蛋白纯化层析系统操作规程
蛋白层析纯化系统安全操作及保养规程
蛋白层析纯化系统安全操作及保养规程前言蛋白质分离和纯化是一项精细的工作，对实验室人员来说需要深入了解其原理和注意安全操作。
为了确保蛋白层析纯化系统的正常运行，及确保实验人员的人身安全，本文档总结了蛋白层析纯化系统的安全操作及保养规程。
安全操作规程1. 实验前的准备工作1.1. 实验人员应着实验服，并佩戴安全眼镜、口罩、手套等防护用品。
1.2. 实验前应通风良好，确保实验室内空气质量。
1.3. 检查蛋白层析纯化系统的设备和设施是否正常运行和连通。
2. 正确操作设备2.1. 启动设备和加样前，请务必阅读设备说明书，并认真学习使用方法。
2.2. 操作前先检查试剂/缓冲液是否准备好。
确保使用的试剂标签清晰、正确、未过期。
2.3. 操作前确定好方法和顺序，避免在操作过程中出现意外情况。
3. 防止污染3.1. 操作前要保证操作台面、工作区域干净整洁，避免杂物进入操作区域。
3.2. 加样前要注意纯水或乙醇等可能存在杂质的物质都需要通过0.22um过滤器进行过滤。
3.3. 空白样品管子和未经过冲洗的采样器不允许接触到试剂。
4. 废弃物的处理4.1. 废弃物要正确分类，分别放在不同的废弃桶中。
4.2. 废液需要配制30%酸性过氧化氢，进行彻底灭菌处理。
4.3. 废料收集桶要及时清理，每周定期清洗消毒，以防止交叉污染。
保养规程1. 设备的日常保养1.1. 在使用结束后，要及时进行清洗，保持设备及附件的卫生和清洁。
1.2. 清洁前需要先关闭电源，卸下或缓慢移开所有易受损附件，避免损坏设备。
1.3. 润滑油要定期加满或更换，日常维护保养工作应按照设备说明书的相关要求进行。
2. 设备的定期保养2.1. 定期进行器械的视觉和性能检查。
2.2. 普通型纯化系统每年至少进行一次全面维护，高端型纯化系统则需要每半年全面维护一次。
3. 设备的维修3.1. 如设备出现故障，请及时联系相关厂家进行修理。
3.2. 除非特别授权，在不进行维修的情况下，不得拆卸美国 Bio-Rad 实验室纯化系统。
蛋白纯化AKTA操作说明(二)
蛋白纯化AKTA操作说明（二）引言概述：本文档旨在提供关于蛋白纯化AKTA操作的详细说明。
蛋白纯化是生物化学和生物技术中常用的实验技术之一，能够用于从复杂的生物样品中纯化目标蛋白质。
AKTA操作是常用的蛋白纯化系统，本文将介绍该系统的操作步骤和注意事项，帮助用户顺利进行蛋白纯化实验。
正文：一、AKTA操作之仪器准备1. 确保AKTA蛋白纯化系统已经连接好电源，并打开主机电源开关。
2. 检查液氮罐中的液氮是否充足，并确保液位高于所需运行温度。
3. 打开冰盒，准备好所需的离心管、移液器和其他实验器材。
二、AKTA操作之列柱装配1. 按照实验要求选择合适的色谱柱和填料，并正确装配到AKTA系统中。
2. 使用力学手套松开色谱柱底部的螺丝，将填料注入色谱柱中，确保填料均匀。
3. 同时，注意将填料与色谱柱的连接口处用黑色硅胶密封，以免液体泄漏。
三、AKTA操作之流程设置1. 打开AKTA系统的软件界面，并选择“新建方法”。
2. 在方法设置界面中，设定蛋白纯化的各个步骤，如进样、洗脱等流程参数。
3. 根据实验需求，选择合适的梯度洗脱方案，并输入相应的洗脱液体浓度。
四、AKTA操作之样品处理1. 将待纯化的生物样品进行预处理，如离心、过滤等，以去除杂质。
2. 根据纯化需求，可进行某些特定试剂的添加，如酶切剂、亲和标记剂等。
3. 根据方法设置，将样品装入进样器中，并调整进样量和进样流速。
五、AKTA操作之运行实验1. 保存并加载所设置的方法，确保参数设定正确。
2. 启动AKTA系统，开始实验运行，并监控过程中的各项参数指标。
3. 及时记录实验数据，并根据需要进行样品采样、保存等操作。
总结：通过本文所述的蛋白纯化AKTA操作说明，用户可以了解到系统准备、列柱装配、流程设置、样品处理和运行实验等关键步骤。
合理而正确的操作，将帮助用户获得高质量的蛋白纯化结果。
同时，用户还需根据实际操作中的具体情况，进一步优化实验参数，以满足各自的研究需求。
AKTA蛋白纯化层析系统操作规程
AKTA蛋白纯化层析系统操作规程一、目的：为了确保蛋白纯化层析系统操作的准确性、稳定性和安全性，保证实验结果的可靠性，制定本操作规程。
二、适用范围：本操作规程适用于实验室内的AKTA蛋白纯化层析系统操作。
三、操作流程：1.准备工作：(1)预热：打开系统电源，预热至设定温度（一般为室温）。
(2)洗涤缓冲液：根据实验要求，制备所需的洗涤缓冲液，确保其浓度和pH值符合要求。
(3)净化缓冲液：根据实验要求，制备所需的净化缓冲液，确保其浓度和pH值符合要求。
(4)样品：根据实验要求，制备所需的样品。
2.系统配置：(1)连接仪器：将系统中的各个模块连接好，包括色谱柱、注射器、检测器等。
(2)配置方法参数：根据实验要求，在系统内设置合适的流速、梯度洗脱条件等相关参数。
3.样品处理：(1)样品加载：将样品注入到加载注射器中，通过样品加载阀注入到色谱柱中。
(2)洗脱：根据实验要求，设置梯度洗脱条件，将混合物中的目标蛋白纯化。
4.系统清洗：(1)注射器清洗：每次实验结束后，将注射器从系统中取出，用纯化缓冲液反复洗涤至无污染为止。
(2)色谱柱清洗：每次实验结束后，将色谱柱从系统中取出，用纯化缓冲液反复洗涤至无污染为止。
5.系统关闭：(1)关闭电源：关闭系统电源，断开电源线连接。
(2)清洗系统：将系统中的各个模块用水冲洗干净，保持干燥。
(3)整理工作台：将使用过的耗材整理归位，清理工作台。
四、操作注意事项：1.操作前应仔细阅读操作手册，了解仪器的基本原理和操作要点。
2.操作时要穿戴实验室个人防护用品，避免吸入或接触有害物质。
3.在操作过程中，要严格按照实验要求进行，避免操作失误。
4.定期检查系统的运行状态，保证系统正常工作。
5.操作完成后，要及时清洗和整理仪器，保持仪器的干净和完好。
五、风险控制与安全措施：1.使用过程中，注意避免溶液飞溅引起的伤害，避免溶剂和化学品的吸入或接触。
2.避免电源短路或其他电气故障引起的意外事故。
蛋白纯化层析系统操作规程
蛋白纯化层析系统操作规程一、实验前准备1.确认所需操作的蛋白样品、层析柱类型和材料的完整性和准备情况。
2.检查实验设备和仪器是否正常工作，如层析仪、洗脱缓冲液储备罐、洗脱梯度系统等。
3.预先准备所需的实验试剂和缓冲液，确保其浓度和pH值符合实验要求。
二、层析柱装填和平衡1.将所需的层析柱装填到层析系统中，确保柱床填充均匀且无明显空隙。
2.选择适当的洗脱缓冲液和梯度溶液，根据目标蛋白的特性调整pH值和盐浓度。
3.设置洗脱缓冲液的流量和梯度溶液的梯度程序。
三、样品准备和负载1.根据实验要求，选择适当的样品预处理方法，如离心、过滤、冻干等。
2.根据目标蛋白的亲和特性和pH效果，调整样品pH值并添加必要的盐。
3.将样品加入到层析柱中，确保样品均匀覆盖柱床，并避免气泡。
四、洗脱和收集1.开始运行层析仪，以洗脱缓冲液的流量洗脱样品。
2.监控样品的吸收曲线，调整洗脱缓冲液的pH值和盐浓度，以实现目标蛋白的洗脱。
3.相关实验过程中，及时收集和保存洗脱图峰的分馏物，便于后续分析。
五、柱的再平衡和清洗1.在洗脱完毕后，用适当的缓冲液进行柱的再平衡，以去除残留的洗脱缓冲液和杂质。
2.清洗柱子时，确保缓冲液的流量和浓度符合实验要求，并充分冲洗层析柱。
六、实验后清洗和消毒1.关闭层析仪和其他设备，清除样品和实验废液。
2.将使用过的层析柱经过清洗和消毒处理，准备下一次实验使用。
3.清洗操作台面和其他实验器材，确保实验环境清洁。
七、实验记录和数据分析1.记录重要的实验操作、观察和结果，包括样品负载量、洗脱曲线等。
2.对实验数据进行统计和分析，计算目标蛋白的纯化效率和纯度。
3.分析实验结果，并做出合理解释。
以上是蛋白纯化层析系统操作规程的一般步骤和要点，实验人员在进行实验前，应详细了解实验的要求和步骤，并根据实际情况进行相应的调整和优化。
此外，在实验过程中，要注意安全操作，遵守实验室规章制度，确保实验的顺利进行。
蛋白纯化系统操作规程
蛋白纯化系统操作规程一、注意事项：1.保持系统、馏分收集器内外清洁。
2.使用进口过滤器、过滤后的缓冲液，最后脱氧缓冲液。
3.为获得最佳的结果,在运行期间使用缓冲液,系统和柱处于环境温度。
4.上样之前，离心或过滤样品。
5.定期清洗和清洁整个仪器,包括馏分收集器。
6.防止交叉污染和细菌生长, 系统在每次运行后执行系统清洗(CIP)。
7.系统处于强洗涤液中不超过2小时。
8.系统停用之前，用20%乙醇填满系统，以避免滋生细菌。
9.设置UNICORN TM系统通知,提示定期维护时间。
例如,定期更换泵清洗液。
二、运行必需品：运行前1.泵清洗液：20%乙醇，混浊时或量少时及时更换。
2.检查所有管道, sure no tubing is nicked.3.确保所有缓冲液处于相同的温度系统以减少气泡的问题。
4.所有入口用缓冲液填满。
5.排气：从泵头内把气体抽出。
6.开始一个流动相，观察是否有泄漏。
7.调整ph电极。
8.执行系统预运行，使正确的缓冲液填满系统的整个流路。
9.启动一个流程检查信号从显示器看起来稳定,如果不现实，看7-1210.wipe off the fraction collector sensors(code reader & drop sync sensor) with a tissue and fillthe fraction collector with the tubes plates needed. 除去馏分收集器传感器(代码读者&下降同步传感器)组织和填补与管板所需馏分收集器。
11.wipe off the fraction collector sensors(code reader & drop sync sensor) with a tissue and fillthe fraction collector with the tubes plates needed.12.附上需要的柱子，并设置正确的柱压力。
(完整word版)蛋白纯化AKTA操作说明
AKTA pure操作说明分子筛层析操作步骤：1. 开机：打开AKTA pure开关，看指示灯，泵同步（泵内有注入液体的声音）。
2. 打开系统：打开电脑：双击Unicorn 7.0打开系统，进入log on 界面，用户名默认为Default，输入密码：default，点ok键，出现提示对话框，继续点确定，进入系统。
注意：进入系统时会弹出三个界面：System Control界面，Evaluation界面和Administration界面。
其中system Control界面为主操作窗口，所有的设置选项都是在该界面下完成：Manual---Execute Manual instructions---......；Evaluation界面为结果数据查看及处理窗口；Administration界面为Unicorn 7.0系统设置界面。
3. 洗泵：把A1泵头从20%乙醇中取出，用去离子水冲洗，放入分子筛缓冲液中，在SystemControl界面下，点击manual---Execute Manual instructions---Pumps---Pump A wash---点开inlet，选择A1---Excuse。
4. 设置系统参数：设柱压：Alams---alam systerm pressure---high alam---设置柱压---Execute；设流速：Pumps---System flow ---设置system flow（1mL/min）---Execute。
注意：流速和柱压设置参照“GE蛋白纯化柱表”，不要超出最高限制。
5. 装柱子(先上后下)：接柱子的上面：拧下连接进样阀和检测器之间的线，等进样阀出口有液体流出时，拧开柱上面线头的螺帽，将它连到进样阀出口；接柱子的下面：去掉柱下端连接的注射器，连上接头，连上一段线，待液体滴出滴出液体滴到检测器上的连接口的洞里，滴满，将接头连到检测器的连接口里。
蛋白纯化AKTA操作说明
AKTA pure操作说明分子筛层析操作步骤：1. 开机：打开AKTA pure开关，看指示灯，泵同步（泵内有注入液体的声音）。
2. 打开系统：打开电脑：双击Unicorn 7.0打开系统，进入log on 界面，用户名默认为Default，输入密码：default，点ok键，出现提示对话框，继续点确定，进入系统。
注意：进入系统时会弹出三个界面：System Control界面，Evaluation界面和Administration界面。
其中system Control界面为主操作窗口，所有的设置选项都是在该界面下完成：Manual---Execute Manual instructions---......；Evaluation界面为结果数据查看及处理窗口；Administration界面为Unicorn 7.0系统设置界面。
3. 洗泵：把A1泵头从20%乙醇中取出，用去离子水冲洗，放入分子筛缓冲液中，在SystemControl界面下，点击manual---Execute Manual instructions---Pumps---Pump A wash---点开inlet，选择A1---Excuse。
4. 设置系统参数：设柱压：Alams---alam systerm pressure---high alam---设置柱压---Execute；设流速：Pumps---System flow ---设置system flow（1mL/min）---Execute。
注意：流速和柱压设置参照“GE蛋白纯化柱表”，不要超出最高限制。
5. 装柱子(先上后下)：接柱子的上面：拧下连接进样阀和检测器之间的线，等进样阀出口有液体流出时，拧开柱上面线头的螺帽，将它连到进样阀出口；接柱子的下面：去掉柱下端连接的注射器，连上接头，连上一段线，待液体滴出滴出液体滴到检测器上的连接口的洞里，滴满，将接头连到检测器的连接口里。
AKTA层析仪使用操作规程(AKTA蛋白纯化系统经典培训资料)
ÄKTApurifier层析仪使用操作规程1、开机打开仪器的主电源，打开电脑电源。
待仪器自检完毕（CU950上面的3个指示灯完全点亮并不闪烁）。
双击桌面上UNICORN图标，进入操作界面。
2、准备工作溶液和样品所有的工作溶液和样品必须经过0.45µm的滤膜过滤，样品也可高速离心后取上清备用。
当缓冲液中含有有机溶剂（如乙腈、甲醇），需在使用前用低频超声脱气10min。
3、清洗及管道准备首先将A1管道放入缓冲液或平衡液，binding buffer中，将B1管道放入高盐溶液中或elution buffer，在system control窗口点击工具栏内的manual，选择 pump→pump wash basic，选中A1,B1管道为ON， execute。
泵清洗将自动结束。
4、安装层析柱在manual里选择pump→flow rate，输入流速1ml/ml，insert；选择Alarm&mon→alarm pressure，设置high alarm（输入填料的耐受压力，可在填料说明书中查到），insert，execute。
待InjectionValve的1号位管道流出水后接入柱子的柱头，稍微拧紧后将柱下端的堵头卸掉接入管道连上紫外流动池。
5、开始纯化：1）等待柱子平衡好了（观察电导COND，pH的数值和变化趋势）就准备上样了。
此时将紫外调零，选择Alarm&mon→autozero，exectue。
2）用样品环上：将样品吸进注射器，推掉气泡，从injectionValve的3号位推入（进样量不得低于样品环的体积的2倍）推好后不要取下注射器。
在manual里选择flowpath→injectionValve→inject，execute。
3）用泵上样：点击pause，将A1放入样品中，点击countine，待样品上完后，再将A1放入到平衡液中继续清洗柱子。
2),3)选择一种方式4）洗脱：上样后用缓冲液尽量将穿透峰洗回基线。
蛋白纯化仪安全操作及保养规程
蛋白纯化仪安全操作及保养规程前言蛋白纯化仪是生化和分子生物学实验室中必不可少的设备之一。
准确、安全地操作和维护蛋白纯化仪对于提高实验效率和保障实验人员的身体健康非常重要。
本文旨在介绍蛋白纯化仪的安全操作和保养规程。
安全操作1. 设备安装在蛋白纯化仪安装前，需要选择一个耐重、耐腐蚀、耐高温的设备摆放区域，并确保设备周围药品和试剂放置整齐。
使用前请检查设备和设备周围配件是否齐全。
2. 装填样品（1）根据实验的需要先准备好要分离的样品。
（2）在使用蛋白纯化仪前，应先检查使用范围，如PH值、盐度、清洁程度等进行调试。
（3）在装填前，需确保仪器内部是干燥和清洁的，并需要对仪器和采样管进行预冻结。
（4）将样品缓冲液注入仪器，按设置好的菌液流速和流量进行分离。
3. 设备操作（1）在操作过程中，避免直接接触电极和传感器。
（2）在操作过程中，应确保培养条件和样品的干净，在使用前先洗手，并戴上手套。
（3）在操作过程中，不要自行拆卸或试图调整电机和传感器。
（4）在使用蛋白纯化仪时，需要保持专注，避免拥挤、喧哗等情况。
（5）在设备操作结束后，应清理样品缓冲液、水分和其他非必需物件。
4. 安全储存（1）将蛋白纯化仪放置在干燥、清洁、阴凉处，避免阳光直射，避免风雨侵扰。
（2）储存前，应将设备清理干净，检查电线和仪器外壳是否损坏。
（3）如需长期储存，应选择干燥剂，放在密封袋中存放。
保养规程1. 保养前准备（1）在维修和保养前，请务必断开电源，等待设备冷却。
（2）在检查仪器故障前，请避免使用强酸、强碱等腐蚀性溶液。
（3）在保养蛋白纯化仪前，请确保清洗采样器，以保证设备的卫生和稳定性。
在某些实验条件下，可使用特殊清洗剂进行清洗。
2. 保养方法（1）每次使用后，应清理仪器内和采样器上的残渍。
已销毁的细胞和不适当的样品会在放置一段时间后附着在样品杯或采样器上，导致蛋白纯化仪运行不稳定，应当及时进行清洗。
（2）维修时，请遵循蛋白纯化仪安全操作规程。
蛋白质纯化系统AKTAPurifer10操作规程
仪器操作规程-蛋白质纯化系统 AKTA Purifer 10
一、标准操作规程
1.检查各部件连接是否正常（电源开关，仪器部件，流动相，色谱柱等）。
2.打开AKTA purifierTM10蛋白层析仪和计算机电源。
3.双击UNICON 5.11图标，进入实时方法编辑、实时运行、结果分析界面。
4.编辑新方法:
1)编辑方法：点击文件，点击新建方法，编辑方法（运行时间，流动相选择，流速，
检测波长等）。
2)保存方法：点击文件，点击另存方法为（输入文件名）。
3)运行方法：选择文件，点击右键，点击RUN，进行方法运行。
4)平衡色谱柱，一般约1—2个柱体积。
5)手动单针进样：在Load状态，将样品注入进样环，完毕后，点击Inject状态。
6)批处理进样：编辑方法，选择A—905自动进样器，进入scouting界面，利用向
导进行批处理编辑，保存批处理文件，点击批处理运行图标。
7)数据处理：点击第四个谱图分析图标，进入数据处理界面，打开要处理的文件，
点击积分向导图标进行数据处理（还可点击界面顶部的手动积分进行手动处理）。
保存数据处理方法。
5.运行已有方法：在实时分析界面点击文件，打开方法文件，点击RUN即可。
6.清洗色谱柱，在方法文件中调出自动清洗方法，点击RUN即可。
二、注意事项
1.流动相的溶剂须使用色谱纯，水为超纯水，缓冲盐需用0.45um的滤膜过滤。
2.清洗泵后的保护液为20%乙醇，一周更换一次。
3.如经常使用仪器，在线过滤器中的滤芯需每周超声清洗一次。
三、送样要求
初级纯化过滤后的样品。
蛋白质操作规程(3篇)
第1篇一、目的为确保蛋白质实验的顺利进行，保证实验结果的准确性和安全性，特制定本操作规程。
二、适用范围本规程适用于蛋白质的提取、纯化、鉴定、分析等实验操作。
三、操作步骤1. 实验准备（1）实验前应仔细阅读实验方案，了解实验原理、目的、步骤及注意事项。
（2）准备实验所需试剂、仪器和设备，确保其处于正常工作状态。
（3）实验前应佩戴防护眼镜、手套和口罩，避免接触有害物质。
2. 蛋白质提取（1）取适量组织或细胞，用组织匀浆器或超声波破碎器破碎。
（2）加入适量裂解液，充分搅拌，使蛋白质溶解。
（3）低温离心，收集上清液，即为蛋白质粗提液。
3. 蛋白质纯化（1）根据蛋白质的性质，选择合适的纯化方法，如离子交换、凝胶过滤、亲和层析等。
（2）将蛋白质粗提液按照纯化方法进行操作，如加入缓冲液、平衡液、洗脱液等。
（3）收集纯化后的蛋白质，低温保存。
4. 蛋白质鉴定（1）采用SDS-PAGE电泳对蛋白质进行初步鉴定。
（2）通过Western blot技术检测蛋白质的特异性抗体。
（3）通过质谱分析等技术对蛋白质进行结构鉴定。
5. 蛋白质分析（1）采用紫外分光光度计测定蛋白质浓度。
（2）采用凝胶过滤色谱、动态光散射等技术研究蛋白质的分子量。
（3）通过酶活性、底物消耗等方法研究蛋白质的生物活性。
四、注意事项1. 实验过程中应严格遵守无菌操作原则，防止污染。
2. 实验操作应规范，避免人为误差。
3. 试剂、仪器和设备应定期校准、维护，确保实验结果的准确性。
4. 实验过程中产生的废弃物应按照相关规定进行处理。
5. 实验过程中应关注自身安全，防止化学品、生物制品等对人体的危害。
五、实验记录1. 实验记录应详细记录实验时间、试剂、仪器、操作步骤、实验结果等。
2. 实验记录应真实、准确、完整，便于实验结果的追溯和分析。
六、附则本规程由实验室负责解释和修订，自发布之日起实施。
第2篇一、前言蛋白质是生命活动的重要物质基础，广泛应用于生物学、医学、农业等领域。
AKTA蛋白纯化系统操作Word版
AKTA蛋白纯化系统操作AKTA蛋白纯化系统是当前蛋白纯化工作经常用到的一组设备，自动化程度很高。
AKTA系统依据不同的配置，可以分为AKTA EXPLORER、 AKTA PILOT、AKTA PURIFIER等多种型号的设备。
以下以AKTA EXPLORER为例简单介绍A KTA蛋白纯化系统的一般操作。
1、认识AKTA。
AKTA explorer 是为方法开拓及研究应用而设计的全自动液相色谱系统。
该色谱系统的分离装置有三个主要组件，在底部平台的左侧整齐堆起（Fig 1）。
它们是：FIG 1、AKTA EXPLORER主机• Pump-900 为双通道高效梯度泵系列。
在AKTAexplorer 100，流速范围0.01-100 ml/min，压力高达10 Mpa（泵名为P-901）。
在AKTA explore10，流速范围0.001-10 ml/min，压力高达25 Mpa（泵名为P-903）。
• Monitor UV-900，同时监控190－700 nm 范围内高达3 个波长的多波长紫外-可见（UV-Vis）监测器。
（针对部分AKTA PURIFIER机型，尚有UPC-900监测器可供选择，光源为汞灯光源，一次可以监控一个波长，安装滤光片后，可以在选择的波长范围内进行切换。
）• Monitor pH/C-900，在线电导和pH 监测的组合监测器。
Fig 2、AKTA EXPLORER硬件模式图AKTA EXPLORER系统的主要组成部件可以用模式图表示（Fig 2）。
组成部件，如混合器、柱及不同的阀安装在右边部分。
打开装阀的门可全部看到。
柱被挂在装阀的门的外侧。
分离装置由UNICORN 软件控制。
软件安装于一独立的电脑主机之中，在电脑与色谱系统之间的通信由数据采集装置CU950进行控制。
2、一般操作2.1 开机按位于底部平台前左侧的ON/OFF 按钮，打开色谱系统，然后打开电脑电源。
待仪器自检完毕（CU950上面的3个指示灯完全点亮并不闪烁）。
永联蛋白纯化仪操作流程
永联蛋白纯化仪操作流程1.开机打开仪器的主电源，打开电脑电源。
待仪器自检完毕（CU950上面的3个指示灯完全点亮并不闪烁）。
双击桌面上UNICORN图标，进入操作界面。
2.准备工作溶液和样品所有的工作溶液和样品必须经过0.45µm的滤膜过滤，样品也可高速离心后取上清备用。
当缓冲液中含有有机溶剂（如乙腈、甲醇），需在使用前用低频超声脱气10min。
3.清洗及管道准备首先将A1管道放入缓冲液或平衡液，binding buffer中，将B1管道放入高盐溶液中或elution buffer，在system control窗口点击工具栏内的manual，选择 pump→pump wash basic，选中A1,B1管道为ON，execute。
泵清洗将自动结束。
4. 安装层析柱在manual里选择pump→flow rate，输入流速1ml/ml，insert；选择Alarm&mon→alarm pressure，设置high alarm（输入填料的耐受压力），insert，execute。
InjectionValve的1号位管道流出水后接入柱子的柱头，稍微拧紧后将柱下端的堵头卸掉接入管道连上紫外流动池。
5.开始纯化a）等待柱子平衡好了（观察电导COND，pH的数值和变化趋势）就准备上样了。
此时将紫外调零，选择Alarm&mon→autozero，exectue。
b）用样品环上：将样品吸进注射器，推掉气泡，从injectionValve 的3号位推入（进样量不得低于样品环的体积的2倍）推好后不要取下注射器。
在manual里选择flowpath→injectionValve→inject，execute。
c）用泵上样：点击pause，将A1放入样品中，点击countine，待样品上完后，再将A1放入到平衡液中继续清洗柱子。
选择 b,c中一种方式d)洗脱：上样后用缓冲液尽量将穿透峰洗回基线。
AKTA蛋白纯化系统操作
AKTA蛋白纯化系统操作1.设定纯化方法：首先，根据目标蛋白质的特性和要求，选择合适的纯化方法。
一般而言，常用的纯化方法包括亲和层析、凝胶层析和离子交换层析等。
在AKTA蛋白纯化系统上，可以预设不同的纯化方法并保存为方案。
2.准备蛋白样品：准备待纯化的蛋白样品。
在纯化前，需要将样品进行预处理，例如，去除杂质、去盐、浓缩等。
此外，一些特殊的样品也需要添加辅助试剂，如DTT、EDTA等。
3.配置层析柱：根据之前设定的纯化方法，选择合适的柱子。
AKTA系统支持多种柱径和材质的柱子，可以根据需要更换。
4.连接管路：将柱子与系统的蛋白吸附和洗脱缓冲液的管路相连接，确保连接处无泄漏。
5.调整流速：设置蛋白吸附和洗脱缓冲液的流速。
一般而言，根据柱子的大小和纯化方法的要求，设置合适的流速可以提高纯化效果。
6.均衡柱子：在进行纯化前，需要将柱子进行均衡操作。
均衡柱子可以提高吸附剂（如亲和树脂）和蛋白样品之间的接触效果，提高纯化效率。
7.加样和洗脱：将经过均衡的柱子连接到AKTA系统，将样品通过自动加样器加入。
在加样后，可以通过设定的方法进行洗脱和冲洗，以去除非目标蛋白质和杂质。
8.收集纯化的目标蛋白：通过设置最终洗脱步骤，将目标蛋白质从纯化方法中洗脱出来。
同时，系统可以将纯化的目标蛋白自动收集到相应的管子或容器中。
9.检测纯化后的蛋白质：对纯化后的蛋白质进行检测，如SDS-、Western blot等方法，以验证纯化效果。
10.清洗设备：在纯化完成后，要对设备进行清洗。
根据实验室的规范和设备说明书，进行相应的操作，以确保设备的使用寿命和实验结果的准确性。
总之，AKTA蛋白纯化系统是一种功能强大、操作灵活的蛋白质纯化设备。
通过合理的设定纯化方法、处理样品和操作设备，可以高效地纯化目标蛋白质，并得到高质量的纯化产物。
ATKA 蛋白质纯化系统操作规程
Esc按Esc一次返回一级菜单，或重复地回到主菜单。
5.主菜单概要(Main menu overview)
反复按Esc键可从任何子菜单进入主菜单平面。
Templates.该菜单出现在自检后启动时，用于运行应用模板和方法模板。Program Method用于编辑用户专用方法。
SetParameters用于对检测紫外(UV)、电导、PH、温度、和运转泵及混合器设置参数。
Check用于检测系统内部参数，例如序列号、泵运行时间、和灯亮度。
Manual Run用于手工运行系统。
关机步骤
结束运行(Finishing the run)
在Method Complete即时按OK结束运行。
Method Complete
Press OK to continue
在结束前中断运行，按End，用选择yes来确认后面的信息，并按OK。
5.当使用危险化学品时，在维护和维修前应确保整个系统已用蒸馏水彻底冲洗过。
ATKA prime蛋白质纯化系统
型号：AKTAprime
厂家：GE
价格：13万元
主要功能：用于蛋白质的分离纯化
操作规程
开机骤
启动系统并进行系统自检如下：(Selftest自检)
1．打开系统后面板的主电源开关。系统开始进行自检。
2．首先将显示系统名称和软件版本号。然后在自检期间显示AKTA prime信息。如果检测到错误，则在显示器上显示出错误信息。
3．自检约需30-40秒钟。当启动无误地完成时，显示屏显示模板菜单Template模版并准备好使用。系统可以立即使用。但是直到使用一小时后才能达到全部技术指标。
4．操作用户界面(Operation the user interface)
完整word版蛋白纯化AKTA操作说明
AKTA pure操作说明分子筛层析操作步骤：1. 开机：打开AKTA pure开关，看指示灯，泵同步（泵内有注入液体的声音）。
2. 打开系统：打开电脑：双击Unicorn 7.0打开系统，进入log on 界面，用户名默认为Default，输入密码：default，点ok键，出现提示对话框，继续点确定，进入系统。
注意：进入系统时会弹出三个界面：System Control界面，Evaluation界面和Administration界面。
其中system Control界面为主操作窗口，所有的设置选项都是在该界面下完成：Manual---Execute Manual instructions---......；Evaluation界面为结果数据查看及处理窗口；Administration界面为Unicorn 7.0系统设置界面。
3. 洗泵：把A1泵头从20%乙醇中取出，用去离子水冲洗，放入分子筛缓冲液中，在SystemControl界面下，点击manual---Execute Manual instructions---Pumps---Pump A wash---点开inlet，选择A1---Excuse。
4. 设置系统参数：设柱压：Alams---alam systerm pressure---high alam---设置柱压---Execute；设流速：Pumps---System flow ---设置system flow（1mL/min）---Execute。
注意：流速和柱压设置参照“GE蛋白纯化柱表”，不要超出最高限制。
5. 装柱子(先上后下)：接柱子的上面：拧下连接进样阀和检测器之间的线，等进样阀出口有液体流出时，拧开柱上面线头的螺帽，将它连到进样阀出口；接柱子的下面：去掉柱下端连接的注射器，连上接头，连上一段线，待液体滴出滴出液体滴到检测器上的连接口的洞里，滴满，将接头连到检测器的连接口里。
蛋白质层析纯化系统安全操作保养规程
蛋白质层析纯化系统安全操作保养规程1. 前言蛋白质层析纯化系统安全操作保养规程旨在规范蛋白质层析纯化系统的操作和保养，确保系统正常运行，保障实验安全。
本规程适用于蛋白质层析纯化实验室的操作人员和管理人员。
2. 蛋白质层析纯化系统的安全操作2.1 系统操作前的准备工作1.确认实验目的和实验计划，了解样品来源、性质、含量、组成等信息；2.确认实验条件和实验仪器的使用方法；3.打开实验室门窗，保持良好通风；4.戴上实验手套和实验眼镜。
2.2 系统操作中的注意事项1.样品注入前，应该检查仪器本身的完好情况，检查样品是否净化充分；2.样品注入时，应该确保注入量不超过所使用的柱的容量，防止样品溢出；3.开始运行仪器时，应该确保仪器连接正常、操作正确；4.实验中应该时刻关注仪器的运转状态，以便于及时处理异常情况；5.实验结束后，应该关闭仪器、清洗仪器、排空管子，彻底清理实验室。
2.3 系统操作中的安全措施1.对操作人员进行培训，了解仪器的所有安全措施；2.安装防护设备，警示标志等，以确保实验室的安全；3.在操作仪器时应该穿戴戴实验手套和实验眼镜等防护装备，避免有害物质的接触；4.在紧急情况下，应该立即停止工作，并采取相应的应对措施。
3. 蛋白质层析纯化系统的保养规程3.1 仪器保养1.每次使用结束后清洗仪器；2.定期检查仪器的功能和状态；3.定期清理计算机缓存，防止系统死机；4.定期更换废弃的试剂，避免影响仪器正常使用。
3.2 实验室保养1.定期清洗实验台面，确保实验环境干净卫生；2.定期检修水源，确保水质符合实验要求；3.定期更换老化的仪器配件，确保仪器的完好性。
4. 总结蛋白质层析纯化系统是非常重要的生物实验仪器，操作人员应该重视仪器的安全以及保养工作。
本规程的实施，不仅能够保证实验数据的准确性，更能够保障操作人员的安全。
在实验室工作中，我们应该时刻牢记实验安全第一，并严格按照规程开展实验工作。
蛋白质纯化层析设备操作流程
蛋白质纯化层析设备操作流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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蛋白质层析纯化系统设备安全操作规程
蛋白质层析纯化系统设备安全操作规程前言蛋白质层析是一种广泛应用于分离、纯化生物大分子的技术，而蛋白质层析纯化设备的使用也成为科研过程中的常见操作。
然而，由于层析纯化涉及到高压、高温等危险因素，设备的不当操作会对个人和实验室安全造成严重威胁。
为保障实验室安全和实验进程的顺利进行，科研人员应加强对蛋白质层析纯化设备的了解，遵守相关操作规程。
设备的基本概述1. 蛋白质层析纯化仪蛋白质层析纯化仪是蛋白质分离、纯化的主要设备。
其由流路系统、压力计、泵、分馏器、色谱柱和检测器等组成。
层析柱只能用于相应的实验，不能混用。
压力计需安装在流路系统上，以检测系统中的压力变化。
检测器用于监测经过分离柱的样品浓度，并输出检测数据。
2. 活性染料活性染料属于弱酸性阳离子染料，在pH值<7时呈阳离子结构，pH值>9时呈疏水结构，常用于蛋白质的分离纯化中。
但其具有刺激性，对皮肤和黏膜有刺激作用，应避免直接接触。
3. 离心机与高压灭菌器离心机可用于分离高分子材料，加速样品混合速度。
注意离心机转速不超过所选离心管或容器的最大自转速。
高压灭菌器可用于对层析柱及相关玻璃仪器的灭菌处理。
设备的安全操作规程以下是蛋白质层析纯化系统设备的安全操作规程，科研人员使用层析纯化设备需严格按照规程操作。
1. 操作前准备•了解所用设备的基本性能和使用方法。
•检查设备的运转状况、气源等是否正常，必要时进行相关调整。
•注意安全操作，佩戴实验服及口罩等防护用具，避免直接接触离心机和高压灭菌器。
•准备实验所需的其他试剂，按照实验方案制作不同的缓冲液及溶液。
2. 样品的制备•样品必须在洁净无尘的环境下处理，并采用无菌技术处理。
•样品需进行必要的预处理，如冷冻、离心、过滤等，以提高样品质量和测试准确度。
•减少样品浓度，尽量避免在检测时超出检测器的最大量程。
3. 试剂的选择•选择优质的纯化试剂，以提高纯化效率和净化质量。
•建议不同浓度的溶液使用不同的颜色标记，以免混淆。
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AKTA蛋白纯化层析系统操作规程
1、使用前，根据自己所要分离蛋白的性质确定所需的分离柱及缓冲液，打开计算机及仪器，但不要急于打开软件，等计算机与仪器连接再打开软件，此过程大约需要3-5分钟。
2、将纯水先抽滤脱气（使用≤0.45μm的滤膜），然后选择流路连到机器上，先洗泵，然后给机器一个流速和压力。
选择的最高压力须小于柱子所能承受的压力极限。
3、将柱子连接到仪器上，接柱子时，须等进液管中的液体出来，将柱子的一头与进液管通过接头连接，先不要拧的太紧，等液体从柱子的另一头流出，再用接头将其与出液管相连拧紧，再将进液管端拧紧，这样防止柱子中进入气泡，影响分离效果。
4、柱子接上后，换上配好的缓冲液（须抽滤脱气）用缓冲液平衡至仪器的各条基线都平后，再上样。
5、上样时，必须通过滤膜过滤（0.22μm），具体上样体积视样品浓度而定，采用不同的上样环上样。
6、仪器使用完毕，切记要用纯水清洗泵和柱子，洗柱直至各条基线都平为止，防止盐和粒子结晶于泵和柱子使机器报废。
若长期不用，再用20%的乙醇清洗系统和柱子,防止泵和柱子生长微生物（这一步非常重要）。
7、仪器的PH计每隔一段时间（一个月）须校准一次。
紫外流动池也需定期清洗（三个月）。
生物技术中心仪器管理人：李红兵
2006年10月15日。