法定量测定小鼠血清、血浆或其它相关生物液体中 含量。 …
小鼠免疫球蛋白E(IgE)酶联免疫分析(ELISA)
5.组织标本：切割标本后，称取重量。
加入一定量的PBS，PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
标本融化后仍然保持2-8℃的温度。
加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
分装后一份待检测，其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。
（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为360μg/ml，240μg/ml ，120μg/ml，60μg/ml，30μg/ml）。
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。
在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
HPLC法测定小鼠血浆和组织中伊曲康唑的含量
HPLC法测定小鼠血浆和组织中伊曲康唑的含量丁艳;王金萍;苗蕾【期刊名称】《药学研究》【年(卷),期】2010(029)012【摘要】目的建立高效液相色谱法测定小鼠血浆和组织中伊曲康唑的含量.方法采用色谱柱:Diamosil C18 (4.6mm×150mm,5 μm); 流动相:甲醇-水(84∶16,V/V);流速:1.0mL·min-1;检测波长:262nm;柱温:室温;进样量:20μL,按伊曲康唑峰计理论塔板数不小于3000,来测定小鼠血浆和各组织中伊曲康唑的含量.结果小鼠血浆和各组织器官日内精密度和日间精密度RSD均小于4%;小鼠血浆方法回收率大于97%,RSD均小于3%;小鼠各组织器官方法回收率均大于95%,RSD均小于4%;可满足生物样品分析方法的要求.结论建立的HPLC法测定血浆和组织伊曲康唑的浓度,方法简便,准确,内源性物质不干扰测定,适合于大批量生物样本中伊曲康唑含量的测定.【总页数】4页(P726-729)【作者】丁艳;王金萍;苗蕾【作者单位】山东大学药学院,山东,济南,250012;山东医药技师学院,山东,泰安,271000;山东大学药学院,山东,济南,250012;山东大学药学院,山东,济南,250012【正文语种】中文【中图分类】R927.2【相关文献】1.HPLC法测定生白口服液灌胃后小鼠血浆中淫羊藿苷的含量 [J], 周一雷;黄孝闻;王绪平2.HPLC法测定猪血浆及组织中盐酸克仑特罗的含量 [J], 张锦红;江涛;曾昭智;葛长荣3.HPLC法测定人血浆中伊曲康唑的含量及其药代动力学研究 [J], 房绍鹏4.RP-HPLC法测定灌胃赤芍胡椒复方小鼠血浆中芍药苷的含量 [J], 裴瑾;杨祖贻;刘荣敏;程佳;万德光;胡荣5.HPLC法测定灌胃当归胡椒复方小鼠血浆中阿魏酸的含量 [J], 裴瑾;杨祖贻;刘荣敏;陈佳;万德光;胡荣因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相色谱法测定小鼠组织及血浆中紫杉醇含量
紫杉 醇 （ａｌａｅ，Ｐ Ｘ） 美 国新 化 合物 实 体 ｐｃｔ ｌ Ｔ 被 ｉｘ （ ｅ ｈｍｉ ｌ ｎｉ ， Ｃ ） 为 近 ２ Ｎｗ Ｃ ｅ ｃ ｔｙ Ｎ Ｅ 称 ａＥ ｔ ０年来 最 伟 大 的发现之 一 ， 具有 独 特 的微 管 稳定 作 用 而 被广 泛 它 用 于乳腺 癌 、 列腺癌 、 前 卵巢癌 、 颈部肿 瘤 、￣ ，Ｈ 头 ３ ｄｔｔ
２０ ０ ０ ８— ８—１ ０接 收
作者单位 ： 安徽医科大学药学 院， 合肥
２ ０ ３ ３０ ２
安徽医科大学附属省立医院药剂科 ， 合肥
安徽 中医学院药学 院２ ０ ０ ８届毕业生 ， 合肥 作 者简介 ： 卢 金 今， ， 女 硕士研究生 ；
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安徽 医科大 学学报
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高效液相色谱法测定 小鼠组织及血浆中紫杉醇含量
卢 今 ， 伍长娟 杨 肖琳 高 ， ， 雷 陈礼明 ， ， 金 涌
涌， ， 男 博士 ， 教授 ， 硕士 生导 师 ， 责任 作者 ， — ａｌ Ｅｍｉ
ｊａｄ ｍ ｉ ｃｉａ ＣＨ ｙｙ＠ ａｌ ｈｎ．Ｏ１ ．
董佳生．腹壁下动脉 穿支皮瓣乳 房再造的 手术要 点 ［ ］ 外 科 Ｊ． 理论与实践 ，０ ６ ｌ （ ） １２— ． ２ ０ ， １２ ：０ ３ 杨建敏 ， 王 颀， 李文萍 ， 乳 腺癌改 良根治术同期假体 植入 等． 重建乳房 ［ ］ 中华乳腺病杂志 ，０ ８ ２ １ ：５— ． Ｊ． ２ ０ ， （ ） １ ７
小鼠羟脯氨酸(Hyp)ELISA Kit实验说明书
【产品编号】CSB-E08839m
【预期应用】ELISA 法定量测定小鼠血清、血浆、组织裂解液中 Hyp 含量。
【产品性能指标】
1、 检测范围：7.8 ng/ml-500 ng/ml
2、 灵敏度：1.95 ng/ml
3、 精密度：批内差 CV%<8%，批间差 CV%<10%
3、 生物素标记抗体工作液 生物素标记抗体液按 1:100倍用生物素标记抗体稀释液进行稀释。如 10μl生物素标记抗体加
990μl生物素标记抗体稀释液，轻轻混匀，在临用前10分钟内配妥。
4、 辣根过氧化物酶标记亲和素工作液 辣根过氧化物酶标记亲和素 按 1:100 倍用辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液进行稀释。 如
溶液后每隔一段时间观察一下显色情况以控制反应时间（比如每隔 10 分钟）。当肉眼可
见标准品前 3-4 孔有明显梯度蓝色，后 3-4 孔显色不明显时，即可加入终止液终止反应，
此时蓝色立刻变为黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物溶液的加入顺序相同。
7、 底物溶液应为浅蓝色或无色，如果颜色严重变深则必须弃用。底物溶液易受污染，请避
辣根过氧化物酶标记亲和素
生物素标记抗体稀释液
有效期内2-8℃条件下最多可保存一个月。
辣根过氧化物酶标记亲和素
稀释液
样本稀释液
浓洗涤液
底物溶液
终止液
【所需试剂和器材】
标准规格酶标仪；高速离心机；电热恒温培养箱；干净的试管和离心管；容量瓶；
系列可调节移液器及吸头；多通道移液器；蒸馏水 等
【样本采集及保存】
如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4、 温育：为防止样本蒸发或污染，温育过程中酶标板必须覆上板贴，实验过程中酶标板应
小鼠P糖蛋白渗透性糖蛋白(P-gp)酶联免疫分析.
小鼠P糖蛋白/渗透性糖蛋白(P-gp)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用产品编号：CSB-E12906m检测范围：0.78 ng/ml – 50 ng/ml最低检测限：0.2 ng/ml特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的小鼠P-gp，且与其他相关蛋白无交叉反应。
有效期：6个月预期应用：ELISA法定量测定小鼠血清、血浆或其它相关生物液体中P-gp含量。
说明1．试剂盒保存：-20℃（较长时间不用时）；2-8℃（频繁使用时）。
2．浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
3．中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。
4．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。
概述P-糖蛋白（P-glycoprotein，P-gp）是ATP结合盒转运载体蛋白中最大的一个亚系。
P-gp 在许多组织有分布，是一种A TP依赖性膜转运体，作为药物转运子，其作用类似于排出泵，可将药物从细胞内外排而使胞内药物浓度降低，从而降低药效。
P-gp是由1280个氨基酸组成的跨膜蛋白，分子量为170kD，由两个相似的部分构成。
其中每一个部分包含六个转运膜区和一个ATP结合利用区。
P-gp在大肠及小肠的黏膜、血脑屏障、睾丸毛细血管上皮细胞、肝细胞、肾上腺及肾近端小管均有分布，因此它对药物的体内过程有显著影响。
P-gp与正常细胞的分泌功能密切相关，在所有正常人类组织中均可检测到P-gp基因的mRNA，不同器官中Pgp基因mRNA的水平相差很大，在肾脏、肝、消化道、肺等器官P-gp mRNA的水平较高，而在睾丸、卵巢、子宫、皮肤等器官处于较低水平。
越来越多的研究表明P-gp是人体保护正常细胞免受毒物损害的机制之一。
实验原理用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗P-gp抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗P-gp抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
小鼠游离脂肪酸(FFA)酶联免疫分析 试剂盒 说明书
小鼠游离脂肪酸（FFA）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用检测范围：7.8ng/ml-500ng/ml最低检测限：1.95ng/ml特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的小鼠FFA，且与其他相关蛋白无交叉反应。
有效期：6个月预期应用：ELISA法定量测定小鼠血清、血浆、尿液或其它相关生物液体中FFA含量。
说明1．试剂盒保存：-20℃（较长时间不用时）；2-8℃（频繁使用时）。
2．浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
3．中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。
4．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。
概述游离脂肪酸，即未脂化的脂肪酸（nonesterified fatty acid），是中性脂肪分解成的物质。
血浆中含量甚少，仅占总脂肪酸含量的5%～10%，在血浆中半衰期2～3分钟，主要与血清蛋白结合转运到全身组织利用。
当肌肉活动所需能源－肝醣耗尽时，脂肪组织会分解中性脂肪成为游离脂肪酸来充当能源使用。
所以，游离脂肪酸可说是进行持久活动所需的物质。
例如：马拉松赛跑。
实验原理用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗FFA抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗FFA抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的FFA呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板（Assay plate）：一块（96孔）。
2.标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。
3.样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4.生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液（HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
同时检测小鼠血液和肝脏组织中脂肪酸含量的气相色谱方法[发明专利]
![同时检测小鼠血液和肝脏组织中脂肪酸含量的气相色谱方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/916d22aa336c1eb91b375d02.png)
每日兵器：妖刀是否真实存在？日本史上最著名武士刀盘点妖刀一词的由来：妖刀一词起源于日本著名典故“村正妖刀”。
村正作为刀工的姓名正式登场是在室町中期，直到江户时期才有了“邪剑”、“妖刀”的称号。
村正之所以被称为“妖刀”，是由于德川家康禁刀所致。
首先，德川家康的祖父松平清康在与织田家作战的时候被自己的家臣用千子村正一刀从右肩一直劈到左腹，肚破肠流，死状极惨。
接着，德川家康的父亲松平宏忠被近臣用刀斩伤了大腿，用的也是村正。
后来，德川家康的嫡男信康被织田信长疑心和武田家勾通而切腹自杀，用的又是村正！再后来，关原合战中轮到德川家康自己被村正的枪斩伤了手指。
所以家康对村正极其痛恨，斥之为“不吉”的象征，下令废止村正，不许使用，持刀者都被处极刑。
德川家康禁刀后，妖刀的说法就泛化了，几乎所有村正都称为妖刀。
但是当时有不少武士感叹于村正的锋利，不忍心将自己的爱刀损毁，就将势州村正的刀铭改成正宗或者正宏，也或将村正的名字消去，继续佩带使用。
这也是现在经常看到一些正宗的作品带有村正特征的原因。
幕府对村正的反应也使妖刀在民众中有了广泛而且离奇的传言，与德川家根本没有关系的村正怪谈也越来越多，以村正为恶源的事件在江户时代有很多的书籍记录。
德川幕府末期，“妖刀村正”在倒幕派人士中人气极高，不少长州倒幕派人士都把自己的配刀刻上村正的刀铭，以示坚决倒幕，也有取个吉利之意，希望自己亲手斩了幕府将军。
今天我们就来看看日本最著名的六大名刀吧！【村正妖刀】村正妖刀，是镰仓末期名匠，冈崎五郎入道正宗的弟子村正所作。
镰仓末期名刀匠，冈崎五郎入道正宗之弟子村正所作之刀，相传村正心术不正，又因正宗不传他炼刀的水温控制秘传而怀恨在心，就私下盗取此秘传来实作。
被正宗发现后，一刀砍断了他的手腕，村正破门之后，便以打败正宗所铸之刀为目标，以此邪恶之心入刀，自此村正成为不祥的代名词。
另外村正在日本进入战国时代的动荡时期，对于日本刀的需求很大，村正只生产最优秀的、可用于实战的刀。
小鼠血脂检测原理
小鼠血脂检测原理小鼠血脂检测是指对小鼠体内的血液中的脂质类物质进行定量分析和检测的过程。
血脂是指在动物体内的血液中存在的各种脂质类物质，包括胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）等。
血脂的水平与许多疾病的发生和发展密切相关，如心血管疾病、脂肪肝等。
因此，血脂检测在研究小鼠模型的相关疾病过程以及药物治疗的研究中具有重要意义。
小鼠血脂检测分为定性检测和定量检测两种方法。
定性检测主要通过观察小鼠的外观特征，如皮肤黄染等，来初步判断小鼠是否存在异常血脂水平。
但这种方法不够准确和全面，无法提供具体的数值数据。
因此，定量检测是进行小鼠血脂分析的主要方法。
小鼠血脂的定量检测常采用生化学方法，包括比色法、高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱法（GC）等。
以下以比色法为例来介绍小鼠血脂检测的原理。
比色法是通过分析小鼠血液中的其中一种物质与特定试剂之间发生反应，并根据不同反应产物的吸光度变化来判断样品中物质的含量。
对于小鼠血液中的不同脂类物质，比色法可以选择合适的试剂进行反应，从而定量测定不同的血脂成分。
以胆固醇的检测为例，比色法常采用用硫酸草酸与胆固醇在酸性条件下发生化学反应生成物质，同时产生一种具有明显吸光度的紫色化合物，其吸光度与胆固醇的浓度成正比。
通过光度计测定紫色化合物的吸光度，就可以推算出样品中胆固醇的浓度。
比色法的优点是操作简单、成本低，适用于大批量样品的快速分析。
然而，比色法也存在一些问题，如试剂的选择和标准曲线的制备等。
不同的脂质成分需要不同的试剂和操作条件，因此，需要根据实验需求选择合适的方法进行检测。
此外，为了提高测量的准确性和可靠性，可以采用标准物质和质控样品进行校准和质量控制。
标准物质的浓度已经被准确确定，在检测过程中可以与待测样品一起进行比较，以验证检测结果的准确性。
质控样品是事先确定好胆固醇含量的样品，用于反复检测来评估检测方法的精密度和稳定性。
综上所述，小鼠血脂检测是通过定量测定小鼠血液中脂质类物质的含量，利用比色法、HPLC、GC等生化分析方法来进行检测。
ELISA 法检测动物血液、尿液及脏器中药物残留量
ELISA 法检测动物血液、尿液及脏器中药物残留量作者：丁丹方友平王有祥等来源：《养殖与饲料》 2014年第3期丁丹1 方友平2 王有祥2 杨勇敏2 徐丹华11.湖北省十堰市动物产品质量监督检验测试中心，湖北十堰442000；2.湖北省十堰市动物卫生监督所，湖北十堰442000摘要为了探寻较为方便、有效的药物残留测定方法，十堰市动物卫生监督所和十堰市动物产品质量监督检验测试中心进行了利用动物血液来检测克伦特罗含量的技术尝试，分别采集动物血液、脏器和尿液进行克伦特罗含量检测，发现不同部位样品的克伦特罗含量有差异性、相关性和规律性。
关键词ELISA 法；血液；尿液；肝脏；药物残留酶联免疫法（ELISA）基本原理是：把受检标本（测定其中的抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应，结合在固相载体上的酶量与标本中受体物质的量有一定的比例，加入酶反应的底物后，底物被酶催化水解或发生氧化还原反应而成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。
ELISA 法具有灵敏性高等特点，广泛应用于动物体内药物残留测定。
然而，人们往往将动物尿液和脏器作为样品进行检测，但脏器只能屠宰后才可进行检测，尿液采集也因条件限制费工费时。
能否利用动物血液来检测克伦特罗（俗称“瘦肉精”）含量，十堰市动物卫生监督所和十堰市动物产品质量监督检验测试中心对此进行了技术尝试。
1 材料与方法1.1 试验仪器及试剂Sunrise酶标仪（滤光片波长为450 nm/630 nm）、离心机（3 000～4 000 r/min）、微量移液器（10～300 μL，单道、多道）。
酶联免疫试剂盒Ⅲ、Ⅳ型（由北京维德维康生物技术公司生产）：克伦特罗酶标板、标准品工作液（浓度分别为0.0、0.1、0.3、0.9、2.7、8.1μg/L）、高浓度（100 μg/L）标准品、克伦特罗酶标记物浓缩液及稀释液、洗涤液、底物A液及B液、终止液、组织提取液等。
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断。.doc
本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断。
小鼠新生甲状腺素(NN-T4)ELISA试剂盒使用说明书【小鼠新生甲状腺素(NN-T4)ELISA试剂盒试剂盒名称】小鼠新生甲状腺素(NN-T4)ELISA试剂盒【小鼠新生甲状腺素(NN-T4)ELISA试剂盒试剂盒用途】定量检测小鼠血清、血浆及相关液体样本中新生甲状腺素(NN-T4)的含量。
【小鼠新生甲状腺素(NN-T4)ELISA试剂盒检测原理】本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。
将标准品、待测样本加入到预先包被新生甲状腺素(NN-T4)透明酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分，再加入酶标工作液，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分。
依次加入底物A、B，底物（TMB）在辣根过氧化物酶（HRP）催化下转化为蓝色产物，在酸的作用下变成黄色，颜色的深浅与样品中新生甲状腺素(NN-T4)浓度呈正相关，450nm波长下测定OD值，根据标准品和样品的OD值，计算样本中新生甲状腺素(NN-T4)含量。
备注：标准品用标准品稀释液依次稀释为：200、100、50、25、12.5、6.25ng/ml【小鼠新生甲状腺素(NN-T4)ELISA试剂盒需要而未提供的试剂和器材】1、37℃恒温箱2、标准规格酶标仪3、精密移液器及一次性吸头4、蒸馏水5、一次性试管6、吸水纸【小鼠新生甲状腺素(NN-T4)ELISA试剂盒操作步骤】1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡30分钟。
2、配液：用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。
3、加标准品和待测样本：取足够数量的酶标包被板，固定于框架上，分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔，记录各孔位置，在标准品孔中加入标准品50μL；待测样本孔中先加入待测样本10μL，再加样本稀释液40μL（即样本稀释5倍）；空白对照孔不加。
4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。
5、洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板4次（也可用洗板机按说明书操作洗板）。
HPLC—MS同时测定小鼠血浆中青蒿素、青蒿乙素、青蒿酸和东莨菪内酯的含量
HPLC—MS同时测定小鼠血浆中青蒿素、青蒿乙素、青蒿酸和东莨菪内酯的含量青蒿素是一种常用的抗疟药，但青蒿中其他组分的药效作用很少被考察。
研究发现，当青蒿中的青蒿乙素、青蒿酸、东莨菪内酯3种组分与青蒿素按照质量比为1∶1∶1∶1的比例在小鼠体内考察药效时，与等剂量青蒿素单用组相比可以起到显著的抗疟增效作用。
建立血浆中同时检测青蒿素、青蒿乙素、青蒿酸和东莨菪内酯4种组分含量的HPLC-MS方法，有助于这种增效现象在药动学层面研究的进一步开展。
采用Agilent公司1200-6130液质联用系统，电喷雾电离源，正离子和负离子检测方式，SIM模式；色谱分离采用Agilent Zorbax SB-C18色谱柱（2.1 mm×150 mm，5 μm），流动相乙腈-0.5%乙酸水溶液（60∶40），流速0.3 mL·min-1 ，柱温为40.0 ℃，进样量5 μL。
结果显示，4组分血浆浓度在5～3 000 μg·L-1 呈现良好线性关系，方法专属性、准确度、精密度良好，无基质效应。
该方法适用于小鼠血浆中青蒿素、青蒿乙素、青蒿酸和东莨菪内酯的含量测定，可用于开展4组分小鼠体内药物动力学研究。
标签：青蒿素；青蒿乙素；青蒿酸；东莨菪内酯；液质联用世界卫生组织为了延缓疟原虫青蒿素类药物抗药性的产生，自2001年开始推荐使用基于青蒿素类抗疟药的联合治疗方案（artemisinin-based combination therapies，ACTs）。
ACTs目前在全球疟疾治疗中发挥着重要作用[1-2]。
为了更好利用我国的青蒿资源以及发展新型天然ACTs组合药物，我国学者开展了青蒿多组分配伍抗疟研究。
纪晓光等发现以青蒿素、青蒿酸、青蒿乙素和东莨菪内酯1∶1∶1∶1的比例配伍后，青蒿素用量仅为原剂量的1/4，抗疟药效与青蒿素单用组相当[3-4]。
为了进一步明确4组分配伍增效的机制，需要进一步开展药物相互作用研究。
LMK504Mu 96T 钙卫蛋白(CALPRO)检测试剂盒 (磁性微球Luminex单因子夹心法)
LMK504Mu 96T钙卫蛋白(CALPRO)检测试剂盒(磁性微球Luminex单因子夹心法)适用生物：小鼠使用说明书仅供体外研究使用，不用于临床诊断!第一版[ 预期应用 ]本试剂盒运用双抗体夹心法定量测定小鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清或其它相关生物液体中CALPRO含量。
[ 试剂盒内容 ][ 需自备的设备及试剂 ]1、Luminex MAGPIX®，Luminex 100™，Luminex200™，或Bio-Rad®,Bio-Plex®分析仪（建议仪器使用前提前预热,并做好自检和校准）2、单道或多道微量移液器及吸头3、稀释样品的EP管.4、蒸馏水或去离子水5、磁力架6、盛放洗液的容器7、0.01mol/L（或1×）磷酸缓冲盐 (PBS)，pH=7.0-7.28、旋涡振荡器9、酶标板振荡器[ 试剂盒的储存及有效期 ]1、 未开封的试剂盒：所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。
请注意，收到试剂盒后请尽快将标准品、检测溶液A 、检测溶液B以及96孔板保存于-20°C，其余试剂请置于4°C保存备用。
2、 使用后的试剂盒：剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存。
注意：试剂盒内酶标条可拆卸，按实验需求可分多次使用；使用后的剩余试剂盒建议在首次实验后1个月内使用完毕。
产品过期时间以盒子上的标签为准，保质期内所有组分都确保是稳定的。
[ 标本的采集与保存 ]血清：将收集于血清分离管中的全血标本在室温放置2小时或4°C过夜，然后1,000×g离心20分钟，取上清即可，将上清置于-20°C或-80°C保存，避免反复冻融。
血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8°C 1,000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20°C或-80°C保存，避免反复冻融。
HPLC—MS同时测定小鼠血浆中青蒿素、青蒿乙素、青蒿酸和东莨菪内酯的含量
HPLC—MS同时测定小鼠血浆中青蒿素、青蒿乙素、青蒿酸和东莨菪内酯的含量青蒿素是一种常用的抗疟药，但青蒿中其他组分的药效作用很少被考察。
研究发现，当青蒿中的青蒿乙素、青蒿酸、东莨菪内酯3种组分与青蒿素按照质量比为1∶1∶1∶1的比例在小鼠体内考察药效时，与等剂量青蒿素单用组相比可以起到显著的抗疟增效作用。
建立血浆中同时检测青蒿素、青蒿乙素、青蒿酸和东莨菪内酯4种组分含量的HPLC-MS方法，有助于这种增效现象在药动学层面研究的进一步开展。
采用Agilent公司1200-6130液质联用系统，电喷雾电离源，正离子和负离子检测方式，SIM模式；色谱分离采用Agilent Zorbax SB-C18色谱柱（2.1 mm×150 mm，5 μm），流动相乙腈-0.5%乙酸水溶液（60∶40），流速0.3 mL·min-1 ，柱温为40.0 ℃，进样量5 μL。
结果显示，4组分血浆浓度在5～3 000 μg·L-1 呈现良好线性关系，方法专属性、准确度、精密度良好，无基质效应。
该方法适用于小鼠血浆中青蒿素、青蒿乙素、青蒿酸和东莨菪内酯的含量测定，可用于开展4组分小鼠体内药物动力学研究。
标签：青蒿素；青蒿乙素；青蒿酸；东莨菪内酯；液质联用世界卫生组织为了延缓疟原虫青蒿素类药物抗药性的产生，自2001年开始推荐使用基于青蒿素类抗疟药的联合治疗方案（artemisinin-based combination therapies，ACTs）。
ACTs目前在全球疟疾治疗中发挥着重要作用[1-2]。
为了更好利用我国的青蒿资源以及发展新型天然ACTs组合药物，我国学者开展了青蒿多组分配伍抗疟研究。
纪晓光等发现以青蒿素、青蒿酸、青蒿乙素和东莨菪内酯1∶1∶1∶1的比例配伍后，青蒿素用量仅为原剂量的1/4，抗疟药效与青蒿素单用组相当[3-4]。
为了进一步明确4组分配伍增效的机制，需要进一步开展药物相互作用研究。
39 882-885 食品安全与检测 4 简易顶空气相法测定小鼠血液中的乙醇含量
99.9%）至 100 mL 容量瓶中配制成 0.12 g/mL 的乙醇 试验中，分别测定了 60、65、70、75 ℃条件下乙醇
储备液，将其稀释得到浓度为 80 mg/mL、40 mg/mL、 和叔丁醇的响应，结果见图 1。
20 mg/mL、10 mg/mL、5 mg/mL、1 mg/mL、0.50 mg/mL
英毛细管柱（PEG-20M，30 m×0.20 mm×0.25 μm）， 氢火焰离子化检测器，柱温 70 ℃，气化室 150 ℃，检
图 1 加热温度对乙醇和叔丁醇响应的影响 Fig.1 Effect of extraction temperature on the responses of
测室 180 ℃，载气(N2)流速 40 mL/min，燃气(H2)和空 气流速分别为 35 mL/min，350 mL/min[14]，进样量 1
Key words: gas chromatography; blood alcohol concentration; headspace gas chromatographic; internal standard
血液 中乙醇浓 度测定广泛 用于药理 学和法医 学 中，尤其是在酒驾引起的交通事故频发的今天，对于 血液中乙醇浓度的测定显得尤为重要，目前测定乙醇 的方法有酶法[1]、比重法[2]、电化学法[3]等，而应用比 较广泛的测定方法还是气相色谱法[4~6]，利用气相色谱
524088, China）
Abstract: The purpose of this study was to establish an ultra-sensitive and handy headspace gas chromatographic for the determination of alcohol in rat blood by gas chromatograph. The blood samples containing alcohol and tert-butanol (internal standard, IS) were heated in a water bath. The headspace vapor was drawn into a syringe and injected into a GC port and the experimental conditions of headspace and GC were optimized by taking the peak areas as index. The results showed that the samples heated at 70 ℃for 15 min had a steady peak area and good vapor-liquid equilibrium. Under the optimized conditions, the target peak and the internal standard peak were clearly separated. In the range of 0.05~12 mg/mL, the linear relation between peak area and concentration of the alcohol was found. RSD was 1.63% by testing the standard solution for seven times. The detection limit was 0.005 mg/mL and the reclaim ratio was 93.4%~103.2% (RSD≤3.41%). In conclusion, this method was simple, flexible and effective to detect the alcohol concentration in rats’blood and can be used widely.
本试剂盒用于定量检测小鼠血清或血浆中的IL-10的浓度
3. 消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。
4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。
5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6. 在储存和温育时避免强光直接照射。
7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8. 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。
任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
9. 不能使用过期产品。
10. 如果可能传播疾病，所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。
贮藏于2-8°C。
在此检测中，可使用血清、血浆样品。
1. 浓缩洗涤液(50X)用双蒸水稀释成1X（至350ml）。
2. 配制1x HRP：HRP用酶联物稀释液稀释60倍，即1份浓缩HRP加入59份HRP稀释液。
即50ul HRP 加入2950ul HRP 稀释液。
3. 标本应稀释50000倍，即10ul 血清/血浆加入5ml 生理盐水中，混匀（1:500）；然后将混匀液10ul 加入1000ul 样品稀释液中（1: 100），混匀；这样总共稀释50000倍。
标准品已经稀释，不用再稀释。
试剂盒应平衡至室温（20-25°C ）再试验。
取出所需反应板。
1. 加入100ul标准品(Standards)、100ul已稀释标本于相应反应板孔中。
2. 轻轻混匀30秒，20-25°C温育20分钟。
3. 洗板：甩尽板内液体，用洗涤液洗涤反应板（每孔内加入350ul洗涤液），并去除水滴（在厚叠吸水纸上拍干）；反复洗涤3次。
4. 每孔加入100ul Biotin anti rat IL-10。
轻轻混匀30秒，20-25°C温育20分钟5. 洗板：甩尽板内液体，用洗涤液洗涤反应板（每孔内加入350ul洗涤液），并去除水滴（在厚叠吸水纸上拍干）；反复洗涤3次。
6. 每孔加入100ul 1x HRP。
轻轻混匀30秒，20-25°C温育10分钟7. 洗板：甩尽板内液体，用洗涤液洗涤反应板（每孔内加入350ul洗涤液），并去除水滴（在厚叠吸水纸上拍干）；反复洗涤3次。
小鼠血清测定实验报告
一、实验目的1. 了解小鼠血清的采集方法；2. 掌握小鼠血清中抗体含量的测定方法；3. 分析不同处理条件下小鼠血清中抗体含量的变化。
二、实验原理小鼠血清中含有多种免疫球蛋白，如IgG、IgA、IgM等，这些免疫球蛋白在体液免疫过程中发挥重要作用。
本实验通过测定小鼠血清中抗体含量，评估小鼠免疫系统的功能。
三、实验材料1. 实验动物：健康小鼠若干；2. 试剂：绵羊红细胞（SRBC）、HRP标记的抗小鼠IgG抗体、底物液、终止液等；3. 仪器：离心机、酶标仪、移液器、培养箱等。
四、实验方法1. 实验分组：将实验小鼠随机分为三组，分别为A组、B组和C组。
A组为对照组，B组为实验组1，C组为实验组2。
2. 处理方法：A组小鼠正常饲养；B组小鼠给予低剂量制剂；C组小鼠给予高剂量制剂。
3. 采集血清：实验结束后，采集各组小鼠血清。
4. 抗体含量测定：（1）将绵羊红细胞与HRP标记的抗小鼠IgG抗体按一定比例混合；（2）将混合液加入待测血清，混匀；（3）置于室温下孵育一段时间；（4）加入底物液，显色；（5）用酶标仪测定吸光度值。
五、实验结果1. A组小鼠血清抗体含量为X；2. B组小鼠血清抗体含量为Y；3. C组小鼠血清抗体含量为Z。
六、结果分析1. 与A组相比，B组和C组小鼠血清抗体含量均有所提高，说明制剂对小鼠免疫机能具有一定的调节作用；2. 与B组相比，C组小鼠血清抗体含量更高，说明高剂量制剂对小鼠免疫机能的调节作用更强。
七、结论1. 本实验成功测定了小鼠血清中抗体含量；2. 制剂对小鼠免疫机能具有一定的调节作用，高剂量制剂作用更强。
八、实验注意事项1. 实验过程中，注意无菌操作，避免污染；2. 严格按照实验步骤进行操作，确保实验结果的准确性；3. 实验数据应进行统计分析，以便得出可靠的结论。
九、实验拓展1. 研究不同处理条件下小鼠血清中其他免疫球蛋白含量的变化；2. 探讨制剂对小鼠免疫细胞的影响；3. 进一步研究制剂的作用机制。
达科为 Mouse TGF-β1 Precoated ELISA Kit 说明书
Mouse TGF-β1Precoated ELISA KitCatalog#：1217103产品描述：达优®Mouse TGF-β1Precoated ELISA Kit 是通过酶联免疫吸附技术体外定量检测小鼠血清、血浆、缓冲液或细胞培养液中的TGF-β1。
本试剂盒专用于科研，而非用于诊断。
使用前请仔细阅读说明书并检查试剂盒组分，若有任何疑问请与深圳市达科为生物工程有限公司联系。
E-mail ：检测范围：1000-15.6pg/mL 灵敏度：5pg/mL重复性：板内变异系数<10%，板间变异系数均<15％。
试剂盒提供的试剂：试剂规格×数量配制Cytokine Standard 10瓶干粉状，按瓶上说明稀释Biotinylated Antibody 50µL×10支1∶100用1×Dilution Buffer R 工作液稀释Streptavidin-HRP 500µL×1支1∶100用1×Dilution Buffer R 工作液稀释Dilution Buffer R （10×）18mL×2瓶1∶9用1×PBS 稀释Washing Buffer （50×）75mL×1瓶1∶50用蒸馏水稀释TMB 50mL×1瓶即用型Stop Solution 50mL×1瓶即用型1N HCL 4mL×5瓶即用型1.2N NaOH4mL×5瓶即用型Precoated ELISA Plate5块即用型封板膜20张即用型说明书1份自备物品：1．酶标仪（建议参考仪器使用说明提前预热）2．微量加液器及吸头：P10，P50，P100，P200，P10003．蒸馏水或去离子水，全新滤纸4．旋涡振荡器和磁力搅拌器5．37℃温箱注意事项：1.试剂应按瓶上标签说明储存，使用前室温平衡20-30分钟。
小鼠肌酐酶联免疫分析解读
小鼠肌酐酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用产品编号：CSB-E12745m检测范围：3.12 μmol/L - 200 μmol/L最低检测限：0.78 μmol/L特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的小鼠肌酐，且与其他相关蛋白无交叉反应。
有效期：6个月预期应用：ELISA法定量测定小鼠血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中肌酐含量。
说明1．试剂盒保存：-20℃（较长时间不用时）；2-8℃（频繁使用时）。
2．浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
3．中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。
4．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。
实验原理用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗肌酐抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗肌酐抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的肌酐呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板(Assay plate )：一块（96孔）。
2.标准品（Standard）：2瓶(冻干品)。
3.样品稀释液(Sample Diluent)：1×20ml/瓶。
4.生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液（HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6.生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）7.辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）8.底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
GC法测定砷(Ⅲ)在小鼠血浆和血细胞中的浓度及药动学研究
GC法测定砷（Ⅲ）在小鼠血浆和血细胞中的浓度及药动学研究李士敏1，朱亚尔1，李俊2（1.浙江大学分析测试中心，杭州，310029；2. 浙江省台州市药品检验所，台州，318000）摘要: 目的建立血浆和血细胞中砷（Ⅲ）的气相色谱测定方法，考察小鼠静脉注射砷（Ⅲ）溶液后血浆和血细胞中的药代动力学情况。
方法血浆样品经6%高氯酸去蛋白，二巯基丙醇（BAL）衍生化后，苯萃取，浓缩后用苯溶解后进样，血细胞样品则直接衍生化后经苯萃取、浓缩、再溶解后进行GC分析。
采用该方法测定给小鼠静脉注射砷（Ⅲ）后血浆和血细胞中砷（Ⅲ）浓度，计算主要的药动学参数。
结果血浆和血细胞中砷（Ⅲ）分别在0.0375～2.40μg·m L-1和0.03125～1.00μg·m L-1的范围内线性关系良好，两者的T1/2α分别是7.178min则分别为72.334 mg/L*min和和2.531min，T1/2β分别为108.731min和146.236min，AUC0-∞112.239 mg/L*min。
结论本实验建立的小鼠血样中砷的气相色谱测定法设备简单方便、方法灵敏可靠，砷在小鼠血浆和血细胞中的消除很快，没有蓄积的倾向，而血细胞中砷的浓度要高于血浆中的浓度。
关键词:砷（Ⅲ）；气相色谱法；血浆；血细胞由于砷对人体健康带来的危害从而引起了越来越多的人的关注。
有关砷在人体内的代谢变化以及砷的致癌机制，便成了各国学者关注的热点。
砷虽然是一种毒物，同时，在临床上也有应用，有报道采用亚砷酸注射液治疗急性早幼粒细胞白血病和慢性粒细胞白血病 [1,2，3]，具有良好的疗效，因此研究砷化合物在体内的分布具有很重要的意义。
目前对生物样本中砷的测定有采用原子荧光或者GC测定 [4]，但血浆处理方式都是采用氧化消解，测定的是血浆中总砷的含量[1，5]，本文拟采用气相色谱方法对血浆和血细胞中砷(Ⅲ)的浓度进行测定，并对其药动学进行研究。
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小鼠胰岛素（INS）酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!
预期应用
ELISA法定量测定小鼠血清、血浆或其它相关生物液体中INS含量。
实验原理
用纯化的INS抗体包被微孔板，制成固相载体，往微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的INS抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物（TMB）显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的INS 呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制
1、酶标板：一块（96孔）
2、标准品（冻干品）：2瓶，请临用前15分钟内配制。
每瓶以样品稀释液稀释至1ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为160mIU/L，将其稀释为40mIU/L后，再做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成40 mIU/L，20mIU/L，10mIU/L，5mIU/L，2.5mIU/L，1.25mIU/L，0.625mIU/L，样品稀释液直接作为空白孔0mIU/L。
如配制20mIU/L标准品：取0.5ml（不要少于0.5ml）40mIU/L 的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、样品稀释液：1×20ml。
4、检测稀释液A：1×10ml。
5、检测稀释液B：1×10ml。
6、检测溶液A：1×120/瓶（1:100）。
临用前以检测稀释液A1:100稀释（如：10检测溶液A/990检测稀释液A），充分混匀，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（100/孔），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。
7、检测溶液B：1×120/瓶（1:100）。
临用前以检测稀释液B1:100稀释。
稀释方法同检测溶液A。
8、底物溶液：1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液：1×10ml/瓶（2mol/L H2SO4）。
11、覆膜：5张
12、使用说明书：1份
自备物品
1、酶标仪（建议仪器使用前提前预热）
2、微量加液器及吸头，EP管
3、蒸馏水或去离子水，滤纸
标本的采集及保存
1、血清：全血标本请于室温放置2小时或4过夜后于1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20或-80保存，但应避免反复冻融。
2、血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于1000g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20或-80保存，但应避免反复冻融。
3、其它生物标本：请1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20或-80保
存，但应避免反复冻融。
注：以上标本均应密封保存，4保存应小于1周，-20不应超过1个月，-80不应超过2个月；标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。
操作步骤
实验开始前，各试剂均应平衡至室温，试剂不能直接在37溶解；试剂或样品配制时，均需
充分混匀，混匀时尽量避免起泡。
实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。
1、加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。
空白孔加样品稀释液100，余孔分别加标准品或待测样品100，注意不要有气泡，加样时将样品加于酶标板底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37温育2小时。
为保证实验结果有效
性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2、弃去液体，甩干，不用洗涤。
每孔加检测溶液A工作液100（临用前配制），酶标板加上覆膜，37温育1小时。
3、弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。
4、每孔加检测溶液B工作液（临用前配制）100，加上覆膜，37温育1小时。
5、弃去孔内液体，甩干，洗板5次，方法同步骤3。
6、每孔加底物溶液90，酶标板加上覆膜37避光显色（反应时间控制在15-30分钟，当标准孔的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔梯度不明显时，即可终止）。
7、每孔加终止溶液50，终止反应，此时蓝色立转黄色。
终止液的加入顺序应尽量与底物
液的加入顺序相同。
8、立即用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度（OD值）。
注：
1、试剂准备：所有试剂在使用前应平衡至室温，使用后请立即按照说明书要求保存试剂。
实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。
2、加样：加样或加试剂时，第一个孔与最后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的“预温育”时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。
一次加样时间（包括标准品及所有样品）最好控制在10分钟内。
推荐设置复孔进行实验。
3、温育：为防止样品蒸发，实验时将加上盖或覆膜的酶标板置于湿盒内，以避免液体蒸发；
洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态；同时应严格遵守给定的温育时间和温度。
4、洗涤：洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上拍干，勿将滤纸直接放入反应孔中吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响最后的酶标仪读数。
5、试剂配制：Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。
标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配制使用，并使用相应的稀释液配制，不能混淆。
请精确配制标准品及工作液，尽量不要微量配制（如吸取检测溶液A时，一次不要小于10），以避免由于不准确稀释而造成浓度误差；请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液。
6、反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化（比如，每隔10分钟），如颜色较深，请提前加入终止液终止反应，避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
7、底物：底物请避光保存，在储存和温育时避免强光直接照射。
洗板方法
1、手工洗板方法：将推荐的洗涤缓冲液至少0.4ml注入孔内，浸泡1-2分钟，吸去（不可触及板壁）或甩掉酶标板内的液体，在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；根据需要，重复此过程数次。
2、自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
特异性
本试剂盒可同时检测重组或天然的小鼠INS，且与其它相关蛋白无交叉反应。
计算
各标准品及样本OD值扣除空白孔OD值后作图（七点图），如设置复孔，则应取其平均值计算。
以标准品的浓度为纵坐标（对数坐标），OD值为横坐标（对数坐标），在对数坐标纸上绘出标准曲线。
推荐使用专业制作曲线软件进行分析，如curve expert1.3，根据样品
OD值，由标准曲线查出相应的浓度，乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
检测范围：0.625mIU/L-40mIU/L，绘制标准曲线请取用以下浓度值：40mIU/L，20mIU/L，10mIU/L，5mIU/L，2.5mIU/L，1.25mIU/L，0.625mIU/L。
最低检测限：0.156mIU/L
说明
1.在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。
所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染，试剂避免受到微生物的污染，因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。
2.小心吸取试剂并严格遵守给定的孵育时间和温度。
请注意在吸取标本/标准品，酶结合物或底物时，第一个孔与最后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的“预孵育”时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。
而且，洗涤不充分将影响试验结果。
3.试剂盒保存：部分试剂保存于-20℃，部分试剂保存于2-8℃，具体以标签上的标示为准。
4.浓洗涤液会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
5.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。
6.中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。
7.所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。
8.有效期：6个月。