紫外分光光度法测定牛蒡子提取物总木脂素含量
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紫外分光光度法测定牛蒡子提取物总木
脂素含量
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【摘要】目的建立牛蒡子提取物中总木脂素的含量测定方
法。方法利用总木脂素与牛蒡苷对照品在同一峰位有吸收,以牛蒡苷为对照品,测定样品溶液在280 nm波长处的吸收度。结果对照品牛蒡苷浓度在0.01 804〜0.0 902 mg/mL范围内吸收度与浓度呈良好的线性关系,r=0.9 999,平均回收率98.6%, RSD=1.7%提取物中每克含总木脂素以牛蒡苷计,不得少于800 mg结论采用紫外分光光度法测定总木脂素含量方法可行,简便,稳定性可靠,精密度良好。
【关键词】牛蒡子总木脂素牛蒡苷紫外分光光度法
牛蒡子为菊科牛蒡属植物牛蒡(Arctium lappa L.)的干燥成熟果实
[1],是常用中药,始载于《名医别录》。现代历版中国药典均有收载。传统中医药理论认为,牛蒡子味苦辛,性寒,归肺胃二经,具有疏散风热,宣肺透疹,解毒利咽之功效,可用于治疗风热感冒,咳嗽痰多, 麻疹,风疹,咽喉肿痛,痄腮丹毒,痈肿疮毒等。近年来研究表明:牛蒡子提取物中主要成分是总木脂素类化合物,其具有降血糖[2],有效抑制甲型流感病毒FM1株[3],抗肿瘤及免疫活性等作用。但对
牛蒡子提取物分析方法研究报道不多,用HPLC法只分析其中两种成分一牛蒡苷和牛蒡苷元,对牛蒡子提取物中总木脂素的含量分析尚未见报道。本文采用紫外分光光度法测定牛蒡子提取物中总木脂素的含量,方法简便、快速,为寻找和利用植物资源,控制生药质量,提供了一个很好的方法。
1仪器与试药
仪器:日本岛津UV-265型分光光度仪,CQ-250型超声波清洗器。试药:甲醇(色谱纯),重蒸馏水,牛蒡苷对照品(由中国药品生物
制品检定所提供,批号819— 9401),牛蒡子药材(沈阳天益堂药房,由辽宁中医药大学中药鉴定教研室翟延君教授鉴定。
2方法与结果
2.1制法牛蒡子药材粉碎成粗粉,取1.0 kg,加95沱醇提取2次,第1次加6倍量,提取1 h,第2次加4倍量,提取1 h,滤过,合并两次提取液,回收溶剂,干燥,得牛蒡子提取物。
2.2对照品溶液制备精密称取牛蒡苷对照品4.51 mg,置50 mL量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,精密吸取对照品溶液 5.0 mL 置10 mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,制成每1 mL含0.0 451 mg的溶液,作为对照品溶液。
2.3供试品溶液制备取牛蒡子提取物0.1 g,精密称定,置100 mL 量瓶中,加甲醇60 mL超声使溶解并稀释至刻度,摇匀。精密吸取 2 mL,置
50 mL量瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液。
2.4测定方法分别取供试品溶液、对照品溶液在280 nm波长处测定吸收度,计算,即得。
2.5线性范围考察
精密称取牛蒡苷对照品4.51 mg,置50 mL量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,制成每1 mL含0.0 902 mg的对照品溶液,分别精密吸取对照品溶液2.0、4.0、6.0、8.0、10.0置10 mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,在280 nm波长处测定吸收度。以对照品浓度为横坐标,吸收度为纵坐标,绘制标准曲线,经线性回归,得回归方程为:
C=10.7 816A-0.0 053,r=0.9 999,由此可见,牛蒡苷的浓度在0.01 804〜0.0 902 mg/mL内线性关系良好。
2.6 稳定性试验考察
取同一供试品溶液(批号080602),按0,0.5,1.0,1.5,2.0,2.5 h 时间间隔进行测定。结果RSD为0.8% (n=6),表明总木脂素性质较
稳定,样品液在2.5 h内测定,结果可靠。
2.7精密度试验考察
取同一供试品溶液(批号080602),连续测定6次。结果RSD为0.4%(n=6),表明仪器精密度良好。
2.8重复性试验考察
精密称取6份(批号080602)样品0.1 g,按供试品溶液的制备项下方法操作,测定结果总木脂素平均含量为931.6 mg/g,RSD为1.3%
(n=6),表明本试验测定方法的重复性良好。
2.9加样回收率试验考察
精密称取已知准确含量的样品(批号080602,含量931.6 mg/g)0.07 g,精密加入牛蒡苷对照品溶液(1.604 mg/mL) 15 mL,按供试品溶液的制备项下方法操作,测定结果见表1。表1加样回收率试验考察结果序号取样量
上述测定结果提示,回收率在97.0%〜101.2%之间,RSD为1.7%, 符合有关规定。
2.10提取物含量测定数据
取3批提取物,按供试品溶液制备项下的方法操作,测定3批样品
中总木脂素含量,测定结果见表2。表2 3批样品总木脂素含量批次总木脂素含量根据上述测定结果,暂定提取物中每克含总木脂素以牛蒡苷计,不得低于800 mg。
3讨论
3.1总木脂素类含量测定的定量指标与定量方法的建立本提取物
由牛蒡子一味药经提取加工制成,经查阅文献[2,3],牛蒡子含有的木脂素类化合物为其主要活性成分,含量测定方法研究中发现,总木脂素与牛蒡苷对照品在同一峰位有吸收,故以牛蒡苷为对照品,采用紫外分光光度法测定提取物中总木脂素的含量。
3.2通过紫外分光光度法测定提取物中总木脂素含量,方法的精密度、稳定性、重现性均良好,简便易行,为牛蒡子提取物的研制开发奠定了基础。
【参考文献】
:1]国家药典委员会.中国药典一部[S].北京:化学工业出版社,2005:48.
[2] 徐朝晖,赵爱华,高先富,等.具降糖活性的牛蒡子提取物的化学成分[J].中国天然药物,2006, 4(6): 444-447.
[3] 王雪峰,潘曌曌,闫丽娟,等.牛蒡子提取物体外抗甲型流感病毒FM1株的实验研究[J].中医研究,2007, 20(6):18-21.