化学发光检测原理和微孔板
化学发光检测原理
化学发光检测原理化学发光检测的原理基于发光分析方法的一般原理，即在光激发的作用下，发光物质中的电子被激发到较高能级，随后电子会从高能级退回到低能级，这个过程伴随着能量的释放，以光的形式传播出去。
从而产生可观测的光信号。
在化学发光检测中，一般采用的方法有化学发光法、化学发光电化学法和化学发光化学法。
化学发光法是通过化学反应的发光现象来检测分析物。
常用的发光反应有酶促发光反应、维生素C氧化反应、氧化亚铁发光反应等。
这些发光反应均为氧化还原反应，通过光激发和电子转移来产生发光现象。
化学发光电化学法是基于电化学原理和化学发光原理，通过在电极表面进行氧化还原反应产生发光。
在电化学发光电极上，有一个可逆反应体系，当电子从电极表面传到溶液中时，发生氧化还原反应，伴随着能量的释放和发光现象。
该方法的优点是实时性好、灵敏度高，适用于微量分析。
化学发光化学法是基于化学分析原理和化学发光原理，通过化学反应转变来产生发光。
常用的方法有硫酸钡法、雾化射线法等。
化学发光化学法一般可以实现灵敏的检测和定量的分析，但需要有一定的化学实验操作技巧和装置。
化学发光检测的核心是检测光信号，因此光学装置的设计和建立是关键。
光学装置一般包括光源、光学透镜、光栅或单色仪、探测器等。
光源的选择通常是根据需要的波长范围和较高的亮度来确定的，常见的光源有白炽灯、氘灯、钨灯等。
光学透镜和光栅或单色仪的作用是分离和选择特定的波长，以及提供单色光源。
光学探测器的选择一般根据需要的灵敏度和响应速度来确定，常见的探测器有光电倍增管、光电二极管和光敏电阻等。
化学发光检测方法的应用非常广泛，包括生物医学、环境监测、食品安全等领域。
在生物医学中，化学发光检测常用于酶标免疫分析、核酸检测和免疫组织化学等。
在环境监测中，化学发光检测可用于检测有机物、无机物和重金属等。
在食品安全中，化学发光检测可用于检测农药残留、添加剂和毒素等。
总之，化学发光检测方法是一种灵敏、快速、准确且广泛应用的分析技术。
化学发光检测原理和微孔板
化学发光检测原理和微孔板化学发光检测的原理是基于化学反应中能量释放所导致的电子激发态的衰变。
化学反应产生的激发态分子通常处于高能量状态，随着时间的推移会逐渐返回到低能量态。
在这个过程中，激发态分子会释放出能量，通常以光的形式发射出来。
这种发光现象被称为化学发光。
化学发光分析通常包括两步反应：化学发光系统的预处理和发光反应。
在预处理中，需要将样品中含有的发光物质经过特定的方法提取出来，并与适当的试剂反应，形成发光物质。
在发光反应中，发光物质会进一步被激发，最终发射出光信号。
这个过程中需要控制发光试剂的浓度、温度、pH等实验条件，以确保发光反应的有效进行。
微孔板（microplate）是一种广泛应用于生物化学实验室中的试验平台。
它通常由塑料或玻璃制成，具有多个孔的阵列，每个孔都可以容纳一定体积的样品。
微孔板通常具有标准化的孔间距和尺寸，以方便自动化设备进行样品的操作。
在化学发光检测中，微孔板发挥着重要的作用。
首先，微孔板可以同时处理多个样品，有效提高实验的通量。
每个孔都可以装载不同的试样，从而可以在同一实验中同时进行多个试验，提高实验效率。
其次，微孔板的孔内通常具有优良的光学性能，例如低自发荧光、低自由辐射等，可以减少光信号的干扰，提高检测的灵敏度。
此外，微孔板中的孔也可与其他实验装置（如自动加样器、读板仪等）有效配合，实现高通量的化学发光检测。
化学发光检测在生物医学研究中有广泛的应用。
例如，在生物分子的检测中，通过将标记有特定化学发光物质的抗体或探针与待检测物质结合，可以实现对生物分子（如蛋白质、DNA、RNA等）的灵敏检测。
此外，化学发光检测还被应用于药物筛选，通过检测特定药物对生物分子的作用，可以高通量地筛选出潜在的药物候选物。
在环境监测中，化学发光检测可以用于检测水质、空气中的污染物等。
总之，化学发光检测是一种重要的分析方法，通过利用化学反应释放的光信号来检测物质。
微孔板作为化学发光检测的重要工具，在样品处理、试剂配制、自动化操作等方面都具有重要作用。
化学发光法 说明书
化学发光法说明书化学发光法说明书一、引言化学发光法是一种常用的分析技术，它通过特定的化学反应产生发光现象，并利用测量发光强度来确定待测物质的浓度。
本说明书将介绍化学发光法的原理、实验步骤、仪器设备及应用领域。
二、原理化学发光法的原理基于化学反应产生发光的特性。
当特定的化学物质与待测物质发生反应时，会产生激发态的化学物种。
随后，激发态的化学物种会通过辐射或非辐射的方式回到基态，释放出能量并产生光。
通过测量发光强度，可以间接推测出待测物质的浓度。
三、实验步骤1. 准备样品：将待测物质制备成合适的浓度，并与特定的试剂混合。
2. 反应：在适当的条件下，使待测物质与试剂发生化学反应，产生发光。
3. 测量：利用发光仪器测量发光强度，并记录下来。
4. 构建标准曲线：根据已知浓度的标准样品的发光强度，绘制标准曲线。
5. 计算待测物质浓度：通过待测样品的发光强度，在标准曲线上找到对应的浓度值，并计算待测物质的浓度。
四、仪器设备化学发光法的实验需要使用特定的仪器设备，主要包括：1. 发光仪：用于测量样品的发光强度。
2. 标准样品：已知浓度的样品，用于构建标准曲线。
3. 试剂：与待测物质发生反应，产生发光的化学试剂。
4. 试管或微孔板：用于混合样品和试剂，进行反应。
五、应用领域化学发光法广泛应用于许多领域，包括：1. 生物医学研究：用于检测生物标志物、药物浓度等。
2. 环境监测：用于测定水中重金属、有机物等的浓度。
3. 食品安全：用于检测食品中的农药残留、添加剂等。
4. 公共安全：用于检测爆炸物、毒品等危险物质。
六、实验注意事项1. 实验操作要规范，遵守实验室安全规定。
2. 样品和试剂要保持干净和干燥，避免受到外界污染。
3. 仪器设备要正确校准，确保测量结果准确可靠。
4. 实验过程中要注意控制反应条件，如温度、pH值等。
5. 标准曲线的制备要精确可靠，避免误差产生。
七、总结化学发光法作为一种敏感、快速和准确的分析方法，在科学研究和实际应用中具有重要的地位。
化学发光法的原理及操作流程
化学发光法的原理及操作流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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化学发光法的原理技术要点及评价应用 PPT
第一节 发光与化学发光剂
一、发光 一种物质由电子激发态回复到基态时， 释放出的能量表现为光的发射。
1.光照发光:发光剂经短波长入射光照射后进入激 发态，当回复至基态时发出较长波长的可见光。
2.生物发光:反应底物在荧光素酶的催化下利用 ATP产能，生成激发态的氧化荧光素，后者在回 复到基态时多余的能量以光子形式放出。
技术要点
1.抗原抗体结合反应 将包被McAb的磁颗粒和待 测标本加入到反应管中，标本中待测Ag与磁珠 上Ab结合，再加上AE标记Ab，经过温育，形成 磁珠Ab-Ag-AE标记Ab复合物。
2.分离技术 在电磁场中进行2-3次洗涤后，很快 地将未结合的多余Ag和标记Ab洗去。
3.化学发光反应 经洗涤的磁珠中，加入H2O2和 pH纠正液NaOH，这时AE不需要催化剂即分解并 发光，由集光器接收，经光电倍增管放大，记 录1S内所产生的光子能，其积分与被测物含量
体料是通包微 利过被珠 光用酶强度对标 记 的发抗 光测体 定底而物样抗 本原催直接化进作A M行用P P定而D 量直。接发光，
电化学发光原理图
• 这一过程可在电极表面周而复始地进行 • 产生许多光子，使光信号增强
TPA+●
电极
●
TPA
R u ( b p y )33 +
R u ( b p y )32 +
常用试剂：吖啶酯（acridinium，AE）
CH 3
N+
- HO 2
CO
O
R
CH 3 N
O CO O
R
CH 3 N
O CO O
+ CO2+ 光
化学发光仪工作原理
化学发光仪工作原理化学发光技术是近二十年来发展非常迅速的非放射性免疫分析技术。
化学发光免疫测定（Chemiluminesent Immunoassay，CLIA）是免疫测定技术继酶免技术（EIA）、放免技术（RIA）、荧光免疫技术（FIA）之后发展的一项新兴测定技术。
由于这种测定具备很高的特异性和很小的干扰，因此，如同RIA、FIA等一样利用免疫反应的特异性和化学发光本身的信号特异性形成了目前所说的化学发光免疫测定（CLIA）技术。
工作原理：化学发光免疫分析仪是通过检测患者血清从而对人体进行免疫分析的医学检验仪器。
将定量的患者血清和辣根过氧化物（HRP）加入到固相包被有抗体的白色不透明微孔板中，血清中的待测分子与辣根过氧化物酶的结合物和固相载体上的抗体特异性结合。
分离洗涤未反应的游离成分。
然后，加入鲁米诺Luminol发光底液，利用化学反应释放的自由能激发中间体，从基态回到激发态，能量以光子的形式释放。
此时，将微孔板置入分析仪内，通过仪器内部的三维传动系统，依次由光子计数器读出各孔的光子数。
样品中的待测分子浓度根据标准品建立的数学模型进行定量分析。
最后，打印数据报告，以辅助临床诊断。
产品参数：测量系统：单光子计数器（PMT）样品形式：96孔微孔板光谱范围：300～700nm检测时间：0.1～100S/孔检测速度：0.1 秒/孔时小于3分钟每96孔孔间干扰：< 1×10－6本底噪声：0RLU—100RLU/秒检测范围：0RLU—2.5×107RLU/秒灵敏度：1×10-22mol/孔重复性:CV<3%功率:小于等于300瓦数据接口：RS232串行口或USB通信口工作环境：0℃—45℃，最大相对湿度85％工作电压：220V±10% 50HZ±1HZ试剂自动加样器(为选配)数量：0,1,2(可升级)加样体积：20-300μL,最小步进1μL加样速度：多于180个测试/6分钟加样精度：20μL ±1%50μL ±0.4%100μL ±0.2%200μL ±0.1%300μL ±0.067%加样模式：1个加样器孔孔随机任选2个加样器正向反向起始加样加样泵及管线: 原装进口耐酸碱四.产品特点：1、可以选用试剂自动加样器可选配试剂自动加样器，免去发光底物人工加样程序,提高检测精度2、远程网络诊断和远程数据交互专门为出口型仪器配套网上硬件监控诊断系统，并且实现网络远程**作仪器和无损数据交换，方便产品技术支持和服务。
化学发光仪器的检测原理
化学发光仪器的检测原理化学发光仪器的检测原理化学发光仪器是一类用于测量物质发出的光信号的仪器，它广泛应用于生物医学研究、环境监测、食品安全等领域。
化学发光是指某些物质在特定条件下受到激发后发出的光现象，这种发光现象的产生主要是由于化学反应中释放出来的能量转化为光的能量。
下面将介绍化学发光仪器的主要检测原理。
1. 化学发光的产生机理化学发光的产生机理可以简单分为两种：化学发光和生物发光。
化学发光是指在化学反应中产生的发光现象，其中最常见的是氧化反应发光和荧光探针发光。
生物发光则是指某些生物体内的酶或酶促反应产生的化学发光现象，如生物体内的酶底物与酶催化反应后产生的发光等。
2. 化学发光仪器的基本原理化学发光仪器的基本原理是通过检测样品发出的光信号来分析样品中感兴趣的成分。
一般来说，化学发光仪器由光源、样品室、检测器和数据处理系统四个部分组成。
- 光源：光源是产生激发源的装置，通常使用的光源有电弧灯、荧光灯、激光等。
光源的选择应根据具体的实验要求和被测物质的特性来确定。
- 样品室：样品室是用来容纳待测样品的空间，它的设计应尽量减小光的散射和漏失，以保证信号的稳定和灵敏度。
样品室的形状和材料也要根据具体实验要求来选择。
- 检测器：检测器主要负责测量样品发出的光信号，目前常用的检测器有光电倍增管（PMT）、光电二极管（PD）、CCD图像传感器等。
检测器的选择主要取决于被测物质的波长范围和灵敏度要求。
- 数据处理系统：数据处理系统主要用于记录和分析检测到的光信号，一般采用计算机和相关软件进行数据采集和处理。
根据不同的检测原理和应用需求，化学发光仪器又可以分为几种不同的类型，如荧光发光仪、化学发光免疫分析仪、环境监测仪等。
3. 化学发光的检测方法在化学发光检测中，常用的方法有光度测定法、荧光测定法和比色法等。
这些方法分别根据样品发出的光信号的强度、波长和颜色来进行分析。
- 光度测定法：光度测定法是通过测量待测样品对特定波长的光的吸收或透过来定量分析样品中的物质含量。
化学发光免疫标记分析技术(基本原理)
吖啶酯化学发光系统-CH3-HOO-C=0-OH-光子+C02+-R
碱性磷酸酶化学发光系统-金钢烷（发光底物）及其衍生物的增敏化学发光系统-OCH3-AP-0P032-碱性磷 酶及其衍生物的化-·光子477nm
化学发光的检测类型-化学发光按化学反应类型分为：-◆直接化学发光（非酶促化学发光-吖啶酯系统-●-异鲁米诺 统-◆间接化学发光（酶促化学发光-·辣根过氧化物酶一鲁米诺系统（HRP系统-碱性磷酸酶一金刚烷系统AP系统 其它-电化学发光
板式化学发光-,适合流行病调查、疾病预防与控制、-体检中心，以及医院血站等大样本检-测项目的使用（比如HI 、TP、HCV和-乙肝两对半等。-通常采用96孔白色不透明微孔板进行包-被，不方便随到随测和医院急诊；-对 定量检测需要做标准曲线。-◆-国内厂家主要是板式化学发光系统
管式化学发光-采用管式或微粒子发光，测定快速、准确；-可以随到随测，适用于医院急诊；-定量检测的标准曲线存 在试剂条形码中，-可在2-4周内直接使用。-国外厂家全部是管式化学发光系统
间接化学发光-以碱性磷酸酶系统为例-洗涤清除团-间接化学发光：用参与发-◆》回+-光反应的酶来标记抗原或体，免疫反应后，加入-抗体包被-的磁珠-标记抗体-双抗体夹心复合物-发光底物，测定发光体系-的发光强度来进 抗原或-◆可茶-抗体的检测。-AMPPD-AMPD发光-两大反应体系：-辣根过氧化物酶-HRP系统：氧化还 反应，稳定性差-·源德、科美、安图-碱性磷酸酶（AP系统：水解反应，灵敏度较高-●-贝克曼：Access1 Access2,DXI600、DXI800-西门子：mmulite:1000,Immulite2000-达 生物：AULIN200
免疫学检测-◆-免疫学检测是应用免疫学理论设计的一系列测定抗原、-抗体、免疫细胞及其分泌的细胞因子的实验手 及分子-生物学技术在免疫学研究中的应用。它包括：-抗原抗体的检测技术-免疫细胞的检测-细胞因子的检测-免疫 关基因分析-免疫标记技术-免疫PCRIM-PCR技术-杂交瘤技术与T细胞克隆技术
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• 发光剂分为荧光素、生物发光剂、化学发光剂
化学发光剂应符合以下几个条件
①能参与化学发光反应； ②与抗原或抗体偶联后形成稳定的结合物试剂； ③偶联后仍保留高的量子效应和反应动力； ④应不改变或极少改变被标记物的理化特性，
2.分离技术 将复合物转移到玻璃纤维上，用缓 冲液洗涤，没结合的抗原被洗脱，酶标抗体-抗 原-胶乳微粒抗体复合物则被保留在纤维膜上。
HRP
+N2 + H2O +光
对-羟基苯乙酸（HPA）
• HPA在H2O2存在下被HRP氧化成氧化二聚体（荧光 物质），在350nm激发光作用下，发出450nm波长 的荧光，可用荧光光度计测量。
1.2 HPA
H2O2 HRP
HO
CH 2 COOH +荧
光
HO
CH 2 COOH
氧化二聚体
AMPPD
1.4 4-MUP
AP H3PO4 +
360nm 激发光
荧
4-MU
光
2.直接化学发光剂
特点：不需催化剂，只需改变溶液的pH等条件 就能发光的物质。反应迅速、背景低、 信比高，发光量与AE浓度呈线性关系。
常用试剂：吖啶酯（acridinium，AE）
CH 3
N+
- HO 2
CO
O
R
CH 3 N
O CO O
T P A +●
电极
●
TPA
R u ( b p y )33 +
激发态
R u ( b p y )3 *
RuBiblioteka (bpy
化学发光法的原理技术要点及评价应用
化学发光法的原理技术要点及评价应用化学发光法是一种利用化学反应产生的发光现象进行分析的方法。
其原理是通过物质的发光反应，在外界刺激下，物质发生激发态到基态的电子跃迁，从而释放光子并产生发光现象。
化学发光法技术要点包括反应物的选择、光学系统的设计和检测等方面。
下面将详细介绍化学发光法的原理、技术要点以及评价应用。
1.原理：化学发光法的原理基于化学反应产生的发光现象。
一般来说，化学发光反应包括激发和发光两个过程。
首先，通过适当的刺激，使得反应物处于高能级的激发态；然后，在能级自发降低的过程中，放出能量差，产生光子并产生发光现象。
这种发光现象被称为化学发光。
2.技术要点：（1）选择合适的反应物：反应物的选择对化学发光法具有至关重要的影响。
通常要求反应物在发光过程中能产生稳定可靠的发光，且反应物之间的反应控制要良好。
同时，还要考虑反应物的选择范围、溶解性、灵敏度等因素。
（2）光学系统的设计：光学系统是用于收集、传输、分离和检测发光信号的组件。
设计良好的光学系统可以提高灵敏度和准确度。
光学系统的设计要考虑光源的选择、光路的布局、光学元件的选用等方面。
（3）检测：检测是化学发光法中的关键步骤。
可以使用不同的光学仪器进行检测，如光电倍增管、光电二极管和光电子多功能测量系统等。
检测的关键是要选择合适的波长和敏感性以获得准确的发光信号。
3.评价应用：（1）分析化学：化学发光法在分析化学领域被广泛应用于无机、有机和生物分析中。
在无机分析中，可以用于测定微量的金属离子、无机盐和荧光物质。
在有机分析中，可以应用于测定有机物的含量和浓度。
在生物分析中，化学发光法可以用于检测细胞组织中的酶活性、激素浓度、蛋白质浓度等。
（2）生命科学研究：化学发光法在生命科学研究中有着广泛的应用。
例如，可以用于药物筛选、生物传感器的构建、分子诊断等。
化学发光法在生命科学研究中具有灵敏性高、检测速度快的特点。
（3）环境监测：化学发光法可以用于环境监测领域，例如检测水中的重金属、有机物和污染物。
微粒子酶促化学发光原理
微粒子酶促化学发光原理
微粒子酶促化学发光（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，ELISA）是一种常用的生物分析技术，它基于酶促反应和化学发光原理，用于检测特定分子（如蛋白质、抗体、抗原等）的存在和浓度。
ELISA的原理包括以下几个关键步骤：
1. 固相吸附：首先，在试验板上涂覆含有特定抗原或抗体的微孔板，使其吸附在固相表面上。
2. 样品处理：将待测样品加入到微孔板中，使其中的目标分子与固相上的抗体或抗原发生特异性的结合。
3. 二次抗体结合：洗涤微孔板，以去除非特异性结合物。
然后，添加与待测分子特异性结合的酶标记的二次抗体，使其与样品中的目标分子结合。
4. 酶促反应：再次洗涤微孔板，以去除未结合的二次抗体。
然后，加入酶底物，它与酶标记的二次抗体结合，并形成可测量的产物。
5. 化学发光：酶底物与酶催化产生的产物具有发光性质，通过加入相应的底物来引发化学发光反应。
6. 检测和分析：使用荧光计或发光仪测量样品中的发光信号，该信号的强度与待测分子的浓度成正比。
通过与已知浓度的标准曲线比较，可以确定待测样品中待测分子的浓度。
微粒子酶促化学发光技术具有高灵敏度、高选择性和广泛的应用范围。
它在医学诊断、生物学研究和药物开发等领域发挥着重要作用。
1/ 1。
微孔板化学发光法检测技术在生化领域的应用
微孔板化学发光法检测技术在生化领域的应用美国Maxwell公司生物发光及化学发光仪简介(研究级冷光仪LuminMax-C)前言化学发光指化学反应过程中发射出来的光，又称冷光；生物发光是化学发光的一种，专指由酶催化的化学反应过程中发射出的光。
化学和生物发光经常被用于测定样品中未知成分的量，并且在过去的十年里在基因表达和基因调控的研究中发挥着非常重要的作用。
通过发射光的比率可以推出未知成分的浓度，因此测定化学反应过程中的发射光是非常有用的。
反应过程中产生的光与发射光的量产率是直接相关的，相应的，与发光物质的浓度成比例。
因此，反应过程中的光可以相对反映出目标样品中发光物质的量。
近年来，生物发光和化学发光的研究及使用与日俱增。
从测试细胞活性的ATP-荧光素酶检验，到当今的DNA、基因及蛋白质分析的应用日益扩大。
与荧光发光不同，它不需要外部光源。
冷光是从化学反应所产生的。
利用光子计数检测器，通过对反应中所产生的光子计数，冷光检验已成为最灵敏的光学检测方法之一。
美国Maxwell Sensors公司的LuminMax-C研究级化学发光仪（冷光仪）为广大用户提供了一款具有超高灵敏度和重复精度、易使用、结构紧凑及经济实用的仪器。
该仪器可测量96孔微孔板（黑或白）中的发光强度。
微孔板底部很清洁，因此，从孔的底部产生的发光即可被检测。
（详细技术规格请咨询中国一级代理：南京覃思科技有限公司，TEL：025-********，85432278或登录：）优点• 化学发光定量检测法相对于其它分析技术有许多优点：非常灵敏；动力学范围广；仪器设备便宜；这一新的发光实验方法的出现使得这一技术的应用非常广泛。
LuminMax-C使用了超级光电倍增管作为检测器，它具有极高的灵敏度。
检测灵敏度可达10-18摩尔（HRP）以上。
它具有检测从反应中产生光子数的能力，这意味着它可以检测样品中被分析物极小的份量（浓度）。
• 优秀的灵敏度和低背景使发光检测仪从其它分析方法中脱颖而出。
化学发光仪工作原理
化学发光仪工作原理1.荧光的产生和探测荧光是指当一些物质受到光的激发后，在光照射停止后自发地发出的短波长的可见光。
荧光产生的过程中，物质首先吸收入射光的能量，使得其内部的电子从基态跃迁到激发态。
当电子从激发态返回到基态时，会释放出较低能量的光子，形成荧光。
在化学发光仪中，荧光产生的过程如下：1)光源:化学发光仪通常使用氘灯、汞灯或激光器等作为光源，产生特定波长的入射光。
2)激发:入射光通过滤光片或单色仪，选择性地激发待测样品中的目标物质。
3)荧光发射:被激发的目标物质返回到基态时，会放出特定的荧光，其波长通常比入射光长。
荧光会在不同的波长范围内，以不同的强度被发射。
4)光学检测:荧光发射通过镜片和滤光片等光学元件收集和分离，进入光电二极管或光电倍增管等检测装置。
5)信号处理:检测到的荧光信号经过放大、滤波和数据处理等步骤，以得到具体的测量结果。
2.化学发光的产生和探测与荧光相比，化学发光是一种在化学反应中产生的光。
化学发光的产生和探测依赖于化学反应中放出的能量。
化学发光通常基于以下两种化学反应原理：a)化学发光原理之化学发光一些化学物质在特定条件下，释放出的能量足以激发周围的分子，从而产生化学发光。
典型的例子是气体放电发光，如氖灯或氙灯。
化学反应中的开放式电离产生的能量或过氧化物的自动氧化反应释放的能量也可以产生化学发光。
b)化学发光原理之生物发光该原理利用生物体内酶催化反应或化学反应，将化学能转换为光能以产生生物发光。
常见的生物发光反应是生物发光酶催化的氧化反应。
例如火萤虫的萤光素酶在存在氧和ATP的条件下，催化产生氧化的萤光素，从而产生生物发光。
在化学发光仪中，化学发光的产生和探测过程如下：1)反应物混合:反应物包括底物、催化剂、辅助试剂和缓冲液等，根据待测物质的不同选择适当的反应体系。
2)反应触发:反应物混合后，通过灌注或加热等方法触发化学反应的进行。
3)化学反应:化学反应中产生的分子间碰撞和能量释放，使得目标物质被激发，产生化学发光。
微孔板检测原理和应用
TRF应用——DNA与Protein 间的相互作用
聚合位 核酸外切位
Fluorescent Байду номын сангаасrobe
Klenow fragment (E.coli DNA聚合酶片断)与DNA间的相互作用
38
——Biochemistry 1991, 37, 1513
TRF应用——ELISA免疫分析
激素检测、传染性疾病诊断（比放射免疫更灵敏）
00 444400
446600
448800
550000
WWaavveelleennggtthh[[nnmm]]
00
448855
550055
552255
554455
WWaavveelleennggtthh[[nnmm]]
21
Excitation and emission spectra of fluorescein at different pH values (pH 5.0 to pH 9.0)
荧光染料，如与Ca2+ 结合的Fura-2, Indo-1等，与DNA结合的 PicoGreen，PI等，与蛋白质结合的Texes Red，Rhodamines等
荧光蛋白，如GFP，RFP等 量子点，Quantum Dot 上转换荧光材料，即稀土元素等 膜探针（疏水性DPH、亲水性探针与磷脂相连等） 膜电位探针，如JC-1
4
一、光吸收（Absorbance）
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分光光度检测
又称分子吸收光谱检测，是利用物质分子所特有的吸收光谱而对物质进行定性定 量测定的检测技术。
• 紫外分光光度检测（200～400nm） • 可见光分光光度检测（400～760nm） • 红外光分光光度检测（760～1000nm） 检测单位用OD值表示
化学发光原理及应用
生物发光的本质是化学发光
生物体化学发光现象的研究起源于古代，但 是，直到十九世纪末，这种现象与简单的有机反 应相联系才得到解释。
1877年 洛粉碱CL 1905年 洛粉碱类似物 1928年 鲁米诺 1935年 光泽精 1960s PMT 出现
DPA - e → DPA. + ( +1.3 V ) DPA + e → DPA. - ( - 2.2 V)
DPA. + + DPA. - → 1DPA* + DPA
1DPA* → DPA + h ν ( λ = 512nm )
+1.3 V -2.2 V
三、化学发光的表征
光谱：仅取决于体系的激发态 动力学曲线（反应时间）
Fluorophore (激发态) — 间接CL
还原剂：氨基酸、SO2、碘、药物、毒品等具有还原性的物质
量子产率不高，可以加入强还原 性物质增强体系灵敏度
可以测定化学需氧量 Talanta 2003, 61, 651-658
六、其他化学发光体系
1. 高价铈 CL体系
Chemiluminescence of Ce (IV) and surfactant Tween 20
(3)
490 ~ 500 nm
(4) CO2双分子发射：
(5)
430 ~ 450 nm
(6)
多酚类物质对该体系的化学发光有增强作用
林金明 Analytical Chemistry 2002
五、酸性高锰酸钾化学发光体系
1. KMnO4 – 还原剂 CL体系
丙型肝炎抗体化学发光法
丙型肝炎抗体化学发光法丙型肝炎是由丙型肝炎病毒引起的肝炎，它是一种常见的肝病，主要通过血液传播。
丙型肝炎抗体化学发光法是目前临床上常用的检测方法之一，下面我们来详细介绍一下。
1.检测原理丙型肝炎抗体化学发光法是一种间接免疫荧光法，通过荧光信号检测样本中的丙型肝炎抗体。
检测时，将被检测的样本加入已经涂有丙型肝炎病毒（HCV）抗原的微孔板孔中，如果样本中存在丙型肝炎抗体，它将和孔中的抗原结合形成抗原-抗体复合物。
接着，将荧光标记的抗人类IgG抗体加入孔中，与抗原-抗体复合物发生结合，形成荧光信号。
最后，使用发光仪检测样本的荧光信号，根据荧光强度来判断是否存在丙型肝炎抗体，从而确定阳性或阴性结果。
2.适用范围丙型肝炎抗体化学发光法适用于检测人体血清和血浆中的丙型肝炎抗体，适用于肝炎病例的早期诊断、血液安全筛查及慢性丙型肝炎的治疗效果监测。
3.操作步骤①标本采集和处理：新鲜静脉全血或血浆样本进行分离和预处理。
②实验室仪器和试剂：普通实验室仪器，包括荧光孔板读板仪、自动化化学发光免疫分析仪等。
试剂包括微孔板、丙型肝炎抗体、荧光标记的抗人类IgG抗体等。
③操作流程：样本加入孔中→酶联免疫吸附反应→清洗→添加荧光标记的抗人类IgG抗体→显色检测→荧光检测。
4.结果判断丙型肝炎抗体化学发光法结果通过荧光测定来判断，荧光测定值越高，表明样本中丙型肝炎抗体的含量越高。
根据不同医疗机构或实验室的标准，阳性和阴性的荧光值解释也有所不同。
5.注意事项①标本应该及时送达实验室，存放时间不能过长。
②严格按照实验操作规范进行操作。
操作过程中，应保持实验区域清洁，避免污染。
③注意试剂的使用期限，过期试剂会影响结果准确性。
④操作过程中应注意眼、口、鼻的保护，避免直接接触检测物质。
化学发光检测原理和微孔板
化学发光检测原理和微孔板化学发光检测是一种常用的生物分析技术，广泛应用于生物医学、环境监测、食品安全等领域。
它利用生物体内一些物质在发光底物的催化下发生化学反应，产生可见光或紫外光，通过检测发光信号的强度来分析样品中特定物质的含量或活性。
化学发光检测原理包括光物理原理和生物化学原理。
光物理原理是化学发光检测基础，光物理研究的是光与物质相互作用的过程。
化学发光过程中，常用的有化学发光、电化学发光和生物发光。
化学发光是指在光物理激发下，分子能级发生跃迁并产生光的过程。
当发光底物与样品中的分析物发生相应的化学反应后，产生能激发发光底物分子发生能级跃迁的物质，从基态跃迁到激发态，再通过发射光子的方式返回基态。
电化学发光是指在电极上电化学激发下发生光化学反应并产生发光现象。
生物发光是指生物体内特定的酶反应或化学反应，被称为生物发光反应。
生物化学原理是化学发光检测的核心，生物化学研究的是生物体内特定物质在分子和细胞水平上的结构、性质以及它们之间的相互作用。
化学发光检测中常用的反应系统包括酶催化反应、酶标记反应和化学发光标记反应。
酶催化反应是指酶作为催化剂参与到化学反应中，加速反应进程并使反应产物发光。
酶催化反应常用的酶有过氧化物酶（horseradish peroxidase，HRP）、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）、β-半乳糖苷酶（β-galactosidase，β-Gal）等。
在酶催化反应中，发光底物被酶催化分解，产生发光物质，其发光强度与被检测物质的浓度成正比。
酶标记反应是将目标物质（如抗原、抗体、核酸等）与酶标记物（如标记有酶的抗体、亲和素或其他标记物质）结合，通过酶标记物与发光底物的反应产生发光信号，进而检测目标物质的存在。
常用的酶标记物有辣根过氧化物酶（HRP）和碱性磷酸酶（ALP）等。
化学发光标记反应是通过将分析物与标记有化学发光物质的分子结合，通过化学发光物质的光学特性来检测目标物质的含量或活性。
化学发光检测原理
化学发光检测原理化学发光检测是一种常见的分析技术，广泛应用于生命科学、环境监测、食品安全等领域。
本文将介绍化学发光检测的原理及其应用。
一、原理概述化学发光检测是利用化学反应产生的光信号来检测目标分析物的一种方法。
其中最常见的化学发光系统有荧光物质发光和化学发光反应发光两种。
二、荧光物质发光检测原理荧光物质发光检测原理是利用分子在受到激发能量后，电子跃迁到激发态，再由激发态返回基态时释放能量的过程产生荧光。
荧光物质具有特异的发射光谱，可以通过检测荧光的强度来确定目标分析物的存在与浓度。
三、化学发光反应发光检测原理化学发光反应发光检测原理是通过在化学反应中释放能量，从而产生发光现象。
最常见的化学发光反应是氧化还原反应，其中包括氧化酶底物体系和氧化剂底物体系两种。
四、氧化酶底物体系氧化酶底物体系是一种常用的化学发光反应体系，如辣根过氧化物酶（HRP）底物体系。
在该体系中，HRP作为氧化酶，底物为一种可氧化的物质，如硫代酚类化合物。
当底物与HRP反应时，产生氧化反应，并释放出光信号。
光信号的强度与目标分析物的浓度成正比，通过检测发光信号的强度可以确定目标分析物的存在与浓度。
五、氧化剂底物体系氧化剂底物体系是另一种常见的化学发光反应体系，如过氧化氢（H2O2）和荧光素底物体系。
在该体系中，过氧化氢作为氧化剂，底物为荧光素。
当H2O2与荧光素反应时，产生氧化反应，并释放出光信号。
光信号的强度也与目标分析物的浓度成正比，通过检测发光信号的强度可以确定目标分析物的存在与浓度。
六、应用领域化学发光检测广泛应用于生命科学、环境监测、食品安全等领域。
在生命科学中，化学发光技术常用于蛋白质与核酸的检测。
在环境监测中，化学发光技术可用于检测环境中的有害物质，如重金属和农药残留等。
在食品安全领域，化学发光技术可用于检测食品中的添加剂和污染物。
七、总结化学发光检测利用化学反应产生的光信号来检测目标分析物的存在与浓度。
荧光物质发光和化学发光反应发光是常见的化学发光系统。
化学发光的原理
化学发光标记免疫分析又称化学发光免疫分析(CL IA ) ,是用化学发光剂直接标记抗原或抗体的免疫分析方法。
化学发光免疫分析仪包含两个部分, 即免疫反应系统和化学发光分析系统。
化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化, 形成一个激发态的中间体, 当这种激发态中间体回到稳定的基态时, 同时发射出光子(hM) , 利用发光信号测量仪器测量光量子产额。
免疫反应系统是将发光物质(在反应剂激发下生成激发态中间体) 直接标记在抗原(化学发光免疫分析) 或抗体(免疫化学发光分析) 上, 或酶作用于发光底物。
化学发光免疫分析仪包含两个部分, 即免疫反应系统和化学发光分析系统。
化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化, 形成一个激发态的中间体, 当这种激发态中间体回到稳定的基态时, 同时发射出光子(hM) , 利用发光信号测量仪器测量光量子产额。
免疫反应系统是将发光物质(在反应剂激发下生成激发态中间体) 直接标记在抗原(化学发光免疫分析) 或抗体(免疫化学发光分析) 上, 或酶作用于发光底物。
化学发光免疫分析仪器中核心探测器件为光电倍增管（PMT），由单光子检测并传输至放大器，并加高压电流放大，放大器将模拟电流转化为数字电流，数字电流将发光信号由R232数据线传输给电脑并加以计算，得出临床结果。
化学发光标记免疫分析法化学发光标记免疫分析又称化学发光免疫分析(CL IA ) ,是用化学发光剂直接标记抗原或抗体的免疫分析方法。
常用于标记的化学发光物质有吖啶酯类化合物——acridin ium ester (A E) ,是有效的发光标记物[ 3 ] , 其通过起动发光试剂(N aOH2H2O 2 ) 作用而发光, 强烈的直接发光在一秒钟内完成,为快速的闪烁发光(见图1)。
吖啶酯作为标记物用于免疫分析, 其化学反应简单、快速、无须催化剂; 检测小分子抗原采用竞争法 ,大分子抗原则采用夹心法 , 非特异性结合少, 本底低; 与大分子的结合不会减小所产生的光量, 从而增加灵敏度。
化学发光检测原理和微孔板
化学发光检测原理概述化学发光作为一种分析工具的吸引之处就在于检测的简单性。
化学发光的实质是自身发光，这意味着化学发光的分析测试仪器只需要提供一种可以检测光信号和纪录结果的方法就可以了。
自发光检测仪需要一个闭光的样品室和光检测器。
最简单的便是相片纸或X光片，甚至视觉检测器都可以。
化学发光检测方法的简单性使得它的应用很简单并且完全可以自动化。
但是它的灵敏度又是怎么样的呢？化学发光有如下两个内在的优势：1．绝大多数的样品没有“背景”信号，如它们自身不发光。
2．化学发光的检测不是一个比例测试，这是与荧光和吸收或比色测试不同的。
在荧光测试中，具有小的Stokes Shift的荧光基团非常难检测。
荧光很难从激发波长中分辨出来。
另外一个问题是，特别在样品是浑浊的情况下有一部分杂光会进入到检测器。
在吸收光测试上，其灵敏度受到限制的根本因素是需要在两个相对较强的信号之间去区分一个较小的差别。
需要注意的是检测器对光谱的敏感性近可能接近化学发光的光谱，以得到最大化的灵敏度。
一般在自发光仪中的光电倍增管对蓝光有最佳的反应，对红光的末端光谱不太敏感。
固态检测器对红光有较好的反应。
X光片广泛用于记录在尼龙膜、纤维素膜或PVDF膜上的化学发光印迹分析。
但是我们需要牢记在心的是X光片仅能够用于检测紫外到蓝光光谱范围内的光信号，虽然有一些特殊的光片对增强的绿光有敏感性。
液体样品的检测有一些特定的词来描绘化学发光检测：灵敏度、线性和动态范围。
每一个词的意义如下：1．灵敏度指的是某种东西可靠检测的最低水平。
“某种东西”是指在一个分析测试中的测试物。
测试物是被标记了一种可检测的东西，如化学发光化合物或的一种酶。
分析物也可以是一种通过与具有标记的亲合物有特异性结合反应而检测的物质。
所谓的可靠检测指的是针对一个空白测试样品，检测器能够重复感应到最低水平的信号，而这种信号是由所检测物本身产生的。
2．线性描述的是信号与分析检测物浓度范围之间的关系。
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化学发光检测原理概述化学发光作为一种分析工具的吸引之处就在于检测的简单性。
化学发光的实质是自身发光，这意味着化学发光的分析测试仪器只需要提供一种可以检测光信号和纪录结果的方法就可以了。
自发光检测仪需要一个闭光的样品室和光检测器。
最简单的便是相片纸或X光片，甚至视觉检测器都可以。
化学发光检测方法的简单性使得它的应用很简单并且完全可以自动化。
但是它的灵敏度又是怎么样的呢？化学发光有如下两个内在的优势：1．绝大多数的样品没有“背景”信号，如它们自身不发光。
2．化学发光的检测不是一个比例测试，这是与荧光和吸收或比色测试不同的。
在荧光测试中，具有小的Stokes Shift的荧光基团非常难检测。
荧光很难从激发波长中分辨出来。
另外一个问题是，特别在样品是浑浊的情况下有一部分杂光会进入到检测器。
在吸收光测试上，其灵敏度受到限制的根本因素是需要在两个相对较强的信号之间去区分一个较小的差别。
需要注意的是检测器对光谱的敏感性近可能接近化学发光的光谱，以得到最大化的灵敏度。
一般在自发光仪中的光电倍增管对蓝光有最佳的反应，对红光的末端光谱不太敏感。
固态检测器对红光有较好的反应。
X光片广泛用于记录在尼龙膜、纤维素膜或PVDF膜上的化学发光印迹分析。
但是我们需要牢记在心的是X光片仅能够用于检测紫外到蓝光光谱范围内的光信号，虽然有一些特殊的光片对增强的绿光有敏感性。
液体样品的检测有一些特定的词来描绘化学发光检测：灵敏度、线性和动态范围。
每一个词的意义如下：1．灵敏度指的是某种东西可靠检测的最低水平。
“某种东西”是指在一个分析测试中的测试物。
测试物是被标记了一种可检测的东西，如化学发光化合物或的一种酶。
分析物也可以是一种通过与具有标记的亲合物有特异性结合反应而检测的物质。
所谓的可靠检测指的是针对一个空白测试样品，检测器能够重复感应到最低水平的信号，而这种信号是由所检测物本身产生的。
2．线性描述的是信号与分析检测物浓度范围之间的关系。
理想的比例因子是常数；信号点与分析检测物是一条直线关系。
标准曲线可以不是直线，如s形，仍是有用的。
3．动态范围指的是被检测物浓度与信号单一模式的变换范围。
它定义的是分析的工作范围。
你期望通过化学发光得到什么水平的灵敏度呢？答案不一定会满足你的要求，“它是有条件的”。
在很少情况下，检测器的灵敏度或化学发光方法会是检测的局限因素。
现在的检测器可以达到很高的灵敏度。
大多数情况下，而是其它的一些因素显示了分析检测的灵敏度。
最通常的是生物成分（抗体、酶等）的非特异性结合到反应容器和支持物的表面。
例如，免疫分析，印迹实验，核酸杂交和其它的酶联结合实验都是受制于此因素。
管和微孔板玻璃、透明或半透明的塑料管、比色皿是化学发光测试比较理想的材料。
理想的是光能够通过一个平面然后测试，以减少边际效应。
曲面也可以使用，如圆柱型的测试管。
用不同的测试管测试比较结果，这些管必须是统一生产的，才可以比较结果。
微孔板——从化学发光反应中发射出的光是各向同性的，即在各个方向上同等发射出来的。
如果一个化学反应是在透明的微孔板中的微孔中进行，光不仅从垂直方向发散，还从水平方向发散出来。
光很容易的通过各个孔之间的间隙和孔壁。
光较强的孔就会干扰相邻的孔。
因此，化学发光测试一般不用透明微孔板。
不透明的微孔板和板条主要有两种——白色和黑色。
使用者需要注意的是黑色的因为有光吸收，所以它的信号会比白色板有很明显的减弱（将近10倍）。
因为所有的孔是同等比例的收到影响，所以不管他们的强度，定量并没有问题。
白色或黑色板的选择，主要是基于预期检测信号的强弱，白色板用于检测较弱光的检测，黑色板用于检测强光的检测。
黑色板的另一优点就是可以削弱非特异性结合所带来的问题。
此外，白色板并不是完全同等不透明。
为荧光设计的白板的白色素比用于化学发光的白板的要少的多。
在荧光检测时，每检测一次，一般在针对一个孔，消除了相邻孔之间的干扰。
白色微孔板的好坏很容易检测，只要在板的后面放上一只灯，然后看每个孔。
如果穿过的灯光不仅仅是淡淡的，那么用于较强的化学发光底物的分析是会有一些问题的。
固相样品的检测（印迹膜）X光片——它已经被认为是对固定在膜上的蛋白或核酸进行化学发光检测的强有力的工具，如Southern、Northern和Western杂交的化学发光检测。
此类商业化的产品已非常广泛。
如果能够控制好非特异性的结合，灵敏度是足够的。
如果不能很好控制，将会X光片上曝光过度。
解决这个问题的最好策略是减少结合的试剂的量，例如抗体或类似物。
曝光时间1到10分钟通常是足够显现大多数的印迹。
更长的很少能提高信号/背景。
关于灵敏度相对的方面来讲，未得到信号并不意味着分析物的不存在。
任何一种光学用膜片都有一个强度阈值，在这个阈值之上银颗粒的光化学转化才能成功。
否则会失败，称之为“可逆失败”。
在实际操作中，化学发光信号低于阈值强度的结果仅是简单的没有记录。
更长时间的曝光也不能克服这个问题。
可以通过一些方法来改进，在曝光之前如把膜片放在氢气和氮气的混合气体中预闪，即用低强度的光短时间的照射膜片，以提高光学颗粒的光子。
CCD成像技术——最近，基于CCD的影像系统已成为化学发光印迹结果获得和记录的好工具。
这些系统在信号测试的动态范围上表现出很好的效果。
CCD的量度大小为3～4个级数，而X 光片仅为1个级数。
摄像时间短，并且可以获得多个影像和容易存储。
虽然需要投入设备的购置费，但是可以节省膜片和其它的投入。
设备（光电倍增管）在发光仪上，PMT为传统的选择。
它们的优势包括良好的灵敏度，宽广的动态范围和较宽的光谱相应。
因为PMT具有很低的暗电流，使得它们具有极佳的信噪比。
PMT有两种基本模式——单光子计数和电流感应。
有些复合系统是在每秒百万个光子以下为单光子模式，超过之后为电流感应。
PMT单光子计数系统是超灵敏的。
用这类检测器主要是为了满足灵敏度要求较高的测试和定量。
越高要求的灵敏度，价格越高。
样品测试室必须是光密闭性非常好的。
如果光太强会损害PMT。
PMT电流感应系统也能获得较好的灵敏度，经常用于比单光子计数系统检测的更强的光。
对于选择何种模式的PMT检测器，需要与你的实际需要结合起来选择。
现在，这两种检测器的化学发光仪操作都比较简单，灵敏度也都比较好。
对此有一个正确的理解，你就可以选择一个比较适合你的应用的设备。
PMT主要应用在液相中化学发光的检测，仪器形式可以为管式和板式。
其检测结果单位值为RLU（Relative Light Unit），各个公司生产的产品其对RLU的定义会有所不同。
固态检测光电二极管能够感应比光电倍增管所感应的更强的光强度。
对于那些需要测试高强度光的应用，选择这样的检测器比较好。
然而，固态检测器的暗电流比光电倍增管一般要高很多。
解决这个问题的方法之一是通过Peltier或者是其它的热电制冷设备冷却固态检测器。
在0～30摄氏度范围内，固态检测器的暗电流随温度的降低会急剧下降。
冷却的检测器能够整合1到100秒范围内所检测到光信号而不会被暗电流所覆盖。
CCD和其它的固态检测器拥有以下几个内在的优点：1、在可见光谱范围内，固态检测器有一个较好的光谱响应。
发光反应发出红光，甚至近红外光。
2、CCD影像系统可以对不同的目标物进行检测。
基本上任何一种样品或容器都可以适用，如微孔板，细菌测试管或细胞培养皿，电泳凝胶和印迹膜。
3、单个PMT系统在测读之前必须对样品位置进行定位。
样品管重复多次带到一个固定位置，然后重复测读。
微孔板PMT测读仪依赖于微孔之间的标准间隔，能够按照一个预算好的位置移动微孔板，由此微孔一个接着一个的测读。
而摄像系统测读一个样品不需要预先知道它的位置，例如膜上的一个条带。
影像系统能够把样品的浓度和位置信息给出。
4、CCD影像系统能够同时获得大量样品的信息。
如对96、384或更多数目的微孔板的数据的同步收集并不是一个奢望。
固态影像系统可以一次就获得整个微孔板的影像和定量。
仪器设计者或终端使用者需要注意的是影像检测器对于微孔板样品的检测存在一个重大的缺陷：三维的微孔板相比于二维检测物（如膜）会产生一个边际效应。
因为光强度按照距离平方的倒数逐渐变弱，所以把摄像头放到尽可能离板近的地方由此可以得到最好的结果。
然而，因为孔是有深度，最远孔的整个底部就可能看不到。
这个孔的边缘部分的光信号就很可能检测不到。
提高摄像头将削减检测器所获得的整体的光强度。
几何计算模式可以拿来应用以弥补边际强度的丢失，但是外围孔的信噪比必然比中央孔的要差。
CCD应用最普遍的设备系统为带制冷CCD的化学发光凝胶成像系统。
为了提高检测速度和通量，有时也把CCD应用到高通量的板式化学发光检测仪上。
大多数研究用的发光仪和发光免疫分析仪都装有一些辅助装置，如样品孵育，样品注射器，光学滤光片等。
1.、温度控制——有时需要的结果进行比较，会因为温度的不同而收到干扰。
特别是在一些酶催化的“glow”型的反应需要几分钟才能达到高峰，温度的变化会导致测试到的强度发生变化，降低分析的精确性。
如果能够控制样品的温度和反应温度的统一，可以使得反应在固定条件下进行。
样品发光强度可能由几个因素造成的：温度依赖的酶动力学和随后的底物化学反应动力学。
缓冲液的pH值加上温度的影响可以引起信号的显著变化。
2、单色分光和滤光片可以分离特定的波长或光谱范围的光。
在化学发光应用中一般没有特殊的要求，它们是不需要的。
在同一个反应体系中有两种能够发出不同光谱的发光物，其目的是为了分析检测两种不同的测试物。
如在生物化学发光能量共振转移中，就用滤光片来分析蛋白质的相互结合。
波长的选择不免会降低检测器上的光通过量从而倒是灵敏度的损失。
3、中性滤光片——使用中型滤光片可以是检测设备的检测范围延伸2～3个数量级。
由特制的浅灰玻璃组成，放置于样品与监测器之间，这些滤镜起到类似“太阳镜”的作用将所有波长的光都以相同的因子进行减弱。
使用此校正因子将测量得到的光校正到“真实”的强度。
4、注射器可以使得底物或启动剂能够以精确的时间加入。
对于一个随时间光信号产生变化的动力学样品来说，这是非常重要的。
内容来源于：丁香通/experiment/430/599/610/19941.htm。