动物细胞培养的条件与方法
生物-动物细胞培养
动物细胞培养[高中生物] 1.阐明动物细胞培养的条件和过程。
2.简述干细胞在生物医学工程中有广泛的应用价值。
一、动物细胞培养的条件和过程1．动物细胞工程常用技术(1)常用技术：动物细胞培养、动物细胞融合和动物细胞核移植等。
(2)基础：动物细胞培养。
2．动物细胞培养(1)概念：从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。
(2)培养条件①营养a．合成培养基：将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基。
b．天然成分：血清。
c．培养液：即液体培养基。
②无菌、无毒的环境a．对培养液和所有培养用具进行灭菌处理。
b．在无菌环境下进行操作。
c．培养液需定期更换，以清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。
③温度、pH和渗透压a．温度：以36.5 ℃±0.5 ℃为宜。
b．pH：以pH为7.2～7.4为宜。
c．适宜的渗透压。
④气体环境a．O2作用：细胞代谢所必需的。
b．CO2主要作用：维持培养液的pH。
c．气体组合：95%空气＋5%CO2。
(3)培养过程②过程(4)相关概念①细胞贴壁：悬液中分散的细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上。
②接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞停止分裂增殖的现象。
③原代培养：指动物组织经处理后的初次培养。
④传代培养：分瓶后的细胞培养。
判断正误(1)动物细胞培养体现了动物细胞的全能性( )(2)培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞( )(3)悬浮培养的细胞直接用离心法收集，贴壁细胞需要用胰蛋白酶等处理后再用离心法收集( ) (4)动物细胞培养时，O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH( )答案 (1)× (2)× (3)√ (4)√探讨点 动物细胞培养1．动物细胞培养的原理是细胞增殖。
2．幼龄动物的细胞与老龄动物的细胞比较，分化程度低的细胞与分化程度高的细胞比较，哪些细胞更易于培养？为什么？提示 幼龄动物的细胞和分化程度低的细胞更易培养，原因是这些细胞分裂能力强。
【高中生物】动物细胞培养课件 2022-2023学年高二下学期生物人教版选择性必修3
➢制成细胞悬液
1.将组织分散成单个细胞 ①方法: 机械法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理。 ②原因: 从动物体取出的成块组织中，细胞与细胞靠在一起，彼此限制了 生长和增殖；能使细胞与培养液充分接触，更易进行物质交换。
进行动物细胞培养地常用胰蛋白酶分散细胞，这说明细胞间的物质主要是 什么成分？用胃蛋白酶行吗？
这一阶段的细胞称为细胞株
增殖缓慢，甚至完全停止。
这一阶段的细胞称为细胞系
继续培养 （50代以后）
大部分细胞 衰老死亡
少数细胞会克服细胞寿命的自然极限，获得不死性， 这些细胞已经发生了突变，正朝癌细胞发展。
遗传物质一定改变了
二、动物细胞培养的过程
➢流程图解
取动物组织
制成细胞悬液
用机械的方法，或用胰 蛋白酶、胶原蛋白酶等 处理的方法，将组织分 散成单个细胞
放入CO2培养箱中培养 转入培养液进行原代培养
传代培养
放入CO2 培养箱中培养
有关动物细胞培养的问题
➢酶解法较温和，一定不会对动物细胞造成损伤，对吗？ 不对；使用胰蛋白酶时，要控制好作用时间，因为胰蛋白酶不仅能
分解细胞间的蛋白质，长时间作用还会分解细胞膜蛋白等，对细胞造成 损伤。
1.幼龄动物的细胞与老龄动物的细胞相比，分化程度低的与分化程度高的 细胞相比，哪些细胞更易于培养？为什么？
包括胚胎干细胞和成体干细胞等。
➢胚胎干细胞（简称ES细胞）
分布: 存在于早期胚胎中 举例: ES细胞在体外分化成心肌细胞、神经元细胞
和造血干细胞等 特点: 具有分化为成年动物体内的任何一种类型的
细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官 甚至个体的潜能。
动物细胞的培养条件和培养基
• 2、合成培养基：优点是成分明确，组分稳定，可 大量生产供应。动物细胞培养中常用的有BME、 MEM、DMEM、HAM F12、RPMI 1640以及 ISOCOV、199和McCoy等。
• 缺点：无法替代一些未知成分。 • 解决途径合成培养基中添加小牛血清，彼此互补
的胎牛血清。
• 血清的作用机制可能为：（1）提供有利于细胞生 长增殖所需要的各种生长因子和激素；（2）提供 有利于细胞贴壁所需要的贴附因子和伸展因子； （3）提供可识别金属、激素、维生素和脂类的结 合蛋白；（4）提供细胞生长所必须的脂肪酸和微 量元素。
• 3、无血清培养基
• 无血清培养基的优点如下：①提高了细胞培养的可 重复性，避免，避免了由于血清批之间差异的影响； ②减少了由血清带来的病毒、真菌和支原体等微生 物污染的危险；③供应充足、稳定；
动物细胞的培养条件和培养基
• 为了使细胞培养在体外培养成功，需要一些 基本条件：
（1）绝对无菌操作； （2）足够的营养供应，排除有害物质包括极其
微量的离子掺入； （3）适量氧气供应；
（4）随时清除细胞代谢中产生的有害产物； （5）有良好的适于生存外界环境，包括pH、渗透
压和离子浓度等； （6）及时分种，保持合适的细胞密度。
6、空气
二、动物细胞培养基的 种类和组成
• 细胞种系不同对培养基的要求亦有差异，主要 有三类：天然培养基、合成培养基和无血清培 养基。 1、天然培养基：在细胞培养的早期阶段使用的 培养基，主要为来自天然的材料如血浆凝块、 血清、淋巴液、胚胎浸液以及羊水、腹水等。
• 优点：营养价值高 • 缺点：成分复杂、来源有限、成本较高
《动物细胞培养技术及其应用》 知识清单
《动物细胞培养技术及其应用》知识清单一、动物细胞培养技术的基本概念动物细胞培养，简单来说，就是在体外模拟体内的环境，让动物细胞生长、繁殖和发挥功能的技术。
这可不是一件简单的事情，需要精心创造一系列适宜的条件。
细胞从生物体中取出后，要放在特制的培养基中。
培养基就像是细胞的“美食”，包含了细胞生长所需的各种营养物质，如氨基酸、维生素、无机盐、葡萄糖等。
同时，还得调节好环境的温度、pH 值、氧气和二氧化碳的浓度，给细胞一个舒适的“家”。
二、动物细胞培养的基本流程1、取材首先得从动物体内获取要培养的细胞。
这可以是从胚胎、幼体组织，也可以是成体的某些器官。
但取材的过程得小心翼翼，不能损伤细胞，还要保证细胞的活性。
2、原代培养将取得的细胞放入培养瓶或培养皿中，这就是原代培养的开始。
在这个阶段，细胞会慢慢适应新的环境，开始生长和分裂。
3、传代培养当原代培养的细胞长满了培养容器的表面，就需要把它们分成小份，转移到新的容器中继续培养，这就是传代培养。
4、细胞的冻存与复苏为了长期保存细胞，会把细胞放在低温下冻存。
等到需要的时候，再通过特定的方法让它们复苏，恢复活性。
三、动物细胞培养所需的条件1、无菌环境这是至关重要的一点，任何细菌、真菌或病毒的污染都可能导致细胞培养的失败。
所以，实验操作要在无菌的超净工作台中进行，培养基和培养用具也要经过严格的灭菌处理。
2、合适的培养基培养基的成分要精心调配，既要满足细胞的营养需求，又要维持合适的渗透压和 pH 值。
3、温度和气体环境一般来说，细胞培养的温度在 37℃左右，同时要提供适量的氧气和二氧化碳。
氧气用于细胞呼吸，二氧化碳则有助于维持培养基的 pH 稳定。
4、贴壁和悬浮培养有些细胞需要附着在培养容器的表面才能生长，称为贴壁细胞；而有些细胞可以在培养基中自由悬浮生长。
四、动物细胞培养技术的应用1、生物制品的生产比如疫苗、抗体、生长因子等。
通过大规模培养动物细胞，可以高效地生产这些生物制品，满足医疗和预防疾病的需求。
《动物细胞培养技术及其应用》 导学案
《动物细胞培养技术及其应用》导学案一、学习目标1、了解动物细胞培养的概念和基本条件。
2、掌握动物细胞培养的过程和方法。
3、理解动物细胞培养技术在生物学、医学等领域的应用。
二、知识梳理（一）动物细胞培养的概念动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。
（二）动物细胞培养的基本条件1、无菌、无毒的环境（1）对培养液和所有培养用具进行无菌处理。
（2）通常还要在细胞培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。
（3）定期更换培养液，以便清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。
2、营养（1）合成培养基：通常需加入血清、血浆等一些天然成分。
（2）营养成分：包括糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。
3、温度和 pH（1）温度：哺乳动物多以 365℃±05℃为宜。
（2）pH：多数细胞生存的适宜 pH 为 72 74。
4、气体环境（1）O₂：细胞代谢所必需的，是细胞进行有氧呼吸的条件。
（2）CO₂：维持培养液的 pH。
（三）动物细胞培养的过程1、取材动物细胞培养的材料一般选择胚胎或幼龄动物的器官或组织，因为其细胞的分裂能力强。
2、分散细胞（1）机械法：如用剪刀剪碎组织。
（2）胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理法：使细胞分散开。
3、原代培养将取得的组织用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞，制成细胞悬液，然后放入培养瓶中，在适宜条件下培养。
4、传代培养当细胞贴满瓶壁时，需要重新用胰蛋白酶处理，然后分瓶继续培养，称为传代培养。
（四）动物细胞培养技术的应用1、生物制品的生产（1）生产疫苗：如乙肝疫苗、狂犬疫苗等。
（2）生产干扰素、白细胞介素等药物。
2、基因工程（1）作为受体细胞：表达目的基因。
（2）检测目的基因是否成功导入和表达。
3、细胞工程（1）细胞融合：制备单克隆抗体。
（2）细胞核移植：培育克隆动物。
4、医学研究（1）筛选抗癌药物。
《动物细胞培养技术及其应用》 知识清单
《动物细胞培养技术及其应用》知识清单一、动物细胞培养技术的基本概念动物细胞培养是指从动物体内取出细胞或者组织，在体外模拟体内的生理环境，使其生长、分裂、分化并维持其功能的一种技术。
这一技术为生物学、医学等领域的研究和应用提供了重要的手段。
二、动物细胞培养的基本条件1、无菌环境细胞培养必须在严格的无菌条件下进行，以防止微生物的污染。
这包括对培养器皿、培养基、操作工具等进行灭菌处理，以及在无菌操作箱中进行细胞的接种、传代等操作。
2、合适的培养基培养基为细胞提供了生长所需的营养物质，包括氨基酸、维生素、无机盐、葡萄糖等。
此外，培养基中还常常添加血清，血清中含有多种生长因子和激素，有助于细胞的生长和增殖。
3、适宜的温度和 pH一般来说，动物细胞培养的温度通常在 37℃左右，pH 则在 72 74 之间。
保持稳定的温度和 pH 对于细胞的正常代谢和生长至关重要。
4、气体环境细胞培养需要一定的气体环境，通常是 95%的空气和 5%的二氧化碳。
二氧化碳可以调节培养基的 pH 值。
三、动物细胞培养的基本流程1、取材从动物体内取出所需的组织或细胞，例如通过手术获取肿瘤组织、从血液中分离白细胞等。
2、原代培养将取出的组织或细胞进行处理，使其分散成单个细胞，然后接种到培养器皿中，这就是原代培养。
在原代培养中，细胞会经历一个适应体外环境的过程。
3、传代培养当原代培养的细胞生长到一定密度时，需要将其分成若干份，重新接种到新的培养器皿中继续培养，这就是传代培养。
传代培养可以使细胞不断增殖。
4、细胞冻存与复苏为了长期保存细胞，可以将细胞在液氮中冻存。
当需要使用时，再将其复苏，使其恢复生长和代谢能力。
四、动物细胞培养技术的应用1、生物制品的生产利用动物细胞培养技术可以生产多种生物制品，如疫苗、抗体、蛋白质药物等。
例如，通过培养骨髓瘤细胞来生产单克隆抗体，用于疾病的诊断和治疗。
2、医学研究在医学领域，动物细胞培养技术为疾病的发病机制研究、药物筛选和药效评价提供了重要的实验模型。
高中生物第章细胞工程.1动物细胞培养学案选择性3
动物细胞培养必备知识·素养奠基一、动物细胞培养概念从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。
二、动物细胞培养的条件1。
营养条件:(1)合成培养基：将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成。
（2)天然成分：血清等.（3）一般使用液体培养基,即培养液。
2。
无菌、无毒的环境：(1）培养液和培养用具灭菌处理。
(2）无菌环境下操作.（3）培养液定期更换的目的：清除代谢物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。
3。
温度、pH和渗透压:(1)适宜的温度：哺乳动物多以36。
5±0。
5℃为宜。
(2）适宜的pH:多数细胞生存的适宜pH为7.2～7.4。
(3)适宜的渗透压。
动物细胞培养能否体现动物体细胞的全能性？说明你的理由。
提示:不能。
动物细胞培养只是细胞的增殖，没有体现细胞的全能性。
4.气体环境：95％空气和5%CO2。
（1)O2作用：细胞代谢所必需的。
(2）CO2的主要作用：维持培养液的pH。
三、动物细胞培养的过程填一填：基于动物细胞培养的过程，完成下面的问题:（1)过程①处理方法有:机械法或胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理的方法.(2）过程②为原代培养,培养的动物细胞有两类:①悬浮在培养液中生长增殖;②贴附于某些基质表面生长增殖。
(3）进行过程③时,悬浮培养的细胞直接用离心法收集;贴壁细胞需要使用胰蛋白酶等处理，然后用离心法收集.（4)过程③为传代培养，进行过程③的原因主要有:细胞密度过大、有害代谢物积累、营养物质缺乏和接触抑制等。
四、干细胞培养及其应用1。
干细胞分布：早期胚胎、骨髓和脐带等。
2.种类：胚胎干细胞和成体干细胞。
3.判一判：基于干细胞的类型和应用,判断下列说法的正误。
(1)胚胎干细胞和成体干细胞都具有形成机体的所有组织和器官,甚至个体的潜能. (×)提示:成体干细胞具有组织特异性，只能分化成特定的细胞或组织，不具有发育成完整个体的能力。
高三生物一轮复习动物细胞工程(4)
领域发挥大作用。
5.诱导多能干细胞（iPS细胞） （1）胚胎干细胞的局限性： 胚胎干细胞必须从_胚__胎__中获取 ，涉及_伦_理__问__题__,因而限制了在医学上的应用。
（2）诱导多能干细胞概念： 通过体外诱导小鼠成纤维细胞，获得了类似胚胎干细胞的一种细胞，称为诱导
细胞株 从原代培养细胞群中筛选出进行传代培养的细胞，能传到40-50代，其遗传物质
没有发生变化。
细胞系 传到40-50代后有部分细胞遗传物质发生了变化，具有癌细胞的特点，失去
接触抑制，可能在培养条件下无限制的传代下去。
区别： 细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制， 容易传代培养。
三、干细胞培养及其应用
动物细胞培养
动物细胞 动物细胞融合技术与单克隆抗体
工程
动物细胞核移植技术
克隆动物
一、动物细胞培养
1.动物细胞培养概念：指从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适 宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。2.动物细胞培
养的原理：细胞增殖（有丝分裂）。3.动物细胞培养的地位：动物细胞工程的基础。
上皮细胞
肌细胞
神经细胞
4.干细胞的应用 （1）应用原理：有着自我更新能力及分化潜能的干细胞，与组织、 器官的发育、再生和修复等密切相关。 （2）应用实例： 造血干细胞：治疗白血病及一些恶性肿瘤放疗或化疗后引起的 造血系统、免疫系统功能障碍等疾病
神经干细胞：治疗神经组织损伤和神经系统退行性疾病（如帕 金森病、阿尔茨海默病等）
多能干细胞，简称iPS细胞。
诱导方法：①将特定基因或特定蛋白导入细胞（成纤维细胞以及已分化的T细胞、 B细胞均可）；
动物细胞的培养条件
动物细胞的培养条件动物细胞培养是生物医学研究的重要技术之一，为了维持细胞正常的生长和功能，需要满足以下条件：一、无菌环境动物细胞培养需要在严格的无菌条件下进行，以避免微生物污染。
培养箱、培养器具、操作环境和实验人员的双手等都需要经过严格的消毒灭菌处理，以确保细胞生长环境的无菌。
二、营养物质动物细胞生长需要充足的营养物质，包括氨基酸、维生素、糖、脂肪酸等。
培养基是提供这些营养物质的溶液，它需要根据不同细胞类型的需求进行定制，以支持细胞的正常生长和功能。
三、温度和PH值动物细胞生长需要稳定的温度和酸碱度（PH值）。
大多数动物细胞在温度为37°C左右时生长最好，而适宜的PH值范围为7.2-7.4。
因此，在细胞培养过程中，需要使用温度调节器和酸碱度调节器来维持适宜的温度和PH值。
四、气体环境动物细胞生长需要充足的气体环境，主要是氧气和二氧化碳。
培养箱中的气体环境可以通过调节氧气和二氧化碳的浓度来控制，以支持细胞的正常生长和代谢。
五、细胞贴壁动物细胞培养通常需要在固相表面（如玻璃、塑料等）上进行贴壁生长。
在贴壁过程中，细胞会通过表面受体与培养基中的生长因子等物质相互作用，进而维持细胞的生长和功能。
为了使细胞能够顺利贴壁生长，需要选择适当的细胞接种浓度和培养基。
六、传代培养动物细胞在培养过程中会不断分裂增殖，当培养瓶中的细胞密度达到一定程度时，需要进行传代培养，即将细胞分散并重新接种到新的培养瓶中。
传代培养需要注意细胞的分散度和接种密度，以维持细胞的正常生长和功能。
七、血清和血浆动物细胞培养还需要添加血清或血浆等天然成分，以提供丰富的营养物质和生长因子等，促进细胞的生长和分化。
不同类型的细胞可能需要不同类型的血清或血浆，选择和使用这些天然成分时需要谨慎处理，避免对细胞产生不良影响。
人教(2019)生物选择性必修三(学案+练习)：动物细胞培养
人教(2019)生物选择性必修三(学案+练习)动物细胞培养1．动物细胞培养及其条件(1)动物细胞培养：从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。
(2)动物细胞培养的条件 ①营养：除糖类、氨基酸、无机盐、维生素之外，通常还需加入血清等一些天然成分。
②无菌、无毒环境⎩⎨⎧培养液和培养用具进行灭菌处理及在无菌环境下操作定期更换培养液，清除代谢物③温度、pH 和渗透压适宜的温度：36.5±0.5 ℃；适宜的pH ：7.2～7.4；渗透压也是需要考虑的一个重要环境参数。
④气体环境⎩⎨⎧95%的空气：其中O 2为细胞代谢必需的5%的CO 2：维持培养液的pH 2．动物细胞培养的过程(1)过程(2)体外培养的动物细胞类型①一类细胞能够悬浮于培养液中生长增殖。
②另一类则需要贴附于某些基质表面才能生长繁殖，而且还会发生接触抑制现象，从而使细胞停止分裂增殖。
(3)生长特点①细胞贴壁：将细胞悬液放入培养瓶内，置于适宜环境中培养，悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。
②接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞停止分裂增殖的现象称为细胞的接触抑制。
(4)原代培养和传代培养①原代培养：通常指分瓶之前的细胞培养，即动物组织经处理后的初次培养。
②传代培养：指分瓶之后的细胞培养。
3．干细胞培养及其应用(1)分布：存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中。
(2)类型：胚胎干细胞和成体干细胞等。
(3)胚胎干细胞：简称ES细胞，存在于早期胚胎中，具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能。
(4)成体干细胞①分布：成体组织或器官内。
②类型：骨髓中的造血干细胞、神经系统中的神经干细胞和睾丸中的精原干细胞等。
③特性：一般认为，成体干细胞具有组织特异性，只能分化成特定的细胞或组织，不具有发育成完整个体的能力。
动物细胞培养的基本条件
动物细胞培养的基本条件
1. 培养基，动物细胞培养需要使用含有营养物质的培养基，如DMEM（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）或RPMI 1640等。
培养基中通常含有氨基酸、糖类、维生素、无机盐、生长因子和血清等成分，以支持细胞的生长和增殖。
2. 温度，动物细胞通常在37摄氏度的温度下培养，这是因为这个温度符合动物体内的生理条件，有利于细胞的正常生长和代谢活动。
3. pH值，培养基的pH值通常在7.2-7.4之间，这个范围有利于细胞的生长和代谢，维持细胞内外环境的稳定性。
4. 湿度，细胞培养需要在恒定的湿度下进行，通常采用5%二氧化碳培养箱来维持适当的湿度和CO2浓度，以维持培养环境的稳定。
5. 无菌条件，动物细胞培养需要在严格的无菌条件下进行，以避免细胞受到外源微生物的污染，通常在无菌工作台或生物安全柜中进行操作。
6. 细胞密度，在培养过程中，需要控制细胞的密度，避免细胞
过度增殖或过度稀释，通常通过离心和重新悬浮来调节细胞密度。
总的来说，动物细胞培养的基本条件包括适当的培养基、温度、pH值、湿度、无菌条件和细胞密度等因素，这些条件的合理控制对
于维持细胞的生长和稳定的培养环境至关重要。
通过严格控制这些
基本条件，可以有效地进行动物细胞培养实验，为细胞生物学和生
物医学研究提供可靠的实验基础。
动物细胞培养的条件与方法
动物细胞培养的条件与方法动物细胞培养是现代生物研究和医学技术的重要手段之一。
通过动物细胞培养，可以对细胞进行研究，探索其功能与特性，并为药物研发、组织工程等领域提供基础支持。
然而，要成功进行动物细胞培养，需要满足一定的条件并采用适当的方法。
本文将对动物细胞培养的条件和方法进行探讨。
一、培养环境的条件在进行动物细胞培养之前，首先需要提供适宜的培养环境，包括培养基、温度、湿度、气体和培养容器等条件。
1. 培养基：培养基是支持细胞生长和繁殖所必需的，它提供了细胞所需的营养物质和生长因子。
常用的培养基有DMEM、RPMI 1640、MEM等，不同种类的细胞需要采用相应的培养基。
此外，培养基中还需添加适当浓度的血清、抗生素等。
2. 温度：细胞培养的温度通常为37℃。
这是因为37℃是体内细胞正常生长的温度，也是大多数动物细胞培养的最佳生长温度。
3. 湿度：保持培养环境的适宜湿度是细胞培养的重要条件之一。
细胞培养箱通常提供一定的湿度控制功能，保持培养箱内大气中的水分不蒸发。
4. 气体：细胞培养通常需要提供含有5% CO2的空气，以维持细胞培养环境的酸碱平衡。
5. 培养容器：培养容器应选用无毒、无菌的材料，如培养皿、培养瓶等。
常用的培养容器有塑料培养皿、细胞培养板等。
二、动物细胞培养的方法动物细胞培养的方法多种多样，常见的方法包括原代培养和细胞系培养。
1. 原代培养：原代培养是从组织或器官中直接分离细胞并进行培养。
其主要步骤包括组织切割、消化酶处理、细胞筛选和培养等。
原代培养通常用于研究组织的特性和功能，如动物胚胎细胞、肿瘤细胞的原代培养。
2. 细胞系培养：细胞系培养是通过原代培养获得的细胞，经一系列传代操作形成可长期稳定增殖的细胞系。
其主要步骤包括细胞解剖、细胞分离、细胞悬浮培养和细胞传代等。
细胞系培养常用于药物筛选、疾病研究和生物工程等领域。
在动物细胞培养过程中，还需注意以下几点：1. 避免细胞感染：细胞培养过程中，必须保持无菌操作，避免细胞受到细菌、真菌或病毒的污染。
动物细胞培养的条件与技术改进
动物细胞培养的条件与技术改进动物细胞是生物体内一种基本的结构单元，研究动物细胞的培养条件和技术改进对于生物学研究、药物研发等领域具有重要意义。
本文将探讨动物细胞培养的条件以及当前的技术改进。
一、动物细胞培养的基本条件动物细胞培养需要提供一系列基本条件，以确保细胞的正常生长和分裂。
1. 培养基：培养基是支持细胞生长和提供必需营养的基础物质。
常用的培养基包括无血清培养基和含血清培养基，其中含血清培养基具有更好的细胞生存和增殖能力。
此外，还可以根据需要添加特定的生长因子、维生素和氨基酸等。
2. pH值和温度：动物细胞的培养环境应保持适宜的pH值和温度。
一般来说，细胞培养的pH范围为7.2-7.4，温度为37摄氏度。
这些条件有助于细胞内酶的正常反应和代谢活动。
3. 氧气供应：细胞需要适当的氧气供应以进行呼吸作用和能量产生。
通常情况下，细胞培养使用培养箱或培养器来保持氧气的供应和流通。
4. 防止细菌和真菌污染：动物细胞培养的过程中，必须严格避免细胞培养物受到细菌、真菌等污染。
因此，细胞培养需要在无菌条件下进行，使用无菌操作的培养器具和培养环境。
二、动物细胞培养技术的改进为了更好地满足科研和生产的需要，动物细胞培养技术也在不断改进和发展。
1. 三维培养技术：传统的动物细胞培养主要是在二维平面上进行，但这种方式不能完全模拟细胞在体内的环境和结构。
因此，近年来三维培养技术逐渐兴起。
三维培养通过提供复杂的支架或基质，使细胞能够在三维空间中生长和相互作用，更接近体内环境，有助于提高细胞的功能和稳定性。
2. 过滤培养技术：为了减少细胞培养中的细菌污染，过滤培养技术得到广泛应用。
通过使用孔径只有细胞大小的滤膜，可以有效地过滤掉细胞培养物中的细菌和其他有害微生物。
3. 连续培养技术：传统的细胞培养往往需要经常更换培养基，这不仅浪费培养基，而且对细胞生长和维持稳定的影响较大。
为了解决这一问题，连续培养技术应运而生。
连续培养技术通过调节培养基的流动速度和供应方式，实现细胞不断生长和新陈代谢产物的排出，从而提高细胞产量和培养效果。
2-2-1动物细胞培养(课件)——高中生物人教版(2019)选择性必修三
练习
3.有研究表明“渐冻症”是由突变的基因导致运动神经元合成了某种毒蛋白，从而阻碍了轴突内营养物质的流动。也有最新研究结果表明，利用诱移功能干细胞(iPS细胞) 制作前驱细胞，然后移植给渐冻症实验鼠，能延长其寿命。下列相关描述错误的是( )iPS细胞分化成的多种细胞中所有核酸相同，蛋白质却不完全相同B. iPS细胞分化的实质是基因的选择性表达，细胞种类增多C.若控制运动神经元合成毒蛋白的基因替换,则可以起到良好的治疗作用D.植入神经干细胞，恢复受损的运动功能，也许会在一定程度上使渐冻症病情改善
ES细胞
成体干细胞
成体组织或器官内
造血干细胞（骨髓、外周血和脐带血中）神经干细胞（神经系统中）精原干细胞（睾丸中）
具有组织特异性，只能分化成特定的细胞或组织，不具有发育成完整个体的能力
治疗神经组织损伤和神经系统退行性疾病（如帕金森病、阿尔茨海默病等）
治疗白血病及一些恶性肿瘤放疗或化疗后引起的造血系统、免疫系统功能障碍等疾病
A.使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分B.通常置于含有 和 的混合气体的 培养箱中进行培养C.渗透压也是动物细胞培养过程中需要考虑的一个重要环境参数D.需要对培养液和所有培养用具进行灭菌处理以及在无菌环境下进行操作
B
练习
例2 下列关于动物细胞培养过程的叙述，正确的是( )。
动物细胞培养的条件
保证无菌、无毒的环境
无菌
①对培养液和所有培养用具进行灭菌处理
②在无菌环境下进行操作
定期更换培养液。
无毒
③添加一定量的抗生素
目的：方便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成伤害。
动物细胞培养的条件
温度、PH和渗透压
(1)适宜的温度：哺乳动物多以__________ ℃为宜。(2)适宜的pH：多数细胞生存的适宜pH为_________。(3)适宜的渗透压。
动物细胞培养
10代细胞 50代细胞
细胞株
少数 少数 癌变传代培养源自细胞系遗传物质 改变
无限传代
不能培养成个体。
结果：细胞群，细胞产物
动物细胞生长特性
接触抑制：细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分 裂，数量不断增加，最后形成一个单层，此时细 胞间相互接触，细胞分裂和生长停止，数量不再 部分细胞突变，获 增加。
得不死性，向癌细 胞方向发展，糖蛋 白减少。
C．肽链结构 D．基因结构 3．下列关于蛋白质工程的说法错误的是（
Ｄ
）
A．蛋白质工程能定向改造蛋白质分子的结构，使之更 加符合人类的需要 B．蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行 操作，定向改变分子的结构
C．蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在过的新型蛋 白质分子
D．蛋白质工程与基因工程密不可分，又被称为第二代 基因工程
接触抑制 50代以后 失去接触抑制
什么是原代培养？什么是传代培养？
• 原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为 原代细胞。初次培养称为原代细胞培养。 • 一般10代以内
• 传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配 制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的 培养瓶中继续培养，称为传代培养。 进行传代培养的原因： 接触抑制
Ｂ
4、以下关于蛋白质工程的说法正确的是 A、蛋白质工程以基因工程为基础 B、蛋白质工程就是酶工程的延伸 C 、蛋白质工程就是用蛋白酶对蛋白质进行改 造 D、蛋白质工程只能生产天然的蛋白质
Ａ
5、蛋白质工程的基本流程正确的是①蛋白质分 子结构设计② DNA 合成③预期蛋白质功能④ 根据氨基酸序列推出脱氧核苷酸序列 A．①②③④ B．④②①③ C．③①④② D．③④①②
四、冻存及复苏：
阅读教程P24 总结方法
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动物细胞培养的条件与方法
动物细胞培养是生物科学研究中重要的一部分，可以为细胞生物学、分子生物学和生物医学研究提供重要的实验材料和平台。
在动物细胞
培养过程中，为了保证细胞的生长和繁殖，需要创造适宜的条件和选
择合适的方法。
本文将介绍动物细胞培养的条件和方法，并探讨其在
生物科学研究中的应用。
一、细胞培养的条件
1. 培养基
培养基是细胞培养中必不可少的基础物质，它提供了细胞所需的养
分和生长因子。
常用的细胞培养基包括DMEM（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）、RPMI（Roswell Park Memorial Institute）、MEM （Minimum Essential Medium）等。
这些培养基中含有适宜的氨基酸、
糖类、维生素、微量元素等成分，能够满足细胞正常的生长和代谢需求。
2. pH值和温度
细胞培养的过程中，pH值和温度的控制非常重要。
一般来说，细
胞培养的pH值范围为7.2-7.4，温度常在37摄氏度左右。
过高或过低
的pH值或温度都可能导致细胞受损或死亡。
3. CO2浓度
大部分哺乳动物细胞需要适量的CO2浓度来维持其生长和代谢的平衡。
一般情况下，细胞培养使用的培养箱或培养器会控制CO2浓度在5%左右。
CO2的存在可以帮助维持培养基的酸碱平衡，有利于细胞的正常生长。
4. 营养物质和血清
除了基础培养基外，细胞培养中的营养物质和血清也是细胞正常生长所必需的。
营养物质主要包括氨基酸、葡萄糖、维生素等，而血清则是提供生长因子和其他重要成分的来源。
细胞培养中常用的血清包括胎牛血清（FBS）和新生牛血清（NBS）等。
二、细胞培养的方法
1. 传代培养
传代培养是细胞培养中常用的方法之一，可以使细胞持续增殖。
具体步骤包括将细胞从原培养瓶中解离并收集，然后经过计数后按照一定比例重新接种到新的培养瓶中。
传代培养的频率取决于细胞的生长速度和需求。
2. 凝胶培养
凝胶培养是一种将细胞培养在凝胶基质中的方法。
常用的凝胶基质包括琼脂、明胶和纤维蛋白等。
通过在凝胶中固定细胞，可以模拟组织和器官的三维环境，有助于研究细胞在生理和病理条件下的行为。
3. 增殖诱导培养
增殖诱导培养是通过特定培养条件或添加特定物质来诱导细胞增殖。
例如，对于某些细胞系，可以通过降低血清浓度或添加生长因子来促
进其增殖。
这一方法可以用于扩大细胞数量，方便后续实验的进行。
4. 基因编辑技术的应用
随着基因编辑技术的不断发展，如CRISPR-Cas9等，动物细胞培养也可以用于基因组编辑和功能研究。
通过使用这些技术，可以对细胞
中的特定基因进行精确编辑或靶向敲除，进而探索基因与细胞功能之
间的关系。
综上所述，动物细胞培养作为生物科学研究中常用的实验手段，要
求创造适宜的环境和选择合适的方法。
通过控制培养基、pH值、温度
和CO2浓度等条件，并利用传代培养、凝胶培养、增殖诱导培养等方法，我们可以成功培养出质量稳定的细胞，并利用这些细胞进行生物
学研究，推动科学发展。