孕妇母体IgG抗体效价检测操作规程[1]
血型不完全抗体检测卡—母体IgG抗体效价检测
5）37°C孵育15分钟；
6 ）离心5分钟（9rpm2分钟，15rpm3分钟）；
7）肉眼观察结果。
结果判定：
阳性结果：红细胞抗原与相应抗体在微柱凝胶中形成的特异性抗原抗体复合物浮在凝胶表面或胶中，为阳性反应。
5、试剂卡应放在18-25C储存，如若长期放在4C冰箱，建议每1-2个月取出，用专用离心机离心一次，以防止干胶或产生气泡。
6、每日试验前，先取出微柱凝胶卡放置至室温。
7、红细胞悬液的浓度控制在0.5% - 0.8%之间。
**医院文件编号:
**
输全抗体检测卡一母体IgG抗体效价检测=r八 =n =—
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反应原理
微柱凝胶免疫反应的本质是红细胞凝集试验，也可称之微柱凝胶血凝试验（MicrocolumnGel Heamagglutination As，aMGHA ）。
试剂材料：
1、DTT （或2-Me）应用液2、妻子血清3、效价检测卡4、丈夫0.5-0.8%工细胞悬液
阴性结果：红细胞抗原无相应的抗体结合，不出现特异性抗原抗体复合物，红细胞沉于微柱凝胶的尖底部，为阴性反应。
反应强度：特异性红细胞抗原抗体复合物位于胶表面，为强阳性反应；复合物在胶中，为弱阳性反映；愈靠近胶底部颗粒愈小，反应愈弱。
完全溶血凝胶和液体无凝集或未凝集的红细胞，液体出现透明清澈红色
不完全溶血残留红细胞在胶表面、胶中或胶底部，液体出现透明清澈红色
混合凝集红细胞复合物位于凝胶表面和凝胶底部
注意事项
1、血清标本：血清标本必须充分去除纤维蛋白，否则标本中纤维蛋白在微柱凝胶中析出，阻碍红细胞沉淀，呈假阳性反应。
母体IgG抗体效价检测卡操作规程
孕妇血清IgG抗体效价检测操作规程[样本要求]：血样标本最好采用EDTA抗凝（也可以用枸橼酸钠等抗凝），用血清代替血浆进行检测时，用前离心，2000g×10min，防止纤维蛋白干扰反应结果。
[样品准备]：试剂配制：用985ulPH7.4的PBS(或者生理盐水)溶解15ul二巯基乙醇（2-Me）,即为0.2M(2-Me)应用液,密封，避光，置2---6℃保存.红细胞标本的制备：用生理盐水配置红细胞悬液，红细胞最终浓度为1%左右.血清标本的制备：将被检者静脉血采入含兔脑粉或其它促凝剂的试管中,10分钟后离心取上清;或者将被检者静脉血采入无抗凝剂试管中,4℃放置12小时,或37℃放置2小时后离心,2000Rpm,10分钟,取上清.该上清不得有絮状物或沉淀；[配套试剂]：孕妇IgG抗体效价卡，标准A、B、O红细胞（取决于父亲血型），0.2M(2-Me)应用液[实验步骤]1、试剂卡室温平衡，离心一次，标记编号；2、配制中和血浆：先取待检者血浆200微升与生理盐水600微升做4倍稀释，然后取稀释后的标本和0.2M巯基乙醇(2-Me)应用液各200ul，混匀，37℃孵育30---60分钟，（充分破坏标本中IgM类抗体）既得到孕妇的中和血浆。
34、在所有孔中加入50ul健康人O型1%红细胞悬液(测定孕妇ABO血型系统以外IgG血型抗体)或所有孔中加入50ul健康人A型或B型1%红细胞悬液(测定孕妇ABO血型系统IgG血型抗体)，然后加入上述表格中稀释的中和血浆各50ul5、把加有血浆和红细胞的微柱卡置37 ℃专用孵育器孵育15分钟；6、用专用离心机离心5分钟（900r/min2分钟1500r/min3分钟）。
判定结果。
[结果判定]效价值：产生3+凝集的最高稀释度，其倒数即为效价。
[参考值]1、RH系统抗体效价16有临床意义2、ABO系统抗体效价64有临床意义[注意事项]1.据文献报道微柱凝胶法检测出的母体效价值比常规聚凝胺和抗人球蛋白试管法高出1-2个滴度（根据P.L.Mollison所著教材《临床医学中的输血（Blood Transfusion in Clinical Medicine）》）2. 红细胞标本一定不能被细菌污染，否则出现假阳性反应。
三种方法检测孕妇IgG抗体效价的比较
三种方法检测孕妇IgG抗体效价的比较刘广【期刊名称】《海南医学院学报》【年(卷),期】2012(018)007【摘要】目的:比较传统法、聚凝胺法和微柱凝胶卡法检测孕妇血清中IgG抗体效价的差异性.方法:分别运用传统法、聚凝胺法和微柱凝胶卡法检测272例孕妇血清中IgG抗体的效价,计算检测阳性率,以传统法为标准,比较聚凝胺法和微柱凝胺卡法的检测特异度、敏感度.结果:孕妇血清IgG抗A效价阳性率的检测结果分别为:传统法22.8％,聚凝胺法25.0％,微柱凝胶卡法33.8％； IgG抗B效价阳性率的检测结果分别为:传统法19.1％,聚凝胺法20.5％,微柱凝胶卡法31.6％,传统法和聚凝胺法的阳性率差异无统计学意义(P＞0.05),微柱凝胶卡法阳性率明显高于传统法和聚凝胺法(P＜0.01).以传统法为标准,检测孕妇血清IgG抗A效价,聚凝胺法的特异度为96.3％,敏感度为98.1％；微柱凝胶卡法的特异度为63.4％,敏感度为100.0％.结论:检测孕妇血清IgG抗体效价,传统法和聚凝胺法具有一致性,微柱凝胶卡法检测阳性率明显高于传统法和聚凝胺法,在临床检测中应予以特别重视.【总页数】3页(P975-976,980)【作者】刘广【作者单位】浏阳市人民医院输血科,湖南浏阳410300【正文语种】中文【中图分类】R446.61【相关文献】1.三种方法检测O型孕妇IgG抗A(B)效价比较 [J], 林静2.O型血孕妇766例ABO血型IgG抗体效价检测的比较 [J], 陈激扬;王智;陈军3.三种方法检测IgG抗体效价结果比较 [J], 熊超秀;郑玉强4.3种微柱凝胶抗人球蛋白卡在检测孕妇IgG血型抗体效价中的应用比较 [J], 管政;张军;陈丽;郭博5.凝聚胺法与微柱凝集法检测孕妇IgG血型抗体效价应用比较 [J], 潘小良;宋朝晖;梁巧米;王敏因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
妊娠妇女体内IgG抗体效价的检测及临床意义
抗 体 水平 是 预 防 ＨＤ 的 主要 手段 ， 般 认 为 妊 娠 妇女 血 清 中 ｌＧ 抗 Ａ 妇 女 血中 ｌＧ抗 Ａ和 （ ） Ｂ抗体 升 高 而且 ｌＧ分 子量 小 ， Ｎ 一 ｇ ｇ 或 抗 ｇ 可通 过胎 （ ） 价 ≥ １： ４时 ， 儿 有 可 能 受 害 ［ 。 现 对 本 院 ２ ０ Ｂ效 ６ 胎 ０ ９以来 检 测 的 盘 进 入 胎儿 血 液循 环 ， 胎 儿 红 细 胞 上存 在相 关 抗 原 ， 原 抗 体 反 应 则 若 抗
。
结 果 ：１ 血 清 中 ＩＧ 抗 体 效价 的异 常检 出率 为 ３． １ ２ １６ ３ 。不 同年 龄妊 娠 妇女 血 清 抗 Ａ 和抗 Ｂ抗 体 阳性 率 比较 有显 著 性 差异 （ ６ ３份 ｇ ９ ３ ％（ ４ ／１ ） Ｘ
＝１． ８ ５ ７ Ｐ＜ ００ ） 结论 ：妊娠 妇 女产 前检 测 ｌＧ抗 Ａ（ ） 体 的效 价对 于预 防新 生 儿溶 血 具有 重 要意 义 ， 且 随着妊 娠 妇 女 年 龄 的增 大， ． １ ｇ Ｂ抗 并 其发 生
ｇｏ ｌ ｔ ｄ ｏ ｅ ｉｔｎ ｅａ ａｎ ｔＢ ＩＧ ｈ Ｏ ｌｏ ｒｕ ｎｉｏ ｙｔｔｒｄ ｔｃｉｎ Ｒｅｕｔ： ｅ ｕ ＩＧ １ ｎｔ ｏ ｙｔ ｅ ａｅ ｔ ｂ ｏ— ｌｂｕｉ ｍｅｈｏ ｒｒｓｓａ ｃ ｇ ｉｓ ｇ ｔ ｅＡＢ ｂｏ ｄｇｏ ｐａ ｔ ｄ ｉ ｅｅ ｔ ． ｓｌｓ Ｏｆｓ ｒ ｍ ｇ ６ ３ａ ｉ ｄ ｉ ｒｃ ｓ ｓｗｉｈａ ｎ ｒ ｎ ｂ ｅ ｏ ｂ ｔ
ｗｉｈ ｔ ｅ ｉ ｃ ｅ ｓ ｆｗｏ ｅ ｇ ｉｓ ｏ ｃ ｒ ｅ ｃ ｆ ｎ ｏ ｔ ｌｈ ｍｏ ｙ ｉ ． ｔ ｈ ｎ ｒ ａ ｅ ｏ ｍ ｎ ａ ｅ， ｃ ｕ ｒ ｎ ｅ ｏ ｅ ｎａ ａ ｅ ｌ ｓｓ ｔ
孕妇血清IgG抗A(B)抗体效价的检测与分析
参考文献 ： ［ ］ 叶玉坤 ， １ 支修益 ．首届 中 国肺 癌南 北高峰论 坛” ． “ 纪要 ［］ Ｊ． 中华 医学 网 络 杂 志 ，０ ５ ２ ３ ：４ —１８ ２ ０ ， （ ）１ ６ ４ ． ［ ］ Ｇ ｌ Ｓｅ ｈｌ Ｒ． ｎｉｖ ， ｏ ｕｔ ｉ ２ ｏｌ Ｒ， ｅｔ ａ Ａ ｓ ｓ ｉ ｒｂ ｓ ｈｇ ａ ａ ｅ ｔｅ ｈ—ｔｒｕ ｈｕ ｈｏｇ ｏ ｔ ｅ ｃｒｃｅ ｌ ｎｓｅｃ ｓａ ｏ ａ ｎｕｎ 【 ｉ ｌ ｌ ｔ ｈｍｉ ｍｉｅｃｎｅａｓｙｆｒｒｔ ｓｌ Ｊ ．Ｂｏ ｅ ｏ ｕ ｉ ｉ １ ｍｏ
维普资讯
２０ ０ ７年
右 江 民族 医学 院学报
第 ２பைடு நூலகம்
“ 肺癌是我 国的第一大 癌症 ” 这是 国家卫生 部全 国肿瘤 防 ， 办在“ 国家癌症控 制策 略研 究报告” 中发布 的最新 警示信号 … １。
BIOVUE母亲IgG效价测定操作规程
母亲IgG抗体（抗A/抗B）效价检测操作规程一、项目名称、检验方法名称1．项目名称：母亲IgG抗体（抗A/抗B）效价检测2．检验方法名称：柱凝集二、临床意义当母亲血清中存在高效价的IgG型抗A/抗B抗体时，其ABO血型不合胎儿有可能发生新生儿溶血。
母亲血清IgG型抗A/抗B抗体效价测定，有助于预测NHD的发生，因而可以指导临床对NHD进行相应的防治。
三、方法学原理ABO新生儿溶血症常见于母亲为O型的非O型的新生儿，是由于母体含有对抗新生儿血型抗原的IgG型抗A/抗B抗体，该抗体可以通过胎盘进入胎儿体内，从而破坏胎儿的红细胞。
因为人血清中的抗A/抗B抗体通常是IgM型的，要单独测定IgG型抗A/抗B抗体，必需先去除IgM的干扰，所以待检血清先用2-巯基乙醇（2-Me）预先处理，灭活IgM抗体，剩下的IgG型抗体则可通过间接抗人球蛋白试验进行检测。
经过孵育，IgG抗体先致敏A型/B型红细胞，预置在试剂柱中的抗人球蛋白再与IgG抗体的Fc段结合，形成桥连，致敏红细胞因桥连作用而出现凝集反应，经过离心处理，凝集的红细胞被阻隔在分离柱的上方而被判为阳性。
将经过2-Me预处理的待检血清进行倍比稀释，将出现阳性反应的最大稀释度血清的稀释度倒数作为血清抗体效价。
该试剂卡是基于柱凝集的原理而设计。
正常具有抗原的人红细胞将与相应的抗体发生凝集反应，BioVue血型诊断试剂卡的微柱中含有玻璃珠介质和试剂。
加入红细胞并将试剂卡离心后，发生凝集的红细胞会被阻挡在玻璃珠的上面，而未凝集的游离红细胞则会在离心力的作用下通过玻璃珠之间的间隙到达微柱的底部。
四、试剂卡品牌、代号、包装规格、内含物1．试剂卡品牌：美国强生奥索2．代号：BioVue －poly Cassettes3．包装规格：400卡/箱试剂卡(707300);100卡/箱试剂卡(707350)4．试剂成分：抗人球蛋白(lgG,C3b/C3d)检测卡有6根微柱组成，每一柱中含有缓冲液，其成分为牛血清蛋白，大分子增强剂以及0.1％叠氮钠，0.01M的EDTA.成分描述第1～6柱：抗人球蛋白、抗-lgG、-C3d;多特异性抗－lgG(兔)抗－C3b(鼠单克隆)(克隆F7G3) 抗－C3d(鼠单克隆)(克隆C4C7) FD＆C1＃蓝色染料FD＆C5＃黄色染料5．试剂的储存与效期：储存条件：2～25℃环境保存。
孕妇母体IgG抗体效价检测操作规程
孕妇母体IgG抗体效价检测操作规程【原理】新生儿溶血病HDN发生的主要原因在于母子血型不合，血型系统最主要的类型为ABO血型系统，本实验采用微柱凝胶检测孕妇血清中的抗A（B）IgG抗体效价。
【试剂】6%牛血清白蛋白；生理盐水；凝胶卡【标本采集】孕妇静脉血3毫升，肝素钠抗凝，孕妇爱人静脉血3毫升，肝素钠抗凝。
将孕妇标本制作成血清标本，孕妇爱人标本制成0.5%红细胞标本（用生理盐水洗涤后配制）。
本文来源于中华检验医学网【操作步骤】1．取孕妇血清标本50微升加入等体积的牛血清白蛋白，37度水浴温育30～60分钟；2．将血清倍比稀释成9管，依次为1：4、8、16、32、64、128、512、1024、2048管；3．将卡作好标记，在所有孔中加入经处理好的孕妇血清标本50ul；4．然后在所有孔中加入50ul的孕妇爱人0.5%红细胞标本；5．37度孵育15分钟（专用孵育箱）；6．专用离心机离心5分钟；900rpm2分钟，1500rpm3分钟；7．取出判定结果；【结果判定】阳性结果：红细胞凝集块位于凝胶表面或凝胶中；阴性结果：红细胞完全沉降到胶底部，在凝胶管底部形成红细胞扣。
【结果报告】产生1+阳性凝集的最高稀释度，其倒数即为效价。
【注意事项】1．红细胞标本一定不能被细菌污染，否则出现假阳性反应，尽可能应用当日采集的新鲜血做本实验。
如不得不用过夜血或陈旧血，则必须首先用该标本做阴性对照试验，以确定该标本是否可以做本试验。
2．血清标本：血清标本必须充分去除纤维蛋白，否则标本中纤维蛋白在微柱凝胶中析出，阻碍红细胞沉淀，呈假阳性反应。
3．如在微柱凝胶中出现溶血现象，强烈提示为红细胞抗原抗体阳性反应，也不排除其他原因所臻溶血，故对此标本一定认真分析，并向上级主管技术人员报告并讨论。
4．本凝胶卡价格不菲，成本较高，请您节约使用。
【临床意义】有人观察1632例孕妇血清中IgG抗A（B）≥1：64者249例；ABO-HDN发生率随IgG抗A（B）效价升高而上升；HDN与妊娠史的频率有关，随着年龄上升，孕妇个体IgG抗A（B）抗体效价也随之上升。
O型RhD阳性的孕妇血清IgG抗A(B)抗体效价的检测分析
O型RhD阳性的孕妇血清IgG抗A（B）抗体效价的检测分析目的探讨妊娠对O型KhD阳性的孕妇血清IgG抗A（B）抗体效价的影响。
方法选择丈夫血型为非O型的RhD阳性，自身血型为O型RhD阳性的孕产妇1036例，分为两组，对照组为680例首次妊娠妇女，观察组为356例非首次妊娠妇女，两组患者同时进行血清IgG抗A抗体和抗B抗体的效价检测。
结果对照组发现IgG抗A（B）抗体效价>1：64的孕妇154例，占比22.65；观察组发现IgG抗A（B）抗体效价>1：64的孕妇246例，占比69.1%。
结论丈夫血型为非。
型的RhD阳性的情况下，O型RhD阳性的孕妇血清IgG抗A（B）抗体效价有随妊娠次数的增加而增高的趋势。
标签：孕妇；不规则抗体；效价；IgG抗A（B）抗体；新生儿溶血病新生儿溶血病（hemolytie disease of the newbom，HDN）是由于母婴血型不合，母亲体内缺乏胎儿的红细胞血型抗原，当胎儿红细胞通过胎盘进入母体循环后，使母体产生相应的免疫抗体，此抗体又径胎盘进入胎儿血液循环，并与胎儿红细胞膜表面的相应抗原结合，这些被免疫抗体覆盖的红细胞随之在网状内皮系统被巨噬细胞及自然杀伤细胞释放的溶酶体酶溶解而破坏导致的一种溶血病。
ABO血型不合所致的HDN多见于O型母亲所生的A或B型新生儿，這主要是因为O型母亲所产生的抗A或抗B抗体[抗A（B）抗体]为IgG抗体，可通过胎盘进入胎儿循环Ⅲ。
除红细胞外，ABO血型物质广泛存在于自然界，母亲还可通过输血、预防接种、某些食物或细菌的刺激等途径产生IgG抗A（B）抗体。
本研究拟通过研究妊娠次数对O型RhD阳性的孕妇血清IgG抗A（B）抗体效价的影响，探讨IgG抗A（B）抗体效价检测对新生儿溶血病的预防意义，以期为临床提供参考依据。
1.资料与方法1.1一般资料选择丈夫血型为非0型（A型、B型或AB型）的RhD陽性，自身血型为0型RhD阳性的妊娠28 w左右的孕妇1036例，其中首次妊娠的孕妇为680例，非首次妊娠（再次或多次妊娠）的孕妇356例，年龄为21-42岁。
孕妇血清中红细胞血型抗体效价测定标准操作规程
孕妇血清中红细胞血型抗体效价测定标准操作规程1、目的为规范输血科红细胞血型抗体效价测定的技术操作，确保检测结果准确，依据《输血实验室管理程序》4.1.9条款的要求制定本规程。
2、适用范围本文件适用于本院输血科测定IgG抗-A(B)抗体效价，用以评估胎母血型不合妊娠时发生胎儿及新生儿免疫溶血性疾病（HDN）的风险程度及其他临床需要。
3、职责：输血科技术人员负责本实验的技术操作。
4、原理将受检血清（如检测IgG类红细胞血型抗体，先用2-巯基乙醇处理）经连续倍稀释后与表达检测目标抗体对应抗原的试剂红细胞反应，以受检血清凝集试剂红细胞的最高稀释倍数的倒数作为受检血清中检测目标抗体的效价。
5、试剂：生理盐水，0.2mol/L的2-巯基乙醇（2-Me）应用液，博迅的微柱凝胶抗人球蛋白卡，0.8%的A和B型标准试剂红细胞。
6、仪器：XTL-4.7细胞洗涤离心机，博研微术凝胶卡专用孵育器及离心机，电热恒温水浴箱。
7、操作步骤与方法：7.1准备试剂：观察微柱凝胶卡的外观，如有干胶、杂质、气泡不可使用，之后将卡放置室温（18－25℃）平衡，再用专用离心机离心5分钟。
吸取2-Me15μl,加生理盐水至1ml为0.2M 2-Me 应用液。
7.2血清/血浆标本的制备：取血清50ul和150ul的生理盐水作1：4的稀释后再加入0.2M 2-Me应用液200ul混匀，密封试管口，37℃水浴60分钟。
灭活母体血清中IgM时，必须将试管口密封，并经常摇晃试管，以保证灭活效果。
同时用单克隆抗A或抗B作为对照，用来确认2-Me是否有效灭活IgM抗体。
7.3取7只干净试管，做好标记；在第1管中加入处理后的血清200ul和200ul生理盐水，混匀（为1:16稀释）；第2-7管中依次加200ul的生理盐水和前一管中的血清/血浆200ul，做倍比稀释。
7.4将抗人球蛋白卡标记好，从第7管开始到第2管依次将倍比稀释后的相应50ul血清分别加入标记孔中。
抗体效价滴定操作规程
抗体效价滴定操作规程抗体效价是衡量抗体活性和浓度的重要指标，在医药研究和临床应用中有着广泛的应用。
抗体效价滴定操作规程是对进行抗体效价测定的步骤和方法进行规范和描述的文件，下面是一个关于抗体效价滴定操作规程的示例，包括前期准备、试验步骤和结果判定等内容。
一、前期准备1.阅读相关文献和实验说明书，了解抗体效价滴定的原理和方法。
2.了解实验所需物品清单，准备好所需的试剂、试管、移液器等实验器材。
3.检查实验设备，确认设备处于正常工作状态。
4.准备好质控抗体和待测抗体溶液，并按实验要求进行稀释。
二、试验步骤1.根据实验要求，将待测抗体和质控抗体分别加入试管中。
2.通过稀释系列将质控抗体稀释为一系列不同浓度的溶液。
3.充分混匀待测抗体和质控抗体溶液，保证溶液均匀。
4.将待测抗体和质控抗体溶液放置于室温，使其达到相同的温度。
5.取一组试管，依次加入相同体积的质控抗体溶液和待测抗体溶液，混匀后，在每个试管中加入适量的相同抗原。
6.将试管放置于恒温箱或洗涤器中，进行适当的培养时间，使抗原和抗体充分反应。
7.取出试管，加入适量的二抗或底物，并根据实验要求，进行适当的显色反应。
8.根据显色反应的颜色深浅和强度，判断抗体效价的高低。
9.计算抗体效价的对数，确定抗体效价。
三、结果判定1.根据检测结果，得出相应的抗体效价，记录在实验记录表中。
2.将实验结果进行统计和分析，确定最终的抗体效价。
3.根据实验结果，进行抗体效价滴定的质控和质量保证。
四、实验安全1.在操作过程中，注意安全操作，避免溶液的直接接触和飞溅。
2.使用刀片或针头等锐利物品时，要特别注意安全，防止划伤和刺伤。
3.遵守实验室的安全规定，佩戴实验室服装和防护设备，保证实验操作的安全性。
五、实验记录和数据处理1.记录实验过程中的各个步骤和操作细节，包括使用的抗体和试剂名称、溶液浓度和体积等。
2.记录显色反应的颜色深浅和强度，以及操作过程中的问题和异常情况。
3.对实验结果进行统计和分析，计算抗体效价的平均值和标准偏差，并进行结果的合理解释和讨论。
孕妇血清IgG抗A（B）抗体效价的检测与分析
孕妇血清IgG抗A（B）抗体效价的检测与分析【摘要】目的了解血型抗体效价异常在孕妇中所占比率及临床意义。
方法用抗人球蛋白法进行IgG抗A或抗B的ABO血型抗体效价检测。
结果523份血清中IgG抗体效价大于1∶64者有197例，异常检出率为37.67%。
不同孕次、不同年龄孕妇血清抗A和抗B抗体阳性率比较差异有高度显著性(P<0.01)。
结论在产前保健孕妇中进行ABO血型抗体效价检测，及早发现，及时治疗，可减少由于母婴血型不合引起的溶血病发生。
【关键词】幼红细胞增多症，胎儿；IgG抗体；血型目前，由于母婴ABO血型不合致使母体血液中的IgG抗A（B）效价增高而引起的新生儿溶血病（HDN）占整个新生儿溶血病比例的90%以上。
检测孕妇血清中IgG血型抗体水平是间接监测胎儿情况指标之一，是预防HDN的主要手段。
笔者对本院2006年2月以来检测的523例O型孕妇血清IgG抗A（B）抗体检测资料进行分析，报道如下。
1 资料和方法1.1 一般资料2006年2月～7月，在我科实验室检查的O型血孕妇523例，配偶均为非O 型血。
孕妇年龄20～38岁，孕20～35周，身体健康，无肝、肾、血液等方面疾病，无输血史。
主诉第一次妊娠者283例，2次及2次以上妊娠者240例。
其中，1次妊娠者按孕妇年龄分为A组20～29岁共197例，B组30～38岁86例。
1.2 试剂与方法采用深圳市伯劳特生物制品有限公司生产的IgG抗A（B）抗体快速检测试剂盒，其操作步骤严格按其配套使用说明书操作。
1.3 结果判断孕妇血清中抗A或抗B效价≥1∶64为阳性。
1.4 统计学方法计数资料采用χ2检验。
2 结果2.1 受检孕妇血清中IgG抗A（B）效价分布523例孕妇血清中IgG抗A（B）效价≥1∶64者197例，占37.67%，其中≥1∶128者54例，占10.33%，≥1∶256者15例，占2.87%。
IgG抗B-效价测定
IgG抗B-效价测定
IgG抗B-效价测定介绍：
IgG抗B-效价测定是检查孕妇血清中有无IgG性质的抗B抗体并滴定其效价，评
估ABO-HDN发生的可能性。
IgG抗B-效价测定正常值：
IgG抗B效价<1:64
IgG抗B-效价测定临床意义：
异常结果：
IgG抗B效价≥1:64，患儿可能发生ABO-HDN，表现为胎儿水肿和死胎，如流产、早产、死产或出生后数小时内死亡;患儿出现重度贫血、黄疸、核黄疸等症状。
需要检查的人群：夫妇血型不同或母婴血型不同的孕妇
IgG抗B-效价测定注意事项：
不合宜人群：暂无
检查前：空腹，清晨取血为佳
检查时：放松身体，积极配合医生。
IgG抗B-效价测定检查过程：
采集被检对象静脉血，取血清标本50微升加入等体积的牛血清白蛋白，37度水浴温育30～60分钟，倍比稀释后依次将稀释血清分别加入标记的为主凝胶抗人球蛋白卡中，在所有孔中加入等量B型0.5%红细胞悬液后37度孵育5分钟，用专用离心机离心5分钟并观察结果。
传统法与微型凝胶卡法检测孕妇血清IgG抗体效价
传统法与微型凝胶卡法检测孕妇血清IgG抗体效价【摘要】目的比较传统法和微型凝胶卡法在检测孕妇血清igg抗体效价的差异。
方法分别用传统法和微型凝胶卡法对2010年5月至2011年3月来我院就诊的120例o型血孕妇的血清igg抗体效进行检测，从检测结果上对两种方法进行比较。
结果传统法和微型凝胶卡法对102例o型孕妇的血清igg抗体效价的检测结果，传统法测得的均值为42.6，微型凝胶卡法侧得的均值为86.2；传统法测得的igg抗体阳性率为45.83%，微型凝胶卡法侧得的igg抗体阳性率为78.33%，后者与前者相比，p<0.05，差异就有统计学意义。
结论传统法与微型凝胶卡比较，微型凝胶卡检测孕妇血清igg抗体效价灵敏度较高，更加适合于临床应用，操作快捷简单。
【关键词】传统法；微型凝胶卡法；o型血孕妇；igg抗体导致新生儿溶血病（hdn）的重要原因是母婴血型的不合，最常见的是abo血型不合［1］。
hdn是一种免疫系统疾病，其致病原因是与胎儿血型不合的存在于母体中的igg抗体，因此临床上对发生新生儿溶血病可能性的预测，检测孕妇产前的血清igg抗体效价具有重要意义，能够早期诊断hdn，减少其危害。
本文对分别用传统法和微型凝胶卡法对2010年5月至2011年3月来我院就诊的120例o型血孕妇的血清igg抗体效进行检测，比较两种方法的检测结果，现总结如下。
1资料与方法1.1临床资料2010年5月至2011年3月来我院就诊的o型血孕妇120例，年龄为22-43岁，平均年龄为29.4岁，孕期均超过20周。
其中有68例丈夫为a型血，52例丈夫为b型血。
1.2仪器与试剂巯基乙醇和微型凝胶卡试剂盒（上海输血有限公司），全自动血型系统（长春博讯生物技术有限公司），标准a红细胞和b红细胞由实验室自制。
1.3标本处理取0.4ml孕妇的血清于试管中，加入等体积的巯基乙醇混和，塞紧管口后，于37℃水中孵育2h，用0.2ml的生理盐水将用巯基乙醇处理过的血清按照1/8、1/16、1/32、1/64、1/128、1/256、1/512的比例依次进行稀释。
孕妇母体IgG抗体效价检测操作规程
孕妇母体IgG抗体效价检测操作规程
【原理】新生儿溶血病HDN发生的主要原因在于母子血型不合,血型系统最主要的类型为ABO血型系统本实验采用微柱凝胶检测孕妇血清中的抗A、BIgG抗体效价。
【试剂】 6%牛血清白蛋白生理盐水凝胶卡
【标本采集】孕妇静脉血3毫升、孕妇爱人静脉血3毫升EDTA-NA抗凝。
将孕妇标本制作成血清标本孕妇爱人标本制成0.5%红细胞标本用生理盐水洗涤后配制【操作步骤】
1.取孕妇血清标本50微升加入等体积的牛血清白蛋白，37度水浴温育60分钟
2.将血清倍比稀释成9管依次为1 4、8、16、32、64、128、512、1024、2048管
3.将卡作好标记在所有孔中加入经处理好的孕妇血清标本50ul
4. 然后在所有孔中加入50ul的孕妇爱人0.5%红细胞标本
5. 37度孵育15分钟专用孵育箱
6.专用离心机离心5分钟 900rpm2分钟 1500rpm3分钟
7. 取出判定结果
【结果判定】
阳性结果红细胞凝集块位于凝胶表面或凝胶中
阴性结果红细胞完全沉降到胶底部在凝胶管底部形成红细胞扣。
【结果报告】产生1+阳性凝集的最高稀释度其倒数即为效价。
【注意事项】 1.红细胞标本一定不能被细菌污染否则出现假阳性反应尽可能应用当日采集的新鲜血做本实验。
如不得不用过夜血或陈旧血则必须首先用该标本做阴性对照试验以确定该标本是否可以做本试验。
2.血清标本血清标本必须充分去除纤维蛋白否则标本中纤维蛋白在微柱凝胶中析出阻碍红细胞沉淀呈假阳性反应。
3.如在微柱凝胶中出现溶血现象强烈提示为红细胞抗原抗体阳性反应也不排除其他原因所臻溶血故对此标本一定认真分析并向上级主管技术人员报告并讨论。
血清效价测定实验报告
一、实验目的本实验旨在学习血清效价测定的原理和方法，掌握间接ELISA技术的操作步骤，并了解微柱凝胶法检测孕妇血清中IgG抗A（B）抗体效价的室内参考值。
二、实验原理1. 间接ELISA原理：利用间接ELISA技术测定血清效价。
将与抗体相应的抗原固定在载体上，制备固相抗原。
然后加入含有目标抗体的样本，抗体与抗原发生特异性结合。
接着加入酶标二抗，结合到抗原抗体复合物上。
最后加入底物，底物在酶催化下显色。
显色深浅与样本中抗体的含量呈正相关。
2. 微柱凝胶法：通过微柱凝胶法检测孕妇血清中IgG抗A（B）抗体效价。
将样本加入微柱凝胶中，若抗体与抗原结合，则在凝胶中形成可见的凝集现象。
通过观察凝集现象，判断抗体效价。
三、实验材料1. 间接ELISA实验材料：（1）抗原：牛血清白蛋白（BSA）浓度为5mg/ml。
（2）动物：经三次免疫后的BALB/c小鼠。
（3）其他试剂及器材：辣根过氧化物酶标记羊抗鼠lgG抗体、包被液、脱脂奶粉、洗涤液、底物显色液、终止液；手术剪、酒精棉、可拆卸酶标板、聚苯乙烯酶标板条、1.5ml离心管等。
（4）主要设备：离心机、冰箱、酶标仪、微量移液器、恒温箱。
2. 微柱凝胶法实验材料：（1）孕妇血清样本（2）微柱凝胶试剂（3）其他试剂及器材：加样器、离心机、显微镜等。
四、实验步骤1. 间接ELISA实验步骤：（1）包被抗原：将BSA（5mg/ml）稀释到终浓度为1ug/ml，100ul/孔，4℃孵育过夜，洗板3次，拍干。
（2）加入样本：加入含有目标抗体的样本，100ul/孔，37℃孵育1小时。
（3）洗涤：洗板3次，拍干。
（4）加入酶标二抗：加入辣根过氧化物酶标记羊抗鼠lgG抗体，100ul/孔，37℃孵育1小时。
（5）洗涤：洗板3次，拍干。
（6）加入底物：加入底物显色液，37℃孵育30分钟。
（7）终止反应：加入终止液，终止反应。
（8）酶标仪检测：在酶标仪上检测吸光度（OD）值。
2. 微柱凝胶法实验步骤：（1）加样：将孕妇血清样本加入微柱凝胶中。
医院IgG抗A(B)测定规程
医院IgG抗Ａ（Ｂ）测定规程1.试剂和材料1.1.0.2mol/L巯基乙醇应用液：以pH7.4PBS（KH２PO41.73g,Na2HPO4˙12H2O19.35,NaCl8g加蒸馏水至100ml）稀释到100ml,用热合机分装到塑料管中，每段含0.25ml,保存冰箱备用。
1.2.5%A型和B型红细胞悬液1.3.抗球蛋白血清。
2 .操作2.1.吸取受检者血清0.2ml，加巯基乙醇应用液0.2ml,混合，将试管口塞紧，置37℃水浴中2h.2.2.排列小试管一排（10支），每管加pH7.4PBS0.2ml。
2.3.第一管加巯基乙醇应用液处理的血清0.2ml,混合，吸取0.2移至第二管内，混和，以此类推，作倍比稀释至第10管，每管内留有1:4, :8,1:16,…1:2048不同稀释度血清。
2.4.每管各加5%A（或B）型红细胞悬液0.2ml，置37℃致敏一小时。
2.5.结果观察，如在前几管内发现有红细胞凝集者，是由于高效价IgG抗A（B）或IgA抗A（B）所引起，2.6.其余红细胞未见凝集的试管，再以PH7.4PBS洗涤3次，除去洗涤液，留取压积红细胞。
2.7.各管各加pH7.4PBS2滴，混合。
2.8.每管各取1滴，分别移至另一排小试管中，再各加最适稀释度的抗球蛋白血清1滴，混合。
2.9.1000r/min离心1min。
2.10轻轻摇动试管，观察结果，红细胞凝集的最高稀释度的倒数即为IgG抗Ａ（B）效价。
3.附注：3.1 0.01mol/L二硫苏糖醇（DDT）盐水溶液也可用于灭活ＩgM抗体。
3.2当母亲血清中IgG抗A（B）效价大于1:64时提示婴儿有受害的机会，大于1:128时提示婴儿很可能受害，大于1:512时几乎100%发病。
3.3当父亲血型为AB时，应排列小试管两排，第一排加5%A 型红细胞悬液, 第二排加5%B型红细胞悬液,分别测抗A、抗B效价。
抗体效价测定操作规程
抗体效价测定操作规程 Hessen was revised in January 2021抗体效价测定操作规程操作步骤：一．IgG类1.IgG类抗体效价滴定，须取适量血清200μL加等体积2—Me溶液混合，封口，置37℃水浴箱作用60分钟，先稀释血清：200L病人血清600L生理盐水备用，排列6支试管按顺序编号。
第二管开始到第六管加样枪各加生理盐水200L，在第一管和第二管中各加入稀释血清200L，第二管混匀后移出200L转至第三管，以同样操作第六管，从第六管吸出200L暂时保留在另一试管中（可做为第七管），以备必要时作进一步稀释。
这样从第一管到第六管的血清稀释度依次是1:8,1:16,1:32,1:64,1:128,1:256。
2.加红细胞悬液（自配红细胞悬液同反定型试剂）每管各加2％相应红细胞悬液200L，混匀。
（如待检血清抗体为抗A，则加入A型标准红细胞悬液；如待检血清抗体为抗B，则加入B型标准红细胞悬液；如待检血清中既有抗A又有抗B，则倍量稀释两份血清，一份加入A型标准红细胞悬液，另一份加入B型标准红细胞悬液；）3.先直接观察离心结果，之后在每管分别加入凝聚胺试剂盒中的R1液3d，混合30S均匀后，在各加R2液2滴，操作方法同凝聚胺交叉配血法，然后判读结果。
通常以肉眼观察到的第一个“±”的凝集管作为判断的终点，终点血清稀释度的倒数为效价（Titer），或称滴度。
二．IgM1.血清连续倍量稀释法先稀释血清：100L病人血清+700L生理盐水备用，排列6支试管按顺序编号。
第二管开始到第六管加样枪各加生理盐水200L，第一管和第二管中各加入稀释血清200L，第二管混匀后移出200L转至第三管，以同样操作第六管，从第六管吸出200L暂时保留在另一试管中（可做为第七管），以备必要时作进一步稀释。
这样从第一管到第六管的血清稀释度依次是1:8,1:16,1:32,1:64,1:128,1:256。
欧蒙抗核抗体谱(IgG)检测标准操作规程
抗核抗体谱(IgG)检测标准操作规程1.目的规范抗核抗体谱(IgG)检测，保证结果的准确性。
2.适用范围检验科免疫组工作人员。
3.试剂规格名称与组成型号名称：ANA 谱 1靶抗原：nRNP/Sm，Sm，SS-A，Ro-52，SS-B，Scl-70，Jo-1，CENP B，dsDNA，核小体，组蛋白，核糖体 P 蛋白类型：IgG基质：抗原包被的检测膜条规格：16×01(16)4.预期用途：用于体外定性检测人血清或血浆中的抗 nRNP、Sm、SS-A（天然 SS-A 和 Ro-52）、SS-B、Scl-70、PM-Scl、Jo-1、CENP B、PCNA、dsDNA、核小体、组蛋白、核糖体P 蛋白和 AMA M2 共 14 种不同抗原 IgG 类抗体。
5.适应症：夏普综合征（MCTD），系统性红斑狼疮（SLE），干燥综合征，进行性系统性硬化症，多肌炎皮肌炎、重叠综合征、局限型进行性系统性硬化症（CREST 综合征），原发性胆汁性肝硬化。
6.临床意义：抗核抗体识别是各种细胞核组分（细胞核的生化成份）[1,2]，包含核酸、细胞核蛋白及核糖蛋白。
可特征性地出现于许多疾病中，尤其是风湿性疾病[3,4,5]。
在炎症性风湿性疾病中，这些抗核抗体的阳性率在 20%到 100%之间，以风湿性关节炎的阳性率最低，在 20%至40%之间。
因此，ANA 鉴别诊断在对个别风湿疾病的确认十分必要，而且对自身免疫性疾病的进一步诊断也很有价值。
[3,6,7,8,9,10,11]风湿疾病—夏普综合征（混合结缔组织病＝MCTD)[8]—系统性红斑狼疮（SLE)[8, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22]—干燥综合征（原发性干燥综合征）[5],—系统性硬化症（系统性硬皮病,SSc)[1, 23],—局限型系统性硬化症（CREST 综合征） [28]—多肌炎/皮肌炎[12,15]—类风湿性关节炎[5]7.主要组成成分：8.储存条件及有效期： 2-8°C 保存，不要冷冻。
产前IgG抗体效价滴定和抗体筛选的检测分析
World Latest Medicne Information (Electronic Version) 2016 Vo1.16 No.88128・医学检验・产前IgG抗体效价滴定和抗体筛选的检测分析魏晓燕（甘肃省陇南市第一人民医院 输血科，甘肃 陇南 ７４６０００）摘要：目的对血型为O型、RhD阳性的孕妇（准孕妇）进行产前ABO血型系统IgG抗体效价检测分析并对其进行分析评价。
方法临床出现O型血的孕妇（准孕妇），夫妻双方共同采血进行血型测定和孕妇血清IgG抗体效价检测。
结果当孕妇血清中IgG抗-A（抗-B）抗体效价≤64时，所生新生儿患HDN的可能性为0；当抗体效价在128~256之间时，HDN的患病率为9.1%，并可出现疑似病例；当抗体效价≥512时，HDN患病率为51.9%，HDN的患病率随IgG抗体效价梯度的增高逐渐增加。
结论应将产前血型IgG抗体效价检测作为常规检测项目并且定期复查，从而对HDN的发生、发展提供辅助早期诊断依据，对预防和及时进行产前治疗新生儿溶血病有积极作用。
关键词：孕妇；ABO 血型；抗体效价；Rh 血型抗体筛选；新生儿溶血病中图分类号：R197.3 文献标识码：B DOI：10.3969/j.issn.1671-3141.2016.88.110Detection and analysis of titer and antibody screening of prenatal IgG antibodyWei Xiao-yan(Gansu Provincial People's Hospital of Longnan City, , Gansu Province, 746000) ABSTRACT：Objective to type O, RhD positive pregnant women (pregnant) were detected by prenatal IgG antibody titer of ABO blood group system and to analyze it. Methods the clinical appearance of O blood type pregnant women (pregnant), both husband and wife were pregnant women and blood blood determination of serum IgG antibody detection Results when the pregnant women serum IgG anti -A antibody (anti -B) less than or equal to 64, the possibility of newborns suffering from HDN is 0; when the antibody titer was 128~256, the prevalence rate of HDN was 9.1%, and suspected cases occurred when the antibody titer of more than 512; When the HDN prevalence rate was 51.9%, the prevalence rate of HDN increased with the titer of IgG gradient increased. Conclusion the antenatal blood group antibody titer of IgG as a routine test and check regularly, and on the occurrence of HDN, provide the basis for early diagnosis of secondary development, has a positive effect on the prevention and timely prenatal treatment of hemolysis disease of the newborn.KEY WORDS：P regnant women; ABO blood group; Antibody titer；Rh blood group antibody screening；Hemolytic disease of the newborn0 引言妊娠期间，由于母胎的ＡＢＯ血型、Ｒｈ血型及其他血型的不配合，可导致新生儿溶血病，严重时可导致死胎或习惯性流产。
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孕妇母体IgG抗体效价检测操作规程
【原理】
新生儿溶血病HDN发生的主要原因在于母子血型不合，血型系统最主要的类型为ABO血型系统，本实验采用微柱凝胶检测孕妇血清中的抗A（B）IgG抗体效价。
【试剂】
6%牛血清白蛋白；生理盐水；凝胶卡
【标本采集】
孕妇静脉血3毫升，肝素钠抗凝，孕妇爱人静脉血3毫升，肝素钠抗凝。
将孕妇标本制作成血清标本，孕妇爱人标本制成0.5%红细胞标本（用生理盐水洗涤后配制）。
【操作步骤】
1．取孕妇血清标本50微升加入等体积的牛血清白蛋白，37度水浴温育30～60分钟；2．将血清倍比稀释成9管，依次为1：4、8、16、32、64、128、512、1024、2048管；3．将卡作好标记，在所有孔中加入经处理好的孕妇血清标本50ul；
4．然后在所有孔中加入50ul的孕妇爱人0.5%红细胞标本；
5．37度孵育15分钟（专用孵育箱）；
6．专用离心机离心5分钟；900rpm2分钟，1500rpm3分钟；
7．取出判定结果；
【结果判定】
阳性结果：红细胞凝集块位于凝胶表面或凝胶中；
阴性结果：红细胞完全沉降到胶底部，在凝胶管底部形成红细胞扣。
【结果报告】
产生1+阳性凝集的最高稀释度，其倒数即为效价。
【注意事项】
1．红细胞标本一定不能被细菌污染，否则出现假阳性反应，尽可能应用当日采集的新鲜血做本实验。
如不得不用过夜血或陈旧血，则必须首先用该标本做阴性对照试验，以确定该标本是否可以做本试验。
2．血清标本：血清标本必须充分去除纤维蛋白，否则标本中纤维蛋白在微柱凝胶中析出，阻碍红细胞沉淀，呈假阳性反应。
3．如在微柱凝胶中出现溶血现象，强烈提示为红细胞抗原抗体阳性反应，也不排除其他原因所臻溶血，故对此标本一定认真分析，并向上级主管技术人员报告并讨论。
4．本凝胶卡价格不菲，成本较高，请您节约使用。
【临床意义】
有人观察1632例孕妇血清中IgG抗A（B）≥1：64者249例；ABO-HDN发生率随IgG抗A（B）效价升高而上升；HDN与妊娠史的频率有关，随着年龄上升，孕妇个体IgG抗A（B）抗体效价也随之上升。
夫妇间ABO血型不合者应及时检查产前血型抗体水平，用于预防不良妊娠的发生；IgG抗A（B）效价的高低与HDN的发病率成正比；孕妇血清IgG抗A（B）效价≥1：64需定期检测抗体效价水平及时用药降低抗体效价，以预防新生儿溶血病的发生。