影响淀粉酶酶活性的因素
探究温度、PH对酶活性的影响
2% 新鲜淀粉酶溶液,3% 可溶性淀粉溶液,碘液,水,冰 块。
试管,试管架,烧杯,滴管,酒精灯,温度计,试管夹, 石棉网。
温度对淀粉酶活性的影响
2 mL淀粉溶液 2 mL淀粉溶液 2 mL淀粉溶液
A
B
C
1 mL淀粉酶溶液 1 mL淀粉酶溶液 1 mL淀粉酶溶液
A’
B’
C’
A和A’温试管度放对入淀冰块粉中酶,B活和性B’的试管影放响入温水(约
探究影响酶活性的因素
影响作酶出的假活设性的因素有
• 温度 • pH • 重金属 • 某些盐或有机溶剂
1.探究温温度度对对淀酶粉活酶性活的性影的响影响
淀粉+淀粉的温度
温度对淀粉酶活性的影响
• 原理
淀粉酶能催化淀粉分解。碘液检测剩余的淀粉的含量来反 映淀粉酶的活性。颜色越深,剩余的淀粉越多,酶活性越小。
60℃),C和C’试管放入沸水中,维持各自的温度5 min。
A
A’ B
B’
C
C’
0℃ 冰块
60℃
100℃ 沸水
分别将温A度和A对’试淀管粉,酶B和活B’性试的管,影C和响C’试管
混合,振荡,置于原来水浴中保温5 min。
A’
B’
C’
A
B
C
0℃
60℃
100℃ 沸水
目的:使反应终止
取出3支试管,放入冰块中,使温度都为0℃,分别 滴入3滴碘液,摇匀,观察记录颜色变化。
火柴。
pH对H2O2酶活性的影响
步骤:
1. 取6支试管,标号1、2、3、4、5、6,向1、2、3试 管分别加入3 mL 30% H2O2 溶液;4、5、6试管分别 加入1mL肝脏研磨液。
唾液淀粉酶活性的测定
参考文献:
[1]]周锦兰,张开诚.实验化学[M].武汉:华中科技大学出版社,2006:310-311.
[3]许冰,原媛,赵文献.pH值对酶活性影响的实验观察[J].临床合理用药杂志,2010,3(10):35-35.
[4]冯攸科.唾液淀粉酶活性的最适温度质疑[J].《中等医学教育》1996(03了不同条件下唾液淀粉酶的活性差异,实验结果表明,影响唾液淀粉
酶活性的因素很多,必须在适宜的条件下,才能发挥最佳催化作用;淀粉酶具有
高度专一性,其活性受温度、pH值、激活剂及抑制剂、酶浓度以及作用时间等多
种因素的影响;每个人产生唾液淀粉酶的量不同,活性强弱也有差异。
关键词:淀粉酶;活性;温度;抑制剂;激活剂;专一性
向上面的剩余溶液中加2mL班氏试剂,放入沸水中加热10分钟左右,观察现象
2、pH对酶活性的影响:取4支试管,分别加入0.4%盐酸、0.1%乳酸、蒸馏水与1%碳酸钠各2mL,再向以上四支试管中各加2mL1%淀粉溶液及2mL淀粉酶试剂,在沸水浴中加热,根据生成红棕色沉淀的多少,说明淀粉水解的强弱。
3、温度对酶活性的影响:取3支试管,各加3mL1%淀粉溶液;另取3支试管,各加1mL淀粉酶液。将此6支试管分为3组,每组中盛淀粉溶液与淀粉酶液的试管各1支,三组试管分别置于0°C、37°C与70°C的水浴中。5分钟后,将各组中的淀粉溶液倒入淀粉酶液中,继续维持原温度条件5min后,立即加2滴碘液,观察溶液颜色的变化。根据观察结果说明温度对酶活性的影响。
低浓度的Cl-离子能增加淀粉酶的活性,是它的激活剂。Cu2+等金属离子能降低该酶的活性,是它的抑制剂。
(三)器材及试剂
1、器材:试管、酒精灯、烧杯、恒温水浴锅、量筒、冰浴、玻璃棒、试管夹、白磁板、试管架、铁三脚架、唾液淀粉酶
影响淀粉酶活性因素
温度、PH值、金属离子等均能影响酶的活度,具体表现在以下几个方面:①温度:由于酶对热是不稳定的,所以在不同的温度下,酶的活度是不同的。
低温时,酶的活度很低,随着温度的升高,酶的活度逐渐增加,在某一温度下,酶的活度表现最高,此温度称为这种酶的最佳温度。
所谓稳定温度是指酶在该温度范围内是稳定的,不发生或极少发生失活现象。
每种酶都有它的稳定温度和作用最佳温度。
酶退浆应选择所用酶的最佳温度,以使酶的活性及活性的稳定性都具有较大的数值。
胰酶的耐热性较差,稳定温度若低于35℃,高于55℃,则即失活,它的最佳温度为40~55℃,而BF-7658淀粉酶的耐热性高,40~85℃活性较高,20℃时也有较高的活性,当温度为100℃时,其活性尚未完全消失。
酶的最佳温度可因加入某些活化剂而提高。
同时可因与淀粉作用的时间不同而不同。
表BF-7658淀粉酶的最佳温度与作用时间的关系与淀粉作用时间(min)作用最佳温度(℃)60 7030 8015 902-3 100由表可知,BF-7658淀粉酶的最佳温度随反应时间的缩短而提高。
在实际生产中,经常采用短时间高温的处理工艺。
如BF-7658淀粉酶在55~60℃轧酶后,再用汽蒸或热浴处理来求得快速退浆,使生产连续化,其机理是酶的破坏瞬间也是酶发挥最大作用的时间。
②pH值:pH值对酶的活性影响很大,不同PH值下测得酶的活度及稳定性是不同的。
酶具有最大活性与最大稳定性所需的PH值是不同的,但适当选择可兼顾活度与稳定性。
BF-7658淀粉酶在PH6.0~6.5范围内,其活度与稳定性可以兼顾。
胰酶在PH为6.8~7.3范围内,其活度与稳定性可兼顾。
③活化剂与抑制剂:淀粉酶对淀粉的消化作用常受到一些药品的影响而变得活泼或迟钝,这种现象叫活化(激化)或阻化(抑制),这种化学药品称为活化(激化)剂或阻化(抑制)剂。
例如一些轻金属盐类,都是活化剂,其中较常用的是氯化钠和氯化钙。
所以为了提高酶的活性,酶退浆时可用适当的硬水(含有一定量的Ca+、Mg1+等离子),而不必加软水剂。
实验二、外界因素对唾液淀粉酶活性影响
唾液 现象 解释
1 2
3
2ml 2ml
2ml
1ml 0
0
0 1m l
0
0 0
1ml
1ml 1ml
1ml
2、将3支试管放入370C水浴中,并在白色 比色盘上用碘液检查第二管,待碘液不变 色时,向各管加碘液一滴,观察水解情况。
四、分析讨论
1 2 3
2ml 2ml 2ml
1ml 1ml 1ml
0 0C 370C
沸水浴
(3) 在比色盘上加 I2 液2滴于各孔中,每
隔一分钟,从第二管中取反映液1 滴与I2 液混合,观察颜色反应。 (4)待第二管中反应液遇I2,不发生颜色 变化,(即只呈碘的颜色),各管 中加入I2 液1滴,摇匀,观察并记录 各管颜色。
麦芽糖
加 碘
葡萄糖
变蓝
蓝、紫、褐、红
不变色
三、实验步骤
1、温度对酶活性的影响 (1)唾液淀粉酶制备:
每人用自来水漱口3次,然后取20ml 蒸馏水含于口中,半分钟后吐入烧杯 中,棉花过滤,取滤液供实验用 。 (2)取3支试管编号按表中数据加液,操 作按(表一)表一试管号源自0.5%淀唾液温度
现象
解释
粉
2.pH对酶活性的影响 表二
试管号
1
2 3
pH缓 0.5%淀 冲液 粉液 370 C PH5. 2ml 0 2ml 保 PH6. 82ml PH8. 0 2ml
唾液
现象
解释
2ml
2ml 2ml
2ml 2ml
温 3 分 钟
3.酶的激活剂及抑制剂对酶活性的影响 表三
试管号 0.5%淀 1%CuSO4 0.5 蒸馏水 %Na 粉液 Cl
探究影响酶活性的因素实验报告
探究影响酶活性的因素一、探究温度对酶活性的影响(一)实验原理(注:市售a-淀粉酶的最适温度约600C):1.淀粉遇碘后,形成紫蓝色的复合物。
2.淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖,麦芽糖和葡萄糖遇碘后不显色。
(二)方法步骤:1、取3支试管,编上号(A、B、C),然后分别注入2mL可溶性淀粉溶液;2、另取3支试管,编上号(a、b、c),然后分别注入1mL新鲜淀粉酶溶液;3、将装有淀粉溶液和酶溶液的试管分成3组,A和a试管放入热水(约600C)、B和b放入沸水,C和c放入冰块中,维持各自的温度5min;思考题1、不能只用不同温度处理淀粉溶液或酶溶液,这是为什么4、分别将淀粉酶溶液注入相同温度下的淀粉溶液中,摇匀后,维持各自的温度5min;5、在3支试管中各滴入1-2滴碘液,摇匀后观察这3支试管中溶液颜色变化并记录;思考题2、在试管A、B、C中分别能观察到什么现象思考题3、通过上述实验,你能得出什么结论思考题4、在上述实验中,自变量是什么无关变量是什么思考题5、探究温度对酶活性的影响实验中是否可以用斐林试剂来检验实验结果为什么二、探究PH值对酶活性的影响(一)实验原理:思考题6、请依据下面所列实验操作步骤,写出该实验的实验原理。
步骤:用表格显示实验步骤:(注意操作顺序不能错)思考题7、请在上表中填入你所观察到的实验现象。
思考题8、通过上述实验,你能得出什么结论思考题9、在上述实验中,自变量是什么无关变量是什么思考题10、在设计“影响酶活性的条件”实验中最关键的一步是什么附加实验:思考题11、能否用淀粉酶探究PH对酶活性的影响1.(多选)在证明酶的催化作用受温度影响的实验时,有学生取两支试管分别将淀粉溶液与唾液混合后,分别将试管放在冰水、沸水中5min后,待试管冷却后分别加入3滴碘液,结果两支试管都变蓝,证明酶的催化作用需要适宜的温度。
此实验的不足之处是A.酶与淀粉不能在设置各自温度之前接触B.缺少温度为37℃的对照实验C.这两支试管都不应变蓝D.不能用碘液检验是否存在淀粉2.(多选)下图表示的是在最适温度下,反应物浓度对唾液淀粉酶所催化的化学反应速率的影响。
谷物种子萌发时淀粉酶活性测定影响因素分析
a d g r n t n d y , u a c a i i e a e p o i . n emi ai a s b ts e h r y t o f me b h v d o p st e
Ke r s: wh a e y wo d e ts d;g r n t n;a ls ciiy e e mi ai o mya e a tvt
制备好 的酶溶液, 搅匀 , 立即记时间。分别在室温 l、 0 1 、Oc的条件 下 , 52 = 【 吸上述混 合 液各 1 于 白瓷 板上 , 滴 加 1 比色稀 碘液 , 滴 观察 颜 色 , 与标 准 糊 精 比较颜 色 ,
相 同即是 反应达 到终点 , 记录糖 化时 间 t 实验 重复 。每 3次 , 其均值 。 求
研究报告
徐
皓 等 : 物种子萌发时淀粉酶活性测定影 响因素分析 谷
谷 物种 子 萌发 时 淀粉 酶 活 性 测定 影 响 因素分 析
徐 皓
( 陕西理工学院生物科学与工程学院, 陕西 汉中 730 ) 20 1
摘要 : 用碘- 采 淀粉比 色法, 究不 同室温、 同水浴温度 、 研 不 不同萌发 天数 小麦种子萌发 时淀粉酶 活性 的大小。结果表 明 : 室温 2 0℃左右, 水浴 加 ℃, 萌发天数 5d时, 淀粉酶的 活性最强。在一定 范围 内, 随着室温、 水浴温度 的升 高, 萌发天数 的增长 , 糖化时间会 缩短 , 淀粉 酶的活性也会随之上升。 关键词 : 小麦种子 ;萌发 ; 淀粉酶活性 中图分类号 : Q8 4 1 文献标志码 : A 文章编号 : 10 — 7 5 2 1 ) 3 0 3 3 0 1 4 0 (0 0 0 - 1- 0 0
An lsso n u n e F co sAb u tr n t n Amya e Acii ay i n I f e c a tr o tDeemiai l o ls t t vy
淀粉酶活性测定实验报告
淀粉酶活性测定实验报告淀粉酶活性测定实验报告引言:淀粉酶是一种重要的酶类,它在生物体内起着关键的消化和代谢作用。
淀粉酶能够将淀粉降解为较小的分子,以供生物体吸收和利用。
因此,测定淀粉酶的活性对于了解生物体的消化系统以及酶的功能机制具有重要意义。
本实验旨在通过测定淀粉酶的活性,探究其在不同条件下的变化规律,从而加深对淀粉酶的认识。
材料与方法:1. 实验器材:试管、移液管、恒温水浴、分光光度计。
2. 实验试剂:淀粉溶液、淀粉酶溶液、碘液、磷酸盐缓冲液。
3. 实验步骤:a. 准备一系列稀释淀粉酶溶液,分别为0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mg/mL。
b. 取一定量的淀粉溶液置于试管中,加入相应浓度的淀粉酶溶液,混匀。
c. 将试管置于恒温水浴中,保持温度在37°C,反应10分钟。
d. 在反应结束后,加入适量的磷酸盐缓冲液停止反应。
e. 加入适量的碘液,使溶液变为蓝黑色。
f. 使用分光光度计测定溶液的吸光度,记录下吸光度值。
g. 重复以上步骤,分别测定其他浓度的淀粉酶溶液。
结果与讨论:通过实验测定,我们得到了不同浓度淀粉酶溶液的吸光度值,并以吸光度值作为淀粉酶活性的指标。
根据实验结果,我们可以得出以下结论:1. 淀粉酶活性与浓度呈正相关关系:实验结果显示,随着淀粉酶溶液浓度的增加,吸光度值也随之增加。
这表明淀粉酶的活性与其浓度呈正相关关系。
当淀粉酶溶液浓度较低时,其活性较弱,无法有效降解淀粉;而当浓度增加时,淀粉酶活性也相应增强,能够更快速地将淀粉降解为较小的分子。
2. 淀粉酶活性受温度影响较大:实验中将反应温度保持在37°C,这是因为淀粉酶在人体内的最适温度为37°C。
然而,当温度偏离最适温度时,淀粉酶的活性会受到显著影响。
过高或过低的温度都会导致淀粉酶的构象变化,从而影响其催化效率。
因此,合适的温度对于淀粉酶的活性至关重要。
3. 淀粉酶活性受pH值影响:酶活性与pH值之间存在一定的关系。
影响淀粉酶酶活性的因素
一、目的了解淀粉在水解过程中遇碘后溶液颜色的变化。
观察温度、pH、激活剂与抑制剂对淀粉酶活性的影响。
二、原理人唾液中淀粉酶为α—淀粉,在唾液腺细胞中合成。
在唾液淀粉酶的作用下,淀粉水解,经过一系列被称为糊精的中间产物,最后生成麦芽糖和葡萄糖。
淀粉→紫色糊精→红色糊精→麦芽糖、葡萄糖淀粉、紫色糊精、红色糊精遇碘后分别呈蓝色、紫色与红色,麦芽糖、葡萄糖遇碘不变色。
唾液淀粉酶的最适温度为37-40℃,最适pH为。
偏离此最适环境时,酶的活性减弱。
低浓度的氯离子能增加淀粉酶的活性,是它的激活剂。
铜离子等金属离子能降低该酶的活性,是它的抑制剂。
三、试剂和仪器1.碘液:称取2g碘化钾溶于5ml蒸馏水中,再加1g碘。
待碘完全溶解后,加蒸馏水295ml,混合均匀后贮存于棕色瓶内。
2.1%淀粉溶液:称取1克可溶性淀粉放入小烧杯中,加少量蒸馏水做成悬浮液。
然后在搅拌下注入沸腾的蒸馏水中,继续煮沸1分钟,冷后再加蒸馏水定容至100ml。
3.%的盐酸溶液4.%的乳酸溶液。
5.1%的碳酸钠溶液。
6.%的氯化钠溶液。
7.%的硫酸铜溶液。
8.仪器:试管试管架吸管玻璃棒白磁板烧杯漏斗恒温水浴量筒冰浴四、操作步骤1.淀粉酶液的制备:实验者先用蒸馏水嗽口,然后含一口蒸馏水于口中,轻嗽一、二分钟,吐入小烧杯中,用脱脂棉过滤,除去稀释液中可能含有的食物残渣。
最后将数人的稀释液混合在一起,再进行过滤,以避免个体差异。
2.pH对酶活性的影响取4支试管,分别加入%盐酸(pH=1),%乳酸(pH=5),蒸馏水(pH=7),与1%碳酸钠(pH=9)各2毫升,再向以上四支试管中各加入2毫升淀粉溶液及淀粉酶液。
混合摇匀后置于37℃水浴中保温。
2分钟后,从蒸馏水试管中取出一滴溶液,置于白磁板上,用碘液检查淀粉的水解程度,待蒸馏水试管内的溶液遇碘不再变色后,取出所有的试管,各加碘液2滴,观察溶液颜色的变化。
根据观察结果说明pH对酶活性的影响。
3.温度对酶活性的影响取3支试管各加入3毫升2%淀粉溶液,另取三支试管,各加入1毫升淀粉酶液。
唾液淀粉酶酶活性的影响因素及测定方法综述
唾液淀粉酶酶活性的影响因素及测定方法综述摘要:唾液淀粉酶是唾液蛋白的重要组成部分,并且唾液淀粉酶的活性是反映自主神经系统最为灵敏的指标,有理想的应用研究价值。
本文总结介绍了影响唾液淀粉酶的常见因素,以及五种唾液淀粉酶活性的测定方法,对于临床实验以及后续研究提供一定参考。
关键词:唾液淀粉酶,酶活性影响因素,淀粉酶活性测定一、引言生物酶几乎参与了生物体内所有的生物化学反应,并且酶是生命运动、细胞活动中的不可缺少的一部分。
它是一种具有生物催化活性的生物大分子[1]。
唾液淀粉酶(salivary alpha-amylase,sAA)是唾液蛋白的重要组成部分,约占唾液总蛋白的40% ~ 50%[2],常用作唾液蛋白分泌的主要指标。
交感神经系统与副交感神经系统协调作用于唾液蛋白的分泌[3],而唾液淀粉酶活性是交感神经最灵敏的指标。
随着技术发展,唾液淀粉酶的活性测定的准确度及可靠性日渐增加,且常被运用于中医脾虚证的临床辩证、治疗等方面[4]。
而唾液淀粉酶作为一种生物催化剂,具有专一性和高效性的同时,它相较于常见的化学催化剂更易受外界环境影响,导致其活性下降,甚至失活,为临床研究造成困扰。
本文就对常见的影响唾液淀粉酶活性的因素与其活性测定方法的相关资料进行了收集与整理,便于进行实验验证与探究。
二、影响唾液淀粉酶活性的因素(1)温度大多数生物酶的化学本质都为蛋白质,其抗热性较差。
在0℃~40℃的温度范围内,酶催化作用速度随着温度的升高而加快。
温度超过60℃时,绝大多数的酶都会失去活性。
唾液淀粉酶的最适温度约为37℃。
(2)pH值酶对环境中的pH十分敏感,只有在一定的pH范围内才能表现出活性,超过这个范围,酶就失活了。
一般酶的最适pH在4~8之间。
唾液淀粉酶的最适pH值约为6.8。
(3)AMY1基因拷贝数及多态性唾液淀粉酶的编码基因AMY1位于染色体1p21上,不同个体之间该基因的拷贝数存在差异,变化范围为2至15倍,研究显示口腔中的唾液淀粉酶含量与AMY1基因拷贝数正相关[5]。
探究温度对淀粉酶活性的影响课件高一上学期生物沪科版必修(1)
因变量
无关 变量
Y型试管
多孔反应板
三、实验创新
实验方法创新-1
检测结果 高效、稳定
自变量 因变量
无关 变量
相同实验条件下不同小组测得的实验数据
三、实验创新
实验方法创新-2
自变量
无关 变量
淀粉溶液 上清液
淀粉与水解产 物有效分离
淀粉溶液 抽滤液
四、效果与评价
高效 可控 稳定
15%
四、效果与评价
一、实验分析
实验器材
1
试
23
剂
自变量 准 因变量
移液枪
天平
备
试剂
超滤膜抽滤装置
7
定 手持折光仪(糖度计)
量无关 检变量
测
8
Y型试管
5
4
数码恒温水浴锅
反应 过程
多孔反应板
6
二、实验过程
实验准备-完善实验方案
自变量
信息技术赋能 数字化赋能
线上
学习通平台
无关 变量
线下
二、实验过程
实验探究
1. 吸取 2mL 1%淀粉和1mL 1%酶溶液 自变量
科学探究
03
通过小组合作完成温度 对淀粉酶活性的影响的 探究,运用所学知识解 决实际问题
一、实验分析
实验内容
○ 实验1 探究温度对淀粉酶活性的影响 ○ 实验2 探究淀粉酶的热稳定性
淀粉酶在不同温度条件下预处理20min
一、实验分析
实验原理 酶的活性
淀粉酶 淀粉
减少量
麦芽糖(还原糖)
增加量
反应时长 测量方法
无关 变量
用移液枪定量吸取淀粉和酶溶液
二、实验过程
实验6 影响酶活性的因素
2
步骤
取三只试管,按下表加入试剂。
试 管 号 0.1% 硫 酸 铜 1%氯化钠 氯化钠 蒸 馏 水 0.1% 淀 粉 淀粉酶 碘—碘化钾溶液 碘化钾溶液 8 \ 1ml \ 3ml 1ml 2—3d \ \ 3ml 1ml 2—3d 9 1ml 10 \ \ 1ml 3ml 1ml 2—3d
混匀37 保温10—15min冷却。 冷却。 混匀 ℃保温 冷却
六思考题
1. 激动剂和抑制剂有哪几种类型?其作用原理是什么? 2.温度和pH影响酶活性的原理是什么? 3.联系实验结果及所学理论,说明pH对酶活性的影响有什么规 律和实际意义? 4. 酶作为生物催化剂具有哪些特征? 5. 进行酶学实验必须注意控制哪些条件?为什么?
向各试管中加入淀粉酶的时间尽量保持一致。 向各试管中加入淀粉酶的时间尽量保持一致。将各 试管内容物混匀,并依次置于37 恒温水浴中保温。 37ºC 试管内容物混匀,并依次置于37 C恒温水浴中保温。
2
步骤
第8管加入淀粉酶2min后,每隔1min由第7管 取出一滴混合液,置于白瓷板上,加1小 滴碘 化钾—碘溶液,检验淀粉的水解程度。待混合 液变为黄色时,向所有试管依次添加1—2滴碘 化钾—碘溶液。添加碘化钾—碘溶液的时间尽 量保持一致.
混匀,37℃保温15min. ℃
Benedict 2ml 2ml
混匀,沸水浴中煮2 3min。观察有无黄色沉淀产生。 黄色沉淀产生 混匀,沸水浴中煮2—3min。观察有无黄色沉淀产生。
二 温度对酶活力的影响
1 原理
酶的催化作用受温度的影响,在最适温度下,酶的 反应速度最高。大多数动物酶的最适温度37—40℃ ,植 物酶的最适温度为50—60℃ 。酶对温度的稳定性与其存 在形式有关。有些酶的干燥制剂,虽加热到100℃ ,其活 性并无明显变化,但在100℃的溶液中却容易失活。低温 能降低或抑制酶的活性,但不能使酶失活。
测定淀粉酶活性实验报告
一、实验目的1. 了解淀粉酶的生物学特性及其在生物体内的作用。
2. 掌握淀粉酶活性的测定方法。
3. 分析淀粉酶活性受温度、pH值等因素的影响。
二、实验原理淀粉酶是一种水解淀粉的酶,可以将淀粉分解为麦芽糖和葡萄糖。
淀粉酶活性是指单位时间内淀粉酶催化淀粉分解的速率。
本实验采用DNS法测定淀粉酶活性,DNS 法是一种灵敏、准确、精确度高的测定方法,适用于测定小样品淀粉酶活性。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:淀粉酶、淀粉、DNS试剂、标准葡萄糖溶液、pH缓冲液、蒸馏水、试管、恒温水浴锅、移液器、量筒、滴定管等。
2. 实验仪器:pH计、电子天平、电子显微镜、分光光度计等。
四、实验步骤1. 配制淀粉酶溶液:称取适量淀粉酶,用蒸馏水溶解,配制成一定浓度的淀粉酶溶液。
2. 配制淀粉溶液:称取适量淀粉,用蒸馏水溶解,配制成一定浓度的淀粉溶液。
3. 测定淀粉酶活性:取一定量的淀粉溶液于试管中,加入适量淀粉酶溶液,置于恒温水浴锅中,在一定温度下反应一定时间。
4. 测定DNS反应液:取一定量的反应液,加入DNS试剂,置于沸水浴中反应一定时间。
5. 比色:用分光光度计在特定波长下测定DNS反应液的吸光度。
6. 计算淀粉酶活性:根据标准葡萄糖溶液的吸光度值,绘制标准曲线,计算反应液中葡萄糖的浓度,进而计算淀粉酶活性。
五、结果与分析1. 淀粉酶活性随温度升高而增加,在一定温度范围内达到最大值,之后随温度升高而降低。
2. 淀粉酶活性随pH值升高而增加,在一定pH范围内达到最大值,之后随pH值升高而降低。
3. 淀粉酶活性受激活剂和抑制剂的影响,其中激活剂可以增强淀粉酶活性,抑制剂可以抑制淀粉酶活性。
六、实验结论1. 淀粉酶是一种水解淀粉的酶,在生物体内具有重要作用。
2. DNS法是一种灵敏、准确、精确度高的测定淀粉酶活性的方法。
3. 淀粉酶活性受温度、pH值、激活剂和抑制剂等因素的影响。
七、实验讨论1. 实验过程中,淀粉酶溶液和淀粉溶液的浓度对实验结果有较大影响,需要严格控制浓度。
淀粉酶活性测定实验报告
一、实验目的1. 了解淀粉酶的生物学特性及其在生物体内的重要作用;2. 掌握淀粉酶活性测定的原理和方法;3. 通过实验,探究温度、pH值等因素对淀粉酶活性的影响。
二、实验原理淀粉酶是一种能够水解淀粉的酶,其活性高低可以反映酶的催化能力。
本实验采用DNS 法测定淀粉酶活性,DNS 法是利用淀粉酶催化淀粉水解生成还原糖,还原糖与DNS 试剂发生反应,产生黄色化合物,通过比色法测定还原糖的浓度,从而间接反映淀粉酶的活性。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 淀粉酶(市售)- 淀粉溶液- DNS 试剂- 碘液- 酚酞指示剂- 蒸馏水- pH 试纸- 温度计2. 实验仪器:- 721分光光度计- 磁力搅拌器- 电子天平- 试管- 移液器四、实验步骤1. 配制淀粉酶溶液:将市售淀粉酶按照说明书配制一定浓度的淀粉酶溶液。
2. 设置实验组:- 温度实验组:分别设置30℃、40℃、50℃、60℃、70℃ 的温度梯度,每组加入相同量的淀粉酶溶液和淀粉溶液,搅拌反应 10 分钟。
- pH 值实验组:分别设置 pH 3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0 的 pH 值梯度,每组加入相同量的淀粉酶溶液和淀粉溶液,搅拌反应 10 分钟。
3. DNS 反应:- 取反应后的溶液,加入 DNS 试剂,沸水浴加热 5 分钟。
- 取出后,加入 1 滴酚酞指示剂,继续沸水浴加热 5 分钟。
4. 比色:- 使用 721 分光光度计在 540 nm 波长下测定溶液的吸光度值。
5. 数据处理:- 根据标准曲线,计算各组反应生成的还原糖浓度。
- 比较各组实验结果,分析温度、pH 值等因素对淀粉酶活性的影响。
五、实验结果与分析1. 温度对淀粉酶活性的影响:- 从实验结果可以看出,淀粉酶活性随着温度的升高而增加,在60℃ 时达到峰值,之后随着温度的继续升高,淀粉酶活性逐渐降低。
2. pH 值对淀粉酶活性的影响:- 从实验结果可以看出,淀粉酶活性在 pH 6.0 时达到峰值,之后随着 pH 值的继续升高或降低,淀粉酶活性逐渐降低。
淀粉酶活性测定实验报告
淀粉酶活性测定实验报告2 淀粉酶活性测定实验报告一、实验目的1. 学习使用淀粉酶活性测定方法来评估淀粉酶的活性。
2. 了解淀粉酶在不同条件下的活性变化规律。
3. 探究影响淀粉酶活性的因素。
二、实验原理淀粉酶是一种水解淀粉的酶,可将淀粉水解为糖。
淀粉酶活性的测定方法是通过测定淀粉酶作用下淀粉水解产生的糖的含量来评估淀粉酶的活性。
实验中使用碘液来检测淀粉的含量,通过比色法测定样品中碘与淀粉结合生成的淀粉-碘复合物的光吸收值,进而计算淀粉酶的活性。
三、实验步骤1. 准备工作(1)将淀粉酶溶液和淀粉溶液放置在室温下适应30分钟。
(2)调整分光光度计波长为550nm。
(3)用0.1mol/L HCl稀释0.1mol/L NaOH。
2. 样品处理(1)分别取10ml淀粉酶溶液和10ml淀粉溶液分别放入两个试管中作为对照组。
(2)取10ml淀粉酶溶液和10ml淀粉溶液混合放入一个试管中作为实验组。
(3)将试管放入37℃恒温水浴中反应10分钟。
3. 反应终止(1)将样品分别取出,加入5ml稀释后的HCl。
(2)用1%淀粉溶液稀释碘液。
(3)向每个试管中加入1ml稀释后的碘液。
4. 比色测定(1)将试管放入分光光度计中,设置波长为550nm。
(2)调零分光光度计,记录对照组和实验组的吸光度值。
5. 计算淀粉酶活性(1)计算对照组的吸光度平均值,并减去实验组的吸光度值。
(2)根据标准曲线,计算实验组中淀粉的含量。
(3)根据淀粉-碘复合物生成的酶解糖的量,计算淀粉酶的活性。
四、实验结果对照组吸光度平均值为0.3,实验组吸光度值为0.6,经过计算,实验组中淀粉的含量为2mg。
根据淀粉-碘复合物生成的酶解糖的量,计算得到淀粉酶的活性为20U。
五、实验讨论根据实验结果,淀粉酶的活性为20U。
通过对照组和实验组的吸光度值的比较,可以看出淀粉酶在实验组中得到了激活,使淀粉水解为糖的速度加快。
这表明淀粉酶在37℃的条件下具有较高的活性。
探究影响酶活性的因素实验报告
探究影响酶活性的因素实验报告一、实验介绍本次实验是为了探究影响酶活性的因素,以淀粉酶为对象进行研究。
淀粉酶是一种消化淀粉的酶,分泌于胰腺和口腔两个部位。
在口腔中,淀粉酶可以分解淀粉质为葡萄糖,并改善口腔健康。
实验中我们分别以不同的酶液浓度、pH值、温度等参数对淀粉酶酶活进行观察和测量,以期研究影响酶活性的因素。
二、实验方法1、制备淀粉酶酶液将5g淀粉酶粉末加入100mL色谱纯水中,60℃加热,搅拌溶解,待完全溶解并滤除杂质后使用。
2、制备淀粉溶液将10g淀粉粉末加入100mL色谱纯水中,50℃加热,搅拌溶解,待淀粉完全溶解后,加入色谱纯水稀释至1L,即制备出淀粉溶液。
3、制备不同酶液浓度将50mL淀粉酶液分别加入50mL、40mL、30mL、20mL、10mL色谱纯水中,并标记为50倍、40倍、30倍、20倍、10倍浓度的酶液。
4、测量酶活性分别取1mL不同浓度的淀粉酶液加入试管中,再加入4mL 淀粉溶液,以50℃加热,10min后停止反应。
后加入硫酸钠溶液,恒定时间后使用紫外分光光度计测定程序中指定波长下的吸光度值(A值),以此计算出淀粉酶活性。
5、探究影响酶活性的因素- 不同浓度淀粉酶液测量酶活性- 在不同pH值下测量淀粉酶酶活性,分别以pH4、pH5、pH6、pH7、pH8、pH9为条件进行实验。
- 在不同温度下测量淀粉酶酶活性,分别以10℃、20℃、30℃、40℃、50℃、60℃为条件进行实验。
实验条件:使用同一批淀粉酶液和淀粉溶液,保证实验条件一致。
三、实验结果1、不同浓度淀粉酶液测量酶活性浓度(倍)A490值酶活性50 1.03 281.139U/mL 40 0.88 240.681U/mL 30 0.69188.493U/mL 20 0.44 119.865U/mL 10 0.18 49.180U/mL2、在不同pH值下测量淀粉酶酶活性pH值A490值酶活性4 0.58 158.470U/mL5 1.01 275.099U/mL6 1.12305.458U/mL 7 1.26 342.466U/mL 8 0.86 234.426U/mL 9 0.62 168.904U/mL3、在不同温度下测量淀粉酶酶活性温度(℃)A490值酶活性10 0.18 49.180U/mL 20 0.53 144.503U/mL 30 0.93253.924U/mL 40 1.23 334.852U/mL 50 1.42 386.578U/mL 60 1.26 342.466U/mL四、实验分析根据实验结果可以得出如下结论:1、淀粉酶酶活受浓度影响的趋势为:酶活性随着浓度的升高而增加,且不同浓度之间的酶活性有明显差异,浓度越高,酶活性越大。
生化》实验四影响酶活性的因素
• 2. 器材 恒温水浴锅 电炉 白瓷板
四、实验操作
• 1. 唾液淀粉酶的制备
取干净的水杯,盛上蒸馏水。 用蒸馏水漱口。 口含约20ml蒸馏水,1-2分钟后,吐入一干净烧杯 中,棉花过滤。
• 2. 温度对唾液淀粉酶活力的影响
取3支试管,按下表操作:
操作项目
1%淀粉溶液(ml) pH6.8磷酸缓冲液(ml) 唾液淀粉酶溶液(ml)
• 4.激活剂和抑制剂对唾液淀粉酶活性的影响
取试管3支,按下表操作
操作
管号
1
2
0
0
1% CuSO4(ml)
0
1
0
蒸馏水(ml)
0
0
1
唾液淀粉酶溶液(ml)
1
1
1
1%淀粉溶液(ml)
1
1
1
摇匀,37℃水浴反应1min左右即可用碘液检查1号试管淀粉水 解程度,待1号试管的反应液不再变色时取出所有试管。分别向各管 滴加1滴碘液,观察比较各管颜色深浅,并解释。
• 1.试剂
1%淀粉溶液:1g淀粉和0.3g NaCl,用5ml蒸馏水悬浮
,慢慢倒入60ml煮沸的蒸馏水中,煮沸1min,冷却至室 温,加水到100ml,冰箱贮存。
碘液:3g KI溶于5ml蒸馏水中,加1g I2,溶解后再加29
5ml水,混匀贮存于棕色瓶中。
pH4.0、pH6.8、pH8.0磷酸盐缓冲液 1% CuSO4溶液
取试管3支,按下表操作
操作
1
pH4.0磷酸缓冲液(ml)
2
pH6.8磷酸缓冲液(ml)
0
pH8.0磷酸缓冲液(ml)
0
1%淀粉溶液(ml)
1
影响淀粉酶活性的因素的实验报告
影响淀粉酶活性的因素的实验报告实验报告-不同因素对酶的影响实验报告课程名称:生物化学实验(甲)指导老师:成绩:实验名称:酶的基本性质实验——底物专一性剂、激活剂和抑制、最适温度实验类型:分离鉴定实验同组学生姓名:一、实验目的和要求(必填)三、主要仪器设备(必填)五、实验数据记录和处理七、讨论、心得二、实验内容和原理(必填)四、操作方法和实验步骤六、实验结果与分析(必填)Ⅰ.酶的基本性质——底物专一性一、实验目的和要求1. 了解酶的专一性。
2. 掌握验证酶的专一性的基本原理及方法。
3. 学会排除干扰因素,设计酶学实验。
二、实验基本原理酶是一种具有催化功能的蛋白质。
酶蛋白结构决定了酶的功能——酶的高效性,酶催化的反应(酶促反应)要比相应的没有催化剂的反应快103-1017 倍。
酶催化作用的一个重要特点是具有高度的底物专一性,即一种酶只能对某一种底物或一类底物起催化作用,对其他底物无催化反应。
根据各种酶对底物的选择程度不同,它们的专一性可以分为下列几种:1.相对专一性一种酶能够催化一类具有相同化学键或基团的物质进行某种类型的反应。
2.绝对专一性:有些酶对底物的要求非常严格只作用于一种底物,而不作用于任何其他物质。
如脲酶只能催化尿素进行水解而生成二氧化碳和氨。
如麦芽糖酶只作用于麦芽糖而不作用其它双糖,淀粉酶只作用于淀粉,而不作用于纤维素。
3.立体异构专一性有些酶只有作用于底物的立体异构物中的一种,而对另一种则全无作用。
如酵母中的糖酶类只作用于D-型糖而不能作用于L-型的糖。
本实验以唾液淀粉酶、蔗糖酶对淀粉、蔗糖水解反应的催化作用来观察酶的专一性。
采用Benedict 试剂检测反应产物。
Benedict试剂是碱性硫酸铜溶液,具有一定的氧化能力,能与还原性糖的半缩醛羟基发生氧化还原反应,生成砖红色氧化亚铜沉淀。
Na2CO3+ 2H2O2NaOH + H2CO3 CuSO4+2+ Na2SO4 还原糖(—CHO or —C=O)+ 2Cu(OH)2 Cu2O(砖红色或黄色) + 2H2与Benedict试剂无呈色反应。
影响酶活性的因素实验
思考:测定人体内某些酶的活性时,反应体系中温 度、pH值应如何设定,为什么?
通过实验了解温度、pH值对酶作用的影响。
1、酶的活性受到温度、pH值的影响 2、淀粉酶可催化淀粉逐步水解生成糊精,糊 精分子的大小不同,遇碘时呈现的颜色也不 同。 3、可根据颜色判断淀粉被水解的程度,从而 判断温度、pH值对酶活性的影响。
图中物质的背景颜色表示该物质遇碘时所呈现的颜色,无 底色表示为无色透明。
试管号
1
2
3
pH3.0缓冲溶液(d) pH6.8缓冲溶液(d) pH8.0缓冲溶液(d)
1%淀粉溶液(d) 稀唾液(d) 稀碘液(d) 观察颜色
20 10 5 1
20 10 5 1
20
10 5 1
混匀,37℃水浴10分钟
1、加入稀唾液后应充分混匀。 2、滴加稀碘液时注意不可摇晃试管。 3、碘液不能滴加太多。
试管号
1
2
3
pH6.8缓冲溶液(d) 1%淀粉溶液(d) 水浴
稀唾液(d) 水浴 稀碘液(d) 观察现象(颜色)
20 10 0℃水浴5分钟
10 37℃水浴5分钟
5 混匀后37℃水浴10 分钟 1
20 10 100℃水浴5分钟
5 混匀后100℃水浴10 分钟 1
1、1%淀粉溶液 2、稀碘液 3、pH3.0、pH6.8、pH8三种缓冲溶液 4、实验器材 试管,试管夹,冰浴,沸水浴,恒温水浴锅 (37℃),吸管,滴管,试管架,记号笔,120ml烧 杯一个(或一次性纸杯)
1、制备稀释唾液 漱口后含约20ml蒸馏水在口中做咀嚼动作,3 分钟后吐入120ml烧杯或纸杯中,备用。
淀粉酶_实验报告
一、实验目的1. 了解淀粉酶的基本性质和作用。
2. 掌握淀粉酶活性测定的原理和方法。
3. 分析影响淀粉酶活性的因素。
二、实验原理淀粉酶是一种能够水解淀粉的酶,其作用是将淀粉分解成较小的糖类分子。
淀粉酶活性是指单位时间内淀粉被水解的量,通常以淀粉酶活力单位(U)表示。
淀粉酶活性受多种因素影响,如温度、pH值、底物浓度等。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:淀粉酶、淀粉溶液、碘液、蒸馏水、pH缓冲液等。
2. 实验仪器:恒温水浴锅、移液器、试管、量筒、烧杯、比色计等。
四、实验方法1. 淀粉酶活性测定原理:淀粉酶催化淀粉水解,生成葡萄糖。
葡萄糖与碘液反应,产生蓝色复合物。
在一定条件下,淀粉酶活性越高,蓝色复合物颜色越深,可通过比色法测定。
2. 实验步骤:(1)配置淀粉溶液:准确称取一定量的淀粉,用蒸馏水溶解,配制成一定浓度的淀粉溶液。
(2)配置淀粉酶溶液:准确称取一定量的淀粉酶,用蒸馏水溶解,配制成一定浓度的淀粉酶溶液。
(3)pH调节:将淀粉溶液和淀粉酶溶液分别用pH缓冲液调节至适宜pH值。
(4)反应:取一定量的淀粉溶液,加入等体积的淀粉酶溶液,混合均匀,放入恒温水浴锅中,在适宜温度下反应一定时间。
(5)终止反应:反应结束后,加入一定量的碘液,混匀,静置片刻。
(6)比色:用比色计测定蓝色复合物的吸光度,根据吸光度计算淀粉酶活性。
五、实验结果与分析1. 实验结果:根据比色法测定,淀粉酶活性为XX U/mL。
2. 分析:(1)温度对淀粉酶活性的影响:在实验过程中,观察到温度对淀粉酶活性有显著影响。
随着温度升高,淀粉酶活性逐渐增加,达到一定温度后,活性达到最高值,随后活性下降。
这说明温度是影响淀粉酶活性的重要因素。
(2)pH值对淀粉酶活性的影响:实验中发现,淀粉酶活性在不同pH值下有所差异。
在pH值6.0-7.0范围内,淀粉酶活性较高;而在pH值5.0以下或8.0以上,淀粉酶活性明显降低。
这说明pH值对淀粉酶活性有显著影响。
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影响淀粉酶酶活性的因素
一、目的
了解淀粉在水解过程中遇碘后溶液颜色的变化。
观察温度、pH、激活剂与抑制剂对淀粉酶活性的影响。
二、原理
人唾液中淀粉酶为α—淀粉,在唾液腺细胞中合成。
在唾液淀粉酶的作用下,淀粉水解,经过一系列被称为糊精的中间产物,最后生成麦芽糖和葡萄糖。
淀粉→紫色糊精→红色糊精→麦芽糖、葡萄糖
淀粉、紫色糊精、红色糊精遇碘后分别呈蓝色、紫色与红色,麦芽糖、葡萄糖遇碘不变色。
唾液淀粉酶的最适温度为37-40℃,最适pH为6.8。
偏离此最适环境时,酶的活性减弱。
低浓度的氯离子能增加淀粉酶的活性,是它的激活剂。
铜离子等金属离子能降低该酶的活性,是它的抑制剂。
三、试剂和仪器
1.碘液:称取2g碘化钾溶于5ml蒸馏水中,再加1g碘。
待碘完全溶解后,加蒸馏水295ml,混合均匀后贮存于棕色瓶内。
2.1%淀粉溶液:称取1克可溶性淀粉放入小烧杯中,加少量蒸馏水做成悬浮液。
然后在搅拌下注入沸腾的蒸馏水中,继续煮沸1分钟,冷后再加蒸馏水定容至100ml。
3.0.4%的盐酸溶液
4.0.1%的乳酸溶液。
5.1%的碳酸钠溶液。
6.%的氯化钠溶液。
7.%的硫酸铜溶液。
8.仪器:试管试管架吸管玻璃棒白磁板烧杯漏斗恒温水浴量筒冰浴四、操作步骤
1.淀粉酶液的制备:实验者先用蒸馏水嗽口,然后含一口蒸馏水于口中,轻嗽一、二分钟,吐入小烧杯中,用脱脂棉过滤,除去稀释液中可能含有的食物残渣。
最后将数人的稀释液混合在一起,再进行过滤,以避免个体差异。
2.pH对酶活性的影响
取4支试管,分别加入0.4%盐酸(pH=1),0.1%乳酸(pH=5),蒸馏水(pH=7),与1%碳酸钠(pH=9)各2毫升,再向以上四支试管中各加入2毫升淀粉溶液及淀粉酶液。
混合摇匀后置于37℃水浴中保温。
2分钟后,从蒸馏水试管中取出一滴溶液,置于白磁板上,用碘液检查淀粉的水解程度,待蒸馏水试管内的溶液遇碘不再变色后,取出所有的试管,各加碘液2滴,观察溶液颜色的变化。
根据观察结果说明pH对酶活性的影响。
3.温度对酶活性的影响
取3支试管各加入3毫升2%淀粉溶液,另取三支试管,各加入1毫升淀粉酶液。
将6支试管分为三组,每组中盛放淀粉溶液与淀粉酶液的试管各1支。
三组试管分别置于0℃、37℃、70℃的水浴中,5分钟后将各组中的淀粉溶液到入淀粉酶液中,继续保温。
2分钟后从37℃试管中取出一滴溶液,置于白磁板上,用碘液检查淀粉的水解程度,待37℃试管内的溶液遇碘不再变色后,取出所有的试管,各加碘液2滴,观察溶液颜色的变化。
根据观察结果说明温度对酶活性的影响。
4.激活剂与抑制剂对酶活性的影响
取3支试管按下表的规定加入各种试剂。
混匀后置于37℃的水浴中保温,1分钟后从1号试管中取出一滴溶液,置于白磁板上,用碘液检查淀粉的水解程度,待一号试管内的溶液遇碘不再变色后,取出所有的试管,各加碘液2滴,观察溶液颜色的变化。
根据观察结果说明激活剂与抑制剂对酶活性的影响。
pH 值对酶的活力的影响
项目
颜色 水(pH=7)
32a CO N (pH=9)
HCl (pH=1) 乳酸(pH=5)
淡黄色 深紫色 蓝色 浅蓝色
结果分析:由于淀粉水解,经过一系列被称为糊精的中间产物,最后生成麦芽糖和葡萄糖。
淀粉→紫色糊精→红色糊精→麦芽糖、葡萄糖,并且淀粉、紫色糊精、红色糊精遇碘后分别呈蓝色、紫色与红色,麦芽糖、葡萄糖遇碘不变色。
于是从上图的结果可以看出pH 为7这个pH 段的时候,淀粉酶的活力最强。
可见,淀粉酶有一个最适的酸碱度。
这是因为在过酸和过碱的环境下,溶液中的氢离子或者氢氧根例子会进攻酶蛋白分子,使其维持高级结构的化学键(例如氢键,范德华力)破坏,高级结构无法维持稳定,于是解构,最终是蛋白质分子失去活性,活力减弱。
激活剂对酶的影响
激活剂 颜色 水
淡色明蓝 深紫色 不变
结果分析:从上面结果可以看出,在有钠离子存在的情况下淀粉有一点的水解,在有铜离子存在的情况下完全没有水解,在纯水的环境中,酶将淀粉完全水解。
同时,结合资料,水为对照组可以了解到钠离子对酶有一点的抑制作用,铜离子就将酶完全一致了,可见此淀粉酶为金属依赖性的酶,不同的离子对酶的活性中心有抑制的作用,改变其构象影响了活性。
温度对酶的影响
温度
颜色 0摄氏度 37摄氏度 70摄氏度
深紫色 黄色 深紫
结果分析:从上表可以看出,在37摄氏度的时候,酶水解淀粉的能力最强。
由于温度体系中随着温度的升高,酶蛋白分子中维持构象的键由于分子间的碰撞和分子内离子的热运动由于能量的升高而挣脱互相的吸引而造成分子的解体蛋白变性。
总结:从以上实验可以得出影响酶的水解的活性的因素有激活剂,温度,酸碱度。
同时所得的启示就是在应用淀粉酶要注意在最适温度最适酸碱度还有排除抑制剂的干扰来提
高活力。