血液凝集反应

玻片法：（定性）
– 细菌鉴定 – ABO血型的鉴定
试管法：（半定量）
– 肥达试验（Widal test）--伤寒 – 外斐试验（Weil-Felix test）--立克次 体 – 交叉配血试验
间接凝集反应
（indirect agglutination） • 将可溶性抗原（或抗体）先吸附或偶联 与免疫无关大小适当的颗粒性载体的表 面，使之成为致敏载体颗粒，然后与相 应抗体（或抗原）作用，在适宜的电解 质存在的条件下，出现特异性凝集现象， 称间接凝集反应（indirect agglutination）或被动凝集反应 （passive agglutination）。其敏感度高 于直接凝集反应和沉淀反应。
3、加抗血清：滴加抗A，抗B血清于玻片 标记处、 4、加RBC：在抗A，抗B血清中滴加RBC各 一滴。 5、混匀：前后左右摇动，观察有无血细 胞凝集出现。 6、结果：记录受检者红细胞凝集情况及 血型鉴定结果
ABO血型结果判断
抗B
+ + -
抗A
+ + -
血型
试管凝集试验
• 多用于半定量试验，原则上是用定量抗原 悬液与一系列倍比稀释的受检血清混合， 在保温静置后观察结果，以判定受检血清 中有无相应抗体及其效价。 • 常有肥达试验，外-斐试验，交叉配血试 验等。
（可溶性抗原或抗体与载体颗粒结合）
• 电解质的存在 • 肉眼可见的凝集现象
凝集反应的发生分两阶段：
①抗原抗体的特异结合
②出现可见的颗粒凝集
凝集反应的类型
玻片凝集试验：ABO血型 直接凝集试验 试管凝集试验：外斐试验，肥达试验 正向间接凝集试验 反向间接凝集试验 间接凝集抑制试验 协同凝集试验 间接血凝试验 胶乳凝集试验 明胶凝集试验
思考题
• 凝集试验有哪些？可用于检测的原理是 什么？
实验材料与方法
• 试剂：抗A血清，抗B血清 • 材料：玻片，采血针，消毒干棉球，酒 精棉球等
实验方法与步骤
1、标记玻片：取玻片一张，一分为二，分 别标记为抗A，抗B。 2、采血：用酒精棉球消毒被检者左手无名 指或中指内侧，用采血针刺破皮肤，用干 棉球擦去第一滴血，稍加挤压，使其流出 第二滴血，装入盐水试管，摇匀，即成血 细胞悬液。
常用载体：
RBC
聚苯乙烯胶乳（polystyrene latex）
明胶颗粒
活性炭
皂土（bentonite）
火棉胶
间接凝集反应分类依据
• 根据致敏载体用的是抗原（正向）或抗 体（反向） • 根据载体（RBC，胶乳，明胶）
• 根据凝集反应的方式（间接凝集试验， 间接凝集抑制试验，协同凝集试验）
间接凝集试验
• 根据凝集反应中抗原的性质， 反应的方式分为： ①直接凝集反应 ②间接凝集反应
wenku.baidu.com
直接凝集反应（direct agglutination）
细菌、螺旋体和红细胞等颗粒 抗原，在适当电解质参与下可直接 与相应抗体结合出现凝集，称为直 接凝集反应。参加反应的颗粒性抗 原称为凝集原（agglutinogen），抗体 称为凝集素（agglutinin） 。
抗原抗体反应
免疫凝集试验
凝集反应 （agglutination）
• 是指颗粒性抗原，例如细菌、红细胞、 螺旋体、细胞性抗原，或可溶性抗原 （或抗体）与载体颗粒结合成致敏颗粒 后，与相应的抗体（或抗原）在适量的 电解质存在的条件下，经一定时间后凝 聚成肉眼可见的凝集现象。
凝集反应的特点
• 颗粒性抗原 • 致敏颗粒
玻片凝集法-ABO血型鉴定
• 试验目的
通过标准血清抗体鉴定红细胞上ABO血型
系统抗原，掌握盐水介质法进行ABO血型系
统正定型的基本操作方法和结果判断。
实验原理
• 根据IgM类特异性血型抗体与红细胞上特 异性抗原结合能够出现凝集反应的原理， 用已知IgM类特异性标准抗血清与被检红 细胞在盐水介质中反应（室温），若出现 凝集想象，表明被检红细胞膜上有与血型 抗体相对应的抗原，从而判断和鉴定被检 者的血型。
间接反应的常见类型
– 间接凝集试验
– 间接血凝试验
– 胶乳凝集试验
– 明胶凝集试验 – 间接凝集反应的应用
1、（正向）间接凝集试验
2 反向间接凝集试验
3、间接凝集抑制试验
本次实验内容
• ABO血型鉴定
目的与要求
• 掌握凝集反应的原理与类型 • 掌握玻片凝集法操作与结果判断 • 熟悉ABO血型鉴定的原理与操作