【人教版】生物选修一：2.1微生物的实验室培养教案设计
高中生物 2.1微生物的实验室培养学案 新人教版选修1
高中生物 2.1微生物的实验室培养学案新人教版选修1微生物的实验室培养学习目标1、说出培养基的类型、用途和基本成分。
2、举例说明常用的消毒与灭菌方法。
3、阐明培养基配制的方法和接种的方法。
学习重点培养基的营养成分、无菌操作的基本方法、配制培养基的基本步骤、常用的微生物的接种方法。
学习难点配制培养基的基本步骤、常用的微生物的接种方法。
课前预习使用说明与学法指导生物选修一专题二课题一知识准备搜集微生物实验室培养的资料。
教材助读（一）培养基1、概念：人们按照微生物对的不同需求，配制出供其的营养物质。
2、培养基的化学成分包括四类营养成分。
除此之外，培养基还要满足微生物生长对、特殊营养物质以及的要求。
3、分类方式分类标准类型备注培养基的培养基、培养基和半固体培养基培养基中加入凝固剂（有琼脂、明胶、硅胶等）即为培养基。
培养基是实验室中最常用的培养基之一。
微生物的种类细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基和霉菌培养培养基的特殊用途基础培养基、加富培养基、选择培养基和鉴别培养基选择培养基：允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。
鉴别培养基：是在培养基中加入某种试剂或化学药品，使培养后会发生某种变化，从而区别不同类型的微生物。
如鉴别大肠杆菌的伊红美蓝培养基，鉴别纤维素分解菌的刚果红培养基。
（二）无菌技术1、关键防止的入侵。
2、无菌技术包括：（1）对实验操作空间、操作者的衣着和手进行；（2）将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行；（3）为避免周围微生物污染，实验操作应在旁进行；（4）避免已灭菌处理的材料用具与相接触。
3、比较消毒和灭菌消毒灭菌概念用较的物理或化学方法杀死物体的部分微生物（不包括芽孢和孢子）用较的理化因素杀死物体微生物（包括芽孢和孢子）常用方法消毒法（消毒法）消毒法、紫外线消毒法灼烧灭菌、灭菌、灭菌适用对象操作空间、液体、双手等接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等（三）实验操作（大肠杆菌的纯化培养）1、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基①计算：根据比例，计算100mL培养基各成分用量。
生物：2..1《微生物的实验室培养》教案(1)(新人教版选修1)
课题1微生物的实验室培养【课程目标】了解培养基的基础知识，进行微生物培养和无菌技术的操作。
【课题重点】无菌技术的操作【课题难点】无菌技术的操作基础知识一、培养基1．概念：人们按照微生物对的不同需求，配制出供其的营养基质叫培养基。
可分为培养基和培养基。
8en9GjDA6t2．营养构成：各种培养基一般都含有、、和，此外还要满足微生物生长对、以及的要求。
8en9GjDA6t3．培养乳酸杆菌时需在培养基中添加、培养霉菌时需将培养基PH调至、培养细菌时需将PH调至、培养厌氧微生物则需提供条件。
8en9GjDA6t〖思考1〗从细胞的化学元素组成来看，培养基中为什么都含有这些营养成分？【补充1】碳源：如CO2、糖类、脂肪酸等有机物，构成微生物的结构物质和分泌物，并提供能量。
氮源：如N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等，主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。
含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源，又可以作为氮源，如氨基酸等。
8en9GjDA6t二、无菌技术：阅读“无菌技术”，讨论回答下列问题：(一>获得纯净培养物的关键是，具体操作如下：8en9GjDA6t 1．对实验操作的、操作者的和进行。
2．将用于微生物培养的、和等器具进行。
8en9GjDA6t3．为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在附近进行。
4．实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与相接触。
(二>消毒和灭菌1．消毒是指。
常用的方法有、、消毒法。
8en9GjDA6t2．灭菌是指。
常用的方法有：、、灭菌。
分别适用于那些用具？8en9GjDA6t〖思考2〗无菌技术除了防止培养物被污染外，还具有的目的是什么？〖思考3〗利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤，目的是什么？〖思考4〗物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后，要首先打开排气阀，煮沸并排除锅内冷空气，其目的是；随后关闭排气阀继续加热，气压升至，温度为，并维持 min；最后切断热源，使温度自然降温，气压务必降至时打开锅盖，其目的是防止 8en9GjDA6t实验操作----大肠杆菌的纯化培养：本实验所用的培养基是，本实验可分成和8en9GjDA6t两个阶段进行。
课题1微生物的实验室培养-人教版选修1生物技术实践教案
课题1 微生物的实验室培养-人教版选修1 生物技术实践教案教学目标•了解微生物实验室培养的基本原理和方法•学习操作无菌实验的技能•熟悉使用化学试剂和实验器材的方法和注意事项教学重点学生能够熟练地进行微生物实验室培养和无菌实验操作，掌握实验过程的基本方法和注意事项。
教学难点如何正确进行微生物实验室培养和无菌实验，保证实验的准确性和安全性。
教学过程一、实验目的和原理1.实验目的：了解微生物实验室培养的基本原理和方法，掌握无菌实验操作技巧，学会使用化学试剂和实验器材。
2.实验原理：微生物实验室培养是把微生物放在适宜的环境中，使其得到营养、生长和繁殖的过程，一般有两种方法：液体培养和固体培养。
无菌实验是指在无微生物干扰和污染的条件下进行实验操作，通常需要采用灭菌和消毒等技术。
二、实验器材和试剂•实验器材：培养皿、试管、移液管、显微镜等。
•试剂：琼脂、磷酸盐缓冲液、蒸馏水、碘酒、70%酒精等。
三、实验步骤1.实验前准备：清洗试管、培养皿等实验器具，准备所需试剂和培养物。
2.培养基制备：称取适量的琼脂和磷酸盐缓冲液，加入蒸馏水，加热至琼脂完全溶解，然后进行灭菌消毒。
3.杂菌检测：将准备好的培养基倒在培养皿上，放置在恒温箱中，观察是否有杂菌的生长。
4.微生物接种：采用无菌技术，将培养物移植至培养基表面和内部，标明不同的培养条件和试验目的。
5.培养条件：培养箱中的温度、湿度和光照条件要根据不同的微生物种类进行调节和控制。
6.观察和记录：观察微生物在培养基上的生长情况和形态特征，进行记录和统计分析。
7.鉴定和鉴别：采用显微镜等检测技术，进行微生物的鉴定和鉴别，以确定其种类和特性。
四、实验注意事项1.操作过程中要注意使用无菌技术，避免微生物污染。
2.实验室要保持干净卫生，经常清洗和消毒实验器材和环境。
3.对于具有毒性的试剂，要注意正确配制和储存，避免误用和事故发生。
4.操作结束后，要清洗和消毒实验器材和实验环境，保证实验室的安全和卫生。
人教版高中生物选修1-2.1《微生物的实验室培养》教案
课题1 微生物的实验室培养【课题目标】1.通过阅读教材，结合观看培养基相关素材，认识有关培养基的基础知识。
2.通过观看无菌操作视频，结合教师详细讲解，能够掌握无菌操作技术。
3.通过观看实验视频，结合实际实验操作，能够完成纯化大肠杆菌的操作。
【课题重点】无菌技术的操作【课题难点】无菌技术的操作【教学方法】启发式教学【教学工具】多媒体课件【教学过程】（一）引入新课在传统发酵技术的应用中，都利用了微生物的发酵作用，其中的微生物来自于制作过程中的自然感染。
而在工业化生产中，为了提高发酵的质量，需要获得优良菌种，并保持发酵菌种的纯度。
这就要涉及到微生物的培养、分离、鉴别等基本技术。
现在我们开始学习微生物的培养和应用专题。
（二）进行新课1.基础知识1.1 培养基的种类包括固体培养基和液体培养基等。
〖思考1〗琼脂是从红藻中提取的多糖，在配制培养基中用作为凝固剂。
【补充】培养基的类型及其应用：1.2 培养基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源四类营养成分。
〖思考2〗从细胞的化学元素组成来看，培养基中为什么都含有这些营养成分？C、H、O、N、P、S是构成细胞原生质的基本元素，约占原生质总量的97％以上。
【补充】碳源：如CO2、糖类、脂肪酸等有机物，构成微生物的结构物质和分泌物，并提供能量。
氮源：如N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等，主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。
含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源，又可以作为氮源，如氨基酸等。
1.3 培养基除满足微生物生长的pH 、特殊营养物质和氧气等要求。
【补充】生长因子：某些微生物正常生长代谢过程中必须从培养基中吸收的微量有机小分子，如某些氨基酸、碱基、维生素等。
〖思考3〗牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供糖、维生素和有机氮等营养物质。
〖思考4〗培养乳酸杆菌时需要添加维生素，培养霉菌时需要将培养基pH 调节为酸性，培养细菌时需要将pH调节为中性或微碱性。
活动2：阅读“无菌技术”，讨论回答下列问题：1.4 获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。
高中生物 专题2 微生物的培养与应用 课题1 微生物的实验室培养教案 新人教版选修1
专题2 微生物的培养与应用课题1 微生物的实验室培养教学准备1. 教学目标1.1 知识与技能：了解有关培养基的基础知识；掌握培养基的分类、成分及用途，无菌技术等基本操作技术。
1.2过程与方法：分析实验思路的确定和形成的原因，分析实验流程，对比前面的实验设计，归纳共性，分析差异，增加印象。
1.3情感、态度与价值观：形成勇于实践、严谨求实的科学态度和科学精神。
2. 教学重点/难点2.1 教学重点：培养基的分类、成分及用途及无菌技术的操作2.2教学难点：无菌技术的操作3. 教学用具多媒体、板书4. 标签教学过程引入新课在传统发酵技术的应用中，都利用了微生物的发酵作用，其中的微生物来自于制作过程中的自然感染。
而在工业化生产中，为了提高发酵的质量，需要获得优良菌种，并保持发酵菌种的纯度。
这就要涉及到微生物的培养、分离、鉴别等基本技术。
现在我们开始学习微生物的培养和应用专题。
课题背景到目前为止，几十项Nobel生理学和医学奖，化学奖都与微生物学有关。
微生物基础知识：微生物的分类见课件。
进行新课1．微生物基础知识微生物包括五类：病毒、细菌、放线菌、真菌、原生动物特点：结构都相当简单,个体多数十分微小.通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有的甚至没有细胞结构.且体内一般不含有叶绿素.不能进行光合作用.1.培养基培养基（培养液）是由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养液。
1.1培养基的类型和用途（1）按物理状态来分：培养基可分为固体培养基和液体培养基。
其中固体培养基用于菌种分离、鉴定菌落等。
（2）按功能来分，可分为选择培养基和鉴别培养基。
（3）按成分来分，可分为天然培养基和合成培养基。
1.1.1按物理状态来分1.液体培养基：增菌2.固体培养基：菌落，菌苔纯化，增菌3.半固体培养基：半固体培养基：动力检测，保种(可用于观察微生物的运动，保存菌种)思考：琼脂的来自哪种生物？从红藻中提取的化学成分是什么？多糖在配制培养基中有什么用途？用作为凝固剂1.1.2按功能来分1.选择培养基：回答下列培养基可以分离获得哪种微生物或细胞？加入青霉素的培养基:分离酵母菌、霉菌等真菌加入高浓度食盐的培养基:分离金黄色葡萄球菌不加氮源的无氮培养基: 分离固氮菌不加含碳有机物的无碳培养基:分离自养型微生物加入青霉素等抗生素的培养基: 分离导入了目的基因的受体细胞加入氨基喋呤、次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷的培养基:分离杂交瘤细胞2. 鉴别培养基：回答下列培养基可以鉴别哪种微生物？加入伊红美蓝的培养基:鉴别大肠杆菌加入尿素酚红的培养基:鉴别尿素分解菌3.用途：选择培养基:筛选并选择培养某种微生物鉴别培养基: 用来鉴别某种微生物的存在1.1.3按成分来分1.合成培养基:根据细胞生存所需物质的种类和数量，用人工方法模拟合成的。
《专题2课题1微生物的实验室培养》教学设计教学反思-2023-2024学年高中生物人教版选修1
《微生物的实验室培养》教学设计方案（第一课时）一、教学目标1. 知识与技能：理解微生物的概念，掌握实验室培养微生物的基本步骤和方法。
2. 过程与方法：通过实验操作，培养观察、分析和解决问题的能力。
3. 情感态度与价值观：认识到科学实验的重要性，培养严谨的科学态度和团队协作精神。
二、教学重难点1. 教学重点：实验室培养微生物的基本步骤和方法。
2. 教学难点：微生物的观察和识别，以及实验过程中的安全操作。
三、教学准备1. 准备实验器材：培养基、接种工具、显微镜、灭菌设备等。
2. 准备实验材料：新鲜微生物样品、培养皿、试管等。
3. 预习相关内容，设计实验方案，并布置学生课前预习。
4. 实验室保持清洁，并做好安全防护措施。
四、教学过程：1. 导入新课：通过展示微生物在自然界中的重要性和多样性，引导学生认识到实验室培养微生物的重要性。
同时，提出本节课的任务，即学习如何进行微生物的实验室培养。
2. 实验室介绍：带领学生参观实验室，了解实验室的基本设施和设备，如培养箱、显微镜、灭菌器等。
同时，介绍实验室的卫生和安全规定。
3. 微生物基础知识：讲解微生物的基本概念、分类、特点等基础知识，帮助学生了解微生物的基本特性，为后续实验操作打下基础。
4. 实验原理：介绍实验室培养微生物的基本原理和方法，包括培养基的制备、接种、培养、观察等步骤。
同时，讲解实验过程中的注意事项和可能出现的异常情况及处理方法。
5. 实验操作：学生进行实验操作，按照实验步骤和方法进行微生物的培养和观察。
教师进行指导，及时纠正错误和不足，确保学生能够正确操作。
6. 实验报告：学生根据实验结果进行报告，包括微生物的生长情况、形态等。
教师对学生的报告进行点评和指导，帮助学生更好地理解实验结果和微生物的特性。
7. 总结与延伸：总结本节课的内容，强调实验室培养微生物的重要性和方法。
同时，引导学生思考如何将实验室培养技术应用到实际生产中，如食品工业、生物制药等领域的生产过程中。
2.1微生物的实验室培养 教案(人教版选修1).docx
2.1微生物的实验室培养教案（人教版选修1）•课标要求进行微牛物的分离和培养。
用大肠杆菌为材料进行平面培养，分离菌落。
•课标解读1.了解有关培养基的基础知识。
2.进行无菌技术的操作。
3.进行微牛物的培养。
•教学地位本课题介绍了最基本的微牛物技术，是开展其他两个课题的基础。
只有掌握了本课题所介绍的基本技术，才能完成本专题的其他课题。
同时，本课题小学习的无菌操作技术也有助于学习“植物组织培养技术”。
培养基的配置、微牛物的分离都是微牛物相关实验的必备操作技术。
•教法指导1.对于培养基的教学，首先介绍培养基的分类，在介绍液体培养基和固体培养基吋，教师可提供实物或图片，以加深学牛印象，并比较二者呈现不同物理状态的原因。
根据教材屮培养基配方的实例，以资料分析的形式，让学牛结合必修1屮“构成细胞的元素”这一•角度来分析培养基小为什么需要具备这些基本成分。
2.无菌技术的教学，首先应该结合学牛的牛活经验，让学牛意识到在我们H常牛活的环境屮，微牛物无处不在，在微牛物的培养过程屮，极有可能将环境屮的微牛物带入培养物屮，由此强调无菌操作的重耍性。
无菌操作贯穿整个微牛物实验屮，无论是培养基的配置、微牛物的接种，还是微牛物的培养，每--步都要注意无菌操作，熟练、规范的掌握无菌操作技术是成功培养微牛物的关键。
3.常用的消毒、灭菌的方法部分的教学，可先让学生阅读相关内容，然后建立比较表格，通过比较，理解并记忆消毒和灭菌的区别、二者的适用范围及具体操作方法。
可通过教材的旁栏思考题进行检测、巩固。
•新课导入建议专题1学习的传统发酵技术，所用的微牛物来自材料自身携带或者空气，教师可介绍工业发酵技术，所利用的微牛物是优良的菌种，而且是经过培养、纯化的菌种，然后设问：如何培养微生物？如何保证所使用的微生物屮没有混入其他微牛物？对人体健康有害的微牛物如何防止其扩散？这些问题不必给出答案，通过这些问题可引入本课题的学习。
•教学流程设计学牛课前预习：阅读教材比3 20,填写【课前自主导学】，完成“思考交流1、2”。
高中生物 2.1微生物的实验室培养导学案 新人教版选修1
高中生物 2.1微生物的实验室培养导学案新人教版选修11、掌握培养基的配制、分装方法,简述有关培养基的基础知识。
2、说出灭菌和消毒的概念及两者的区别。
3、简述常用的消毒与灭菌方法。
4、掌握实验室灭菌方法及技术,进行无菌技术操作。
预学案一、培养基1、概念:人们按照微生物对①营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质叫培养基。
可分为液体培养基和②固体培养基。
2、营养构成:各种培养基一般都含有水、③碳源、氮源和无机盐,此外还要满足微生物生长对④pH 、特殊营养物质以及氧气的要求。
二、无菌技术1、获得纯净培养物(1)对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行⑤清洁和消毒。
(2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行⑥灭菌。
(3)为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在⑦酒精灯火焰附近进行。
(4)实验操作时应避免⑧已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。
2、消毒和灭菌(1)消毒是指使用较为⑨温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部⑩一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。
常用的方法有煮沸消毒法和巴氏消毒法。
(2)灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物。
常用的方法有:灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。
三、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基步骤:计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。
四、纯化大肠杆菌1、微生物接种最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。
2、平板划线法通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
3、稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。
探究案知识点一:培养基1、培养基的组成成分有哪些?你知道培养微生物时,除必需的营养成分外,还需要怎样的条件?2、培养基的分类依据有哪些?分为哪些种类?3、如何区分选择性培养基、鉴别培养基?分别有何作用?4、配制培养基需要遵守哪些原则?知识点二:无菌技术与大肠杆菌的纯化培养1、请你为以下器皿或材料选择恰当的灭菌方法。
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专题2微生物的培养与应用课题2.1 微生物的实验室培养一、【课题目标】（一）知识与技能了解有关培养基的基础知识；掌握培养基的制备、高压蒸汽灭菌和平板划线法等基本操作技术（二）过程与方法分析实验思路的确定和形成的原因，分析实验流程，对比前面的实验设计，归纳共性，分析差异，增加印象（三）情感、态度与价值观形成勇于实践、严谨求实的科学态度和科学精神二、【课题重点】无菌技术的操作三、【课题难点】无菌技术的操作四、【教学方法】启发式教学五、【教学工具】多媒体课件六、【教学过程】（一）引入新课在传统发酵技术的应用中，都利用了微生物的发酵作用，其中的微生物来自于制作过程中的自然感染。
而在工业化生产中，为了提高发酵的质量，需要获得优良菌种，并保持发酵菌种的纯度。
这就要涉及到微生物的培养、分离、鉴别等基本技术。
现在我们开始学习微生物的培养和应用专题。
（二）进行新课1. 基础知识1. 1培养基的种类包括固体培养基和液体培养基等。
〖思考1〗琼脂是从红藻中提取的多糖，在配制培养基中用作为凝固剂。
【补充】培养基的类型及其应用：1 . 3培养基除满足微生物生长的血、特殊营养物质和氧气等要求。
【补充】生长因子：某些微生物正常生长代谢过程中必须从培养基中吸收的微量有机小分子，如某些氨基酸、碱基、维生素等。
〖思考3〗牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供出、维生素和有机氮等营养物质。
〖思考4〗培养乳酸杆菌时需要添加维生素，培养霉菌时需要将培养基pH调节为酸性,培养细菌时需要将pH调节为中性或微碱性。
活动2:阅读"无菌技术”，讨论回答下列问题:1 . 4获得纯净培养物的关键是 防止外来杂菌的入侵 。
1 . 5无菌技术包括：(1 )对实验操作空间、操作者的衣着和手进行 清洁和消毒;(2)将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行 灭菌； (3 )为避免周围微生物污染，实验操作应在 酒精灯火焰附近 旁进行;(4 )避免已灭菌处理的材料用具与周围物品 相接触。
1 . 6比较消毒和灭菌(填表)(1 )日常生活经常用到的是煮沸 消毒法；(2)对一些不耐高温的液体，则使用巴氏 消毒法(作简要介绍)；(3)对接种室、接种箱或超净工作台首先喷洒 石炭酸或煤酚皂 等溶液以增强消毒效果， 然后使用 紫 外线进行物理消毒。
—(4 )实验操作者的双手使用 酒精 进行消毒； (5)饮水水源用氯气进行消毒。
1 . 8灭菌方法： (1) 接种环、接种针、试管口等使用 灼烧 灭菌法;(2) 玻璃器皿、金属用具等使用 干热灭菌法，所用器械是 干热灭菌箱； (3) 培养基、无菌水等使用 高压蒸汽 灭菌法，所用器械是 高压蒸汽灭菌锅(4)表面灭菌和空气灭菌等使用 紫外线 灭菌法，所用器械是 紫外灯。
1思考6〗对接种环灭菌时要用酒精灯的充分燃烧层火焰灼烧可能伸入试管或培养皿的部位。
1思考7〗利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤，目的是避免妨碍热空气流通。
要首先打开排气阀，煮沸并排除锅内冷空气，其目的是丄 气压升至100k Pa ,温度为121 C ,并维持15〜30 min ； 零 时打开锅盖R 目的是防 ― 器中的液体暴沸 。
【补充】培养基的配制原则:① 目的要明确：根据培养的微生物种类、培养的目的等确定培养基的类型和配制量。
② 营养要协调：培养基中各种营养物质的浓度和比例要适宜。
例如：碳氮比 4 ： 1时，谷氨酸棒状杆菌大量繁殖而产生谷氨酸少；碳氮比为3: 1时，菌体繁殖受抑制而谷氨酸合成量大增。
① 在火焰旁右手拿锥形瓶，左手拔出棉塞； ② 右手拿锥形瓶，使锥形瓶的瓶口迅速通过火焰；③ 左手将培养皿打开一条缝隙，右手将培养基倒入培养皿，立刻盖上皿盖。
④ 待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置。
〖思考1〗锥形瓶的瓶口通过火焰的目的是消灭瓶口的杂菌，防止杂菌感染培养基。
〖思考2〗倒平板的目的是防止培养基冷却过程中形成的水滴落到培养基表面。
〖思考3〗若皿盖和皿底之间粘有培养基，则该平板能否培养微生物？为什么？ 不能。
空气中杂菌会在这些粘附培养基上繁殖，并污染皿内培养基。
〖思考4〗配制斜面培养基中，试管要加塞棉塞的目的是保持通气并防止杂菌感染。
〖思考8〗物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后， 利于锅内温度升高；随后关闭排气阀继续加热, 最后切断热源，使温度自然降温，气压务必降至③pH 要适宜：细菌培养基2.实验操作pH 中性或偏碱性，霉菌培养基呈酸性。
〖思考5〗试管培养基形成斜面的作用是增大接种面积。
2. 7接种2. 7. 1微生物接种的最常用方法是平板划线法和稀释涂布法，另外还有穿刺接种和斜面接种_____________________2. 7. 2平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。
其操作步骤是：①将接种环在酒精灯火焰上灼烧直至烧红。
②在酒精灯火焰旁冷却接种环，并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞。
③将菌种试管口通过火焰达到消灭试管口杂菌的目的。
④将冷却的接种环伸入到菌液中取出一环菌种。
⑤将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞。
⑥将皿盖打开一条缝隙，把接种环伸入平板内划3〜5条平行线，盖上皿盖，不要划破培养基。
⑦灼烧接种环，冷却后从第一区划线末端开始向第二区域内划线。
重复上述过程，完成三、四、五区域内划线。
注意不要将第五区的划线与第一区划线相连。
⑧将平板倒置放在培养箱中培养。
〖思考6〗取菌种前灼烧接种环的目的是消灭接种环上的微生物；除第一次划线外，其余划线前都要灼烧接种环的目的是消灭接种环上残留菌种；取菌种和划线前都要求接种环冷却后进行，其目的是防止高_________________________________________________ 温杀死菌种；最后灼烧接种环的目的是防止细菌污染环境和操作者。
〖思考7〗在第1次划线后都从上次划线末端开始的目的是获得由单个细菌形成的标准菌落。
2. 7. 3稀释涂布平板法：将菌液进行一系列梯度稀释，并将不同稀释度菌液分别涂布到琼脂固体培养基上进行培养。
当稀释倍数足够高时，即可获得单个细菌形成的标准菌______________________________________________2. 7. 4系列稀释操作：①取盛有9mL水的无菌试管6支，编号101、102、103、104、105、106。
②用灼烧冷却的移液管吸取1mL菌液注入编号为101试管中，并吹打3次，使之混匀。
③从101倍液中吸取1mL菌液注入到编号为102试管内吹打均匀，获得102倍液。
依此类推。
〖思考8〗操作中试管口和移液管应在离火焰1〜2cm处。
整个操作过程中使用了1支移液管。
3 •结果分析与评价3. 1培养未接种培养基的作用是对照丄有菌落形成，说明培养基灭菌不彻底。
3 . 2在肉汤培养基上，大肠杆菌菌落呈白色，为圆形，光滑有光泽，边缘整齐。
3 . 3培养12h和24h后的菌落大小不同（相同、不同）:菌落分布位置相同（相同、不同）。
原因是时间越长，菌落中细菌繁殖越多，菌落体积越大；菌落的位置不动，但菌落数增多。
〖思考9〗在某培养基上出现了3种特征不同的菌落，原因有培养基灭菌不彻底或杂菌感染等。
〖思考10〗频繁使用的菌种利用临时保藏法保存，长期保存菌种的方法是甘油管藏法。
前者利用固体斜面培养基培养后，保存在4C冰箱中，每3〜6个月转种培养一次，缺点是保存时间较短，容易发生污染和变异；后者将菌种与无菌体积等量混合后保存在-20 C 冷冻箱中。
(三) 课堂总结、点评答案：D例2 •下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是A.防止杂菌污染B. 消灭杂菌C.培养基和发酵设备都必须灭菌D.灭菌必须在接种前解析：灭菌是微生物发酵过程的一个重要环节。
A 说的是灭菌的目的，因为发酵所用的菌种大多是单一的纯种，整个发酵过程不能混入其他微生物(杂菌) ，所以是正确的；B 是错误的，因为灭菌的目的是防 止杂菌污染，但实际操作中不可能只消灭杂菌，而是消灭全部微生物。
C 是正确的，因为与发酵有关的所有设备和物质都要灭菌；发酵所用的微生物是灭菌后专门接种的，灭菌必须在接种前，如果接种后再灭菌 就会把所接菌种也杀死。
答案：B ☆综合应用例3 •右表是某微生物培养基成分，请据此回答: (1) 右表培养基可培养的微生物类型 是 (2) 若不慎将过量 NaCl 加入培养基中。
如不想浪费此培养基，可再加入 ________________ 用于培养(3) 若除去成分②，加入(CHC )，该培养基 可用于培养 _________________________________(4) ________________________________ 表中营养成分共有 类。
(5 )不论何种培养基，在各种成分都溶化 后分装前，要进行的是 (7)若右表培养基用于菌种鉴定，应该增加的成分是___________________________________________________________________________________________________ 。
解析：对于一个培养基，它能培养何种微生物，要看它的化学成分。
当然这只适用于合成培养基，如 果是一个天然培养基就不能从培养基的成分上区分它是培养何种微生物的。
分析化学成分要从营养物质的 类型出发。
右表中的营养物质有水、无机盐、氮源三类，缺乏碳源和特殊营养物质。
对特殊营养物质，有 的微生物是不需要的，但没有微生物是不需要碳源的。
该培养基中没有碳源，说明培养的微生物是从空气 中获得碳源的，即可培养的微生物就是自养型微生物了。
该培养基中加入了过量食盐，就可以成为金黄色 葡萄球菌鉴别培养基，但金黄色葡萄球菌是异养型微生物，这个培养基就还需要加入有机碳源。
该培养基 若加入(CH I C )，培养基中就有了碳源，但除去成分②，去卩使培养基中没有了氮源，这时就只能用于培养固微) 生养基关微生物营养物质的叙述中配制培养基的原则氮源 -------都提是碳源的物质不可册是•除水 .验解析: 它的表 同时是 类繁多 无机盐 养基C 以外的无机物只提供无机盐配制培 养基 计供能量称量T 溶化T•的方无机氮源调能提供能曩T 加棉塞 生物的具菌T 倒平板斤。
对 达是不同的微生物，所需营养物质有较大差别，要针对微 和化碳；有的碳源可同时是氮源，如 是能源，如蛋白胨。
对于 C选项，除水以外的无机物种 不完整的。
有的碳源只能是碳源划线法 ，女如葡萄糖；有的碳源同时是氮划线法―一-一 可作为自养型微生物的碳源;，养功能也多样化如二氧化碳］;而A 、B 选项，NH 4HCQ 有的碳源NaCl 则只能提供无机盐，稀释涂布D 选工项，系氮源提供能量板况还是存在的，如细菌提供能量和氮源。