蛋白质糖类脂质的实验鉴定
高中生物必修一课件：2.1 糖类、脂肪、蛋白质的检测
你能举例说出哪些植物 器官的细胞中富含糖类,脂质 和蛋白质吗?如何从这些植物 器官中提取呢?
检测生物组织中的 糖类、脂肪和蛋白质
一、实验原理 二、实验目的要求
三、实验材料用具
四、实验方法步骤 五、注意事项
一、实验原理 某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产
生特定的颜色反应。如：
△
还原糖 + 斐林试剂 → 砖红色沉淀 脂肪 + 苏丹Ⅲ→橘黄色 或 + 苏丹Ⅳ→红色 蛋白质 + 双缩脲试剂→紫色
淀粉 + 碘→蓝色
二、目的要求：
尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质。
三、材料用具：
1.实验材料：苹果汁、花生种子、花生汁、马铃薯 片、豆浆、鲜肝液
2.仪器： 3.试剂：斐林试剂、苏丹Ⅲ、碘液、双缩脲
四、方法步骤：
1．实验材料、仪器和试剂的选择
2．设计记录表格，记录预测结果 ★
3．检测的方法步骤 (1)还原糖的检测和观察; (2)脂肪的检测和观察; (3)蛋白质的检测和观察;
2．设计记录表格，记录预测结果
成分 待测样品
还原糖
*
#
脂肪
Hale Waihona Puke 蛋白质淀粉*处填写预测结果 #处填写实测结果
五、注意事项
（１）、检测还原糖时应水浴50~60度加热 （２）、检测脂肪时，切片要薄，用苏丹Ⅲ 染色时间不宜过长，用显微镜观察。
（３）
斐林试剂是甲乙两液等量混匀后立即使用，即 现配现用。颜色变化：浅兰色 棕色 砖 红色沉淀
生物必修一 实验：检测生物组织中的糖类_脂肪和蛋白质
不加热处理 紫色反应
1-2滴体积分数为 50%的酒精溶液
观察
低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒， 然后用高倍镜观察
圆形小颗粒呈橘黄色，说明有脂肪存在。 结果及结论：
脂肪的检测结果
1、选材：浸泡1-2天的黄豆种子（或用豆浆）
或用鸡蛋蛋白
2、制样： 黄豆浸泡切片→研磨→过滤→滤液
A液：0.1g/mL NaOH 3、试剂： B液：0.01g/mL CuSO4
实验现象明显（富含检测之物，避免干扰）；
选材的原则 便于处理，易获得； 经济节约；
1、选材：含糖较高、颜色为白色或近于白色的
植物组织，苹果、梨最好。
2、制样： 苹果切块→研磨→过滤→滤液
甲液：0.1g/mL NaOH 3、试剂： 乙液：0.05g/mL CuSO4
4、检测：组织样液（2ml）→斐林试剂
方法二：制作子叶临时切片，显微 观察子叶细胞的着色情况。
特别提醒： 实验用的花生种子需提前浸泡3-4h,浸 泡时间太短，不易切片;浸泡时间太长，则 组织太软，切下的薄片不易成形。
取材： 花生种子(浸泡3～4h），将子叶削成薄片
制片
①取最理想的薄片 ②在薄片上滴苏丹Ⅲ染液（2～3min） ③去浮色（如何去浮色） ④ 制成临时装片
☆思考讨论
你能举例说出哪些植物器官的细胞中富含糖 类,脂质和蛋白质吗? 植物叶肉细胞.果实细胞和种子细胞中 通常含有较多的糖类、脂质和蛋白质
禾谷类果实、种子：淀粉(多糖)
蔗糖(二糖) 甘蔗的茎、甜菜的根： 脂质 花生、芝麻种子：
大豆种子：蛋白质
第二章
组成细胞的分子
检测生物组织中的糖类、 脂肪和蛋白质
4、检测： 组织样液（2ml）→ 双缩脲试剂A （1ml）
(完整word版)生物组织中还原糖脂肪蛋白质的鉴定实验教学体会与反思
生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验教学体会与反思一、教材分析高中生物(必修)中《组成生物体的化合物》主要包括无机化合物的水和无机盐，有机化合物的糖类、脂质、蛋白质和核酸内容。
关于无机化合物的水，着重说明它在细胞中含量最多；水在不同的生物体中和不同的组织、器官中含量不同；水在细胞中以结合水和自由水两种形式存在；水在细胞内的重要作用。
关于无机盐，强调指出它在细胞中虽然含量很少，且大多数无机盐以离子状态存在于细胞中，但是具有多方面的重要作用：无机盐既是细胞内复杂化合物的重要组成成分，又对维持生物体的生命活动有重要作用。
关于糖类，主要说明它由C、H、O 3种化学元素组成，它是构成生物体的重要成分，也是细胞的主要能源物质；糖类大致分为单糖、二糖和多糖等几类(其中的葡萄糖、核糖、脱氧核糖、淀粉、糖元等是重要种类)，以及它们在生物体内的分布和重要作用。
关于脂质，主要说明它由C、H、O 3种元素组成，一般包括脂肪、类脂和固醇等；这几类物质在生物体内的分布和重要作用，并强调指出，磷脂是构成细胞膜和多种细胞器的膜结构的重要组成成分。
关于蛋白质，强调蛋白质在细胞中只比水的含量少，大致占细胞干重的50％以上，它是细胞中各种结构的重要化学成分。
说明蛋白质主要由C、H、O、N 4种化学元素组成；它是一种高分子化合物，相对分子质量很大；基本组成单位是氨基酸；蛋白质的分子结构是由许多氨基酸分子互相连接而成；蛋白质分子的多样性，决定了蛋白质在生物体内有多种重要的功能。
关于核酸，明确指出核酸是遗传信息的载体，它对生物体的遗传、变异和蛋白质的生物合成有极重要的作用。
说明核酸由C、H、O、N、P等化学元素组成，也是一种高分子化合物；核酸的基本组成单位是核苷酸；核酸可以分为脱氧核糖核酸和核糖核酸两大类。
最后指出，任何一种化合物都不能单独地完成某一种生命活动，只有按照一定的方式有机地组织起来，才能表现出细胞和生物体的生命现象。
为了配合学习有机化合物的内容，安排了学生实验《生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定》，主要是根据某些化学试剂，能够分别使生物组织中上述三种有机化合物，产生特定的颜色反应，来鉴定生物组织中有还原糖、脂肪和蛋白质的存在。
糖类脂质蛋白质的鉴定实验.
解析：选D。本题在于考查学生的动手能力， 实验操作是否正确、规范。正确回答这类题 目除了要亲自动手完成实验外，熟记实验过 程的操作程序是解题的关键。脂肪的检测选 用的材料是花生子叶，切片后，染色制片用 显微镜观察。可溶性还原糖和蛋白质的检测 都是将生物材料制成样液，然后检测，不用 显微镜。需要隔水加热的是检测可溶性还原 糖的实验；斐林试剂的甲液和乙液要先混合 再使用，且要现配现用；双缩脲试剂中的A 液和B液不需混合，但也要现配现用。实际 上，该实验中有许多可对比记忆的知识点， 同学们在平时学习中要善于去归纳总结。
• 2．方法步骤： • (1)制备生物组织样液
• (2)实验操作方法和观察 • ①向试管内注入组织样液 2 mL( 或蛋白稀 释液2 mL)
• (3)结论：组织样液加入双缩脲试剂A后，颜色变 化为无色，再加双缩脲试剂B后，颜色的变化是 紫色。这说明组织样液中含有蛋白质。从而鉴 定黄豆组织中或者蛋白稀释液中或新鲜的肝脏 中有蛋白质。 • 注意： 做鉴定蛋白质的实验时，在鉴定之前， 要留出一些黄豆组织样液，以便用来与化学试 剂发生反应后的颜色作对比，增强说服力。 • 若不用豆浆，用蛋白稀释液或新鲜肝脏提取液 做实验材料，应稀释到一定程度，如果稀释不 够，与双缩脲试剂发生反应后会粘固在试管的 内壁上，使反应不容易彻底，并且试管不易刷 干净。
• 在脂肪的鉴定实验中，花生种子浸泡的时间是 ( ) • A．1～2 h B．3～4 h • C．6～7 h D．8～9 h • 答案：B • 解析： 实验前将供实验的花生种子浸泡的目的 是容易切成完整的薄片，浸泡时间短了，不容 易切成片(易碎)；浸泡时间过长，则组织太软， 切下的薄片不易成形。经实验证明适宜的浸泡 时间为3～4 h。
双缩脲试剂 A液 B液
实验2 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质(解析版)
实验2 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质➢核心知识回顾1、还原糖的检测：常用材料：和，还原性糖有；斐林试剂甲液的NaOH，乙液的CuSO4甲、乙溶液先再与还原性糖溶液反应（需加热）生成沉淀。
2、蛋白质的检测：常用材料：和，双缩脲试剂A液的NaOH B液的CuSO4，先加入液再加入液. 成反应。
3、脂肪的检测：常用材料：；苏丹Ⅲ( 色)或苏丹Ⅳ( 色)，酒精的作用是。
4、在甘蔗、甜菜、马铃薯、西瓜、苹果等材料中，适合做还原糖鉴定的是。
5、检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质的实验中，实验需要加热的是。
需要用显微镜观察的是。
6、脂肪鉴定的过程中滴加1～2滴体积分数为的酒精的目的是洗去浮色，原因是苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液易溶于酒精。
7、斐林试剂与双缩脲试剂成分相同，但在使用时，斐林试剂甲液与乙液必须混合使用，而双缩脲试剂则先滴加A液，再滴加B液，请分析原因。
8、区分斐林试剂与双缩脲试剂的“一同三不同”【答案】1、苹果梨子葡萄糖、麦芽糖、果糖0.1g/mL 0.05g/mL 等量混匀水浴砖红色2、稀释鸡蛋清豆浆0.1g/mL 0.05g/mL A B 紫色3、花生子叶橘黄红洗去浮色4、苹果5、还原糖脂肪6、50%7、肽键在碱性环境中与Cu2＋反应产生紫色络合物，先滴加A液的目的是制造碱性环境。
➢核心知识辨析1、检测还原糖时，待测液中先加NaOH溶液，再加CuSO4溶液(2021·湖南卷)( × )辨析：斐林试剂是由甲液(0.1g/mL氢氧化钠溶液)和乙液(0.05 g/mL硫酸铜溶液)组成，用于鉴定还原糖，使用时要将甲液和乙液混合均匀后再加入含样品的试管中，且需水浴加热；双缩脲试剂由A液(0.1 g/mL氢氧化钠溶液)和B液(0.01 g/mL硫酸铜溶液)组成，用于鉴定蛋白质，使用时要先加A液后再加入B液。
2、“检测生物组织中的蛋白质”需同时加入双缩脲试剂A和B(2018·浙江卷)( × )辨析：双缩脲试剂是先滴加A液，再滴加B液，肽键在碱性环境中与Cu2＋反应产生紫色络合物，先滴加A液的目的是制造碱性环境。
还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定
四类有机化合物：糖类、脂质、蛋白质和核酸。
问：怎样检测生物组织中糖类、油脂、蛋白质和核酸? 淀粉 +碘液
蓝色
热水浴 2-3min 红黄色
还原糖（葡萄糖、果糖） +本尼迪
特试剂
油脂 +苏丹Ⅲ染液
橙黄色 紫色
蛋白质 +双缩脲试剂A +双缩脲试剂B
项目 试剂
时,溶液颜色变化过程 为
A.浅蓝色 B.无色 C.砖红色 D.棕色 棕色 浅蓝色 浅蓝色 绿色 砖红色 棕色 棕色 无色
4.鉴定黄豆组织中存在蛋白质时，先向试 管内注入2mL黄豆组织样液；然后向试管 内加入2mL双缩脲试剂A，摇匀；再向试 管内加入3 4滴双缩脲试剂B，摇匀。为 什么只加入3 4滴双缩脲试剂B，而不能 过量？
材料 颜色
鉴定糖类 鉴定脂肪 鉴定蛋白质
本尼迪特试剂 苏丹Ш试剂 双缩脲试剂
苹果、梨 砖红色
花生中叶 大豆、卵白 桔黄色 紫色
1.鉴定可溶性还原糖、脂肪、
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
蛋白质的过程中哪一种需要 水浴加热？ 可溶性还原性糖 2.鉴定蛋白质时，双缩脲试剂A 液和B液应如何使用？。 先A液后B液
3.用斐林试剂鉴定可溶性还原糖
如过量，CuSO4在碱性溶液中生成大 量兰色Cu（OH）2沉淀，遮盖了紫色。
5.鉴定蛋清组织中存在蛋白质时，为何充 分稀释？ 如稀释不够，与双缩脲试剂发生反应后， 会粘固在试管内壁上，使反应不易彻底， 并且试管中也不易冲洗干净。 6.若用物理方法如何鉴定脂肪的存在?
烘烤种子后,把子叶放在白纸上用手 指挤压,白纸上会出现透明的油迹,说 明子叶含有脂肪
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
显 色 反 应 现象：
(创设碱性条件)
(提供Cu2+)
无色
紫色或紫红色
蛋白质的检测结果
4.淀粉的鉴定
取材：马铃薯匀浆
检测：
碘液2滴
现象：
摇匀后变成蓝色
[例] 做生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋 白质的鉴定实验时，需要根据实验需要选择不同的 实验材料。请根据下表所列各种材料回答问题：
各种可供实验的材料 梨 黄桃 胡萝卜 黄豆 花生种子 小麦种子
试剂
组成（用量）
用法
斐林 试剂
双缩 脲试 剂
0.1g/ml NaOH + 0.05g/ml CuSO4 甲液 (1mL) (1mL)
乙液
0.1g/ml NaOH + 0.01g/ml CuSO4
A液(1mL)
B液(4滴)
“甲乙等量 混匀”
“先A后B”
知识结构
第二章组成细胞的分子 网络构建
蛋白质的结构和功能
运送营养物质和代谢废物
水 85~90%
脂肪：CHO 生物体内的储能物质
脂质1~2%
磷脂：CHONP 细胞膜和细胞器膜的组成成分 胆固醇:细胞膜的重要成分，参与脂质的运输
固醇 性激素：促进生殖器官的发育和生殖细胞的形成
无机盐1~1.5%
维生素D：促进对钙、磷的吸收
核酸的组成成分
核糖
脱氧核糖
细胞内的主要能源物质 ：葡萄糖
实验的材料的选择和处理有什么要求？
材料的选择 材料的处理
含糖高，颜色为
还原性糖的鉴定 白色的植物组织，
/
如苹果和梨
脂肪的鉴定 富含脂肪的种子 浸泡3~4小时 ，如花生
蛋白质的鉴定
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
考点三 （实验）检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质（5年6考）检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质1.检测原理(1)糖类的检测(2)脂肪的检测：脂肪＋⎩⎨⎧苏丹Ⅲ染液―→橘黄色苏丹Ⅳ染液―→红色 (3)蛋白质的检测：蛋白质＋双缩脲试剂―→紫色2.实验步骤3.实验成功关键点(1)三个实验中都不宜选取有颜色的材料，否则会干扰实验结果的颜色变化。
(2)由于苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液易溶于酒精，故可用体积分数为50%的酒精洗去浮色。
(3)蛋白质鉴定中，若用大豆作材料，必须提前浸泡；若用蛋清作材料，必须稀释，防止其黏在试管上不易刷洗。
(4)物质鉴定实验一般可预留部分样液作对照实验，若需进一步设立对照实验，对照组应加入成分已知的物质，如验证唾液淀粉酶是蛋白质，对照组可加入稀释的鸡蛋清溶液。
1.下图是检测还原糖的实验(1)如下图示的处理，2 min后试管内将呈现何种颜色？试加以分析说明。
(2)向某试管内无色液体中加入斐林试剂，经加热若出现砖红色沉淀，则表明试管内含有葡萄糖，对吗？提示(1)应为蓝色(斐林试剂的颜色，因未经水浴加热，只有将试管置于50～65 ℃温水中，经水浴加热后，方可呈现“砖红色沉淀”)。
(2)不对。
只能证明含有“还原糖”，不能具体证明是哪种还原糖。
2.下图为某种物质鉴定方案，请推测：(1)图示的实验方案用于鉴定何类物质，其中“某试剂”是什么？A液、B液分别指什么？(2)若溶液中有被检测物质则右侧试管“摇匀后”变成何种颜色？提示(1)蛋白质及多肽化合物；双缩脲试剂；A为0.1 g/mL NaOH溶液；B为0.01 g/mL CuSO4溶液。
(2)紫色。
糖类、脂肪与蛋白质的检测1.(2016·海南卷，15)下列实验中，加入试剂后不能产生特定颜色的是()A.取成熟香蕉匀浆，用斐林试剂检测还原糖B.黑暗中生长24 h的天竺葵叶片，用碘液检测淀粉C.玉米根尖经甲基绿染色后，在显微镜下观察细胞核D.花生子叶经苏丹Ⅲ染色后，在显微镜下观察脂肪颗粒解析成熟香蕉中含有较多葡萄糖，用斐林试剂检测会出现砖红色沉淀；黑暗中生长24 h的天竺葵叶片，淀粉被消耗，加入碘液不会产生蓝色；玉米根尖经甲基绿染色后，在显微镜下观察细胞核呈绿色；花生子叶经苏丹Ⅲ染色后，在显微镜下观察脂肪颗粒呈橘黄色。
2.检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
则不需要加热。 (4)现象不同：斐林试剂检测还原糖，产生砖红色沉
淀，双缩脲试剂检测蛋白质，产生紫色物质。
[高考实验对接]
（ⅰ）
（ⅱ） （ⅲ）
【模板应用分析】
实验材料选择：与教材 试验不同，但都是富含 目的有机物且白色或无 色的生物材料，与教材 实验要求相同。
[多维思考]
（1）如果本实验要检测脂肪，应该怎么做？ 提示：可将腐乳制成腐乳组织液，加入苏丹Ⅲ或 Ⅳ染液，观察组织液颜色变化。
（2）如果本实验出现了腐乳腐败现象，可能是由 于什么原因？ 提示：可能的原因是在制作腐乳过程中，无菌操 作出现失误，造成杂菌污染所致。
实验试剂的选择： 蛋白质与双缩脲试 剂反应，与教材实 验要求相同。
实验变量分析：是 对教材实验的拓展。 ①②③组的单一变 量是处理时间，③ ④组的单一变量是 温度
使酶失活 浅
蛋白酶
不变
【模板应用分析】
浅
（ⅴ）
氨基 转换
实验结果： 生物材料中 的目的有机 物含量越多， 颜色越深， 否则越浅。
糖类和脂质
一、实验原理
某些化学试剂能够使生物组织中的相关有机化合物 产生特定的颜色反应。
(1)还原糖＋ 斐林试剂 50℃～65℃温水浴砖红色
沉淀。
苏丹Ⅲ染液 →橘Байду номын сангаас色
(2)脂肪＋
苏丹Ⅳ染液 →红色 (3)蛋白质＋ 双缩脲试剂 →紫色。 (4)淀粉＋ 碘液 →蓝色。
二、实验步骤
1.还原糖的检测： 选材：含糖量较高、白色或近于白色的植物组织
↓ 制备组织样液
↓ 显色反应：
制浆
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
实验一检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质一．实验目的：尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质，阐明实验原理—颜色反应，识记和区分用于可溶性还原糖、脂肪、蛋白质鉴定的试剂及产生的特定颜色，初步掌握鉴定上述化合物的基本方法,学会描述实验现象，掌握NaOH溶液和CuSO4溶液的使用方法.二．实验原理:某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。
1．生物组织中普遍存在的可溶性糖类较多,有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。
前三种糖的分子内都含有游离的具还原性的半缩醛羟基，因此叫做还原糖;蔗糖分子内没有，为非还原糖。
实验中所用的斐林试剂，只能鉴定生物组织中可溶性还原糖，而不能鉴定可溶性非还原糖。
可溶性还原糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖）与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的Cu 2O沉淀。
如：葡萄糖+ 2Cu2+ + 4OH—加热葡萄糖酸+ Cu 2O↓(砖红色）+ H 2O 即Cu 2+被还原成Cu 2O，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。
用斐林试剂鉴定还原糖时，溶液变化过程为:浅蓝色→棕色→砖红色沉淀淀粉遇碘变蓝色(直链）或紫（红)色(支链）。
2．脂肪和类脂（磷脂、糖脂、固醇脂等）统称为脂类.它是构成人体组织的正常成分，不溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶剂中。
在化学组成上，脂类属于脂肪酸的酯或与这些酯有关的物质。
脂类的主要功能是氧化供能.脂肪主要存积于脂肪组织中,并以油滴状的微粒存在脂肪细胞浆内。
在病理检验中，脂类染色法最常用以证明脂肪变性，脂肪栓子以及肿瘤的鉴别。
脂类染色使用最广泛的染料是苏丹染料，最常用的有苏丹Ⅲ，苏丹Ⅳ,苏丹黑及油红O等。
脂肪被染色,实际上是苏丹染料被脂肪溶解吸附而呈现染料的颜色。
经研究认为组织中脂质在液态或半液态时，对苏丹染料着色效果最好。
根据这一原理，适当提高温度(37℃—60℃）对组织切片染色效果是有好处的。
脂类染色，用冰冻或石蜡切片，以水溶性封固剂封固,如甘油、明胶和阿拉伯糖胶等。
糖类、蛋白质、脂肪的鉴定
1.实验原理
生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定
实验原理
鉴定物质 还原性糖
脂肪
蛋白质 淀粉
试剂 斐林试剂
苏丹Ⅲ 苏丹Ⅳ 双缩脲试剂
碘
实验现象
砖红色沉淀 橘黄色 红色 紫色 蓝色
方法步骤： 1．实验材料、仪器和试剂的选择 2．设计记录表格，记录预测结果 3．检测的方法步骤 (1)还原糖的检测和观察; (2)脂肪的检测和观察; (3)蛋白质的检测和观察;
D、使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现配现用
第二章组成细胞的分子 网络构建
蛋白质的结构和功能
细胞的分子组成
核酸的结构和功能
水和无机盐的作用
糖类的种类和作用
脂质的种类和作用
C、H、O、N 种类
20种
氨基酸 脱水缩合 多肽 化学键名称 肽键
氨基酸种类、数目、排列顺序、空间结构
蛋白质结构的多样性
蛋白质7~10%
显微观察：先在低倍镜下找到已着色的薄片，后用高倍镜观察
现象：有被染成橘黄色(或红色)的脂肪微粒
脂肪的检测结果
3.蛋白质的鉴定
选材与制备 黄豆组织样液（或鸡蛋蛋清稀释液） 组织样液：［黄豆浸泡 →去皮→切片→研磨→过滤→滤液］
显 色 反 应 现象：
(创设碱性条件)
(提供Cu2+)
无色
紫色或紫红色
而后立即使用。
砖 红 色 沉
0.05g/mL
淀
在碱性
NaOH 浓度为
蛋白质 的鉴定
双缩脲试 剂NaOH和
CuSO4
环境下 的Cu2+
0.1g/mL
CuS04 浓度为
先加入Na0H 1mL，然后 再加CuS04 4滴，摇匀。 (不能过量)
蛋白质,还原糖的鉴定实验报告.doc
蛋白质,还原糖的鉴定实验报告高一实验二还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定高一生物实验二生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验点拨1、生物学中物质的鉴定与化学中物质的鉴定,其原理是一致的。
化学中被鉴定的物质与所用的化学试剂要么发生颜色反应,要么产生沉淀, 在生物学中物质鉴定的理念是:某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应. ①可溶性还原糖+ 斐林试剂→砖红色沉淀.(水浴加热)②脂肪小颗粒+ 苏丹Ⅲ染液→橘黄色小颗粒.(要显微镜观察)③蛋白质+ 双缩脲试剂→紫色反应.(要先加A液NaOH 溶液再加B液CuSO4 溶液)2、可溶性还原糖的鉴定实验中：应选择含糖量较高,颜色为白色或近白色的植物组织。
以苹果,梨为最好。
且先要制备组织样液。
研磨时，可加石英砂和水一起研磨。
3、斐林试剂要两液混合均匀且现配现用，切勿将甲液和乙液分别加入组织样液中。
斐林试剂的配制过程示意:斐林试剂甲液( 0.1 g/ml的NaOH 溶液) 斐林试剂乙液( 0.05 g/ml 的CuSO4 溶液)4.关于鉴定还原糖的实验，在加热试管中的溶液时，应该用试管夹夹住试管上部，并放入盛开水的大烧杯中加热。
注意试管底部不要接触烧杯底部，同时试管口不要朝向实验者，以免试管内溶液沸腾时冲出试管，造成烫伤。
如果试管内溶液过于沸腾，可以上提试管夹，使试管底部离开大烧杯中的开水。
5.做鉴定还原糖的实验时，在鉴定之前，可以留出一部分样液，以便与鉴定后的样液的颜色变化作对比，这样可以增强说服力。
6、脂肪的鉴定实验中：实验材料应选择富含脂肪的种子,以花生种子为最好。
实验前浸泡3h～4h（浸泡时间太短，不容易切片；浸泡时间过长，组织太软，切下来的薄片不易成形），最适宜切片。
7、实验中学生应分工合作。
在“还原糖的鉴定”实验中，当每组两个学生中的一个制备生物组织样液时，另一个学生可以用酒精灯将水煮开，以便缩短实验的等待时间。
在“脂肪的鉴定”实验中，一个学生制作临时装片时，另一个学生则可以调试显微镜。
实验一 检测生物组织的糖类,脂质,蛋白质
2）实验材料：豆浆
3）试剂：双缩脲试剂 A液：质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液 B液：质量浓度为0.01g/mL的CuSO4溶液
4）检测的方法步骤
①向试管内注入2mL待测组织样液。
②向试管内注入双缩脲试剂A液1mL ，摇匀。 ③向试管内注入双缩脲试剂B液4滴，摇匀。
2021/6/21
6
四：检测生物组织中的淀粉
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
2021/6/21
1
一：检测生物组织中的还原性糖类
1）实验原理： 还原糖 + 斐林试剂→砖红色沉淀
2）实验材料：苹果汁
3）试剂：斐林试剂 甲液：质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液 乙液：质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液
4) 检测的方法步骤
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3）试剂：苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液
4 ) 检测的方法步骤
①方法一：向待测组织样液中滴加3滴苏丹
Ⅲ染液，观察样液被染色的情况。
2021/6/21
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②方法二：制作子叶临时切片，用显微镜观察子叶细胞 的着色情况。（取材，切片，制片，观察）
5）实验现象
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三：检测生物组织中的蛋白质
1）实验原理： 蛋白质 + 双缩脲试剂→紫色
2
①向试管内注入2mL待测组织样液。 ②向试管内注入1mL斐林试剂（甲乙液等量混 合均匀后再注入）。 ③将试管放入盛有50~65℃温水的大烧杯中加热约2min。
④观察试管中出现的颜色变化。 5）实验现象
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二：检测生物组织中的脂肪
1）实验原理： 脂肪 + 苏丹Ⅲ→橘黄色
脂肪 + 苏丹Ⅳ→红色 2）实验材料：花生种子或花生种子匀浆
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
约2min50~65℃水浴加热三、检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质1.实验原理：某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。
①还原糖+斐林试剂———————>砖红色沉淀②淀粉+碘液→蓝色③脂肪+苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）→橘黄色（或红色） ④蛋白质+双缩脲试剂→紫色2.实验步骤及实验现象：①还原性糖鉴定：取材→制备组织样液→加斐林试剂1ml →水浴加热煮沸→显色（浅蓝色→棕色→砖红色沉淀） ②淀粉鉴定：取材→制备组织样液（马铃薯匀浆）→滴加碘液→摇匀后变成蓝色③脂肪鉴定：方法一：取材与制备组织样液（花生种子匀浆）→滴加苏丹Ⅲ（苏丹Ⅳ）→摇匀后变成橘黄色（红色） 方法二：取材、切片、制片：花生种子浸泡，将子叶切成薄片→滴加苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）→用50%酒精洗去浮色→镜检（看到橘黄色或红色的脂肪颗粒）④蛋白质鉴定：取材→制备组织样液（豆浆或蛋清稀释液）→加双缩脲试剂A 液1ml →摇匀→加双缩脲试剂B 液4滴→观察颜色（紫色）3.实验注意事项：（1）从植物器官中提取糖类、脂肪、蛋白质的方法：设法使细胞破碎（如研磨、挤压或切割等），再将这些物质提取出来。
（2）禾谷类的果实、种子中含淀粉较多；甘蔗的茎和甜菜的根含蔗糖较多；花生、芝麻的种子中含脂质较多；大豆种子中含蛋白质较多。
（3）显色反应材料选择时要注意：①材料本身应浅色，以免对实验结果的观察产生干扰； ②材料应含有丰富的相关物质，使现象更显著。
（4）还原性糖鉴定①常见的还原糖有葡萄糖、果糖、半乳糖、麦芽糖、果糖、乳糖等。
②实验材料要选含还原性糖量高，白色或近于白色的组织，如苹果和梨的匀浆。
③不能选用甜菜、甘蔗，因为它们所含的蔗糖属于非还原性糖。
④马铃薯含淀粉较多，也不能作为该实验材料。
⑤西瓜、血液、绿色叶片等材料本身的颜色会对实验结果造成干扰，也不能作为该实验材料。
⑥斐林试剂实际上是Cu(OH)2的悬液，不稳定，如果长时间放置，Cu(OH)2悬液会变成Cu(OH)2沉淀，不易和还原糖发生反应。
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D.氨基
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解析：在碱性溶液中，双缩脲(H2NOC－NH－CONH2)能与 Cu2＋作用，形成紫色的络合物。由于蛋白质分子中含有 很多与双缩脲结构相似的肽键，因此，蛋白质可与双缩 脲试剂发生颜色反应，从而用来鉴定蛋白质的存在。 答案：A
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2.(2007·广东理基)下列健康人的4种液体样本中，能与双
Cu2＋形成络合物的碱性条件，若Cu2＋过量，会与NaOH反
应，生成蓝色的Cu(OH)2，干扰现象的观察。
[答案] (1)斐林试剂 砖红色 葡萄糖
(2)过量的双缩腺试剂 B 会于试剂 A 反应，使溶液呈蓝色，
而掩盖生成的紫色
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利用某些化学试剂能够使生物组织中有关有机化合
物产生特定颜色反应的原理和方法，还可以解决以下问
题：
(1)对生物组织进行某种成分的检测。
(2)在医学上进行疾病的诊断，如糖尿病、肾炎。
(3)可以鉴定某些消化液中含有蛋白质。
(4)用于劣质奶粉的鉴定。
(5)不同生物组织中含糖量高低的测定。
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1.(2008·广东理基)双缩脲试剂可以鉴定蛋白质，是由于
蛋白质有 ( )
A.肽键
B.氨基酸
C.羧基
方法 再加入样液
环境，再加B液
使用 加热(水浴50～65℃)
条件
不加热，摇匀即可
实验
浅蓝色→棕色→砖红色
紫色
现象
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斐林试剂
双缩脲试剂
甲液、乙液混合均匀后，先加A液造成碱性
使用方法
再加入样液
环境，再加B液
使用条件 加热(水浴50～65℃) 不加热，摇匀即可
实验现象 浅蓝色→棕色→砖红色
紫色
验材料，一定要稀释到一定程度，否则，与双缩脲试剂
发生反应后会粘在试管的内壁上，使反应不彻底，试
管也不易洗刷干净.
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还原糖、蛋白质的鉴定实验中，在加相应试剂 鉴定之前，要留出一部分组织样液，以便与鉴定后 的样液颜色作对比，增强实验的说服力。
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(1)实验材料的选择 由于本实验是利用颜色反应鉴定不同的物质，因此在
缩脲试剂发生紫色颜色反应的是 ( )
①尿液 ②胃液 ③汗液 ④唾液
A.①③
B.①④
C.②③
D.②④
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ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
解析：双缩脲试剂是用于鉴定蛋白质的试剂，可与蛋 白质发生紫色反应。胃液中含有胃蛋白酶，唾液中含 有唾液淀粉酶，它们都属于蛋白质。 答案：D
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3.(2007·江苏高考)若以鸡蛋蛋白液为材料进行蛋白质鉴 定实验，发现蛋白液与双缩脲试剂发生反应后会粘固 在试管壁上。下列关于这一现象形成原因的描述中正 确的是 ( ) A.鸡蛋蛋白液稀释不够，搅拌不匀 B.只添加了双缩脲试剂A，未添加双缩脲试剂B C.鸡蛋蛋白液不是合适的实验材料 D.蛋白液与双缩脲试剂的反应时间不够长
实验的选材上应注意以下两点： ①材料本身应无色，以免对结果产生干扰； ②材料应富含相关物质，使现象更显著。
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(2)斐林试剂与双缩脲试剂的比较
鉴定 成分
斐林试剂 还原糖
双缩脲试剂 蛋白质
鉴定 原理
还原糖中的醛基(—
CHO)在加热条件下 双缩脲(H2NOC—NH—
能将Cu(OH)2中的
CONH2)在碱性溶液中能与 Cu2＋结合生成紫色络合物，
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解析：如果蛋白液稀释不够，与双缩脲试剂发生反应后 会粘固在试管的内壁上，使反应不容易进行彻底，并且 试管也不容易刷洗干净。只加双缩脲试剂A是为了造成 碱性环境，不会发生反应，也不会粘固在试管壁上。鸡 蛋蛋白液中含丰富的蛋白质，是蛋白质鉴定的合适材料。 蛋白液中先后加入双缩脲试剂A、B，摇匀后即可观察现 象，是否粘在试管壁上与反应时间无关。 答案：A
Cu2＋还原成Cu＋，从
蛋白质分子中含有与双缩
而生成砖红色的Cu2O 脲结构相似的肽键
沉淀
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斐林试剂
双缩脲试剂
甲液：质量浓度为
A液：质量浓度为0.1g/mL的
试剂 0.1g/mL的NaOH溶液； NaOH溶液；
浓度 乙液：质量浓度为
B液：质量浓度为0.01g/mL
0.05g/mL的CuSO4溶液 的CuSO4溶液 使用 甲液、乙液混合均匀后， 先加A液造成碱性
沉淀，因此，可用该试剂检验糖尿病人尿液 中
的
含量。
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(2)鉴定黄豆组织中存在蛋白质时，向组织液中加入双 缩脲试剂A摇匀，再向样液中加入双缩脲试剂B摇匀。 其中双缩脲试剂B的量只有3～4滴，而不能过量，为 什么？
。
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[解析] 还原糖的鉴定试剂常用斐林剂试，也可用班氏试
剂，原理是相同的：还原糖的—CHO将Cu(OH)2的Cu2＋还原 为Cu＋。在蛋白质鉴定中，NaOH的作用是制造蛋白质与
选材：含糖量较高、白色或近于白色的植物组织
结论：组织样液中有可溶编辑性ppt还原糖
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❖ 在鉴定可溶性还原糖的实验中，加热试管中 的溶液时,应该用试管夹夹住试管上部，放入 盛50℃～65℃温水的大烧杯中加热。注意试 管底部不要接触烧杯底部；
❖ 斐林试剂不稳定，应现用现配。
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(2)脂肪的检测和观察 方法一：花生种子匀浆＋3滴苏丹Ⅲ染液→橘黄色 方法二： 取材：花生种子(浸泡)，将子叶削成薄片
结论：花生种子中有脂编辑肪ppt存在
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脂肪的鉴定中，实验用的花生种子需提前浸泡
3～4 h， 浸泡时间太短，不易切片；浸泡时间太
长，则组织太软，切下的薄片不易成形。
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(3)蛋白质的检测和观察 选材与制备：鲜肝提取液或黄豆浆滤液
结论：组织样液中存在蛋白质
在蛋白质的鉴定实验中，如果用蛋清稀释液作为实
还原糖、脂肪和蛋白 质的鉴定实验
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实验原理
生物组织中某些有机化合物能与某些化学试剂产生
特定的颜色反应。
还原糖+斐林试剂 50~65℃水浴加热
(1)糖类
约2 min
淀粉+碘→蓝色
砖红色沉淀
(2)脂肪＋苏丹Ⅲ染液→橘黄色
脂肪＋苏丹Ⅳ染液→红色
(3)蛋白质＋双缩脲试剂→紫色
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实验流程 (1)还原糖的检测和观察
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习题
基础题 1.（1）√
2、连线题：
2）X 。
苏丹Ⅲ染液 斐林试剂 双缩脲试剂 碘液
豆浆 马铃薯汁 葡萄汁 花生子叶
砖红色沉淀 橘黄色 蓝色 紫色
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典例印证
(2010·茂名质检)根据相关实验，回答下列问题：
(1)鉴定成熟苹果果肉中存在还原性糖，所用的试剂
是
，该试剂与细胞内还原性糖发生作用，形成