艾滋病实验室的生物安全
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根据《人类传染的病源微生物名录》要求: 艾滋病血清检测属于未经培养的感染材料 的操作,应在符合BSL-2实验室的艾滋病检 测实验室(考核发证)中进行。
HIV的分类及防护要求
危害程度分类 病毒培养
动物感染实验
未经培养的感染材料的 操作
灭活材料的操作 无感染性材料的操作
生物安全级别 BSL-3 BSL-3 BSL-2
实验室的安全操作
在安排工作人员的实验室区域时,要根据其工作的种类和所涉及的生物试剂,对实验室环境做好 安全检查。
进入实验室应穿隔离衣、戴手套,必要时(如对初筛阳性标本进行复测或确认时,或直接对HIV 毒种进行操作时)戴防护眼镜,以防污染暴露的皮肤和衣物。不用戴手套的手触摸暴露的皮肤、 口唇、眼睛、耳朵和头发等。
第一代 HIV-1型抗 (1985) 原 (病毒裂解
产物)
30-60天 间接法
检测抗体
特点
lgG
假阳性较多,血清要高
度稀释,灵敏度低,仅
能检测HIV-1
第二代 HIV(1+2型)抗 28-35天 间接法 lgG (1990) Βιβλιοθήκη Baidu(基因重组或
合成多肽)
灵敏度和特异性优于第 一代,但只能检测HIVlgG
疫情分布范围扩大,地区差异明显
疫情分布范围持续扩大,从2002年的50 个县增加到2009年的114个县。
地区差异明显,在全省历年累计报告 HIV/AIDS中,运城市报告占42.87%,太原 市占21.39%,而忻州市只占1.87%,吕梁 市占1.49%。 2009年报告的HIV/AIDS中, 太原市占34.39%,运城市占24.58%,而 忻州市和吕梁市各占2.16%。
艾滋病实验室检查及生物安全
山西省人民医院检验科 耿燕
我省艾滋病疫情及流行特点
我省1995年发现第一例艾滋病感染者,截至 到2009年底,我省共累计报告 HIV/AIDS3422例,其中艾滋病病人1572例, 死亡888例.
2009年,我省共报告HIV/AIDS602例, 其 中新报告513例,既往订正89例。
第三代
HIV(1+2型)抗 14-25天 双抗原夹 LgG+lgM
原(基因重组)
心法
可检测HIV不同的抗体 亚类(lgG、lgM、 lgA
等)灵敏度、特异性均 较高
第四代
HIV(1+2型)抗 原(基因重组+ 抗-p24抗体)
10-18天
双抗原夹 LgG+lgM+ 心法和双 Ag 抗体夹心 法
检测HIV(1+2型)抗体 和p24抗原,明显缩短
艾滋病检测
艾滋病检测工作须遵守《实验 室生物安全通用要求》《全国艾滋病检测 工作管理办法》《全国艾滋病检测技术规 范(2009版)》
艾滋病检测
HIV抗体检测分为筛查试验(包括初筛和复 检)和确证试验
筛查试验常用方法
快速检测 酶联免疫吸附试验(第三代或第四代试剂)
试 剂 包被抗原或抗体 窗口期 方 法 类型及来源
青年成为艾滋病感染的主要人群
自2006年开始,每年报告 HIV/AIDS中,20~29岁年龄组比例持续增 加,约占当年报告数 的1/3,成为艾滋病 病毒感染的主要人群。
流动人口成为艾滋病传播的重要 人群
外来人口和流动人口中发现 的艾滋病感染者逐年增加,从2004年的 6.3%上升到2009年的40.55%。该群体在我 省流动、生活,作为艾滋病传播的主要人 群,给我省艾滋病防治工作带来极大挑战, 是艾滋病防控的重点和难点
2009年报告艾滋病病人167例,其中首次报 告101例,66例由既往HIV转为艾滋病病人。
2009年报告死亡109例。 分布在我省11个市114个县区,占全省119
个县区的95.80%。
山西历年报告HIV/AIDS情况
例数
700
600
500
400
300
200
100
0 1995 1996 1997 1998 1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009
性传播成为主要传播途径,同性性 传播上升速度明显
山西省自2006年开始,性传播成为主要传 播途径,持续保持在较高比例,每年报告 的HIV/AIDS 中约30%-40%为性传播。 2009 年占38.1% 。
2006年首次报告经男男同性传播,截止到 2009年底,已经累计报告95例,管理104例。 数量快速增多,分布在全省除朔州市的10 个市。
年份
我省艾滋病流行概况
疫情呈缓慢上升趋势,综合防治效果开始 显现
从2000年到2004年疫情呈快速上升趋势, 年平均增幅达164%;综合防治效果开始显 现。2005年以后,疫情上升趋势放缓,年 平均增幅为12%。尽管疫情增幅有所减缓, 但由于新增感染数逐年增加,基数持续加 大,危害仍在持续加重。
BSL-1 BSL-1
个体防护的配备原则
BSL-2实验室 除符合BSL-1的要求外,还应该符合下列条件: 在实验室中应穿着工作服或罩衫等防护服。离开实验室时,防护服必
须脱下并留在实验室内。不得穿着外出。用过的工作服应先消毒,然 后统一洗涤或丢弃。 当手可能接触感染材料、污染的表面或设备时应戴手套。如可能发生 感染性材料的溢出或溅出,宜戴两副手套。不得戴着手套离开实验室。 工作完全结束后方可除去手套。 一次性手套不得清洗和再次使用。 当微生物的操作不可能在生物安全柜内进行,而必须采取外部操作时, 为防止感染性材料溅出或雾化危害,必须使用面部保护装置(护目镜、 面罩、个体呼吸保护用品或其他防溅出保护设备)。
判断结果 阴性反应 出具阴性报告
阳性反应 均阴性
双 孔 复 查
均 阳 性
填写《HIV抗体筛查阳性送检单》, 上报筛查中心实验室或确证实验 室,必要时可出具待复检报告
艾滋病的实验室安全
根据《中华人民共和国传染病防治法》, 艾滋病毒(HIV)属于乙类传染病,在卫生 部2006年公布《人类传染的病源微生物名 录》中将艾滋病毒(1和2型)列为危害程 度第二类病原微生物。
窗口期,进一步降低输 血的残余危险度
筛查结果
阴性——出具“HIV抗体阴性”报告 阳性——填写“HIV抗体筛查阳性送检单”,
按照有关要求送样品至市级筛查中心实验 室或确证实验室,必要时可出具“HIV抗体 待复检”报告
一般工作流程(酶联免疫吸附实验)
检测试验 评价试验
外部质控:受控试验 有效,如失控,分析 原因重新进行试验
HIV的分类及防护要求
危害程度分类 病毒培养
动物感染实验
未经培养的感染材料的 操作
灭活材料的操作 无感染性材料的操作
生物安全级别 BSL-3 BSL-3 BSL-2
实验室的安全操作
在安排工作人员的实验室区域时,要根据其工作的种类和所涉及的生物试剂,对实验室环境做好 安全检查。
进入实验室应穿隔离衣、戴手套,必要时(如对初筛阳性标本进行复测或确认时,或直接对HIV 毒种进行操作时)戴防护眼镜,以防污染暴露的皮肤和衣物。不用戴手套的手触摸暴露的皮肤、 口唇、眼睛、耳朵和头发等。
第一代 HIV-1型抗 (1985) 原 (病毒裂解
产物)
30-60天 间接法
检测抗体
特点
lgG
假阳性较多,血清要高
度稀释,灵敏度低,仅
能检测HIV-1
第二代 HIV(1+2型)抗 28-35天 间接法 lgG (1990) Βιβλιοθήκη Baidu(基因重组或
合成多肽)
灵敏度和特异性优于第 一代,但只能检测HIVlgG
疫情分布范围扩大,地区差异明显
疫情分布范围持续扩大,从2002年的50 个县增加到2009年的114个县。
地区差异明显,在全省历年累计报告 HIV/AIDS中,运城市报告占42.87%,太原 市占21.39%,而忻州市只占1.87%,吕梁 市占1.49%。 2009年报告的HIV/AIDS中, 太原市占34.39%,运城市占24.58%,而 忻州市和吕梁市各占2.16%。
艾滋病实验室检查及生物安全
山西省人民医院检验科 耿燕
我省艾滋病疫情及流行特点
我省1995年发现第一例艾滋病感染者,截至 到2009年底,我省共累计报告 HIV/AIDS3422例,其中艾滋病病人1572例, 死亡888例.
2009年,我省共报告HIV/AIDS602例, 其 中新报告513例,既往订正89例。
第三代
HIV(1+2型)抗 14-25天 双抗原夹 LgG+lgM
原(基因重组)
心法
可检测HIV不同的抗体 亚类(lgG、lgM、 lgA
等)灵敏度、特异性均 较高
第四代
HIV(1+2型)抗 原(基因重组+ 抗-p24抗体)
10-18天
双抗原夹 LgG+lgM+ 心法和双 Ag 抗体夹心 法
检测HIV(1+2型)抗体 和p24抗原,明显缩短
艾滋病检测
艾滋病检测工作须遵守《实验 室生物安全通用要求》《全国艾滋病检测 工作管理办法》《全国艾滋病检测技术规 范(2009版)》
艾滋病检测
HIV抗体检测分为筛查试验(包括初筛和复 检)和确证试验
筛查试验常用方法
快速检测 酶联免疫吸附试验(第三代或第四代试剂)
试 剂 包被抗原或抗体 窗口期 方 法 类型及来源
青年成为艾滋病感染的主要人群
自2006年开始,每年报告 HIV/AIDS中,20~29岁年龄组比例持续增 加,约占当年报告数 的1/3,成为艾滋病 病毒感染的主要人群。
流动人口成为艾滋病传播的重要 人群
外来人口和流动人口中发现 的艾滋病感染者逐年增加,从2004年的 6.3%上升到2009年的40.55%。该群体在我 省流动、生活,作为艾滋病传播的主要人 群,给我省艾滋病防治工作带来极大挑战, 是艾滋病防控的重点和难点
2009年报告艾滋病病人167例,其中首次报 告101例,66例由既往HIV转为艾滋病病人。
2009年报告死亡109例。 分布在我省11个市114个县区,占全省119
个县区的95.80%。
山西历年报告HIV/AIDS情况
例数
700
600
500
400
300
200
100
0 1995 1996 1997 1998 1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009
性传播成为主要传播途径,同性性 传播上升速度明显
山西省自2006年开始,性传播成为主要传 播途径,持续保持在较高比例,每年报告 的HIV/AIDS 中约30%-40%为性传播。 2009 年占38.1% 。
2006年首次报告经男男同性传播,截止到 2009年底,已经累计报告95例,管理104例。 数量快速增多,分布在全省除朔州市的10 个市。
年份
我省艾滋病流行概况
疫情呈缓慢上升趋势,综合防治效果开始 显现
从2000年到2004年疫情呈快速上升趋势, 年平均增幅达164%;综合防治效果开始显 现。2005年以后,疫情上升趋势放缓,年 平均增幅为12%。尽管疫情增幅有所减缓, 但由于新增感染数逐年增加,基数持续加 大,危害仍在持续加重。
BSL-1 BSL-1
个体防护的配备原则
BSL-2实验室 除符合BSL-1的要求外,还应该符合下列条件: 在实验室中应穿着工作服或罩衫等防护服。离开实验室时,防护服必
须脱下并留在实验室内。不得穿着外出。用过的工作服应先消毒,然 后统一洗涤或丢弃。 当手可能接触感染材料、污染的表面或设备时应戴手套。如可能发生 感染性材料的溢出或溅出,宜戴两副手套。不得戴着手套离开实验室。 工作完全结束后方可除去手套。 一次性手套不得清洗和再次使用。 当微生物的操作不可能在生物安全柜内进行,而必须采取外部操作时, 为防止感染性材料溅出或雾化危害,必须使用面部保护装置(护目镜、 面罩、个体呼吸保护用品或其他防溅出保护设备)。
判断结果 阴性反应 出具阴性报告
阳性反应 均阴性
双 孔 复 查
均 阳 性
填写《HIV抗体筛查阳性送检单》, 上报筛查中心实验室或确证实验 室,必要时可出具待复检报告
艾滋病的实验室安全
根据《中华人民共和国传染病防治法》, 艾滋病毒(HIV)属于乙类传染病,在卫生 部2006年公布《人类传染的病源微生物名 录》中将艾滋病毒(1和2型)列为危害程 度第二类病原微生物。
窗口期,进一步降低输 血的残余危险度
筛查结果
阴性——出具“HIV抗体阴性”报告 阳性——填写“HIV抗体筛查阳性送检单”,
按照有关要求送样品至市级筛查中心实验 室或确证实验室,必要时可出具“HIV抗体 待复检”报告
一般工作流程(酶联免疫吸附实验)
检测试验 评价试验
外部质控:受控试验 有效,如失控,分析 原因重新进行试验