标准曲线标准磷溶液200ugml,取0、0.05、0.1、0概要
磷的检测方法
本标准参照采用国际标准ISO 3946-1982《淀粉及其衍生物磷总含量测定方法》。
1 主题内容与适用范围本标准规定了分光光度法测定淀粉及其衍生物磷总含量的方法。
本标准适用于磷总含量小于5%(m/m)的淀粉及其衍生物样品。
2 术语磷总含量：淀粉及其衍生物样品中磷元素的全部含量。
以样品磷元素总重量对样品原重量的重量百分比来表示。
3 原理通过用硫酸/硝酸混合物破坏有机物质,并将磷酸盐转化为正磷盐,通过加入钼酸铵和还原剂,再形成磷酸钼,在波长825nm上用分光光度计测定吸光度,并转化成磷总含量。
4 试剂在测定过程中,只可使用分析纯的试剂和蒸馏水,或至少纯度相当的水。
4.1 硫酸/硝酸溶液：由一份体积的浓度96%(m/m)、ρ20为1.84g/mL的硫酸与一份体积的浓度65%(m/m)、ρ20为1.38g/mL的硝酸相混合而成。
4.2 硝酸：65%(m/m)、ρ20为1.38g/mL溶液。
4.3 抗坏血酸溶液：50g/L,该溶液只保存于冰箱内,保存时间最多为48h。
4.4 钼酸铵溶液：在一个1L烧瓶中,将10.6g钼酸铵四水化合物(NH4)6·Mo7o4·4H2O溶于500mL 水中,再加入500mL的10mol/L硫酸溶液使之混合并冷却至室温。
4.5 氢氧化钠溶液：10mol/L。
4.6 磷标准溶液4.6.1 储液：称取无水正磷酸二氢钾0.4393g,精确至0.5mg,并溶于水中,再定量地移入1000mL容量瓶中,加水至刻度,并混合均匀,该标准溶液的每mL含100μg的磷。
正磷酸二氢钾使用前须在干燥烘箱内烘1h,干燥烘箱控制在105±2℃,然后放入干燥器中冷却至室温。
4.6.2 标准溶液：用吸管吸取10mL储液(4.6.1)注入250mL的容量瓶内,加水至刻度,摇匀,该标准溶液的每mL含4μg的磷。
5 仪器5.1 容量瓶：容量分别为50、100、200、250和500mL。
酱油腐乳实习报告
实习报告摘要：酱油制作：主要是利用米曲霉来发酵，首先进行菌种的活化，主要是利用PDA 琼脂培养基和麸皮豆粕培养基活化，然后进行制曲，接种发酵，最后淋油，形成酱油。
腐乳制作：主要是利用毛霉来发酵的，首先也是进行菌种的活化，同样是利用PDA琼脂培养基和麸皮豆粕培养基活化，再进行制曲、接种、发酵、搓毛，最后在腌制，进行后发酵，得到酱油。
关键词：米曲霉，发酵，酱油，毛霉，豆腐乳。
腐乳概述豆腐乳，又因地而异称为“腐乳”或“猫乳”。
豆腐乳是一种二次加工的豆制食品，为华人的常见佐菜，或用於烹调。
中国许多省份及港澳、东南亚都有生产，但各不相同，比如苏州的豆腐乳呈黄白色，口味细腻；北京的腐乳，呈红色，偏甜；四川的腐乳，就比较辣。
在湖南因讳虎而称猫乳。
另外还有臭豆腐乳等变种。
桂林豆腐乳是白腐乳的代表，远在宋代，桂林的豆腐乳已很出名。
桂林豆腐乳历史悠久，颇负盛名，是传统特产“桂林三宝”之一。
桂林豆腐乳制做工艺细腻严谨，从磨浆、过滤到定型、压干、霉化都有一套零乱选材也很讲究。
制出豆腐乳块小，质地细滑松软，表面橙黄透明，味道鲜美奇香，营养丰富，增进食欲，帮助消化是人们常用的食品，同时又是享饪的佐料。
桂林豆腐乳有辣椒豆腐乳、五香豆腐乳两大类。
做乳猪、扣肉、狗肉、红烧肉、白切鸡等，均宜用腐乳作配料，香味四溢。
用以凉拌豆腐、皮蛋、椿芽、小笋等，更是风味别具，回味无穷。
1937年5月，在上海举行的全国手工艺产品展览会上，桂林腐乳因其形、色、香、味超群出众而受到特别推崇，并从而畅销国内外。
1983年，被评为全国优质食品。
白腐乳蜚声海外，受到港澳、东南亚及日本人的欢迎。
根据生产工艺不同，豆腐乳发酵类型可分为四种：①腌制腐乳②毛霉腐乳③根霉腐乳④细菌腐乳。
而我们这次主要是用毛霉进行发酵值腐乳，毛霉腐乳是以豆腐坯培养毛霉，称前期发酵，使白色菌丝长满豆腐坯表面，形成坚韧皮膜，积累蛋白酶，为腌制装坛后期发酵创造条件。
毛霉生长要求温度较低，其最适生长温度为16℃左右，一般只能在冬季气温较低的条件下生产毛霉腐乳。
593-2010单质磷标准曲线
《深入探讨593-2010单质磷标准曲线》在分析化学领域中，单质磷是一种常见的化合物，其分析检测对于环境监测、食品安全等领域具有重要意义。
而593-2010单质磷标准曲线则是评定单质磷含量的一项重要方法。
本文将深入探讨593-2010单质磷标准曲线的相关内容，帮助读者更好地理解和运用这一分析方法。
1. 了解593-2010单质磷标准曲线的背景593-2010单质磷标准曲线是由国际标准化组织（ISO）制定，并被广泛应用于单质磷的含量测定。
该标准曲线的制定旨在通过一系列标准试样的测定，建立单质磷与所测特性（如吸光度、浓度等）之间的数学关系，从而实现对单质磷含量的准确测定。
2. 593-2010单质磷标准曲线的实验方法根据ISO xxx标准，593-2010单质磷标准曲线的实验方法包括准备标准试样、测定吸光度、绘制标准曲线等步骤。
实验操作需严格遵循ISO标准，以确保测定结果的准确性和可比性。
3. 593-2010单质磷标准曲线的应用范围593-2010单质磷标准曲线适用于水、土壤、食品等样品中单质磷的含量测定。
通过该标准，可以快速、准确地确定样品中单质磷的含量，为环境监测、农业生产、食品安全等领域提供重要的数据支持。
4. 个人观点和理解作为一项重要的分析方法，593-2010单质磷标准曲线在实际应用中具有广泛的意义。
通过建立标准曲线，可以实现对单质磷含量的准确测定，为相关领域的研究和生产提供可靠的数据支持。
我认为在使用593-2010单质磷标准曲线时，需充分了解ISO标准要求，并结合实际情况进行合理的操作和数据处理，以确保测试结果的准确性和可靠性。
总结回顾通过本文的介绍，读者可以更全面地了解593-2010单质磷标准曲线的相关内容，并对其实验方法、应用范围有了更深入的认识。
建议读者在实际操作中，遵循ISO标准要求，结合实际情况合理进行操作，以取得准确可靠的测试结果。
以上便是关于593-2010单质磷标准曲线的深入探讨，希望对读者有所帮助。
食品中一般成分分析—蛋白质和氨基酸的测定
反应原理
电位滴定法是靠电极电位的突跃来指示滴定终点。 在滴定到达终点前后，滴液中的待测离子浓度往往变 化很大，引起电位的突跃，被测成分的含量仍然通过 消耗滴定剂的量来计算。
反应原理
因此，电位滴定准确度和精密度高，可用于滴定 突跃小或不明显的滴定反应，也可用于有色或浑浊试 样的滴定，电位滴定装置简单、操作方便，可自动化。 使用不同的指示电极，电位滴定法可以进行酸碱滴定， 氧化还原滴定，配合滴定和沉淀滴定。
食品中通常含有多种氨基酸，因此需要测定氨基酸的总 量，不能以氨基酸百分率来表示，只能以氨基酸中所含的 氮即氨基酸态氮的百分率来表示。
氨基酸含量一直是某些发酵产品如调味品的重要质量指 标，也是目前许多保健食品的质量指标之一。
与蛋白质中氨基酸结合状态不同，呈游离状态的氨基酸 的含氮量可直接测定，因此称为氨基酸态氮。
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营养学分类
（2）半必需氨基酸或条件必需氨基酸 人体虽能够合成精氨酸和组氨酸，但通常不能满足 正常的需要，因此，又被称为半必需氨基酸或条件必需 氨基酸，在幼儿生长期这两种是必需氨基酸。 （3）非必需氨基酸 指能由简单的前体合成，不需要从食物中获得的氨 基酸。例如甘氨酸、丙氨酸等氨基酸。
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化学结构分类
仪器及试剂
仪器及试剂
1.仪器 分光光度计、容量瓶、具塞刻度试管、移液管、恒温水浴锅等； 2.试剂 （1）20g/L茚三酮溶液 称取茚三酮1g置于盛有35mL热水的烧杯中使 其溶解，加入40mg氯化亚锡，搅拌过滤作为防腐剂。滤液放置于棕色 瓶中冷暗处过夜，加水至58.04 磷酸盐缓冲溶液 准确称取磷酸二氢钾4.5350g于烧杯中，用少量蒸馏水溶解，移入500mL 容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀备用； 准确称取磷酸氢二钠11.9380g于烧杯中，用少量蒸馏水溶解，移入 500mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀备用； 取上述配制好的磷酸二氢钾溶液10mL与190mL磷酸氢二钠溶液混匀即为 pH8.04磷酸盐缓冲溶液。
动物饲料中磷的测定
1、磷标准液制作 将磷酸二氢钾在105℃干燥1h，冷却后称取0.2195g溶解于水，
定量转入1000ml容量瓶中，加入硝酸3ml，用水稀释至刻度，摇 匀，即为50ug/ml的磷标准液。
（磷标准液50ug/ml）
2、试样的灰化
称取试样适量（预混料1g，浓缩料，全价料，鱼粉2-4g
于坩埚中），精密称定，在电炉上小心炭化，再加入高温炉 于550℃下灼烧3h。
饲料中磷含量的测定
1、检测依据;GB/T 6437—2018
2、适用范围 本标准适用于饲料原料、配合饲料、浓缩饲料和添加剂预混
合饲料中磷的测定。
3、原理 将试样中的有机物破坏，使磷游离出来，在酸性溶液中，用
钒钼酸铵处理，生成黄色的（NH4）3PO4.NH4VO3.16MoO3,在波 长400mm下进行比色测定。
4、标准曲线的制备
准确移取磷标准液，取0、1.0、2.0、5.0、10.0、15.0ml于50ml容量 瓶中，各加钒钼酸铵显色剂10ml，用水稀释至刻度，摇匀，常温下放置 10min以上，以0ml溶液为参比，用10mm比色池，在400nm波长下，用分光光 度计测定各溶液的吸光度。以吸光度为横坐标，磷含量为纵坐标，绘制标 准曲线
试样分解液
移取试样分解液0.5ml， 加入钒钼酸胺显色剂 10ml，用水稀释至刻 度，摇匀
0ml溶液为参比，用 10mm比色池，在 400nm波长下比色
样品中总磷含量（P%）=
m1 V m V1 10 6
100
m---------试样的质量，g； m1----------由标准曲线查得试样分解液磷含量，mg； V1---------移取试样分解液的体积，ml； V-------试样分解液的总体积
水中磷含量的测定(分光光度法法)
环境监测与实验室质量控制实验报告实验三 钼锑抗分光光度法测定磷环境工程一、实验目的和要求1．掌握钼锑抗分光光度法测定磷的方法。
2．练习实际测量以及定容的操作。
3．练习分光光度计的使用。
二、碘量法溶解氧的测定 （一）原理：在一定酸度和锑离子存在的情况下，磷酸根与钼酸铵形成锑磷钼混合杂多酸，它在常温下可迅速被抗坏血酸还原为钼蓝，在700nm 波长下测定。
实验的适宜酸度为0.28～0.38mol•L -1 H 2SO 4，适宜温度为20～60℃，显色时间为30～60min ，可稳定24h ，含磷5×10-6～2×10-4 %范围内符合线性关系。
（二）主要仪器：10支50mL 比色管；试管架；分光光度计；移液管；容量瓶等。
（三）试剂：1．1+1硫酸：浓硫酸与蒸馏水的体积比为1:1混匀。
24H SO ( 1.84ρ=)。
2．抗坏血酸溶液：100g/L （10%）。
3．钼酸盐溶液:13g 钼酸铵((NH 4)6Mo 7O 24·4H 2O)溶于100ml 蒸馏水，0.35g 酒石酸锑钾（KSbC 4H 4O 7·1/2H 2O ）溶于100ml 蒸馏水。
在不断搅拌的情况下把钼酸铵徐徐加到300ml 1+1硫酸中，加酒石酸锑钾溶液混匀。
4．磷酸盐储备溶液：110℃干燥2h 的磷酸二氢钾0.2197g 溶于水，移入1000ml 容量瓶中，加5mL 1+1硫酸定容至1000mL 。
此时浓度为50μg/mL 。
5. 磷酸盐标准溶液：吸取10mL 磷酸盐储备液至250mL 容量瓶中，定容至250mL 。
此时浓度为2μg/mL 。
（四）步骤：1．标准曲线的绘制 取7支50mL 比色管，分别加入磷酸盐标准溶液 ：0ml 、0.5mL 、1.0mL 、3.0mL 、5.0mL 、7mL 、10mL ，加水定容至刻度。
此时系列标准液浓度为：0、0.02、0.04、0.12、0.20、0.28、0.40μg/mL 。
补充实验：水样中磷的测定--标准曲线不消解
补充实验：水样中磷的测定--标准曲线不消解补充实验：水样中磷的测定在天然水和废水中，磷几乎都以各种磷酸盐的形式存在，它们分为正磷酸盐、缩合磷酸盐（焦磷酸盐、偏磷酸盐和多磷酸盐）和有机结合的磷酸盐，它们存在于溶液、腐殖质粒子或水生生物中。
天然水中磷酸盐含量较少。
化肥、冶炼、合成洗涤剂等行业的工业废水及生活污水中常含有较大量的磷。
磷是生物生长必需的元素之一，但水体中磷含量过高（如超过0.2mg/L)，可造成藻类的过度繁殖，直至数量上达到有害的程度（称为富营养化），造成湖泊、河流透明度降低，水质变坏。
水中总磷是指存在于水溶液中的可溶性正磷酸盐、含磷有机物，以及颗粒物中以各种形态存在的磷，称总磷。
水中磷的测定，通常按其存在的形式，分别测定总磷、溶解性正磷酸盐和总溶解性磷。
正磷酸盐的测定，可采用钼锑抗分光光度法分光光度法、氯化亚锡还原钼蓝法和离子色谱法。
总磷的测定方法则有钼锑抗分光光度法、钼酸铵分光光度法等。
测定水中的总磷，水样（包括悬浮物）要加强氧化剂处理，氧化分解水样中有机物及还原性物质，把各种形态的磷转化为正磷酸盐，利于测定。
水样预处理方法有过硫酸钾消解法、硝酸－硫酸消解法、硝酸－高氯消解法等。
根据水样被污染情况，选择不同的预处理方法，若水样严重污染，必须用硝酸－高氯酸分解。
测定总磷的水样采集后，加硫酸酸化至pH< 1保存。
溶解性正磷酸盐的测定，不加任何试剂，于2～5℃保存，在24 h内进行分析。
一、水样的预处理采集的水样立即经0.45 μm 微孔滤膜过滤，其滤液供可溶性正磷酸盐的测定。
滤液经下述强氧化剂的氧化分解，测得可溶性总磷。
取混合水样（包括悬浮物），也经下述强氧化剂分解，测得水中总磷含量。
1、仪器2医用手提式高压蒸汽消毒器或一般民用压力锅（1～1.5 kg/cm）；电炉（2kW）；具塞比色管（50 mL)；移液管（1mL、2mL、5mL、10mL）。
（所有玻璃器皿用稀盐酸或稀硝酸浸泡） 2、试剂（1）5％ (m/V）过硫酸钾溶液：溶解5 g 过硫酸钾于水中，并稀释至100 mL(冷冻保存)。
磷含量标准曲线
磷标液体积V(ml)1248
磷含量(微克)50100200400
吸光度0.0560.1370.2160.417
磷标准曲线绘制磷含量计算公式
y=0.0012x+0.0160随着所配试剂吸光度的变
x=y-0.016/0.0012=(1/0.0012)*y-0.016/0.0012
x=833.33y-13.33/100
x=833.33y-0.133
y为试样的吸光度值代入上面的公式计算，得出标准曲线磷含量值。
最后再按书上的公式计算即可
最后除以样品质量
2017.6.27上午
磷标液体积V(ml)0124
磷含量(微克)050100200
吸光度00.0690.1470.28
x=714.28y-0.714
y为试样的吸光度值代入上面的公式计算，得出标准曲线磷含量值。
最后再按书上的公式计算即可
2017.6.27下午
磷标液体积V(ml)0124磷含量(微克)050100200吸光度00.0990.1750.361
x=558.87y-1.22
y为试样的吸光度值代入上面的公式计算，得出标准曲线磷含量值。
最后再按书上的公式计算即可
16
800
0.776
量计算公式
随着所配试剂吸光度的变化，此公式只做参考用。
标准曲线标定
1、总磷标线4.6磷酸根标准溶液（1ml=0.02mg 34PO-）：称取0.7165g（精确至0.0002g）预先在（100~105）℃干燥过的磷酸二氢钾（优级纯），溶于500ml蒸馏水中，移入1000ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。
再取20.0ml此溶液移入500ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。
6.1标准曲线的绘制分别吸收（4.6）磷酸根标准溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0和6.0ml于6支50ml的比色管中，依次向各管中加入约25ml蒸馏水及（4.3）钼酸铵溶液5.0ml，（4.4）抗坏血酸溶液3.0ml，稀释至刻度，摇匀。
室温放置10分钟，于710nm处，用1cm玻璃比色皿，以试剂空白做参比，测其吸光度。
以吸光度为纵坐标，34PO-毫克数为横坐标绘制标准曲线。
/2、总铁标线4.6铁离子标准溶液（1ml=0.01mg2e F+）:精确称取0.7020g硫酸亚铁铵，准确至0.0001g,溶解在50ml水中，加0.5ml浓硫酸，全部溶解后，转移到1000ml容量瓶中，用水稀释至刻度，1ml此溶液含0.1mg2e F+。
移取10ml上述溶液于100ml容量瓶中，用水稀释至刻度，1ml此溶液含0.01mg2e F+。
6.1标准曲线的绘制6.1.1取一组100ml比色管，依次加入0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5ml2e F+标准溶液，加水约50ml。
6.1.2分别加（4.4）盐酸溶液4ml和（4.1）盐酸羟胺溶液1ml，加（4.3）醋酸－醋酸铵缓冲溶液20ml，摇匀，再加（4.2）邻菲啰啉溶液5ml，用水稀释至刻度，充分混匀，显色10~15分钟。
6.1.3在波长510nm，用3cm比色皿，以试剂空白溶液为对照测各个溶液的吸光度。
6.1.4以2e F+含量为横坐标（mg），相应地吸光度值为纵坐标（E），绘制标准曲线。
/3、浊度标线4.1标准浊度贮备液4.1.1 溶液A—称取1.0000g硫酸肼()2242NH H SO⎡⎤⎣⎦用水溶解，移入100ml容量瓶中，稀释至刻度，摇匀.4.1.2 溶液B—称取10.000g六次甲基四胺()246CH N⎡⎤⎣⎦用水溶解，移入100ml容量瓶中，稀释至刻度，摇匀。
土壤硝态氮测定方法转氨酶、硝态氮、铵态氮等测定方法
土壤硝态氮测定方法转氨酶、硝态氮、铵态氮等测定方法六、氮含量（硝酸盐、亚硝酸盐、游离氨基酸、铵态氮等）的测定：（2g）样品提取液的提取: 称取新鲜植物组织2g，加入15ml无离子水研磨成匀浆，置于45℃振荡机中摇动浸提（或超声波）lh后用5ml无离子水冲洗干净，然后离心或过滤(如含色素需用活性炭脱色)，滤液备用。
备注（lg的经验）：可溶性糖、可溶性蛋白质、VC等需要研磨提取的简单指标也可以使用此提取液按比例测定。
1硝态氮的测定：标准氮试剂：精称KNO3 0.9021g，溶于少量重蒸无离子水中，并定容至250ml，含N 量为500µgNO3一N／ml。
5％水杨酸一硫酸溶液：称取水杨酸5g，溶于100ml浓H2SO4(比重1．84)中，搅拌溶解后贮于棕色瓶内，冰箱中至多保存l周，最好现用现配。
2mol／L NaOH溶液：称取NaOH 80g放入500ml硬质烧杯中，加入重蒸无离子水200ml，溶解后定容至l000ml。
操作方法标准曲线制作取：50ml容量瓶6只(编号)，依次加入标准氮试剂5、l0、l5、20、25、30ml，用无离子水定容，则成为50、100、l50、200、250、300 ug／ml的氮系列标准溶液；再取干沽50ml三角瓶7只，分别装入上述系列溶液0．2ml，剩下的1只三角瓶加入无离水0.2ml(作为O 点)；然后分别加入5％水杨酸一硫酸溶液0.8ml，混匀静置20--30min(显色)；最后加入2mol／L NaOH溶液l9ml，混匀。
冷却后利用751分光光度计，于410nm下比色，记录光密度(OD)值；并以OD 值为纵座标，以标准氮(0、50、l00、150、200、250、300 ug)为横座标，绘制一条标准曲线(通过原点的直线)。
0.1ml滤液＋0.4ml 5％水杨酸一硫酸溶液，混匀静置20--30min(显色)；最后加入2mol／L NaOH溶液9.5ml，混匀。
HHJW10-2005正丁醇氯仿萃取磷钼蓝光度法测定磷量
宝钢集团上海五钢有限公司宝钢特钢检测中心上海市黑色金属质量监督检验站作业指导书主题: 正丁醇氯仿萃取磷钼蓝光度法测定磷量第3版文件编号: HHJW10-2005 正丁醇氯仿萃取磷钼蓝光度法测定磷量1 方法提要试样用硝酸或王水溶解，高氯酸氧化。
在0.63-1.63N的硝酸介质下，磷酸与钼酸铵生成磷钼杂多酸可被正丁醇氯仿混合剂萃取，然后用氯化亚锡将磷钼杂多酸还原为磷钼蓝，并反萃取至水相，测量其吸光度。
2 适用范围本方法适用于铁粉、碳钢、合金钢、高合金钢中磷量的测定。
测定范围：0.001％～0.020％。
3 试剂材料本方法未经特别注明，所用的水为三级以上纯净水，试剂为分析纯。
3.1 高氯酸（ρ1.67g/mL）。
3.2 盐酸（ρ1.19g/mL）。
3.3 硝酸（ρ1.42g/mL）。
3.4 硝酸－盐酸混合酸：一份和两份盐酸（ρ1.19g/mL）混合。
3.5硝酸（1+3）。
3.6 高锰酸钾（4%）。
3.7亚硝酸钠（10%）。
3.8 正丁醇氯仿混合剂（1+3）。
3.9 钼酸铵（4%）。
3.10 氯化亚锡（1%）称取1.0000g氯化亚锡溶解于8ml盐酸（3.2），用水稀释至100ml。
（现用现配）3.11磷标准溶液（200μg/mL）称取0.8780g基准磷酸二氢钾溶于水，定容于1000ml容量瓶。
3.12磷标准溶液（2μg/mL）分取10ml磷标准溶液（3.11）定容于1000ml容量瓶。
4 仪器设备4.1 分光光度计：200～850nm。
4.2 光电分析天平:准确至0.1mg。
4.3 容量瓶:25mL、100mL、1000mL，A级。
4.4 移液管:2mL、5mL、10mL、20mL，A级。
4.5 一般的实验室仪器。
5 分析步骤5.1 试样量称取0.1000g-0.2000g试样。
5.2 空白试验随同试样做空白试验。
5.3 测定5.3.1 将试样（5.1）置于50mL钢铁两用瓶中，加10-15mL硝酸－盐酸混合酸（3.4），加热溶解，加3mL高氯酸（3.1）（需挥铬的试样多加2～3mL高氯酸）蒸发冒高氯酸烟至近干（成浆状不流动）勿焦，稍冷，加16ml硝酸（3.5）溶解盐类，趁热滴加高锰酸钾（3.6）至黑色二氧化锰沉淀出现，煮沸1-2分钟，滴加亚硝酸钠（3.7）至紫红色消失，煮沸1分钟，冷却。
磷的检测
若消化液变黑，需取下再加5ml浓硝酸后继续消化， 若消化液变黑，需取下再加5ml浓硝酸后继续消化， 5ml浓硝酸后继续消化 直到消化液变成透明或淡黄色，且冒出白烟， 直到消化液变成透明或淡黄色，且冒出白烟，在消 化液剩下3 5ml时取下 冷却，定量的转入50ml 时取下， 50ml容 化液剩下3-5ml时取下，冷却，定量的转入50ml容 量瓶中，用蒸馏水定容，此即为待测液。 量瓶中，用蒸馏水定容，此即为待测液。同时做空 白。
实验仪器 :
1）分光光度计 电热板或可调电炉（带石棉网） 2）电热板或可调电炉（带石棉网）
操作步骤:
1） 样品处理 精确称取0.5000g固体样品或2.5g液体样品于 精确称取0.5000g固体样品或2.5g液体样品于 0.5000g固体样品或2.5g 125ml三角瓶中 加几粒玻璃球， 10ml浓硝酸 三角瓶中， 浓硝酸， 125ml三角瓶中，加几粒玻璃球，加10ml浓硝酸，然 待剧烈反应结束后取下， 后放在电热板上加热反应 。待剧烈反应结束后取下， 稍冷却，在加入5ml浓硝酸，5ml浓硫酸 5ml高氯酸 5ml浓硝酸 浓硫酸， 高氯酸， 稍冷却，在加入5ml浓硝酸，5ml浓硫酸，5ml高氯酸， 重新放置电热板上加热反应，此时应把温度调低些。 重新放置电热板上加热反应，此时应把温度调低些。
3）标准曲线的绘制 精确吸取磷的标准贮备液0 2.5， 7.5， 精确吸取磷的标准贮备液0，2.5，5，7.5， 10，15ml，分别放入50ml容量瓶中， 50ml容量瓶中 10，15ml，分别放入50ml容量瓶中，加显色剂定 容后磷浓度分别为0 2.5， 7.5，10， 容后磷浓度分别为0，2.5，5，7.5，10， 15ug/ml 。
允许差： 允许差： 同一样品两次测定值之差不得超过两次测 定平均值的5% 5%。 定平均值的5%。
2421-2013 磷 标准曲线
2421-2013 磷标准曲线磷是生物体中不可或缺的元素，它在植物和动物的生长发育中发挥着重要的作用。
然而，磷的过量排放会导致水体富营养化，严重影响水生态环境的稳定性。
监测和控制水体中磷的浓度是环境保护和水质管理的重要任务之一。
根据《水和废水监测分析方法》中的规定，2421-2013《水质监测第4部分：总磷的测定高分子物质亮光消解-分光光度法》是用于测定水体中总磷含量的标准方法之一。
该标准方法主要适用于地表水、地下水、饮用水、污水和工业废水等水体样品的监测和分析。
其中，磷的测定是通过高分子物质亮光消解-分光光度法进行的，该方法具有操作简便、准确度高、灵敏度强等特点。
2421-2013标准还规定了磷标准曲线的构建和应用。
磷标准曲线是通过一系列已知浓度的磷标准溶液测定其吸光值，进而构建磷浓度与吸光值之间的线性关系曲线。
通过这条标准曲线，可以将未知水样的吸光值对应到磷浓度，从而准确地测定水样中磷的含量。
建立2421-2013标准曲线的步骤如下：1. 准备磷标准溶液。
根据实际需要，配制一系列不同浓度的磷标准溶液，覆盖待测样品中磷浓度的范围。
要求标准溶液的制备精确、浓度准确。
2. 测定磷标准溶液的吸光值。
使用高分子物质亮光消解-分光光度法，分别对各个磷标准溶液进行吸光值的测定。
3. 绘制标准曲线。
将磷标准溶液的浓度作为横坐标，吸光值作为纵坐标，在坐标纸上绘制出浓度与吸光值之间的线性关系曲线。
通常情况下，经过线性拟合，可以得到一条斜率和截距均为已知数值的直线。
4. 验证标准曲线。
用一定浓度的磷标准溶液对标准曲线进行验证，检查曲线的线性程度和预测精度等指标。
2421-2013标准曲线的应用主要包括以下几个方面：1. 测定未知水样中的磷含量。
将未知水样的吸光值代入标准曲线方程，即可计算出该水样中磷的浓度。
2. 质量控制和质量保证。
标准曲线可以用于对测定结果的准确性进行验证，确保实验数据的可靠性。
3. 比较不同水样中磷的含量。
标准曲线法测定浓度的流程
标准曲线法测定浓度的流程一、准备工作。
咱得先把要用的东西都准备好呀。
比如说各种试剂，这就像做饭得先把食材准备齐一样重要。
像标准品啦，溶剂之类的，可不能少。
还有那些仪器，像什么分光光度计之类的，得确保它们能正常工作，可不能到时候掉链子。
这就好比出门前得检查下车子有没有问题一样。
另外呢，像移液管、容量瓶这些小工具也得准备好，而且得保证它们是干净准确的，毕竟它们在这个过程中就像是小助手一样，要是不准确，那整个测定就可能会出岔子。
二、配制标准溶液。
接下来就是配制标准溶液啦。
这一步可关键了呢。
先根据你要测定的物质，算出需要多少标准品和溶剂来配制不同浓度的标准溶液。
比如说，你可能要配制浓度从低到高的一系列标准溶液，就像搭楼梯一样，每个台阶都要有合适的高度。
在这个过程中呀，移液管就派上大用场了，要准确地吸取一定量的标准品或者溶剂，然后小心地转移到容量瓶里。
这个时候一定要仔细哦，要是移液管里残留了太多液体或者没加够量，那配出来的标准溶液浓度就不对啦。
就像你做蛋糕的时候，材料的量没加对，蛋糕可就不好吃啦。
配好标准溶液之后呢，还得好好摇晃容量瓶，让里面的东西混合均匀，就像把调料拌匀一样重要。
三、测量吸光度。
标准溶液配好了，就轮到测量吸光度啦。
把分光光度计打开，预热一下，就像运动员比赛前要热身一样。
然后呢，依次把配制好的标准溶液放到分光光度计里去测量吸光度。
这个时候要注意，放溶液的比色皿得是干净透明的，要是上面有污渍，就会影响测量结果，就好比你戴着脏眼镜看东西，肯定看不清楚呀。
测量的时候呢，要按照仪器的操作步骤来，仔细读取吸光度的值，并且记录下来。
这个值就像是每个标准溶液的“身份证号码”一样，每个浓度的标准溶液都有对应的吸光度。
四、绘制标准曲线。
有了吸光度的值之后，就可以绘制标准曲线啦。
这就像画画一样有趣呢。
把浓度作为横坐标，吸光度作为纵坐标，然后把每个标准溶液对应的点都标在坐标纸上。
然后呢，用一条线把这些点连起来，这条线就是标准曲线啦。
补充实验：水样中磷的测定--标准曲线不消解
补充实验：水样中磷的测定在天然水和废水中，磷几乎都以各种磷酸盐的形式存在，它们分为正磷酸盐、缩合磷酸盐（焦磷酸盐、偏磷酸盐和多磷酸盐）和有机结合的磷酸盐，它们存在于溶液、腐殖质粒子或水生生物中。
天然水中磷酸盐含量较少。
化肥、冶炼、合成洗涤剂等行业的工业废水及生活污水中常含有较大量的磷。
磷是生物生长必需的元素之一，但水体中磷含量过高（如超过0.2 mg/L)，可造成藻类的过度繁殖，直至数量上达到有害的程度（称为富营养化），造成湖泊、河流透明度降低，水质变坏。
水中总磷是指存在于水溶液中的可溶性正磷酸盐、含磷有机物，以及颗粒物中以各种形态存在的磷，称总磷。
水中磷的测定，通常按其存在的形式，分别测定总磷、溶解性正磷酸盐和总溶解性磷。
正磷酸盐的测定，可采用钼锑抗分光光度法分光光度法、氯化亚锡还原钼蓝法和离子色谱法。
总磷的测定方法则有钼锑抗分光光度法、钼酸铵分光光度法等。
测定水中的总磷，水样（包括悬浮物）要加强氧化剂处理，氧化分解水样中有机物及还原性物质，把各种形态的磷转化为正磷酸盐，利于测定。
水样预处理方法有过硫酸钾消解法、硝酸－硫酸消解法、硝酸－高氯消解法等。
根据水样被污染情况，选择不同的预处理方法，若水样严重污染，必须用硝酸－高氯酸分解。
测定总磷的水样采集后，加硫酸酸化至pH< 1保存。
溶解性正磷酸盐的测定，不加任何试剂，于2～5℃保存，在24 h内进行分析。
一、水样的预处理采集的水样立即经0.45 µm 微孔滤膜过滤，其滤液供可溶性正磷酸盐的测定。
滤液经下述强氧化剂的氧化分解，测得可溶性总磷。
取混合水样（包括悬浮物），也经下述强氧化剂分解，测得水中总磷含量。
1、仪器医用手提式高压蒸汽消毒器或一般民用压力锅（1～1.5 kg/cm2）；电炉（2kW）；具塞比色管（50 mL)；移液管（1mL、2mL、5mL、10mL）。
（所有玻璃器皿用稀盐酸或稀硝酸浸泡）2、试剂（1）5％ (m/V）过硫酸钾溶液：溶解5 g 过硫酸钾于水中，并稀释至100 mL(冷冻保存)。
核酸含量测定定磷法
2
1 50 混匀
2
1 50
2
1 50
消煮炉中消化2—6h至溶液无色透明，冷却
沸水浴中加热10min（分解焦磷酸），冷却
6
2. 定磷标准曲线的制定（每人做一份）
每人取18支试管，按照下表平行操作：
1 标准磷溶液/mL dH2O/mL 定磷试剂/mL 0 1.5 1.5 2 0.1 1.4 1.5 3 0.2 1.3 1.5 4 0.3 1.2 1.5 5 0.4 1.1 1.5 6 0.5 1.0 1.5
11
思考题
1. 回收率的意义； 2. 实验所用的水质、试剂质量、定磷试剂的 酸度对测定结果的影响。
12
实验结束
将试管洗净，斜插在试管架上，放在台 面上。 将消化管和橡皮塞洗净，放回原处。 将比色杯洗净，放在实验台上的小平皿 中。 将实验台面擦干净。
13
2
还原产物钼蓝在波长660nm测定 吸光值，当无机磷含量在1—25μg 范围内，光吸收和含磷量成正比。 RNA的含磷量为9.5%，即1μg RNA磷相当于10.5 μg RNA。DNA 的含磷量平均为9.9%。
3
试剂
酵母RNA样品溶液：2000μg/mL
标准磷原液：含磷量为1000 μg/mL 标准磷溶液：含磷量为10 μg/mL，每组用干试管取 15mL 定磷试剂：含硫酸、钼酸铵、Vit.C，浅黄色，如果 变绿则不能使用,每组用100mL烧杯取70mL
核酸定量测定常见的方法
1. 定磷法：将核酸消化，测定其无机磷量，由此计算出核酸 含量，反应灵敏。 2. 紫外吸收法：利用核酸在260nm处有吸收高峰，操作简 便，受蛋白质和核苷酸的干扰影响。 3. 地衣酚法：用于测定RNA的含量，RNA与浓盐酸共热， 降解形成的核糖转变为糠醛，利用地衣酚反应来测定，特异 性差，戊糖均有此反应。 4. 二苯胺法：DNA中的脱氧核糖在酸性溶液中转化为ω -羟 -γ -酮基戊醛，利用二苯胺试剂反应，除脱氧木糖和阿拉伯 糖外其他糖类无此反应。
磷的检测方法
本标准参照采用国际标准ISO 3946-1982《淀粉及其衍生物磷总含量测定方法》。
1 主题内容与适用范围本标准规定了分光光度法测定淀粉及其衍生物磷总含量的方法。
本标准适用于磷总含量小于5%(m/m)的淀粉及其衍生物样品。
2 术语磷总含量：淀粉及其衍生物样品中磷元素的全部含量。
以样品磷元素总重量对样品原重量的重量百分比来表示。
3 原理通过用硫酸/硝酸混合物破坏有机物质,并将磷酸盐转化为正磷盐,通过加入钼酸铵和还原剂,再形成磷酸钼,在波长825nm上用分光光度计测定吸光度,并转化成磷总含量。
4 试剂在测定过程中,只可使用分析纯的试剂和蒸馏水,或至少纯度相当的水。
4.1 硫酸/硝酸溶液：由一份体积的浓度96%(m/m)、ρ20为1.84g/mL的硫酸与一份体积的浓度65%(m/m)、ρ20为1.38g/mL的硝酸相混合而成。
4.2 硝酸：65%(m/m)、ρ20为1.38g/mL溶液。
4.3 抗坏血酸溶液：50g/L,该溶液只保存于冰箱内,保存时间最多为48h。
4.4 钼酸铵溶液：在一个1L烧瓶中,将10.6g钼酸铵四水化合物(NH4)6·Mo7o4·4H2O溶于500mL 水中,再加入500mL的10mol/L硫酸溶液使之混合并冷却至室温。
4.5 氢氧化钠溶液：10mol/L。
4.6 磷标准溶液4.6.1 储液：称取无水正磷酸二氢钾0.4393g,精确至0.5mg,并溶于水中,再定量地移入1000mL容量瓶中,加水至刻度,并混合均匀,该标准溶液的每mL含100μg的磷。
正磷酸二氢钾使用前须在干燥烘箱内烘1h,干燥烘箱控制在105±2℃,然后放入干燥器中冷却至室温。
4.6.2 标准溶液：用吸管吸取10mL储液(4.6.1)注入250mL的容量瓶内,加水至刻度,摇匀,该标准溶液的每mL含4μg的磷。
5 仪器5.1 容量瓶：容量分别为50、100、200、250和500mL。