱性染料如硫堇、亚甲蓝、甲苯胺蓝和焦油紫等染料染成紫蓝色。
尼氏染色液(Nissl Stain，甲苯胺蓝法)主要优点是操作简便、染色稳定、适用范围广，可以用于石蜡组织切片的尼氏物质、神经元等的染色，尼氏体的存在和消失是神经细胞是否受损的重要指标，当发生脑炎、脑缺血、轴突反应等情况时，尼氏体会发生溶解甚至消失。
操作步骤(仅供参考)：
1、新鲜组织固定于10%甲醛液中，常规脱水包埋。
2、石蜡切片厚5µm，常规脱蜡至水。
3、用尼氏染色液(Nissl Stain，甲苯胺蓝法)置于50-60℃温箱浸染20-40min。
4、蒸馏水稍洗。
5、95%乙醇迅速分化。
6、无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。
染色结果：
尼氏小体紫蓝色
细胞核淡蓝色
背景无色或浅蓝色
注意事项：
1、尼氏体离体后容易溶解，所以组织取出后应立即固定，否则难以着色。
2、组织固定起着非常重要的作用，固定可采用乙醇或中性福尔马林溶液。
3、本染色试剂盒对石蜡组织切片的尼氏染色效果较好。
4、95%乙醇分化应迅速进行，肉眼观察至切片清晰，背景呈淡蓝色或无色为适宜。
5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
普利莱基因技术软骨染色液说明书
软骨染色液（甲苯胺蓝法）B1104（Toluidine blue Staining Solution）货号产品名称规格价格B1104软骨染色液（甲苯胺蓝法）100ml240元描述：甲苯胺蓝，英文名称为Toluidine blue，CAS号为92-31-9，分子式为C28H20N2O10S2·2Na，分子量为305.8256。
甲苯胺蓝属于常用的人工合成的醌亚胺染料类的一种，是具有两个发色团和两个助色团的碱性染料。
甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用。
软骨基质中含有大量的多糖类（硫酸软骨素或硫酸角质素）阴离子基团，具有嗜碱性；组织细胞的细胞核、神经元的尼氏体、肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等酸性物质的特殊颗粒等的酸性物质与甲苯胺蓝中的阳离子相结合而被染色，呈现发光色团的颜色，蓝色。
本品适用于软骨组织、细胞核、尼氏体、肥大细胞的特殊颗粒的染色。
本产品用于软骨染色，可以间接反应软骨基质中蛋白多糖的含量和分布，当软骨受到损伤时，软骨中的糖蛋白会释放出来，使基质成分分布不均匀，导致染色减弱或不着色，用于软骨组织损伤和粘多糖代谢的研究。
适用范围：适用于鉴定细胞或基质内酸性物质的存在，主要用于软骨、细胞核、尼氏体、肥大细胞颗粒的染色。
储存：室温下保存3个月，4℃保存6个月。
染色步骤：1.组织切片入蒸馏水（石蜡切片需脱蜡至水）。
2.入甲苯胺蓝染液染色30分钟左右。
（镜下观察，适当调整染色时间）3.自来水冲洗2分钟去掉浮色，滤纸吸干水分。
4.丙酮或醋酸分化液分化，至软骨细胞呈清晰的紫蓝色为止。
（可省）5.常规酒精脱水、透明后中性树胶封片或蒸馏水洗后冷风吹干，甘油明胶封片。
染色结果：软骨细胞、成骨细胞呈紫红色，基质呈淡蓝色。
说明：1.第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验，确定合适的染色时间。
2.固定、脱水、透明所需的试剂需要另购置。
本公司有甘油明胶封片液。
3.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
百度文库-苯胺蓝染色液说明书
广州市外显子生物技术有限公司
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苯胺蓝染色液
产品说明：
苯胺蓝染色液是 Masson 三色染色试剂盒的组成之一。
苯胺蓝染色液主要有苯胺蓝、弱酸等组成，呈酸性，常与丽春红品红染色液等配合使用对胶原纤维进行染色，染色后肌纤维呈红色，胶原纤维呈蓝色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
产品组成：
货号 产品 规格 储存条件 S-1528 苯胺蓝染液 100ml
2-4℃ -- 说明书
1份
有效期：12个月 操作步骤(仅供参考)： 以Masson 三色染色为例 1.切片脱蜡至水。
2.Weigert 铁苏木素使用前（Weigert 铁苏木素 A 、 B 液等比例混合）。
染 10-20 分钟，流水稍洗。
3.盐酸酒精分化，流水冲洗数分钟。
4.丽春红酸性品红染液染 5-10 分钟，蒸馏水稍冲 洗。
5.磷钼酸溶液处理约 5 分钟，去掉溶液，不用水洗， 直接用苯胺蓝染液复染 5 分钟。
6.1%冰醋酸处理 1 分钟，95%酒精脱水。
7.无水酒精脱水，二甲苯透明，中性树脂封固。
注意事项：
1. 切片脱蜡应尽量干净。
2. 切片入苯胺蓝染色液染色前不要水洗，否则可能出现不着色。
3. 不同染色参照具体的实验要求。
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作 染色结果：
神经节组织×400 结果判定：主要用于神经组织、细胞、结缔组织的染色，使胶原纤维呈蓝色。
甲苯胺蓝染色液
产品号 401002 401041 401081 401032
产品 细胞周期检测试剂盒 线粒体膜电位试剂盒(JC-1) Caspase 3 活性检测试剂盒 AO/EB 双染试剂盒
产品号 401033 401072 401052 401037
-1-
-2-
产品组成：
甲苯胺蓝染色液(细胞专用)
产品编号 甲苯胺蓝染色液(细胞专用)
BB-44527-1 20ml
BB-44527-2 50ml
储存条件： 室温避光保存。
有效期： 一年。
产品简介： 甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料，属于醌亚胺染料类，这类染
料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团，从而成色原显色。甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用， 组织细胞的酸性物质与其中的阳离子结合而被染色。甲苯胺蓝还含有两个助色团，能促使染 料产生电离成盐类，帮助发色团对组织产生染色力，使切片上的组织细胞着色，可染细胞核 使之呈蓝色。另外，肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色物质，遇到甲苯胺蓝可呈异染 性紫红色，临床上经常用于肥大细胞染色。
贝博甲苯胺蓝染色液(细胞专用)适用于细胞内酸性黏液多糖染色，尤其适用于含硫用方法：
使用注意事项： ● 为了证实染色效果，可选用慢性粒细胞白血病血片(嗜酸性粒细胞)或再生障碍性贫血骨髓涂片(组
织嗜酸性粒细胞)作对照。 ● 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
细胞涂片染色 1、细胞涂片后，立即放入 95%的乙醇中固定 15s，取出放在纸巾上； 2、滴加甲苯胺蓝染色液进行滴染 5min； 4、滴加等量蒸馏水于涂片上混匀，染色 15min； 5、水洗、晾干、镜检。
结果分析： 细胞内酸性黏液多糖呈红色。
甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法)
甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法)简介：甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料, 属于醌亚胺染料类, 这类染料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团，从而成色原显色。
甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用, 组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。
甲苯胺蓝还含有两个助色团，能促使染料产生电离成盐类, 帮助发色团对组织产生染色力, 使切片上的组织细胞着色，可染细胞核使之呈蓝色。
另外，肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质，遇到甲苯胺蓝可呈异染性紫红色，临床上经常用于肥大细胞染色。
Leagene 甲苯胺蓝染色液(Toluidine Blue,1%,硼酸盐法)由于硼酸盐缓冲液呈强碱性，更利于组织细胞的着色。
组成：操作步骤(仅供参考)：(一)肥大细胞染色1、脱蜡至蒸馏水。
2、根据切片厚度和组织的不同，浸染于甲苯胺蓝染色液。
3、蒸馏水或去离子水轻轻冲洗。
4、冰乙酸分化，直到细胞核和颗粒清晰可见。
5、快速和无水乙醇脱水。
6、 二甲苯透明，封固。
染色结果：肥大细胞呈紫红色；背景呈淡蓝色。
(二)软骨染色1、 石蜡切片入二甲苯。
2、 系列乙醇各。
3、 自来水洗。
4、 入Toluidine Blue O Stain ，浸染。
5、 自来水洗，滤纸吸干水分。
6、 丙酮分化至软骨细胞呈紫蓝色清楚可见。
7、 逐级乙醇脱水。
编号 名称 DA0059 Storage Toluidine Blue O stain (0.5%,硼酸盐法) 100ml RT 避光 使用说明书 1份8、二甲苯透明，中性树胶封固。
染色结果：软骨、成骨细胞呈紫红色；背景呈淡蓝色。
(三)细胞涂片染色1、用乙醇溶液稀释甲苯胺蓝染色液, 一般要求稀释即可。
2、细胞涂片后，立即放入乙醇中固定，取出放在纸巾上。
3、滴加稀释后的甲苯胺蓝染色液进行滴染，加盖玻片让染料渗透到细胞中。
4、将玻片竖起，稍加压力，使多余染料被纸巾吸去。
5、无需干燥，直接镜检。
甲苯胺蓝染色液(软骨专用)
北京雷根生物技术有限公司
甲苯胺蓝染色液(软骨专用)
简介：
甲苯胺蓝(T oluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料, 属于醌亚胺染料类, 这类染料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团，从而成色原显色。
甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用, 组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。
甲苯胺蓝还含有两个助色团，能促使染料产生电离成盐类, 帮助发色团对组织产生染色力, 使切片上的组织细胞着色，可染细胞核使之呈蓝色。
Leagene 甲苯胺蓝染色液(软骨专用)呈强碱性，更利于软骨组织的着色。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 常规脱钙，包埋、固定。
2、 石蜡切片入二甲苯2次每次。
3、 系列乙醇各1min ，自来水洗。
4、 入Toluidine Blue O Stain 浸染。
根据不同组织，染色时间不完全相同。
5、 自来水洗，滤纸吸干水分。
6、 丙酮分化至软骨细胞呈紫蓝色清楚可见。
7、 逐级乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。
染色结果：软骨、成骨细胞呈紫红色；背景呈淡蓝色。
注意事项：
1、 针对于较难着色组织的染色，浸染于甲苯胺蓝染色液的时间应相应延长。
2、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期： 12个月有效。
编号 名称 DA0054 Storage Toluidine Blue O stain (软骨专用) 50ml RT 避光 使用说明书 1份。
Masson三色染色试剂盒甲苯胺蓝
Masson 三色染色试剂盒（甲苯胺蓝）说明书修订日期：2018.07.31Cat number：KGMST-8004Store at 2-8℃ for 12 monthsFor Research Use Only（科研专用）【适用范围】Masson 三色染色试剂盒主要用于结缔组织染色。
用于判定各种组织、器官的病变程度与修复情况，以不同色调显示与区分某些非结缔组织及物质成分；如显示与区分肌肉及其肿瘤组织的正常或异常成分。
尤适用于软组织肿瘤的鉴别诊断。
【主要成分】【染色步骤】1、切片脱蜡处理至水。
2、滴加 1 滴（50-100µl）苏木素染色液（试剂 A）染色 5-10 分钟。
蒸馏水冲掉染液。
3、蒸馏水或自来水冲洗 2-5 分钟。
4、滴加 1 滴（50-100µl）复合染色液（试剂 B）染色 5 分钟。
5、蒸馏水或自来水冲洗一下（2-3 秒，冲掉染液即可）。
6、滴加 1 滴（50-100µl）磷钼酸（试剂 C）染色 1 分钟。
7、甩干或自然晾干。
8、滴加 1 滴（50-100µl）甲苯胺蓝染色液（试剂 D）染色 5min 左右。
9、蒸馏水或自来水冲洗一下（2-3 秒，冲掉染液即可）。
10、放入烘箱（50－60 摄氏度）烘干。
中性树胶封片。
【结果】胶元纤维、黏液、软骨、神经纤维呈蓝色；肌肉、弹力纤维呈红色；神经轴索呈粉红色；纤维素呈紫红色；红血球呈橘红色。
细胞核呈蓝紫色。
【注意事项】1、不同的固定液或固定时间以及不一样的组织，染色效果可有差异，要根据显微镜下观察来掌握染色或分化时间。
2、染色液必须充分淹盖组织。
3、每次染色宜用阳性切片作对照。
【有效期】12 个月仅供研究、不用于临床诊断。
肥大细胞染色液(甲苯胺蓝法)
肥大细胞染色液(甲苯胺蓝法)简介：肥大细胞(Mast cell)是疏松结缔组织内常见的细胞，常成群的沿着小血管和淋巴管分布，也常见于支气管和胰腺的小叶间导管周围，一般细胞较大，直径约为20-30μm ，呈圆形或椭圆形，胞核较小、胞质内充满粗大且具有异染性嗜酸性颗粒。
甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)中的阳离子有染色作用, 组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。
甲苯胺蓝还含有两个助色团，能促使染料产生电离成盐类, 帮助发色团对组织产生染色力, 使切片上的组织细胞着色，可染细胞核使之呈蓝色。
肥大细胞颗粒呈紫红色，其他呈蓝色。
组成：操作步骤(仅供参考)：1、 取新鲜组织立即固定于10%中性福尔马林固定液中，常规脱水包埋。
2、 切片厚度4-5μm ，常规脱蜡至水。
3、 系列乙醇各，自来水洗2min 。
4、 入Toluidine Blue O Stain ，浸染。
5、 自来水稍洗。
6、 TBO 分化液分化，直至细胞核和颗粒清晰，可在显微镜下控制。
7、 自来水稍洗，滤纸吸干或吹风机吹干水分。
8、 95%乙醇1min ，无水乙醇2次，每次2min 。
9、 二甲苯透明，中性树胶封固。
染色结果： 肥大细胞颗粒紫蓝色 背景 淡蓝色注意事项：1、 针对于胃粘膜组织、软骨组织等较难着色组织的染色，浸染于甲苯胺蓝染色液的时间应 编号 名称 DA0050 Storage 试剂(A): Toluidine Blue O Stain 100ml RT 避光 试剂(B): TBO 分化液 250ml RT 使用说明书 1份相应延长。
2、应注意组织要新鲜，取出后立即固定。
3、甲苯胺蓝染色后不宜采用低浓度乙醇脱水，否则容易导致褪色。
4、分色后应快速入95%乙醇、无水乙醇、二甲苯的时间不宜过久，否则容易导致褪色。
有效期：6个月有效。
相关：编号名称DC0032 Masson三色染色液DF0111 中性福尔马林固定液(10%)DG0005 糖原PAS染色液DH0001 改良Lillie-Mayer苏木素染色液DJ0001 普鲁士蓝染色液(核固红法)DK0022 尼氏染色液(焦油紫法)NH0043 SSC缓冲液(20×,pH7.0)TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD比色法)。
甲苯胺蓝-DNA琼脂产品说明书
产品编号：024025 修订日期：2019-06-10化学品安全技术说明书第一部分化学品及企业标识产品中文名称：甲苯胺蓝-DNA琼脂产品英文名称：Toluidine Blue-DNA Agar产品编号：024025企业名称：广东环凯微生物科技有限公司地址：广东省广州市黄埔区广州开发区科学城神舟路788号邮编：510663公司网址电子邮件地址：*********************传真号码：************销售热线：************-8602技术热线：************-8877/8876推荐用途和限制用途：生化研究/分析第二部分危险性概述GSH危害性类别皮肤刺激(类别3), H316眼睛刺激(类别2B), H320GSH标签要素象形图无信号词警告危险申明H316 造成轻微皮肤刺激。
H320 造成眼刺激。
警告申明预防措施P264 作业后彻底清洗皮肤。
事故响应P305 + P351 + P338 如进入眼睛：用水小心冲洗几分钟。
如戴隐形眼镜并可方便地取出，取出隐形眼镜。
继续冲洗。
P332 + P313 如发生皮肤刺激：求医/就诊。
P337 + P313 如仍觉眼刺激：求医/就诊。
当心- 此制剂含有还未完全测试过的物质。
物理和化学危险目前掌握信息，没有物理或化学的危险性。
产品编号：024025 修订日期：2019-06-10健康危害H316 造成轻微皮肤刺激。
H320 造成眼刺激。
其它危害（健康危害、环境危害）未见报道第四部分 急救措施一般信息： 无特殊的措施要求 皮肤接触： 立即用清水彻底清洗眼睛接触： 立即提起眼睑，用大量流动清水冲洗，如不适就医。
吸 入： 如不适就医 食 入： 如不适就医就医信息： 出示产品使用说明或者此SDS第五部分 消防措施危险特性： 可能助燃。
有害燃烧产物：碳氧化物, 氮氧化物, 硫氧化物, 氯化氢气体 碳氧化物, 硫氧化物, 氯化氢气体, 氧化钠灭火方法及灭火剂： 用水雾，耐醇泡沫，干粉或二氧化碳灭火。
骨磨片(groundsection)甲苯胺蓝(toluidineblue)染色试
骨磨片（ground section）甲苯胺蓝（toluidine blue）染色试剂盒产品说明书（中文版）主要用途骨磨片（ground section）甲苯胺蓝（toluidine blue）染色试剂是一种旨在通过甲苯胺蓝染料的使用，观察分析由成骨细胞和破骨细胞产生的的各种骨组织形成状态的权威而经典的技术方法。
该技术经过精心研制、成功实验证明的。
广泛应用于各种不脱钙骨组织、类骨质和软骨组织的染色分析。
产品即到即用，性能稳定，显色清晰。
技术背景甲苯胺蓝（toluidine blue）是一种异染性（metachromatic）染料，其分子式是C15H16ClN3S，分子量为305.83。
常用于骨组织浅表染色，观察成骨细胞和破骨细胞产生的的骨粘合线（cement line）、反折线（reversal line）、长线（dermacation line）、类骨质（osteoid）、钙质化新骨（mineralized）等骨组织变化，以评价各种骨整合（osseointegration）、新骨形成、材料再吸收（materials resorption）、骨组织重塑（remodeling）和骨组织计量测定（histomorphometrics）等。
产品内容清理液（Reagent A）毫升净化液（Reagent B）毫升脱水液（Reagent C）毫升染色液（Reagent D）毫升产品说明书1份保存方式保存染色液（Reagent B）在4℃冰箱里，避免光照；其余的保存在室温下；清理液（Reagent A）具有腐蚀性，注意操作安全；有效保证6月用户自备（偏振光）光学显微镜：观察染色后的组织细胞实验步骤实验开始前，准备好甲基丙烯酸甲酯（methylmethacrylate；MMA）包埋的不脱钙骨组织，进行机器或手动不脱钙骨磨片样品，10至50微米厚（通常为30微米），然后进行下列操作：1．小心加上xx微升清理液（Reagent A），铺满整个样品表面2．室温下，孵育3分钟3．小心移去样品上的清理液（Reagent A）4．室温下，小心将切片置入xx毫升净化液（Reagent B）中浸泡30秒5．小心加上xx微升脱水液（Reagent C），铺满整个样品表面6．室温下，孵育15分钟7．小心移去样品上的脱水液（Reagent C）8．等待切片晾干9．小心加上xx微升染色液（Reagent D），铺满整个样品表面10．室温下，孵育5至20分钟，避免光照11．小心移去切片上的染色液（Reagent D）12．（选择步骤）小心加上xx微升脱水液（Reagent C），铺满整个样品表面13．（选择步骤）小心移去样品上的脱水液（Reagent C）14．室温下，小心将样品置入xx毫升净化液（Reagent B）中浸泡1分种15．小心移去样品上的净化液（Reagent B）16．封片17．即刻在光学或偏振光显微镜下观察：注意事项1．本产品为50次操作2．操作时须戴手套3．染色过程，避免光照4．清理液（Reagent A）具有腐蚀性，注意操作安全5．如果使用包埋后硬组织切片机切片的样品，建议使用无离子水稀释染色液（Reagent D）10倍后染色6．可以进行骨小梁参数计量，借助VIDAS图象分析系统进行测量，参数包括骨小梁的体积、骨小梁的宽度、骨小梁的间隙等7．脱水液（Reagent C）具有脱色作用，如果染色过深，可以使用脱水液（Reagent C）快速处理，避免脱色过度8．骨组织包埋切片或磨片，以及厚度差异，对于染色的孵育时间会有不同9．建议使用非水相封片10．参考图像如下：黑色实体箭头为浅蓝色类骨质；白色空箭头为成骨细胞产生新生骨组织11．本公司提供系列骨组织染色试剂产品质量标准1．本产品经鉴定性能稳定2．本产品经鉴定着色清晰。
甲苯胺蓝染色原理软骨
甲苯胺蓝（Toluidine Blue）染色法用于软骨染色的原理基于该染料的化学性质和软骨组织的特性。
甲苯胺蓝是一种碱性染料，它的分子结构中含有阳离子，使其带有正电荷。
软骨组织中富含酸性黏多糖（如硫酸软骨素、透明质酸等），这些多糖带负电荷，因而能够与甲苯胺蓝中的阳离子形成离子键，从而被染色。
在甲苯胺蓝染色液中，软骨组织特别是软骨基质会被染成蓝紫色，这是因为软骨基质内丰富的酸性黏多糖容易与甲苯胺蓝结合。
此外，软骨细胞核和一些特殊的蛋白质也可能会被甲苯胺蓝染成不同的颜色，从而可以在显微镜下清晰地区分软骨的不同结构成分。
通过甲苯胺蓝染色，研究人员能够准确观察到软骨的形态结构，包括软骨细胞、软骨基质的分布以及软骨损伤等情况，这对于研究关节炎、发育生物学、病理诊断等多种领域都具有重要意义。
甲苯胺蓝染软骨原理
甲苯胺蓝染软骨原理
甲苯胺蓝是一种常用的软骨染色剂，它的染色原理涉及到其与软骨组织中的多糖类物质的特异性结合。
在进行软骨染色时，甲苯胺蓝会与软骨中的多糖类物质发生特异性反应，形成可见的染色复合物。
软骨组织中含有大量的多糖类物质，如硫酸软骨素和透明质酸等。
这些多糖类物质与甲苯胺蓝之间存在亲和性，甲苯胺蓝分子中的芳香环结构与多糖类物质中的羟基或羧基发生作用，从而形成复合物。
这种复合物在光学显微镜下呈现出特定的颜色，从而使得软骨组织能够被清晰地观察和分析。
甲苯胺蓝染软骨的原理是基于这种特异性结合的化学反应，通过染色使得软骨组织的结构和成分得以清晰展现。
这种染色方法在组织学研究和临床诊断中具有重要的应用意义，能够帮助科研人员和医生观察和分析软骨组织的形态和病变情况，为疾病诊断和治疗提供重要依据。
总的来说，甲苯胺蓝染软骨的原理是基于其与软骨中多糖类物
质的特异性结合，通过形成可见的染色复合物来清晰展现软骨组织的结构和成分，为科研和临床诊断提供帮助。
软骨染色液(番红O法)步骤及注意事项
软骨染色液(番红O法)步骤及注意事项货号：G2540规格：100ml有效期：12个月有效产品简介：软骨组织由软骨细胞、软骨基质和纤维组成，软骨组织及其周围的软骨膜构成软骨。
软骨根据基质内所含纤维素成分不同分为透明软骨、弹性软骨、纤维软骨。
软骨染色方法有很多种，例如甲苯胺蓝法、阿利新蓝法、番红O法等。
番红0软骨染色的原理在于嗜碱性的软骨与碱性染料番红O结合呈现红色。
番红O是一种结合多阴离子的阳离子染料，其显示软骨组织是基于阳离子染料与多糖中阴离子基团（硫酸软骨素或硫酸角质素）结合。
自备材料：10%福尔马林固定液、脱钙液、蒸馏水、Weigert铁苏木素、系列乙醇等。
操作步骤（仅供参考）：1.标本的处理：10%福尔马林固定、脱钙、石蜡切片。
2.常规脱蜡至水。
3.入新鲜配制的Weigert染液染色3-5min。
4.酸性乙醇分化液分化15s。
5.蒸馏水洗10min。
6.（可选）在固绿染色液内浸染5min，蒸馏水洗1min。
7.入Safranin O stain内浸染1-2min，蒸馏水洗1min。
8.分别用95%乙醇、无水乙醇脱水。
9.二甲苯透明，光学树脂封固。
染色结果：软骨基质深红色软骨细胞核蓝色软骨细胞浆红色细胞核灰黑色注意事项：1.需要显示细胞核时，尽量采用铁苏木素染色，其着色力强色调浓，一般的苏木素着色力不强。
2.Weigert苏木素染液不可预先配制后放置，配制好后一般24h失去染色能力。
3.切片在Safranin O stain中染色不宜过长，否则易导致背景的深红色不易分化掉。
4.Safranin O stain染色后，不宜在低浓度乙醇脱水，否则易褪色。
5.95%乙醇脱水时间不宜过长。
6.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
苯胺蓝染色液使用说明
苯胺蓝染色液使用说明
货号：G1350
规格：100ml
保存：室温避光保存，有效期24个月。
产品说明：
苯胺蓝染色液是Masson三色染色试剂盒的组成之一。
主要有苯胺蓝、弱酸等组成，呈酸性，常与丽春红品红染色液等配合使用对胶原纤维进行染色，染色后肌纤维呈红色，胶原纤维呈蓝色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
操作步骤(仅供参考)：
以Masson三色染色为例：
1、切片常规脱蜡至水。
2、用配制好的Weigert铁苏木素染色液染色5min-10min。
3、酸性乙醇分化液分化、水洗。
4、Masson蓝化液返蓝、水洗。
5、蒸馏水洗1min。
6、丽春红品红染色液染色5-10min。
7、磷钼酸溶液分化1-2min
8、倒掉分化液，直接放入苯胺蓝染色液中染色1-2min。
9、用弱酸工作液洗1min。
10、95%乙醇快速脱水。
11、无水乙醇脱水3次，每次5-10s。
12、二甲苯透明3次，每次1-2min。
13、中性树胶封固。
注意事项：
1.切片脱蜡应尽量干净。
2.切片入苯胺蓝染色液染色前不要水洗，否则可能出现不着色。
3.不同染色参照具体的实验要求。
4.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
苯胺蓝染色液说明书
苯胺蓝染色液说明书
货号：G1350
规格：100ml
保存：室温避光保存，有效期24个月。
产品说明：
本苯胺蓝染色液是Masson三色染色试剂盒的组成之一。
本苯胺蓝染色液主要有苯胺蓝、弱酸等组成，呈酸性，常与丽春红品红染色液等配合使用对胶原纤维进行染色，染色后肌纤维呈红色，胶原纤维呈蓝色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
操作步骤(仅供参考)：
以Masson三色染色为例：
1、切片常规脱蜡至水。
2、用配制好的Weigert铁苏木素染色液染色5min-10min。
3、酸性乙醇分化液分化、水洗。
4、Masson蓝化液返蓝、水洗。
5、蒸馏水洗1min。
6、丽春红品红染色液染色5-10min。
7、磷钼酸溶液分化1-2min
8、倒掉分化液，直接放入苯胺蓝染色液中染色1-2min。
9、用弱酸工作液洗1min。
10、95%乙醇快速脱水。
11、无水乙醇脱水3次，每次5-10s。
13、二甲苯透明3次，每次1-2min。
14、中性树胶封固。
注意事项：
1.切片脱蜡应尽量干净。
2.切片入苯胺蓝染色液染色前不要水洗，否则可能出现不着色。
3.不同染色参照具体的实验要求。
4.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
软骨细胞培养.doc
实验方法各种溶液的配制1、配制D-Hanks液(无钙镁)1L，PH8-9（1）称量Nacl8.0g，kcl0.4g,Na2Hpo4.H2o 0.06g, kH2po40.06g，NaHco30.35g，酚红0.02g（2）依次将各成分逐个溶解于800ml水中。
（3）用5.6% NaHco3溶解酚红0.02克。
（4）将酚红液（３）加入（２）中。
（5）补加水至1000ml，混匀。
（6）将Hanks液分装盐水瓶内，110℃、8镑高压蒸汽消毒灭菌20分钟，4℃冰箱保存备用。
2、配制0.25%胰蛋白酶溶液75ml（1）称取胰蛋白酶187.5mg，用少量D-Hanks液先将胰蛋白酶粉末调成糊状。
（2）补足Hanks液至75ml，搅拌混匀，置40℃水浴搅拌帮助溶解。
（3）冷却至室温后，置4℃冰箱过夜。
（4）用滤纸粗滤，再用0.22μm微孔过滤膜过滤除菌。
（5）分装小瓶，低温冰箱冰冻保存备用。
3、配制0.3%Ⅱ型胶原酶溶液49.5ml（1）称取Ⅱ型胶原酶150mg，用D-Hanks液溶解。
（2）补足Hanks液至49.5ml，搅拌混匀。
（3）用0.22μm微孔滤膜过滤除菌。
（4）分装小瓶，低温冰箱保存备用。
4、配制闪烁液（1）用电子天平称取POPOP 0.2g，PPO 2.0g。
（2）将上二者溶解在500ml二甲苯中，避光保存，备用。
取材与培养（1）取3kg重6月龄青紫蓝兔一只(购自首都医科大学动物房)，兔耳静脉注射5ml空气致死。
（2）无菌条件下取双侧下肢膝，髋关节面软骨，置于D-Hanks液中漂洗2次,并用眼科剪将软骨剪碎至1mm3大小,继续用D-Hanks液漂洗2次。
（3）吸去漂洗液，加入0.25%胰蛋白酶溶液，并置入37℃、5%CO2孵箱中消化30分钟,中途不时摇晃。
（4）吸出胰蛋白酶溶液，加入0.3%Ⅱ型胶原酶溶液，置入37℃、5%CO2孵箱中继续消化3小时。
每1小时更换Ⅱ型胶原酶溶液1次。
用离心管留取各次消化液，离心2000rpmX10min，去除上清液。
苯胺蓝染色液
北京雷根生物技术有限公司
苯胺蓝染色液
简介：
结缔组织狭义上是指其含有的三种纤维：胶原纤维、网状纤维、弹力纤维，而胶原纤维(collagen fiber)是分布最广、含量最多的一种纤维。
Masson 三色染色又称马松染色，是结缔组织染色中最经典的一种方法，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。
淡绿或苯胺蓝的分子量都很大，因此Masson 染色后肌纤维呈红色，胶原纤维呈绿色(淡绿)或蓝色(苯胺蓝)，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
胺蓝染色液主要有苯胺蓝、弱酸等组成，呈酸性，常与丽春红品红染色液等配合使用对胶原纤维进行染色。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、根据实验具体要求操作。
2、一般浸染1～2min 。
注意事项：
1、 切片脱蜡应尽量干净。
2、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
相关：
编号 名称 DC0031 Storage 苯胺蓝染色液 100ml RT 避光 使用说明书 1份
编号 名称 DC0032 Masson 三色染色液 TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD 比色法)。
甲苯胺蓝染液使用说明书
颜色变化。
准备
使用前新鲜配制甲苯胺蓝工作液。
甲苯胺蓝工作液的配制：1 份甲苯胺蓝染液 A+9 份甲苯胺蓝染液 B，即得甲苯胺蓝工作液。
使用说明
1. 样品处理：石蜡切片样品脱蜡水化：二甲苯脱蜡，2×5min；依次浸入梯度乙醇（无水乙
醇、无水乙醇、95%、85%、75%乙醇）和蒸馏水中各 5min 水化，蒸馏水水洗三遍。
2. 甲苯胺蓝工作液染 1~3min；
3. 蒸馏水漂洗 3 次，
4. 95%乙醇、100%乙醇、100%乙醇快速脱水（每次蘸 10 下，因为在乙醇中可快速褪色）；
5. 二甲苯透明，2×3min，中性树胶封固。
结果
肥大细胞应为蓝紫色/紫红色。
注意事项
1. 需自备梯度乙醇。如果需要脱水、透明和封片处理，还需自备二甲苯，中性树胶或其它
胞，多见于血管周围、黏膜下等。肥大细胞染色意义较大，可用于某些过敏性疾病、肥大细
胞增生性疾病、肥大细胞瘤等的诊断，本产品能够快速染色，且特异性强，效果稳定，能将
肥大细胞的典型形态结构显示清楚。
肥大细胞含有肝素和由组胺组成的颗粒。甲苯胺蓝将肥大细胞染为蓝紫色。由于染料
pH，染料浓度和温度的不同，它可能将细胞染成不同的颜色。蓝色染料可能会有一个红色的
封片剂。
2．第一次使用本试剂盒时建议先取 1~2 个样品做预实验。
温馨提示
为了您的自身安全，使用试剂前，请做好防护，如穿实验服，戴手套等。
储存温度
2~8℃避光储存。
包装清单
货号
品名
包装
HCY132A
甲苯胺蓝染液 A
10mL
HCY132B
甲苯胺蓝染液 B
100mL
说明书
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甲苯胺蓝染色液(软骨专用)使用说明书
货号：G2493
规格：100ml
保存：室温，避光，12个月。
产品说明：
甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料,属于醌亚胺染料类。
这类染料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团，从而成色原显色。
甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用,组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。
甲苯胺蓝不仅含有两个发色团，还含有两个助色团，能促使染料产生电离成盐类,帮助发色团对组织产生染色力,使切片上的组织细胞着色，可染细胞核使之呈蓝色；肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质遇到甲苯胺蓝可呈异染性紫红色。
甲苯胺蓝染色液(Toluidine Blue，1%，硼酸盐法)由于硼酸盐缓冲液呈强碱性，更利于组织细胞的着色。
操作说明：（仅供参考）
1、常规脱钙，包埋，固定。
2、石蜡切片入二甲苯2次，每次15min。
3、系列乙醇各1min。
自来水洗2min。
4、入Toluidine Blue O Stain浸染15-20min。
根据不同组织，染色时间不完全相同。
5、自来水洗2min，滤纸吸干水分。
6、丙酮分化至软骨细胞呈紫蓝色清楚可见。
7、逐级乙醇脱水。
8、二甲苯透明，中性树胶封固。
染色结果：
软骨、成骨细胞呈紫红色；背景呈淡蓝色。
注意事项：
1、第一次使用本试剂时建议先取1-2个样品做预实验。
2、针对于胃粘膜组织、软骨组织等较难着色组织的染色，浸染于甲苯胺蓝染色液的时间应相应延长。
3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
相关产品：
G3661甲苯胺蓝染色液(1%,磷酸盐法)
G3662甲苯胺蓝染色液(0.5%,磷酸盐法)
G3665甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法)。