快速高灵敏度考马斯亮蓝染色

快速高灵敏度考马斯亮蓝染色

Method：

（1）凝胶染色：

1.电泳结束后，将凝胶置于盛有试剂A的微波炉专用塑料容器中，试剂A的量要足够覆

盖整块凝胶；

2.用微波炉的最大功率加热凝胶直至溶液沸腾（约需2min）；

3.室温轻轻摇动凝胶，使之冷却5min；

4.弃去用过的试剂A，用水快速地冲洗一下凝胶。这时，即使在蓝色的背景下也可以看

到蛋白含量在100ng以上的蛋白条带显现出来；

5.加入试剂B，用微波炉的最大功率加热凝胶直至溶液沸腾（约需80s）；

6.弃去热试剂B，用水冲洗凝胶。此步完成后可见蛋白含量在50ng以上的条带；

7.加入试剂C，并用微波炉的最大功率加热凝胶直至溶液沸腾（约需80s）；

8.弃去热试剂C，用水冲洗凝胶。这样蛋白含量在25ng以上的蛋白条带可显现。（2）凝胶脱色：

9.加入试剂D，并用微波炉的最大功率加热凝胶直至溶液沸腾（约需80s）；

10.在溶液中放入Kimwipe纸巾，吸取多余染料；

11.室温冷却凝胶5min，此时，蛋白含量大于5ng的条带也能显现；

12.重复步骤9~11两次以上，或将凝胶放在试剂D中于室温摇动15min以上，这时，某

些仅含有2.5ng蛋白的条带也能显现。

Reagents：

试剂A：在含有250ml异丙醇、100ml醋酸及650ml水的混合液中溶解0.5gCBR-250

试剂B：在含有100ml异丙醇、100ml醋酸及800ml水的混合液中溶解0.05gCBR-250

试剂C：溶解0.02gCBR-250于100ml醋酸和900ml水中

试剂D：将100ml醋酸和900ml水混合