平板划线法试验记录
分区划线法
培养基
常用玻璃器材的准备 培养基的成分和作用 培养基的种类 培养基的制备
细菌的接种与培养
无菌技术 细菌检验的操作需在无菌室或超净工作 台内进行。 无菌室、超净工作台使用前后需进行消 毒。 细菌检验使用的物品使用前后需严格灭 菌 标本的采集 无菌试管、平皿的使用
细菌接种的基本程序
1.光滑型菌落（Smooth type Colony） ：又称S型 2.粗糙型菌落（Rough type Colony）：又称R型 3.粘液型菌落（Mucoid type Colony）又称M型
菌落（S型）
culture plate
菌落(R型)
细菌在液体培养基中的生长现象
混浊 沉淀：多见于链状排列的细菌 菌膜：多见于厌氧菌
细菌在固体培养基中的生长现象
菌落 ★定义：指单个细菌在平板培养基上生长繁殖，形 成单一肉眼可见的细菌集团。 ★菌落特征：大小、形状、边缘、颜色、表面、透 明度、湿润度、黏度、溶血性 ★菌落类型：光滑型（S）、粗糙型（R）、黏液型 （ M） 菌苔：指多个菌落融合在一起形成的细菌堆积物。
菌落的三个类型：
无动力 现象
有动力 现象
细菌培养法
一般培养（需氧培养）： ★培养温度：37℃（采用恒温培养箱） ★培养时间：18～24h
斜面接种法及接种后菌落生长 示意图
取菌的方法
接种后菌落生长示意图菌苔(lawn)
【实验结果观察记录】
细菌生长情况的观察 观察琼脂平板表面生长的各种菌落， 注意其大小、形 状、边缘、表面结 构、透明度、颜色等性状。
灭菌接种环 杀灭接种环沾染的细菌，以免污染标本
沾取标本
接种
灭菌接种环
杀灭接种环沾染的细菌，以免污染环境
《平板划线试验》课件
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接种细菌：用无菌接种环蘸取细菌 培养物，在平板上均匀涂抹
观察结果：培养结束后，观察细菌 的生长情况，记录结果
划线分离
准备平板：选择合 适的平板，如琼脂 平板、培养基平板 等
划线：使用无菌操 作，将菌液或菌落 均匀地涂布在平板 上
干燥：将涂布好的 平板放在干燥箱中 干燥，使菌液或菌 落干燥
划线深度过浅或过深都会影响实验结 果，应保持适中的深度
划线角度过大或过小都会影响实验结 果，应保持适中的角度
划线过程中应避免划破平板，以免影 响实验结果
划线过程中应避免划破平板，以免影 响实验结果
THANK YOU
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平板划线试验
汇报人：
目录
PART One
添加目录标题
PART Two
平板划线试验简介
PART Three
平板划线试验的步 骤
PART Five
平板划线试验的注 意事项
PART Four
平板划线试验的应 用
单击添加章节标题
平板划线试验简介
平板划线试验的定义
平板划线试验是一 种微生物分离和纯 化的方法
实验结束后，应及时清理实 验台和设备，保持实验室整 洁
实验结果应及时分析，包括 菌落形态、生长情况、抗药
性等
实验报告应及时撰写，包括 实验目的、方法、结果、讨
论等
影响实验结果的因素及解决方法
平板划线试验的准确性受划线速度、 划线深度、划线角度等因素的影响
划线速度过快或过慢都会影响实验结 果，应保持适中的速度
特性
菌落计数：通 过平板划线试 验，可以计算 细菌的数量和
细菌的分离培养与移植实验报告
实验五细菌的分离培养与移植[实验目的]1、掌握细菌分离培养及移植的基本要领和方法。
[实验原理]在细菌学诊断中，分离培养是不可缺少的一环。
分离培养的目的主要是在含多种细菌的病料或培养物中挑选出某种细菌。
在分离培养时应注意：选择适合于所分离细菌生长的培养基、培养温度、气体条件等。
同时应严格按无菌操作程序进行实验，并做好标记。
[实验材料]菌种：大肠杆菌斜面、大肠杆菌与金黄色葡萄球菌等。
器械：剪刀、记号笔(以上小组共用)。
培养基：普通肉汤和普通琼脂斜面、普通琼脂平板、酒精灯、接种环。
[实验内容]1、细菌的分离平板划线接种法通过在平板上划线，将混杂的细菌在琼脂平板表面充分的分散开，使单个细菌能固定在一点上生长繁殖，形成单个菌落，以达到分离纯种的目的。
若需从平板上获取纯种，则挑取一个单个菌落作纯培养。
可用做分离纯种细菌。
操作方法（三区划线法）：a、右手拿接种环，烧灼冷却后，勾取菌种。
b、左手抓握琼脂平板（让皿盖留于桌上），在酒精灯火焰左前上方，使平板面向火焰，以免空中杂菌落入，右手将已沾菌的接种环在琼脂表面密集而不重叠的来回划线，面积约占整个平板的1/5-1/6，此为第一区。
划线时接种环与琼脂呈30-40度角轻轻接触，利用腕力滑动，切忌划破琼脂。
c、接种环上多余的细菌可烧灼（每划完一个区域是否需要烧灼灭菌视标本中含菌量多少而定），待冷后，在划线末端重复2-3根线后，再划下一区域（约占1/4面积），此为第二区。
d、第二区划完后可不烧灼接种环，用同样方法划第三区，划满整个平皿。
e、划线完毕，将平板扣入皿盖并作好标记，置37℃温箱孵育18-24小时观察琼脂表面菌落分布情况，注意是否分离出单个菌落，并记录菌落特征（如大小、形状、透明度、色素等）。
平板分区划线法培养后菌落分布情况平板划线培养的方法甚多，可按各人的习惯选择应用，其目的都是达到使被检材料适当的稀释，以求获得独立单在的菌落，防止发育成菌苔，以致不易鉴别其菌落性状。
细菌的人工培养方法
细菌的人工培养方法[适用对象]生物工程专业[实验学时] 4学时一、实验目的了解常用的液体、固体和半固体培养基的成分、制备方法和用途。
初步掌握各种培养基接种技术；观察细菌在培养基中的生长现象；认识菌落、菌苔。
二、实验原理培养基是用人工方法将微生物生长繁殖所需的多种营养物质调配在一起，形成的一种营养物质的混合物，用以分离、传代和培养细菌。
按培养基的用途分为基础（普通）培养基、营养培养基、鉴别培养基，选择培养基、厌氧培养基等。
按培养基的物理形状又分为液体、固体和半固体三种。
三、仪器设备三角烧瓶、天平、试管、平皿、高压消毒灭菌器。
四、相关知识点培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质，用以培养、分离、鉴定、保存各种微生物或积累代谢产物。
在自然界，微生物种类繁多，营养类型多样，加之实验和研究目的不同，所以培养基的种类很多。
但是，不同种类的培养基中，一般应含有水分、碳源、氮源、无机盐、生长因子等。
不同的微生物在固体、半固体和液体培养基中能表现出各自特有的培养特征，这些特征可以作为不同种类微生物的鉴别特征之一。
了解它们的培养特征、掌握其生长规律对识别、控制和利用微生物具有重要价值。
五、实验步骤（一）常用培养基的制备1、普通液体培养基(1)将新鲜的精牛肉除去脂肪和筋膜制成肉馅，取500克牛肉馅加l000ml蒸馏水，置4℃冰箱浸泡过夜，使牛肉中的水溶性营养物质充分浸出。
(2)次日将浸泡过夜的牛肉馅加热煮沸30分钟，放凉，使残余的脂肪凝固，然后用纱布和滤纸过滤，最后将滤液补足为原量，此种液体为牛肉浸汁。
(3)取1 000ml牛肉浸汁加蛋白胨10克，氯化钠5克加热溶解，冷至50℃左右时用氢氧化钠调整pH至7．6，再煮沸10分钟(因牛肉浸汁中部分碳水化合物，经加热破坏产酸，影响pH；产生多磷酸盐，培养基不澄清)待冷却后，再调整pH至7．6，然后以滤纸过滤，滤液必须澄清，此种液体称为肉汤培养基。
(4)将肉汤培养基分装于试管或三角烧瓶中，塞好试管和瓶塞，包装好后，用15磅(121℃)蒸气15～30分钟灭菌。
筛选光合细菌实验报告
一、实验目的1. 掌握光合细菌的分离筛选方法。
2. 熟悉光合细菌的形态特征和生理生化特性。
3. 提高微生物实验技能，培养严谨的科学态度。
二、实验原理光合细菌是一类在厌氧条件下进行光合作用的微生物，它们能利用无机物作为碳源和能源。
本实验通过平板划线法从土壤样品中分离筛选出光合细菌，并对其进行鉴定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 土壤样品- 光合细菌培养基（PSB培养基）- 琼脂- 生理盐水- 氯化钠- 碳酸氢钠- 氯化钾- 磷酸氢二钠- 蛋白胨- 硫酸铵- 碘液- 75%酒精- 紫外灯- 恒温培养箱- 显微镜2. 实验仪器：- 高压蒸汽灭菌器- 烧杯- 玻璃棒- 离心机- 移液器- 平板划线器- 紫外线灯- 恒温培养箱四、实验步骤1. 准备PSB培养基：称取PSB培养基成分，加入适量蒸馏水，溶解后分装于锥形瓶中，121℃高压灭菌15分钟，待冷却后备用。
2. 制备土壤样品：取适量土壤样品，用生理盐水进行梯度稀释。
3. 制备平板：将PSB培养基倒入培养皿中，待凝固后，用无菌接种环取适量稀释后的土壤样品，在平板上进行划线。
4. 恒温培养：将平板置于恒温培养箱中，在适宜的光照条件下培养。
5. 观察与筛选：定期观察平板上的菌落，挑选具有明显特征的菌落进行进一步鉴定。
6. 鉴定：a. 观察菌落形态：记录菌落的颜色、大小、形状等特征。
b. 进行生理生化试验：包括氧化酶试验、糖发酵试验、淀粉酶试验等。
c. 染色观察：采用革兰氏染色法、芽孢染色法等方法，观察细菌的形态和结构。
五、实验结果与分析1. 分离筛选：从土壤样品中分离出多种菌落，其中一种菌落具有明显的绿色荧光，初步判断为光合细菌。
2. 鉴定结果：a. 菌落形态：该菌落呈圆形，直径约1-2mm，边缘整齐，颜色为绿色荧光。
b. 生理生化试验：氧化酶试验阳性，糖发酵试验阴性，淀粉酶试验阳性。
c. 染色观察：革兰氏染色为阴性，芽孢染色为阴性。
综合以上结果，初步鉴定该菌为光合细菌。
微生物接种方法
微生物接种方法微生物接种是生物实验中的一项基本技术，也是各种微生物检测和研究中不可缺少的步骤。
本文将介绍一些常见的微生物接种方法，包括平板划线法、斜面接种法、液体培养基接种法和穿刺接种法等。
平板划线法是一种常用的微生物接种方法，其目的是将菌种纯化，得到单一的菌落。
该方法通过在固体培养基上划线，使菌种在培养基上繁殖并形成菌落。
具体步骤如下：(1)将固体培养基灭菌后倒入培养皿中，待凝固后加入适量菌液。
(2)用接种环取适量菌液，在培养皿表面划线。
(3)将培养皿放入适宜的温度下培养，观察菌落的生长情况。
(4)根据需要重复划线操作，直至得到单一的菌落。
斜面接种法是一种常用的微生物接种方法，其目的是将菌种接种到斜面培养基上，以便于观察和保存。
该方法通过将菌液加入到灭菌后的斜面培养基中，使菌种在斜面上繁殖并形成菌落。
具体步骤如下：(1)将斜面培养基灭菌后放置在实验台上，用无菌操作法加入适量菌液。
(2)将接种环放入菌液中沾取少量菌种，然后在斜面培养基上划线接种。
(3)将培养皿放入适宜的温度下培养，观察菌落的生长情况。
(4)根据需要重复划线操作，直至得到单一的菌落。
液体培养基接种法是一种常用的微生物接种方法，其目的是将菌种接种到液体培养基中，以便于微生物的生长和繁殖。
该方法通过将菌液加入到灭菌后的液体培养基中，使菌种在液体培养基中繁殖并形成微生物。
具体步骤如下：(1)将液体培养基灭菌后倒入试管中，加入适量菌液。
(2)用摇床或其他设备将试管中的培养基混合均匀。
(3)将试管放入适宜的温度下培养，观察微生物的生长情况。
微生物接种技术是生物工程中一项重要的技术，广泛应用于生物制品制造、环境生物治理、医学诊断等领域。
本文将介绍微生物接种技术的基本原理、应用场景以及发展前景。
微生物接种技术是指将目的微生物通过一定的方式引入到培养基或发酵系统中，使其在特定的环境下生长繁殖，以达到特定的生物制品或环境治理的目的。
该技术的主要环节包括菌种选择、接种量确定、接种方法选择和培养条件控制等。
培养基的制备与细菌的接种的实验报告
培养基的制备与细菌的接种的实验报告篇一：细菌的分离纯化和接种实验环工综合实验细菌的分离纯化和接种实验实验报告环境科学与工程学院实验中心篇二：微生物实验报告细菌微生物实验报告题目年级专业实验者学号小组成员指导老师一、实验目的脓汁和粪便标本中病原菌的检测 2021级临床医学八年制1.了解细菌生长的基本营养条件，熟悉培养基的类型，学习并掌握培养基的原则与方法。
2.掌握无菌操作技术，掌握病原菌的分离与培养方法。
3.了解并比较细菌在固体、半固体和液体培养基的生长特征。
4.学习并掌握空气及人体细菌检测学方法。
5.掌握细菌涂片标本的制备以及革兰染色法，熟悉不同类型细菌的基本形态。
6.掌握糖发酵实验、抗菌素敏感性实验和血浆凝固酶实验的原理与方法。
7.从脓汁和粪便标本中分离培养和检测出病原体。
二、实验器材1.培养基的制备：干粉培养基、天平、蒸馏水、称量皿、药勺、锥形瓶、量筒、电炉、试管、洗耳球、试管筐、移液管、棉塞、牛皮纸、橡皮筋、手套、石棉网2.空气与人体体表细菌学检查：琼脂培养基、酒精、碘酒3.细菌的分离培养：脓汁标本、粪便标本、伊红美蓝平板、营养琼脂平板、接种环、酒精灯、打火机4.细菌的纯培养：接种环、酒精灯、打火机、中性笔、斜面培养基5.细菌的形态学检测：斜面培养物、营养肉汤、生理盐水、镜油瓶、拭镜纸、吸水纸、载玻片、显微镜、接种环、酒精灯、打火机、中性笔、革兰染色试剂、液体培养基6.细菌的生化试验：葡萄糖发酵管、乳糖发酵管、接种针、酒精灯、打火机、中性笔、菌液、营养琼脂平板、接种环、药物纸片（青霉素、庆大霉素、头孢曲松）、玻片、兔血浆、生理盐水7.细菌的血清学试验：玻片、福氏志贺菌诊断血清、生理盐水、接种环、酒精灯三、实验方法与步骤1.培养基的制备称量琼脂粉→蒸馏水→加热溶化→分装→集中放在试管筐里→罩上硫酸纸、牛皮纸→ 用橡皮筋扎好→放入讲台边的灭菌桶或灭菌筐内→送到高压蒸汽灭菌室（洗刷室）→灭菌2.空气与人体体表细菌学检查2.1空气的细菌学检查每组1个营养琼脂平板，选择实验楼女厕所→将平板盖打开，盖朝下放置在平板旁边→平板暴露于空气中15分钟→平板倒扣盖上→作标记→37℃温箱培养24小时→观察结果。
土壤菌株筛选实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 掌握土壤中微生物的分离与纯化方法。
2. 了解不同微生物的形态特征和生理特性。
3. 筛选具有特定生理功能的菌株。
二、实验原理土壤中存在着大量的微生物，包括细菌、真菌、放线菌等。
通过选择合适的培养基和分离方法，可以从土壤中分离出具有特定生理功能的菌株。
本实验采用平板划线法、涂布分离法等方法，对土壤样品进行分离纯化，并对筛选出的菌株进行鉴定。
三、实验材料与仪器1. 材料：土壤样品、牛肉膏蛋白胨培养基、琼脂糖、无菌水、无菌平板、无菌试管、接种环、显微镜等。
2. 仪器：恒温培养箱、高压蒸汽灭菌锅、电子天平、显微镜等。
四、实验步骤1. 样品处理：取一定量的土壤样品，用无菌水进行稀释，制成10^-3、10^-5、10^-7等不同浓度的土壤悬液。
2. 分离纯化：（1）平板划线法：将不同浓度的土壤悬液涂布于牛肉膏蛋白胨琼脂平板上，用接种环进行划线分离，培养24小时后观察菌落形态。
（2）涂布分离法：将不同浓度的土壤悬液涂布于牛肉膏蛋白胨琼脂平板上，用无菌玻璃棒轻轻涂布，培养24小时后观察菌落形态。
3. 菌落鉴定：（1）形态特征观察：观察菌落的大小、形状、颜色、边缘、表面等特征，记录下来。
（2）生理生化试验：对筛选出的疑似菌株进行生理生化试验，如革兰氏染色、氧化酶试验、过氧化氢酶试验等，以确定菌株的属种。
4. 结果分析：根据形态特征和生理生化试验结果，对筛选出的菌株进行鉴定，并统计不同生理功能菌株的筛选数量。
五、实验结果与分析1. 菌落形态特征观察：在牛肉膏蛋白胨琼脂平板上，观察到不同形态的菌落，如圆形、卵圆形、长条形等，颜色有白色、黄色、红色等。
2. 生理生化试验结果：（1）革兰氏染色：部分菌株为革兰氏阳性菌，部分菌株为革兰氏阴性菌。
（2）氧化酶试验：部分菌株产生氧化酶，部分菌株不产生氧化酶。
（3）过氧化氢酶试验：部分菌株产生过氧化氢酶，部分菌株不产生过氧化氢酶。
3. 结果分析：根据形态特征和生理生化试验结果，筛选出以下具有特定生理功能的菌株：（1）革兰氏阳性菌：可能为葡萄球菌、链球菌等。
枯草芽孢杆菌实验报告解析
微生物技术综合实验年级：13级生物工程（专升本）班级：2013011201学号：***********名：***指导老师：刘凤霞教授日期：二零一三十月五号目录1实验目的及原理 (1)1.1实验目的 (1)1.2实验原理 (1)2实验材料 (1)2.1实验仪器 (1)2.2实验试剂 (1)2.3培养基 (2)2.3.1 生长培养基 (2)2.3.2鉴定培养基 (2)2.3.3摇瓶培养基 (2)3试验方法 (2)3.1仪器的准备 (2)3.2培养基的配置 (2)3.3初步筛选及鉴定 (2)3.3.1采集土样 (3)3.3.2富集培养 (3)3.3.3稀释分离、纯化 (3)3.3.4初筛 (3)3.4复筛及鉴定 (4)3.4.1革兰染色 (4)3.5酶活力的测定 (4)3.5.1摇瓶培养 (4)3.5.2酶液稀释 (4)3.5.3酶液测定 (4)4结果分析 (5)4.1平板涂布分离 (5)4.2平板划线分离 (5)4.3初筛 (5)4.4复筛 (5)4.5摇瓶培养 (6)4.6酶活力测定 (6)5参考资料 (7)6附录 (8)微生物上游技术综合实验枯草芽孢杆菌的分离、纯化、筛选及鉴定1.实验目的及原理1.1实验目的（1）学习从土壤中分离、纯化枯草芽孢杆菌的原理和方法。
（2）学习掌握枯草芽孢杆菌的鉴定方法。
（3）掌握微生物的摇瓶培养方法及淀粉酶活力的测定的原理和方法。
（4）培养学生综合应用微生物实验方法的能力。
（5）培养学生自行设计实验流程、综合分析问题解决问题和判断实验结果的能力。
1.2实验原理选择合适与待分离微生物的生长条件，如营养成分、酸碱度、温度和氧等要求，或加入某种抑制剂造成只利于该微生物生长，而抑制其他微生物的环境，从而淘汰一些不需要的微生物。
将土壤稀释液倒在不同类型的培养基平板上，在适宜的环境中培养几天，细菌或是其他的微生物便能在平板上生长繁殖，形成菌落。
将初次筛选得到的微生物接到淀粉培养基上培养，因为只有能够产生淀粉酶的细菌才能够利用培养基中的淀粉成分来完成自身的生命活动，才能够生存。
绿脓细菌菌实验报告
一、实验目的1. 学习绿脓杆菌的分离与培养方法。
2. 掌握绿脓杆菌的形态观察和特征鉴定。
3. 了解绿脓杆菌的生物学特性。
二、实验原理绿脓杆菌（Pseudomonas aeruginosa），又称铜绿假单胞菌，是一种革兰氏阴性杆菌，具有运动性、形成芽孢和荚膜等特点。
绿脓杆菌广泛存在于自然界，如土壤、水、空气等，是一种条件致病菌，可引起多种感染。
本实验采用平板划线法和稀释涂布平板法分离绿脓杆菌，通过显微镜观察其形态和运动性，并对其进行革兰氏染色、氧化酶试验等鉴定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：绿脓杆菌标准菌株、土壤样品、营养肉汤、营养琼脂、生理盐水、无菌棉签、无菌镊子、无菌移液器、无菌试管、酒精灯、高压蒸汽灭菌器、显微镜、接种环、接种针等。
2. 试剂：革兰氏染液、氧化酶试剂、无菌生理盐水等。
四、实验方法1. 绿脓杆菌的分离（1）取土壤样品10g，放入100ml无菌生理盐水中，振荡混匀，制成10^-1稀释液。
（2）取10^-1稀释液1ml，加入9ml无菌生理盐水中，制成10^-2稀释液。
（3）取10^-2稀释液0.1ml，涂布于营养琼脂平板上，用接种环划线。
（4）将平板倒置，放入37℃恒温培养箱中培养24小时。
2. 绿脓杆菌的鉴定（1）观察分离得到的菌落，挑选典型菌落，用接种环挑取少量菌体，进行革兰氏染色。
（2）在显微镜下观察菌体形态，记录结果。
（3）进行氧化酶试验，观察菌体是否产生颜色变化。
五、实验结果与分析1. 绿脓杆菌的分离经过培养，营养琼脂平板上出现典型的绿色菌落，符合绿脓杆菌的特征。
2. 绿脓杆菌的鉴定（1）革兰氏染色：菌体呈革兰氏阴性，呈短杆状，两端钝圆，无芽孢，无荚膜。
（2）氧化酶试验：菌体产生颜色变化，说明具有氧化酶活性。
根据实验结果，分离得到的菌落符合绿脓杆菌的特征，可初步判断为绿脓杆菌。
六、实验结论通过本次实验，我们成功分离和鉴定了绿脓杆菌。
实验过程中，我们掌握了绿脓杆菌的分离、培养和鉴定方法，了解了绿脓杆菌的生物学特性，为后续研究绿脓杆菌的致病机制和防治提供了基础。
实验四++细菌的接种培养法与生长现象的观察
实验四细菌的接种培养法与生长现象的观察【目的和要求】1．掌握无菌技术，建立无菌观念；明确无菌操作时注意要点。
2．掌握细菌的接种、分离培养方法和接种环的制作方法。
3．熟悉细菌生长现象的观察方法。
【试剂与器材】1．菌种：葡萄球菌、链球菌、大肠埃希菌、枯草芽胞杆菌等。
2．培养基：固体、半固体、液体培养基。
3．其他：温箱、酒精灯、接种环、接种针、L形玻棒、打火机、记号笔等。
【实验内容】一、细菌的接种工具1．接种环和接种针：其结构包括环（针）、金属柄、绝缘柄三部分（见图4-1）。
其中环（针）部分最佳材料为白金丝，因其受热和散热速度快，硬度适宜，不易生锈且经久耐用，但因为价格昂贵而限制了其应用。
目前实验室常用的是经济实用的300~500W电热镍鉻丝。
一般要求接种环长5~8cm，直径为2~4mm，定量接种环的容量为0.001ml。
图4-1 接种环和接种针接种环（针）在使用之前需检查镍鉻丝是否呈直线，若有弯曲，需用吸管或接种环的另一端将其压直；若环不圆，可将镍鉻丝前端放在吸管尖部缠绕一圈，再将镍鉻丝突出的部分朝内压紧。
接种环用于固体、液体培养基的接种，接种针用于半固体培养基的接种。
2．L形玻棒：由直径2~3mm的玻璃棒弯曲成L形制成。
在使用之前用厚纸包扎后置高压蒸汽灭菌，或沾取无水乙醇后在火焰上烧灼灭菌。
主要用于液体标本涂布接种。
二、细菌的接种方法1．液体培养基的接种该法主要用于细菌的增菌培养或进行细菌的生化反应。
方法：（图4-2）（1）先将接种环在火焰上烧灼灭菌，待冷却后挑取少许细菌。
（2）左手拿试管，右手持接种环，用右手其余手指将试管塞打开，试管口通过火焰烧灼灭菌。
（3）将接种环在贴近液面的管壁上上下碾磨数次，使细菌均匀分布于培养基中。
（4）将试管口灭菌后加塞，接种环烧灼灭菌后放回原处。
（5）在试管上做好标记，经35℃培养18~24h后观察结果。
图4-2 液体培养基接种法2．半固体培养基的接种该法可用于保存菌种、观察细菌的动力或进行细菌的生化反应。
细菌培养实验报告分析
一、实验背景细菌培养是微生物学实验中一项基本且重要的技术，通过对细菌进行培养，可以观察其生长特性、分离纯化、鉴定以及进行各种生化实验等。
本实验旨在通过平板划线法分离培养细菌，并对所分离的菌落进行形态观察、生化实验和药敏试验，以分析细菌的种类和特性。
二、实验材料与方法1. 实验材料（1）菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌等。
（2）培养基：牛肉膏蛋白胨培养基、营养肉汤培养基、琼脂平板等。
（3）试剂：酚红指示剂、葡萄糖、乳糖、靛基质、甲基红、V-P试剂、革兰氏染色液等。
2. 实验方法（1）平板划线法分离细菌：将待分离的细菌接种于牛肉膏蛋白胨培养基平板上，用无菌接种环进行划线操作，重复划线直至菌落分离。
（2）观察菌落特征：观察分离的菌落形态、大小、颜色、边缘、表面等特征。
（3）进行生化实验：对分离的菌落进行葡萄糖发酵、乳糖发酵、靛基质试验、甲基红试验、V-P试验等生化实验。
（4）药敏试验：采用纸片扩散法进行药敏试验，观察细菌对多种抗生素的敏感性。
三、实验结果与分析1. 菌落特征通过平板划线法分离，我们得到了形态各异的菌落。
大肠杆菌菌落呈白色、光滑、圆形、边缘整齐；金黄色葡萄球菌菌落呈金黄色、光滑、圆形、边缘整齐；枯草芽孢杆菌菌落呈白色、粗糙、圆形、边缘不整齐。
2. 生化实验结果（1）葡萄糖发酵：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均能发酵葡萄糖，产生红色沉淀；枯草芽孢杆菌不发酵葡萄糖。
（2）乳糖发酵：金黄色葡萄球菌能发酵乳糖，产生红色沉淀；大肠杆菌、枯草芽孢杆菌不发酵乳糖。
（3）靛基质试验：金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌均产生靛基质，使培养基呈蓝绿色；大肠杆菌不产生靛基质。
（4）甲基红试验：金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌均呈阴性反应；大肠杆菌呈阳性反应。
（5）V-P试验：金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌均呈阴性反应；大肠杆菌呈阳性反应。
3. 药敏试验结果大肠杆菌对氨苄西林、头孢噻肟、头孢曲松等抗生素敏感；金黄色葡萄球菌对万古霉素、利奈唑胺等抗生素敏感；枯草芽孢杆菌对青霉素、氨苄西林、头孢噻肟等抗生素耐药。
细菌接种实验报告总结(3篇)
第1篇一、实验背景细菌接种实验是微生物学实验中的重要内容，通过对细菌进行分离、纯化和接种，我们可以研究细菌的生长、代谢、形态和生理特性。
本实验旨在通过学习细菌接种技术，掌握无菌操作的基本原则，了解细菌在不同培养基上的生长情况，为后续的微生物学研究打下基础。
二、实验目的1. 掌握无菌操作的基本原则，建立无菌观念。
2. 熟悉细菌的接种、分离培养方法和接种环的制作方法。
3. 观察细菌在不同培养基上的生长情况，了解细菌的生理特性。
4. 分析实验结果，提高实验技能。
三、实验方法1. 准备培养基：本实验选用三种培养基，分别为琼脂培养基、含有抗生素的琼脂培养基和富含糖分的琼脂培养基。
2. 细菌接种：采用平板划线分离法、斜面接种法、液体培养基接种法和穿刺接种法进行细菌接种。
3. 观察与记录：观察细菌在不同培养基上的生长情况，记录菌落形态、颜色、大小等特征。
四、实验结果与分析1. 平板划线分离法：通过连续划线接种，将混合菌分离成单菌落。
观察发现，菌落形态、颜色、大小等特征各异，表明分离效果良好。
2. 斜面接种法：用接种环取单个菌落，从培养基斜面底部向上划一条直线，然后从底部向上作连续曲线划线。
观察到菌落生长均匀，斜面顶端菌落较密集。
3. 液体培养基接种法：用接种环取菌少许，在试管内壁与液面交接处的管壁上轻轻研磨，使细菌混合于培养液中。
观察到菌液均匀，无沉淀物。
4. 穿刺接种法：用接种针取细菌少许，从半固体培养基中央，平行于管壁垂直刺入，接近管底但不可接触管底，然后接种针沿原路退出。
观察到菌落生长良好，无细菌扩散。
五、实验总结1. 本实验成功掌握了无菌操作的基本原则，确保了实验结果的准确性。
2. 通过学习细菌接种技术，了解了不同接种方法的特点和适用范围。
3. 观察了细菌在不同培养基上的生长情况，为后续的微生物学研究提供了基础数据。
4. 在实验过程中，发现了实验操作中的不足，如接种环消毒不彻底、培养基制备不规范等，为今后的实验提供了改进方向。
细菌分离画线实验报告
细菌分离画线实验报告引言细菌的分离对于研究细菌的种类和特性具有重要的意义。
细菌分离画线实验是一种常见的方法，通过在琼脂平板上均匀涂抹细菌样品并进行培养，可以单独培养出某一种细菌，并观察其生长情况和形态特征。
本实验旨在利用细菌分离画线的方法，分离出具有特定特征的细菌菌落。
实验材料和方法实验材料- 细菌样品：待分离的细菌样品- 琼脂平板：含有琼脂和适宜培养细菌的营养成分的培养基- 细菌培养基：提供细菌所需的营养物质- 培养皿：用于保存培养基和细菌- 细菌铅笔：细菌分离时用于画线的工具- 恒温培养箱：提供恒定的适宜温度用于细菌培养实验方法1. 准备琼脂平板：将琼脂平板从冰箱取出并恢复至室温，将培养基均匀涂抹在平板上，使其上下平整。
2. 细菌样品处理：将待分离的细菌样品取少量悬浊于生理盐水中，混匀。
3. 分离细菌：取一只无菌的细菌铅笔沾取少量悬浊液，在琼脂平板上画线，确保线条平整并尽量避免交叉。
4. 孵育：将琼脂平板放入恒温培养箱，设置适宜的温度，通常为37摄氏度，培养时间依细菌种类而定，通常为24-48小时。
5. 观察菌落：观察琼脂平板上出现的细菌菌落。
记录菌落形态特征，如大小、颜色、形状等。
6. 纯化菌落：根据菌落特征，挑选单个菌落转移到新的琼脂平板上，用细菌铅笔进行标记。
7. 重复培养：将分离出的单个菌落转移到新的琼脂平板上，重复培养，确保菌落的纯化。
实验结果和讨论在本次实验中，我们利用细菌分离画线的方法成功分离出了待分离细菌样品中的不同种类的细菌菌落。
经过培养后，我们观察到在琼脂平板上出现了各种不同形态的菌落。
对于培养基的选择，琼脂平板是一种常用的培养基，其成分能够提供细菌所需的营养物质，并且有助于观察细菌菌落的形态特征。
在实验过程中，细菌铅笔的使用也非常重要。
细菌铅笔应该保持无菌状态，以避免细菌样品的污染。
此外，细菌铅笔的绘线要平滑均匀，尽量避免线条的交叉，这样可以更好地分离出单个菌落，便于菌落的纯化。
设计实验微生物菌种的分离纯化、培养、、鉴定以及保藏技术
设计实验：微生物菌种的分离纯化、培养、、鉴定以及保藏技术一．实验目的1.学习大肠菌群分离纯化、鉴定的原理。
2.掌握平板表面涂布法、平板划线法的分离技术。
3.学习掌握菌种保藏的原理和方法。
二.实验原理菌种的分离纯化从混杂微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物分离与纯化。
在分子生物学的研究及应用中，不仅需要通过分离纯化技术从混杂的天然微生物群中分离出特定的微生物，而且还必须随时注意保持微生物纯培养物的“纯洁”，防止其他微生物的混入。
1.涂布平板法因为将微生物悬液先加到较烫的培养基中再倒平板易造成某些热敏感菌的死亡，且采用稀释倒平板法也会使一些严格好氧菌因被固定在琼脂中间缺乏氧气而影响其生长，因此在微生物学研究中常用的纯种分离方法是涂布平板法。
2.平板划线法最简单的分离微生物的方法是平板划线法，其原理是将微生物样品在固体培养基表面多次作“由点到线”稀释而达到分离目的的。
划线的方法很多，常见的比较容易出现单个菌落的划线方法有斜线法、曲线法、方格法、放射法、四格法等。
大肠菌群的培养鉴定大肠菌群能在乳糖胆盐液体培养液中生长，并且产气产酸，使培养液变色。
还能在伊红美兰固体培养上生长，形成黑紫色的菌落，有的还有金属光泽。
其他病原菌的菌落呈粉红色。
再做镜检观察是无芽孢的革兰氏阴性杆菌（呈红色）。
即可鉴定是有大肠菌群的菌存在。
菌种保藏菌种保藏是将微生物的菌种经长时间的保存，不污染其它杂菌，及可保持其形态特征和生理性状，减少变异，防止衰老，以便于将来使用。
保藏菌种一般是选用它的休眠休，如孢子；芽孢等等，并且要创造一个低温；干燥；缺氧；避光和缺少营养的环境条件，以利于休眠体能长期地处于休眠状态。
对于不产孢子的微生物，应使其新陈代谢处于最低状态，又不会死亡，从而达到长期保存的目的三.实验器材1.菌种：污水中的大肠菌群、酵母菌和霉菌2、培养基：乳糖胆盐液体培养基、伊红美蓝琼脂（EMB）、营养琼脂培养基、麦芽汁固体斜面培养基和马铃薯固体斜面培养基。
大肠杆菌微生物培养实验报告及评价标准
实验1 微生物的分离、培养及计数实验原理纯化分离：人为提供适宜的菌落生长的条件（包括营养、温度、Ph 等）。
用平板划线法，通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
在数次划线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞菌落。
筛选：转基因大肠杆菌有抗氨苄青霉素基因，所以在含有氨苄青霉素的LB 培养基中可以正常繁殖长成菌落。
而普通的大肠杆菌没有抗氨苄青霉素基因，咋含有氨苄青霉素的LB 培养基中不能繁殖。
由此可进行大肠杆菌的筛选。
梯度稀释并计数：通过浓度梯度稀释把液体培养基培养的大肠杆菌稀释到一定浓度，用稀释涂布平板法，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养。
在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。
由此可计数计算大肠杆菌的数量。
实验目的1. 通过制备LB 固体培养基，对平板进行划线等，学会使用固体LB 平板。
2. 通过用液体培养基，学会对微生物进行扩大培养。
3. 通过稀释，学会用计数器对微生物进行计数。
实验材料和药品待分离的大肠杆菌菌液、高压蒸汽灭菌锅、LB 固体培养基、LB 液体培养基、接种环、玻璃涂布器、培养皿、恒温培养箱、摇床、酒精灯、无菌水、移液枪、EP 管实验步骤（用简单的流程图表示）实验数据的记录与分析（如照片、表格等）实验结果与讨论结果：稀释了105计算出来的结果约为1.726×107ml/cm^3稀释了104计算出来的结果约为0.274×107ml/cm^3全组数据计算出来结果为2.233×107ml/cm^3讨论：在稀释倍数为104的试验中大肠杆菌菌落较少，原因可能是在稀释过程操作中，震荡不够，而且由于不小心洒了半管104稀释液，所以取液接种的时候底层的大肠杆菌数量偏少了。
也有可能是靠近酒精灯附近使得温度升高杀死了一部分细菌或者降低了活性。
平板划线试验
平板划线试验
平板划线试验，也称为拉格朗日试验，是一种常见的材料测试方法，旨在测定材料表面抗划痕性能。
该测试方法可以用于各种材料的测试，如金属、塑料、橡胶、陶瓷等。
测试原理：将试板置于按一定速率移动的滑动直线上，然后用标准划刀（如菲尔德划刀）在试样表面划出一道划痕，检测划痕的深度和长度。
重复进行多次划痕，以获取平均数值。
测试仪器：平板式抗抓痕试验仪，具有可调节速度和不同硬度的划刀。
测试过程：
1、准备试件：选取待测试材料，根据制造标准或设计要求切割出一定尺寸的试件。
2、清洗试件：用去污纸或棉布清洗试件表面，去除表面杂质。
3、标记试件：在试件表面标记出固定距离的测试线，确定距离后，用铅笔控制好试件的方向，使试件顺直移动，以确保准确性。
4、测试：将试件放置在平板试验仪上，导向将其固定。
打开金属壳，搭载含有合适压力和角度（角度一般为 45）的划刀。
然后按下电机启动按键，使划刀按一致的速度划过试件。
在每道划痕后，使用显微镜或裸眼观察其深度和长度。
5、记录数据：将测试数据录入电脑或记录本中，以便以后分析。
测试结果：测试结果表明了样品表面的硬度，抗划痕性能以及耐磨性能。
通过测试结果，可以判断该材料是否符合质量标准或应用要求，以便进行后续研究或生产调整。
该测试方法常用于建筑材料、汽车材料、电视屏幕、玻璃等各种材料的测试。
通过该测试方法，可以精确地测定材料的表面硬度和抗划痕性能，以确定其适用范围和使用寿命。
细菌的分离纯化生化试验以及保种
观察。
2、染色观察
• 固定的目的：
• 杀死细菌并使菌体粘附于坡片上。 • 增加细菌对染料的亲和力。
• 常用的方法有酒精灯火焰加热和化学固定二种。
染色观察
简单染色法 正染色 鉴别染色法 死菌 细菌染色法 革兰氏染色法 抗酸性染色法 芽孢染色法 姬姆萨染色法
负染色：荚膜染色法等 活菌: 用美蓝或TTC（氯化三苯基四氮唑）等 作活菌染色
项目总览
1、细菌的分离 2、生化试验 3、药敏试验 4、保存
制作: 宋云杰 指导: 薛永康
原理：在固体平板培养基上，用划线的方法或 用稀释涂布的方法将混杂菌群的微生物各个分 开，通过挑选单菌落而分离微生物。
特点： 快速、方便。 分区划线： 适用于浓度 较大的样品； 连续划线： 适用于浓度 较小的样品；
药敏片的制作
取定性滤纸，用打孔机打成6毫米直径的圆形小纸 片。取圆纸片50片放入清洁干燥的青霉素空瓶中， 瓶口以单层牛皮纸包扎。经15-20分钟高压消毒后， 放在37℃温箱或烘箱中数天，使完全干燥。 抗菌药纸片制作：在上述含有50片纸片的青霉素 瓶内加入药液0.25毫升，并翻动纸片，使各纸片 充分浸透药液，翻动纸片时不能将纸片捣烂。同 时在瓶口上记录药物名称，放37℃温箱内过夜， 干燥后即密盖，如有条件可真空干燥。切勿受潮， 置阴暗干燥处存放，有效期3-6个月。 药液的制备（用于商品药的试验）：按商品药的 使用治疗量的比例配制药液。
生化试验指导方案
生化试验结果记录
• • • •
1、注意无菌操作 2、防止杂菌的污染 3、配试剂时要准确精准 4、注意留取空白对照
通过药敏试验可以得到所检测细菌敏感 的药物，用于疾病的准确治疗。在选择 合适的药物后，还要注意轮换用药，减 少同一种药物使用的频率，从而减少细 菌耐药性产生的机率。 注意事项： 1.药敏纸片的制作。 2.《药敏试验的操作执行标准》美国临 床试验协会。2008年版
分区划线法
细菌接种的基本程序
灭菌接种环 杀灭接种环沾染的细菌，以免污染标本
沾取标本
接种
灭菌接种环
杀灭接种环沾染的细菌，以免污染环境
细菌接种法
平板划线接种法： ★目的：使混合的细菌呈单个分散生长， 形成单个菌落，以便获得纯菌。 ★方法： 分区划线法：适用于含菌量较多的标本 连续划线法：适用于含菌量较少的标本 液体培养基接种法 穿刺接种法 :用于观察细菌动力 斜面接种法 倾注培养法:用于细菌计数
细菌在半固体培养基中的生长现象
有鞭毛细菌：在培养基中沿穿刺线并向 外扩散生长，穿刺线边缘模糊。 无鞭毛细菌：只沿穿刺线生长，穿刺线 边缘清晰。
细菌的群体形态
菌落（R型）
单菌落（clone)
菌苔(lawn)
菌落
菌落与菌苔
液体培养时的群体形态：
细菌在液体培养基中的生长现象
细菌在半固体培养基中的生长现象
1.光滑型菌落（Smooth type Colony） ：又称S型 2.粗糙型菌落（Rough type Colony）：又称R型 3.粘液型菌落（Mucoid type Colony）又称M型
菌落（S型）
culture plate
菌落(R型)
细菌在液体培养基中的生长现象
混浊 沉淀：多见于链状排列的细菌 菌膜：多见于厌氧菌
★
★
分区划线法：
本次试验要求同学首先掌握细菌分离培 养的平板划线接种法。 注意：在每次划线前要烧灼接种环，以 杀灭环上留剩的菌液。
图2-3 分区划线法示意图
三段分区法 四段分区法
五段分区法
孵育后情况
分区划线法(3区)
第一区划线 灭菌接种环 第二区划线 灭菌接种环 第三区划线 灭菌接种环
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平板划线法
一、实验目的
1、了解平板划线法分离菌种的基本原理
2、练习平板划线法分离菌种的基本操作，掌握无菌操作技术
二、实验原理
平板划线法是指把杂菌样品通过在平板表面划线稀释而获得单菌落的方法。
一般是将混杂在一起的不同种微生物或同种微生物群体中的不同细胞，通过在分区的平板表面上作多次划线稀释，形成较多的独立分布的单个细胞，经培养而繁殖成相互独立的多个单菌落。
通常认为这种单菌落就是某微生物的“纯种”。
实际上同种微生物数个细胞在一起通过繁殖也可形成一个单菌落，故在科学研究中，特别是在菌种鉴定等工作中，必须对实验菌种的单菌落进行多次划线分离，才可获得可靠的纯种。
三、材料和器皿
1、菌种：前期帅选中有溶钙圈的单菌落
2、培养基：MRS固体培养基
3、器皿：无菌培养皿，接种环，培养箱等。
四、实验步骤
1、MRS培养基的配置：用MRS肉汤按每升48g计算配置，向其中加入1.5%的比例加入琼脂，按1%的比例加入CaCO3后，121℃灭菌15min。
2、倒平板：培养皿灭菌，烘干后，取灭菌的MRS固体培养基倒平板（每个平板倒10mL 左右），放入4℃冰箱备用。
3、划线：于超净工作台中，将涂布平板中的单菌落用接种环挑取，按图1中所示的方法与平板上划线。
4、将接种好的平板置于37℃厌氧培养箱中培养24h。
5、培养期间，注意观察菌的生长情况，培养结束后，拍照留底。