平板划线试验

平板划线接种法
（4）分离划线接种细菌（四区接种法） ①左手持琼脂平板培养基（将皿盖反放在桌上酒精
灯附近），尽量使之直立以免空气中的细菌落入 其中，并靠近火焰。右手持接种环在琼脂平板上 端来回划线，涂成一细菌薄膜（约占平板的 1/10），视为一区。划线时使接种环与接种平板 面呈30~40度角，以腕力在平板表面行轻而快地 来回滑动动作。
平板划线实验
巴州质检所 阿依尼萨.艾依提
相关基础理论－－细菌的培养
一般细菌均可用人工方法进行培养，使其生长繁 殖，以便进一步观察和研究他们的各种生物学特 征。为了获得良好的细菌培养物，在分离培养细 菌时，除采用适宜的培养基，并考虑到其他的培 养条件之外，掌握各种分离培养和接种的基本技 术，也是重要环节。
各区接种线间尽量互不交接，以达到细菌逐渐 稀释的目的。
平板划线接种法
四区划线
平板划线接种法
平板划线接种法
（5）划线完毕，将琼脂平板放进皿盖，将培养皿倒 放，送进37℃温箱培养。
（6）培养18~24h后将培养皿取出。观察琼脂平板 表面生长的各种菌落，注意其大小、形状、边缘、 表面结构、透明度、颜色等性状。
培养基
在土壤、水、食品、空气以及人和动、植物中， 不同种类的细菌混杂地生活在一起。若要研究其 中某种细菌，就必须将各种细菌进行分离，以得 到只含有这一种细菌的纯培养。当细菌分离成纯 种后，常需要接种到有关的培养基中，以测试其 各种生物学性状，不同的细菌需要不同的培养基 进行培养。
一、培养基
培养基按其物理性状，分为固体培养基、液体培 养基和半固体培养基。 培养基按用途，分基础培养基、加富培养基、选 择培养基、鉴别培养基。
二、细菌的接种方法
将混合的细菌分离的方法有多种，平板划线法即 是其中之一，该方法主要是借划线而将混杂的细 菌在琼脂平板表面分散开，是单个细菌能固定在 某一点，生长繁殖后形成单个的菌落以达到分离 纯种的目的。 当细菌分离成纯种后，一般还可用斜面、液体和 半固体培养基来检验细菌的培养特征，因此接种 方法可相应的分为四种。
②旋转琼脂平板90度，烧灼接种环，以杀灭环 上的残留细菌，将接种环触及培养基表面以使其 冷却。灭菌接种环通过薄膜处作连续平行划线 （约占平板1/5），此视为二区。
平板划线接种法
③旋转琼脂平板90度，灼烧接种环灭菌并使之 冷却。将灭菌接种环接二区连续平行划线（约占 平板1/4），此为三区。
④旋转琼脂平板90度，接种环不必再灭菌，接 三区连续平行划线，划满平板其余部分，此视为 四区。
常见的几种细菌的培养和基接种方法举例
菌种
培养 基
平板划线接种 斜面培养基
法
接种法
液体培养基 接种法
葡萄球菌和大 肠杆菌的混合
菌液
大肠杆菌培养 物
大肠杆菌培养 物枯草杆菌培
养物
普通琼脂平板
琼脂斜面 培养基
普通肉汤 培养基
穿刺Hale Waihona Puke Baidu种法
变形杆菌培养 物痢疾杆菌培
养物 半固体琼脂
培养基
平板划线接种法
常用于分离单个菌落，也可用于观察细菌 的生长状况和观察某些生化反应。
4、平板划线接种法
图2-4 灭菌接种环
平板划线接种法
（3）取菌种 左手持装有金黄色葡萄球菌或大肠杆菌菌液的
试管，用持有接种环的右手手掌及小指拔取试管 塞，将试管管口迅速通过火焰2~3次进行灭菌。
将已灭菌且已冷却的接种环伸入菌种管中，取 一接种环的菌液，然后退出菌种管，将菌种管管 口再次通过火焰2~3次灭菌，塞好试管塞，放至 原来的位置。
平板划线接种法——接种方法
（1）标记 在培养皿底面，用记号笔注明接种的菌名、接
种 者姓名、日期等。
4、平板划线接种法
（2）灭菌接种环 点燃酒精灯，右手以持笔式握持接种环，并放置 火焰中烧灼灭菌，先将接种环的接种丝部分置于 火焰中，待金属丝烧红并蔓延至金属端，再直接 烧灼金属环直至烧红，然后由金属环至金属杆方 向快速通过火焰，随后再反方向通过火焰，如此 2~3次。然后将接种环移开火焰，待其冷却。