华科考博分子生物学历年真题汇总
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华中科技大学同济医学院考博分子生物学(专业基础)简答题历年试题汇总
1.顺式作用元件有哪些,并加以解释。2015,2012考
2.人类基因组计划的4张图,各自的意义是什么?
3.癌基因激活的主要途径?
问答:1.什么是基因治疗,基因治疗的主要策略是什么?基因治疗的技术及主要内容,2015,2014,2013考
问答2.蛋白质组学的主要技术有哪些并解释?2015,2012考
2014简问答题
1.PCR原理,步骤,写出6种PCR衍生技术 2013,2014,2009考
2.何谓基因克隆?简述其基本过程。09年
3.重组DNA技术,问答题20分,14年考
4.举例说明基因表达的调控机制。题目太大,原核调控,真核调控?13年
问答5.人类基因定位的常用方法及原理。12年,09年考
简问6.简述反式作用因子的结构特点及作用方式 09年
简问7.简述逆转录病毒的结构特点 09年考
问答:真核细胞中基因表达的特异性转录调控因子是指什么?根据他们的结构特征可以分为哪些类型?它们和DNA相互识别的原理是什么?2013年考
问答:试述大肠杆菌中表达蛋白质产物的步骤。 2013年考
试比较克隆载体、原核载体和真核载体的特点 2012年考
2016年真题
英译中名词解释(20分)
反义RNA;操纵子;限制性核酸内切酶;选择性剪切;抑癌基因;基因诊断;RNA 干扰;质粒;gene maping;管家基因
简答题。
真核基因组的结构和功能特点20分
人类基因组的结构特征15分
原癌基因的特点15分
蛋白质组研究常用技术有那些,简介其作用。15分
当前基因治疗技术面临的技术问题有哪些?15分
以下为2001-2004年试题及网上答案
基因工程是在分子水平上对基因进行操作的复杂技术,是将外源基因通过体外重组后导入受体细胞内,使这个基因能在受体细胞内复制、转录、翻译表达的操作,又叫分子克隆,DNA 重组技术。
1. 在GENBANK中检索IL-2的mRNA序列;在genecard里检索IL-2高表达的组织;同时检索一下有关文献;
2. 如果考虑使用原核表达系统(通常是大肠杆菌表达系统),将IL-2的成熟肽的基因序列找出(呵呵,我没有检索,不清楚是否有信号肽)进行分析;
3. 根据表达载体,设计含有合适酶切位点的、对应成熟肽编码区的引物;
4. 提取IL-2高表达的组织的mRNA,RT-PCR,T载体克隆或直接酶切克隆至表达载体中、测序。
Trans-acting factor是一类细胞核内的蛋白质因子,能够与顺式作用元件和RNA-pol相互作用,调节基因转录活性。一般含有DNA结合结构域和转录活化结构域。
(1) Helix-turn-helix 含有3个helix,其中helix3与DNA识别结合,helix1 DNA结合结构域:
和helix2与其它蛋白质结合。(2)Zenic finger锌指结构:由相对保守的一段氨基酸序列和锌离子结合,形成相对独立的功能域,像一根手指插入DNA的大沟。两种类型的DNA结合蛋白有这样的模序,一是锌指蛋白,另一个是甾体受体。(3)Leucine Zipper:亮氨酸拉链,两个蛋白质之间相互作用,共同建立一个转录复合体。是一种富含亮氨酸的蛋白质形成的二聚体motif。这种motif可以识别特殊的DNA序列。两个亮氨酸拉链区的反式作用因子依靠疏水力量相互结合,N-端有碱性氨基酸构成的a-helix能够与DNA结合。Eg: AP1与SV40增强子的结合(4)helix-loop-helix: 兼性a-helix具有疏水面和亲水面,两个具有这种的motif反
式因子可以形成dimer。仅靠helix的N-端有一段富含碱性氨基酸的序列可以与DNA结合。HLH 以同二聚体或者异二聚体作用于顺式作用元件。(5)同源异形结构域homeodomain,同源异性盒是一种编码60aa的序列,长180bp,几乎存在于所有真核生物中。
转录激活域:与其他转录因子相互作用的结构成分。常见的转录激活结构域有富含谷氨酰胺结构域,富含脯氨酸结构域及酸性α螺旋结构域。
Ⅱ型酶相对来说最简单,它们识别回文对称序列,在回文序列内部或附近切割 DNA ,产生带3'- 羟基和 5'- 磷酸基团的 DNA 产物,需 Mg2+ 的存在才能发挥活性,相应的修饰酶只需SAM 。识别序列主要为 4-6bp ,或更长且呈二重对称的特殊序列,但有少数酶识别更长的序列或简并序列,切割位置因酶而异,有些是隔开的。
①有特异识别和切割的序列部位
② DNA分子上两个单链断裂的部位通常不是直接相对的
③断裂所形成的DNA片段常具有碱基互补的单链尾巴(粘性末端)
④内切酶的切割和修饰功能由两个不同的酶催化所完成,即内切酶活性和甲基化作用活性是分开的
原核基因表达调控与真核存在很多共同之处,但因原核生物没有细胞核和亚细胞结构,其基因组结构要比真核生物简单,基因表达的调控因此而比较简单。虽然原核基因的表达也受转录起始、转录终止、翻译调控及RNA、蛋白质的稳定性等多级调控,但其表达开、关的关键机制主要发生在转录起始。其特点包括以下3方面:(1)σ因子决定RNA聚合酶的识别特异性:原核生物只有一种RNA聚合酶,核心酶催化转录的延长,亚基识别特异启动序列,即不同的因子协助启动不同基因的转录。(2)操纵子模型的普遍性:除个别基因外,原核生物绝大数基因按功能相关性成簇地连续排列在染色体上,共同组成一个转录单位即操纵子,如乳糖操纵子等。一个操纵子含一个启动序列及数个编码基因。在同一个启动序列控制下,转录出多顺反子mRNA。(3)阻遏蛋白与阻遏机制的普遍性:在很多原核操纵子系统,特异的阻遏蛋白是控制启动序列活性的重要因素。当阻遏蛋白与操纵基因结合或解离时,结构基因的转录被阻遏或去阻