蛋白质糖类脂质的实验鉴定
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Cu2+形成络合物的碱性条件,若Cu2+过量,会与NaOH反
应,生成蓝色的Cu(OH)2,干扰现象的观察。
[答案] (1)斐林试剂 砖红色 葡萄糖
(2)过量的双缩腺试剂 B 会于试剂 A 反应,使溶液呈蓝色,
而掩盖生成的紫色
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利用某些化学试剂能够使生物组织中有关有机化合
物产生特定颜色反应的原理和方法,还可以解决以下问
Cu2+还原成Cu+,从
蛋白质分子中含有与双缩
而生成砖红色的Cu2O 脲结构相似的肽键
沉淀
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斐林试剂
双缩脲试剂
甲液:质量浓度为
A液:质量浓度为0.1g/mL的
试剂 0.1g/mL的NaOH溶液; NaOH溶液;
浓度 乙液:质量浓度为
B液:质量浓度为0.01g/mL
0.05g/mL的CuSO4溶液 的CuSO4溶液 使用 甲液、乙液混合均匀后, 先加A液造成碱性
缩脲试剂发生紫色颜色反应的是 ( )
①尿液 ②胃液 ③汗液 ④唾液
A.①③
B.①④
C.②③
D.②④
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解析:双缩脲试剂是用于鉴定蛋白质的试剂,可与蛋 白质发生紫色反应。胃液中含有胃蛋白酶,唾液中含 有唾液淀粉酶,它们都属于蛋白质。 答案:D
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3.(2007·江苏高考)若以鸡蛋蛋白液为材料进行蛋白质鉴 定实验,发现蛋白液与双缩脲试剂发生反应后会粘固 在试管壁上。下列关于这一现象形成原因的描述中正 确的是 ( ) A.鸡蛋蛋白液稀释不够,搅拌不匀 B.只添加了双缩脲试剂A,未添加双缩脲试剂B C.鸡蛋蛋白液不是合适的实验材料 D.蛋白液与双缩脲试剂的反应时间不够长
D.氨基
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解析:在碱性溶液中,双缩脲(H2NOC-NH-CONH2)能与 Cu2+作用,形成紫色的络合物。由于蛋白质分子中含有 很多与双缩脲结构相似的肽键,因此,蛋白质可与双缩 脲试剂发生颜色反应,从而用来鉴定蛋白质的存在。 答案:A
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2.(2007·广东理基)下列健康人的4种液体样本中,能与双
还原糖、脂肪和蛋白 质的鉴定实验
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来自百度文库
实验原理
生物组织中某些有机化合物能与某些化学试剂产生
特定的颜色反应。
还原糖+斐林试剂 50~65℃水浴加热
(1)糖类
约2 min
淀粉+碘→蓝色
砖红色沉淀
(2)脂肪+苏丹Ⅲ染液→橘黄色
脂肪+苏丹Ⅳ染液→红色
(3)蛋白质+双缩脲试剂→紫色
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实验流程 (1)还原糖的检测和观察
沉淀,因此,可用该试剂检验糖尿病人尿液 中
的
含量。
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(2)鉴定黄豆组织中存在蛋白质时,向组织液中加入双 缩脲试剂A摇匀,再向样液中加入双缩脲试剂B摇匀。 其中双缩脲试剂B的量只有3~4滴,而不能过量,为 什么?
。
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[解析] 还原糖的鉴定试剂常用斐林剂试,也可用班氏试
剂,原理是相同的:还原糖的—CHO将Cu(OH)2的Cu2+还原 为Cu+。在蛋白质鉴定中,NaOH的作用是制造蛋白质与
结论:花生种子中有脂编辑肪ppt存在
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脂肪的鉴定中,实验用的花生种子需提前浸泡
3~4 h, 浸泡时间太短,不易切片;浸泡时间太
长,则组织太软,切下的薄片不易成形。
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(3)蛋白质的检测和观察 选材与制备:鲜肝提取液或黄豆浆滤液
结论:组织样液中存在蛋白质
在蛋白质的鉴定实验中,如果用蛋清稀释液作为实
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习题
基础题 1.(1)√
2、连线题:
2)X 。
苏丹Ⅲ染液 斐林试剂 双缩脲试剂 碘液
豆浆 马铃薯汁 葡萄汁 花生子叶
砖红色沉淀 橘黄色 蓝色 紫色
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典例印证
(2010·茂名质检)根据相关实验,回答下列问题:
(1)鉴定成熟苹果果肉中存在还原性糖,所用的试剂
是
,该试剂与细胞内还原性糖发生作用,形成
实验的选材上应注意以下两点: ①材料本身应无色,以免对结果产生干扰; ②材料应富含相关物质,使现象更显著。
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(2)斐林试剂与双缩脲试剂的比较
鉴定 成分
斐林试剂 还原糖
双缩脲试剂 蛋白质
鉴定 原理
还原糖中的醛基(—
CHO)在加热条件下 双缩脲(H2NOC—NH—
能将Cu(OH)2中的
CONH2)在碱性溶液中能与 Cu2+结合生成紫色络合物,
方法 再加入样液
环境,再加B液
使用 加热(水浴50~65℃)
条件
不加热,摇匀即可
实验
浅蓝色→棕色→砖红色
紫色
现象
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斐林试剂
双缩脲试剂
甲液、乙液混合均匀后,先加A液造成碱性
使用方法
再加入样液
环境,再加B液
使用条件 加热(水浴50~65℃) 不加热,摇匀即可
实验现象 浅蓝色→棕色→砖红色
紫色
验材料,一定要稀释到一定程度,否则,与双缩脲试剂
发生反应后会粘在试管的内壁上,使反应不彻底,试
管也不易洗刷干净.
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还原糖、蛋白质的鉴定实验中,在加相应试剂 鉴定之前,要留出一部分组织样液,以便与鉴定后 的样液颜色作对比,增强实验的说服力。
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(1)实验材料的选择 由于本实验是利用颜色反应鉴定不同的物质,因此在
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解析:如果蛋白液稀释不够,与双缩脲试剂发生反应后 会粘固在试管的内壁上,使反应不容易进行彻底,并且 试管也不容易刷洗干净。只加双缩脲试剂A是为了造成 碱性环境,不会发生反应,也不会粘固在试管壁上。鸡 蛋蛋白液中含丰富的蛋白质,是蛋白质鉴定的合适材料。 蛋白液中先后加入双缩脲试剂A、B,摇匀后即可观察现 象,是否粘在试管壁上与反应时间无关。 答案:A
选材:含糖量较高、白色或近于白色的植物组织
结论:组织样液中有可溶编辑性ppt还原糖
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❖ 在鉴定可溶性还原糖的实验中,加热试管中 的溶液时,应该用试管夹夹住试管上部,放入 盛50℃~65℃温水的大烧杯中加热。注意试 管底部不要接触烧杯底部;
❖ 斐林试剂不稳定,应现用现配。
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(2)脂肪的检测和观察 方法一:花生种子匀浆+3滴苏丹Ⅲ染液→橘黄色 方法二: 取材:花生种子(浸泡),将子叶削成薄片
题:
(1)对生物组织进行某种成分的检测。
(2)在医学上进行疾病的诊断,如糖尿病、肾炎。
(3)可以鉴定某些消化液中含有蛋白质。
(4)用于劣质奶粉的鉴定。
(5)不同生物组织中含糖量高低的测定。
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1.(2008·广东理基)双缩脲试剂可以鉴定蛋白质,是由于
蛋白质有 ( )
A.肽键
B.氨基酸
C.羧基