第七章 芳胺类药物的分析
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7第七章芳香胺类药物的分析
15
盐酸普鲁卡因 附录Ⅲ 应（附录Ⅲ）
ChP（2000） （ ）
【鉴别】 （1）本品显芳香第一胺类的鉴别反 鉴别】 ） 取供试品约50mg，加稀盐酸1m1，必要时 取供试品约 ，加稀盐酸 ， 缓缓煮沸使溶解，放冷， 缓缓煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L亚硝酸钠 亚硝酸钠 溶液数滴，滴加碱性 萘酚试液数滴 萘酚试液数滴， 溶液数滴，滴加碱性β-萘酚试液数滴，视供试 品不同，生成由橙黄到猩红色沉淀。 品不同，生成由橙黄到猩红色沉淀。
29
（七）红外吸收光谱 盐酸布比卡因 ChP（2000） （ ）
鉴别】 【鉴别】 （3）本品的红外光吸收图谱与对照的 ） 图谱（光谱集 图 一致。 图谱（光谱集324图）一致。
30
四、特殊杂质检查 （一）对乙酰氨基酚杂质检查 对乙酰氨基酚杂质检查 1.乙醇溶液的澄清度与颜色 乙醇溶液的澄清度与颜色 生产工艺用铁粉作还原剂，如带入成品，则 生产工艺用铁粉作还原剂，如带入成品， 铁粉作还原剂 导致对乙酰氨基酚乙醇溶液产生浑浊。 导致对乙酰氨基酚乙醇溶液产生浑浊。 中间体对氨基酚有色氧化物在乙醇中显橙红 中间体对氨基酚有色氧化物在乙醇中显橙红 对氨基酚 色或棕色。 色或棕色。
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限量: ⑥ 限量:
允 杂 存 的 大 许 质 在 最 量 L= ×100% 供 品 试 量 50×40 = ×100% = 0.005% 6 1×10 ×200 5
35
3.对氨基酚 对氨基酚 杂质来源： 杂质来源：乙酰化不完全或贮存不当发生水解
检查原理：对氨基酚在碱性条件下，与亚硝基铁 检查原理 对氨基酚在碱性条件下， 对氨基酚在碱性条件下 氰化钠作用，生成蓝色络合物，与对照液比较。 氰化钠作用，生成蓝色络合物，与对照液比较。
药物分析第七章芳香胺类药物的分析
二、性质 1. 易被氧化 邻苯二酚或苯酚结构, 易被氧化呈色 2. 显碱性
具有烃胺侧链, 显弱碱性, 能与酸成盐
3. 具有旋光性
具有手性碳原子, 具有光学活性
二．鉴别试验 1. 三氯化铁反应、与甲醛-硫酸反应
肾上腺素
盐酸去甲氧 肾上腺素
2.氧化反应
三氯化铁 甲醛—硫酸 0.1mol/LHCl显绿色加氨液 红色 显紫色/紫红色 紫色 玫瑰红---橙红--深棕红
Na2[Fe(CN)5NO] + H2N OH OH
-
Na2[Fe(CN)5H2N
OH] + H2O
检查方法：
样品(1.0g)
甲醇(12) 碱性 Na2[Fe(CN)5NO] 放置 30 操作同样品 比较
对照 (对乙酰氨基酚对照品 1.0g+对氨基酚 50g)
限量：0.005%
(二)盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查
理论上:
实际上:
原因：
＊强酸性可加速反应 ＊重氮盐在酸性下稳定 ＊酸性下避免副反应发生。
ⅲ．反应速度与滴定时温度的关系
一般，温度升高反应速度加快。 但重氮化反应所生成的重氮盐不稳定，
3、体内药物分析 采用HPLC测定病人血中对乙酰氨基酚浓度。 ①标准曲线：测已知浓度的峰面积得：峰面积~浓度 ②取样： ③测定未知样峰面积，并在标准图中查出相应浓度。 ④判断是否超标。
§7.2 苯乙胺类药物分析 一．结构特点（P154表7-3）
肾上腺素：R1=
R2=-CH3
R3=H
肾上腺素
盐酸去氧肾上腺素
a.
当苯环上特别是氨基邻位或对位上有 吸电基时,如 SO 3H COOH NO X 等可使氨基的碱性降低，重氮化反应速 度加快。
芳香胺类药物的分析
水解特性 含酯键（或酰胺键）易水解。 弱碱性 因其脂烃胺侧链为叔胺氮原子，故具有弱碱 性。苯佐卡因例外。 其它特性 本类药物的游离碱多为碱性油状液体或低 熔点固体，难溶于水，可溶于有机溶剂。其盐酸盐 均系白色结晶性粉末,具有一定的熔点，易溶于水和 乙醇，难溶于有机溶剂。
精选ppt
典型药物
对乙酰氨基酚(Paracetamol） 醋氨苯砜 (Acedapsone)
精选ppt
鉴别试验
➢ (一) 重氮化－偶合反应
分子结构中具有芳伯氨基或潜在芳伯氨基的
药物
R1
R3 NHCOR2 酸性溶液
NH2
R3
R4 NaNO2 HCl
R4
N2Cl
R3
R4
NaOH R1
OH R3
R1 HO
NN R4
R1
精选ppt
苯佐卡因、盐酸普鲁卡因和盐酸普鲁卡因胺(盐酸溶液中) + 亚
硝酸钠→直接进行重氮化反应
盐酸普鲁卡因 (Procaine Hydrochloride)
盐酸丁卡因(Tetracaine Hydrochloride)
H 2 N
C O N H C H 2 C H 2 N (C 2 H 5 )2 H C l
盐酸普鲁卡因胺
精选ppt
主要化学性质
芳伯氨基特性 重氮化－偶合反应；与芳醛缩合反应； 易氧化变色等。盐酸丁卡因无此特性。
盐酸普鲁卡因、盐酸丁卡因和苯佐卡因等无此
反应。
2. 与Hg2+反应
精选ppt
3. 羟肟酸铁盐反应 盐酸普鲁卡因胺（芳酰胺 结构）+浓过氧化氢 氧化成羟肟酸+三氯化 铁 溶液显紫红色，随即变为暗棕色至棕黑 色
4. 与三氯化铁反应 对乙酰氨基酚+FeCl3试液→蓝紫色
精选ppt
典型药物
对乙酰氨基酚(Paracetamol） 醋氨苯砜 (Acedapsone)
精选ppt
鉴别试验
➢ (一) 重氮化－偶合反应
分子结构中具有芳伯氨基或潜在芳伯氨基的
药物
R1
R3 NHCOR2 酸性溶液
NH2
R3
R4 NaNO2 HCl
R4
N2Cl
R3
R4
NaOH R1
OH R3
R1 HO
NN R4
R1
精选ppt
苯佐卡因、盐酸普鲁卡因和盐酸普鲁卡因胺(盐酸溶液中) + 亚
硝酸钠→直接进行重氮化反应
盐酸普鲁卡因 (Procaine Hydrochloride)
盐酸丁卡因(Tetracaine Hydrochloride)
H 2 N
C O N H C H 2 C H 2 N (C 2 H 5 )2 H C l
盐酸普鲁卡因胺
精选ppt
主要化学性质
芳伯氨基特性 重氮化－偶合反应；与芳醛缩合反应； 易氧化变色等。盐酸丁卡因无此特性。
盐酸普鲁卡因、盐酸丁卡因和苯佐卡因等无此
反应。
2. 与Hg2+反应
精选ppt
3. 羟肟酸铁盐反应 盐酸普鲁卡因胺（芳酰胺 结构）+浓过氧化氢 氧化成羟肟酸+三氯化 铁 溶液显紫红色，随即变为暗棕色至棕黑 色
4. 与三氯化铁反应 对乙酰氨基酚+FeCl3试液→蓝紫色
07 芳胺类
2）性质：① 水解；②酚羟基特性；③弱碱性；④与重金属离子反应；⑤光谱特征 ①水解 －芳酰氨基易水解，在酸性溶液中水解后具有芳伯氨基，显芳伯氨基特性反应 。 －水解反应的速度受分子结构 （空间位阻） 影响： 对乙酰氨基酚(扑热息痛 )＞利多卡因、 布比卡因。 －部分药物其水解产物易酯化，例如对乙酰氨基酚和醋氨苯砜，水解→醋酸→醋酸乙酯的香味 。 ②酚羟基特性：若具有酚羟基或水解后产生酚羟基，可与 FeCl3 反应，例如对乙酰氨基酚。 ③弱碱性： 若具有脂烃胺侧链且为叔胺氮原子， 则显弱碱性， 可成盐， 可与生物碱沉淀剂发生沉淀反应。 ④与重金属离子反应：盐酸利多卡因和盐酸布比卡因酰氨基上的氮可在水溶液中与铜离子或钴离子络 合，生成有色的配位化合物沉淀。 ⑤光谱特征：本类药物的紫外吸收和红外吸收光谱特征均可供分析用。 1.2 鉴别试验 ① 重氮化-偶合反应；②三氯化铁反应；③与重金属离子反应； ④ 水解产物反应；⑤衍生物熔点测定；⑥吸收光谱
2）乙醇溶液的澄清度与颜色 生产工艺中使用铁粉为还原剂，可能带入成品中，致使乙醇溶液产生浑浊。中间体对氨基酚的有 色氧化产物，在乙醇中显橙红色或棕色。 3）有关物质 －来源：中间体、副产物及分解产物 －方法：TLC －对照品：对氯乙酰苯胺 4）对氨基酚 利用对氨基酚在碱性条件下可与亚硝基铁氰化钠生成蓝色配位化合物，而对乙酰氨基酚无此反应 的特点，与对照品比较，进行限量检查。 1.3.2 盐酸普鲁卡因 ①酸度；②对氨基苯甲酸 对氨基苯甲酸：普鲁卡因易水解，其注射液制备过程中受各种因素影响较易水解，其最终产物可使注 射液变黄，使疗效下降，毒性增加。 1.4 含量测定 ①亚硝酸钠滴定法；②非水滴定法；③紫外分光光度法；④快速荧光测定；⑤高效液相色谱法 1.4.1 亚硝酸钠滴定法 具游离芳伯氨基的药物可用本法直接测定。具潜在芳伯氨基的药物，如具酰胺基药物（对乙酰氨基酚 等）经水解，芳香族硝基化合物（如无味氯霉素）经还原，也可用本法测定。
第7章 芳胺及芳烃胺类药物的分析
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H+ Ar − NHCOR + H 2O → Ar − NH2 + RCOOH
∆
Ar − NO 2 + 6[ H ] Zn + → Ar − NH 2 + 2 H 2 O HCl
Ar − NH2 + NaNO2 + 2HCl → [Ar − N 2 ]Cl + NaCl + 2H 2O
A r
N 2 H
H Cl N O aN 2
O H β− 酚 萘
重 盐 氮
橙 ～ 红 黄 猩 色
11
直接反应：苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、 直接反应：苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、 盐酸普 鲁卡因胺 间接反应：对乙酰氨基酚、醋氨苯砜 间接反应：对乙酰氨基酚、 利多卡因和布比卡因由于空间位阻很难发 生此反应。 生此反应。
H 利多卡因 + CoCl 2 → 细小的亮绿色 ↓
17
+
CH3
+ Cu
CH 3 2 NHCOCH 2H5)2 2N(C CH 3
2+
NCOCH 2N(C 2H5)2 CH3 Cu CH3
(C 2H5)2NCH 2CON CH3 蓝紫色
+Co2+
CH3
CH3
NCOCHN(C H5)2 (C2H5)2NCHCON 2 2 2 CH3 Co 亮绿色
18
CH3
（3）羟肟酸铁的反应
具有芳酰胺结构，被H2O2氧化成羟肟酸，羟肟酸与 FeCl3反应生成紫红色羟肟酸铁，随即变为暗棕色至棕 黑色。如盐酸普鲁卡因胺。
NH2 H2O2 NH2 FeCl3 NH2 Fe
CONHCH2CH2N(C2H5)2
第七章 芳胺类药物的分析.
第七章
芳香胺类药物的分析
基本要求
第一节 芳胺类药物的分析
第二节 苯乙胺类药物分析
练习与思考
基本要求
一、掌握芳胺类、苯乙胺类药物的鉴别 和含量测定的基本原理与方法。
第一节 芳 胺类药物的分析
芳伯氨基未被取代 芳胺类药物分为两类 芳伯氨基被酰化
一、对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构与主要化学性质
（一）基本结构与典型药物
(六)红外吸收光谱法（略）
四、特殊杂质检查
（一）对乙酰氨基酚中的特殊杂质检查
1.乙醇溶液的澄清度与颜色：因其生产工艺用铁粉作还原剂，可 能带入，致使乙醇溶液产生混浊，中间体对氨基酚易氧化产生 有色化物，在乙醇溶液中显橙红色或棕色。
1.乙醇溶液的澄清度与颜色：
检查方法：配制0.1g/ml本品乙醇溶液，溶液应澄清，无色； 如显混浊，与1号浊度标 准液比较，不得更浓；
NH2
Fe
CON(OH)CH 2CH2N(C2H5)2 紫红，暗棕色，棕黑色 3
CON(OH)CH 2CH2N(C2H5)2
3. 与汞离子反应
盐酸利多卡因 + H2NO3 + Hg(NO3)2
对氨基苯甲酸酯 ＋ H2NO3 + Hg(NO3)2
黄色
红色或橙黄色
(四) 水解产物反应
1. 盐酸普鲁卡因的鉴别 盐酸普鲁卡因 + NaOH 普鲁卡因
W×1／1000×5／100×100＝C （g/100ml) C = A/715 ∴ 溶出度＝W／标示量×100％＞80％为合格
（四）HPLC法
此法主要用于盐酸普鲁卡因注射液的测定。因该注射液中 常含有降解产物对氨基苯甲酸；可以苯甲酸为内标同时测定两
者的含量，该法简单准确。
芳香胺类药物的分析
基本要求
第一节 芳胺类药物的分析
第二节 苯乙胺类药物分析
练习与思考
基本要求
一、掌握芳胺类、苯乙胺类药物的鉴别 和含量测定的基本原理与方法。
第一节 芳 胺类药物的分析
芳伯氨基未被取代 芳胺类药物分为两类 芳伯氨基被酰化
一、对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构与主要化学性质
（一）基本结构与典型药物
(六)红外吸收光谱法（略）
四、特殊杂质检查
（一）对乙酰氨基酚中的特殊杂质检查
1.乙醇溶液的澄清度与颜色：因其生产工艺用铁粉作还原剂，可 能带入，致使乙醇溶液产生混浊，中间体对氨基酚易氧化产生 有色化物，在乙醇溶液中显橙红色或棕色。
1.乙醇溶液的澄清度与颜色：
检查方法：配制0.1g/ml本品乙醇溶液，溶液应澄清，无色； 如显混浊，与1号浊度标 准液比较，不得更浓；
NH2
Fe
CON(OH)CH 2CH2N(C2H5)2 紫红，暗棕色，棕黑色 3
CON(OH)CH 2CH2N(C2H5)2
3. 与汞离子反应
盐酸利多卡因 + H2NO3 + Hg(NO3)2
对氨基苯甲酸酯 ＋ H2NO3 + Hg(NO3)2
黄色
红色或橙黄色
(四) 水解产物反应
1. 盐酸普鲁卡因的鉴别 盐酸普鲁卡因 + NaOH 普鲁卡因
W×1／1000×5／100×100＝C （g/100ml) C = A/715 ∴ 溶出度＝W／标示量×100％＞80％为合格
（四）HPLC法
此法主要用于盐酸普鲁卡因注射液的测定。因该注射液中 常含有降解产物对氨基苯甲酸；可以苯甲酸为内标同时测定两
者的含量，该法简单准确。
7芳胺及芳烃胺类药物的分析 newPPT课件
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（4）弱碱性：如利多卡因和布比卡因具有 脂烃胺侧链，显碱性，能与生物碱沉淀剂反 应，可与对乙酰氨基酚和醋氨苯砜区别。 (5) 与重金属离子发生沉淀反应，盐酸利多 卡因可与铜离子或钴离子络合，生成有色的 配位化合物沉淀。
17
三、鉴别试验
（一）重氮化—偶合反应
Ar
NH2
HCl NaNO2
重氮盐
OH- 橙黄～猩红色
后，加10％氢氧化钠溶液1ml，即生成白色
沉淀；加热，变为油状物；继续加热，产生
的蒸气，能使湿润的红色石蕊试纸变为蓝色；
热至油状物消失后，放冷，加盐酸酸化，即
析出白色沉淀。
二乙氨基乙醇
对氨基苯甲酸
29
2、苯佐卡因的鉴别试验
苯佐卡因 ChP（2000）
[鉴别] （2）取本品约0.1g，加氢氧化钠试液5m1， 煮沸，即有乙醇生成；加碘试液，加热，即生成黄色 沉淀，并发生碘仿的臭气。
NH C R2
O R4
11
HO
NHCOCH3
对乙酰氨基酚（扑热息痛）
O
CH 3CO N H
S
O
醋氨苯砜
N H CO CH 3
12
CH3
NHCOCH2N(C2H5)2
CH3
HCl
盐酸利多卡因
13
CH3
C4H9 N
NHCO
HCl
CH3
盐酸布比卡因
14
2、主要化学性质
（1）水解后显芳伯氨基特性：本类药物均具有 芳酰氨基结构，在酸性溶液中可水解为具芳伯 氨基的化合物，并显芳伯氨基特性反应。 水解反应的速度与分子结构有关： 对乙酰氨基酚（对位取代）＞利多卡因、布多 卡因（邻位2个取代基）
（4）弱碱性：如利多卡因和布比卡因具有 脂烃胺侧链，显碱性，能与生物碱沉淀剂反 应，可与对乙酰氨基酚和醋氨苯砜区别。 (5) 与重金属离子发生沉淀反应，盐酸利多 卡因可与铜离子或钴离子络合，生成有色的 配位化合物沉淀。
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三、鉴别试验
（一）重氮化—偶合反应
Ar
NH2
HCl NaNO2
重氮盐
OH- 橙黄～猩红色
后，加10％氢氧化钠溶液1ml，即生成白色
沉淀；加热，变为油状物；继续加热，产生
的蒸气，能使湿润的红色石蕊试纸变为蓝色；
热至油状物消失后，放冷，加盐酸酸化，即
析出白色沉淀。
二乙氨基乙醇
对氨基苯甲酸
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2、苯佐卡因的鉴别试验
苯佐卡因 ChP（2000）
[鉴别] （2）取本品约0.1g，加氢氧化钠试液5m1， 煮沸，即有乙醇生成；加碘试液，加热，即生成黄色 沉淀，并发生碘仿的臭气。
NH C R2
O R4
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HO
NHCOCH3
对乙酰氨基酚（扑热息痛）
O
CH 3CO N H
S
O
醋氨苯砜
N H CO CH 3
12
CH3
NHCOCH2N(C2H5)2
CH3
HCl
盐酸利多卡因
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CH3
C4H9 N
NHCO
HCl
CH3
盐酸布比卡因
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2、主要化学性质
（1）水解后显芳伯氨基特性：本类药物均具有 芳酰氨基结构，在酸性溶液中可水解为具芳伯 氨基的化合物，并显芳伯氨基特性反应。 水解反应的速度与分子结构有关： 对乙酰氨基酚（对位取代）＞利多卡因、布多 卡因（邻位2个取代基）
药物分析7-芳胺类药物的分析
五、含量测定
1．亚硝酸钠滴定法 ． ① 原理 具有芳伯氨基药物，在酸性条件下与 NaNO2 反 应 生 成 重 氮 盐 ， 根 据 消 耗 NaNO2量，计算出含量。 潜在芳伯氨基药物，如芳酰氨基、硝基 等，可先水解或还原，得芳伯氨基后， 再进行测定。
H+ Ar − NHCOR + H 2O → Ar − NH2 + RCOOH
三、鉴别反应
(一)、重氮化-偶合反应 具有芳伯氨基药物，如盐酸普鲁卡因等， 在酸性溶液中与NaNO2TS发生重氮化反 应，再与碱性β-萘酚偶合产生红色偶氮 化合物。 具有潜在芳伯氨基，如对乙酰氨基酚， 水解后可得芳伯氨基，能发生类似反应。
※ 盐酸丁卡因（芳香第二胺结构）与 NaNO2作用生成乳白色N-亚硝基化合物 沉淀。
用HBr时，生成NOBr量大，反应速度快。 但HBr价格贵，用盐酸代替，为加快反 应速度，需加入KBr（催化剂）。
HCl + KBr → HBr + KCl
产生HBr与HNO2反应，可生成大 量NOBr，加快反应速度。
b.
盐酸的用量
芳胺∶盐酸＝1∶1mol 芳胺∶盐酸＝1∶2.5~6mol
理论上: 实际上:
原因： ＊强酸性可加速反应 ＊重氮盐在酸性下稳定 ＊酸性下避免副反应发生。
如酸度不足则没反应的芳胺与生成的重 氮盐产生偶氮氨基化合物，而影响测定 结果。
[A N+ N]Cl－+ H2N A r r A N N NH A + HCl r r
如盐酸量增加，则反应向左进行。 如盐酸浓度太大，反到会使游离芳伯氨 的量减小（成盐），而影响重氮化反应 速度，使反应速度减慢。
TLC法 ① 样品液
乙醚 5 ml 离心 样品 （对乙酰氨基酚） 1g → → 上清液 溶解
第7章-芳香胺类药物
Tetracaine hydrochloride
[ H3C(H 2C)3HN COOCH 2CH 2N(C 2H5)2 ] . HCl
Procainamide hydrochloride
[ H 2N
CONHCH 2CH 2N(C 2H5)2
]
. HCl
（二）酰胺类药物
• 基本结构
R1 R4
R3
O
NH C R2
第1步的快慢与2个方面有关： A、 反应体系中NO+浓度
KBr的加入可产生大量NO+ KBr + HCl → HBr + KCl HNO2 (HONO) + HBr →NOBr + H2O ---- (2) 反应速度:（2）式比（1）式 大约快300倍
B、芳伯氨基的游离程度
Ar-NH2的碱性弱，酸性溶液中成盐的比例 小，游离程度大，重氮化反应速度快； 反之，反应慢
2）酸的种类和用量
种类：多用盐酸 胺类药物的盐酸盐比硫酸盐的溶解度大 盐酸的用量： 适度过量 芳胺类药物：盐酸 = 1：2.5-6 酸度过大，防碍芳伯氨基的游离，影响重氮化 反应速度
过量盐酸的作用： 重氮化反应速度加快 重氮盐在酸性溶液中稳定 防止生成偶氮氨基化合物
Ar-N 2 + Cl - + H 2 N-Ar Ar-N=N-NH-Ar + HCl
共性：芳酰氨基
• 典型药物
HO NHCOCH
3
Paracetamol
NHCOCH N(C2H5)2 2 H3C CH3 ●HCl ●H2O
Lidocaine hydrochloride
醋氨苯砜 Acedapsone
O CH3COHN S O NHCOCH3
第七章 芳香胺类药物的分析
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（二）盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查
注射液制备过程中受灭菌温度、时间、溶液pH值、贮藏时间以及光线和
金属离子等因素的影响，可发生水解反应生成对氨基苯甲酸和 2- 二乙氨基 醇。高温加热，脱羧转化为苯氨，而苯氨又可被氧化为有色物质，使注射 液变黄，疗效下降，毒性增加。
检查方法
流动相
检测器
甲醇-1%醋酸（40：60，pH4.7）用时当天配制。
紫外检测器，检测波长250nm
盐酸普鲁卡因在0.2mg/ml～0.8mg/ml范围内呈线性，其平均回收率为 100.11%±0.56%；含PABA在16μ g/ml～64μ g/ml范围内呈线性，其回收率 为99.96%±0.39%。也适用于溶液的稳定性。
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3. 指示终点的方法 有电位法、永停滴定法、外指示剂法和 内指示剂法等。多采用永停滴定法或外指示剂法指示终点。
（1）永停滴定法：电极应为铂-铂电极系统。终点时溶液中有 微量亚硝酸存在，电极即起氧化还原反应，此时电流计指针突
然偏转，并不再回复，即为滴定终点。
（2）外指示剂法：常用碘化钾-淀粉糊剂或指示液，稍过量的
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（七）体内药物分析
对乙酰氨基酚急性中毒的血药浓度检测分析 对乙酰氨基酚是解热镇痛药 色谱条件： 1.采用Nova-Pak C18柱和Nova-Pak C18预柱 2.流动相为甲醇-水（30：30），流速为0.8ml/min 3.二极管阵列检测器，检测波长254nm。
第七章 芳香胺类药物的分析
本章重点介绍芳胺类、芳烃胺类药物中的苯 乙胺类和芳氧丙醇胺类药物的分析方法及有关 药物质量控制的方法。
第七章-芳香胺类药物分析
C OR2 ∙HCl
（二）主要性质(Feature)
4. 溶解性： ➢游离碱，油状液体或低熔点固体难溶于水，易溶于
有机溶剂； ➢盐酸盐白色结晶粉末，具一点的熔点，易溶于水和
乙醇，难溶于有机溶剂。
第一节 芳胺类药物的分析
二、酰胺类 （一）基本结构与典型药物
R3
R1
NH C R2
O R4
第一节 芳胺类药物的分析
Analysis of Aromatic amines
第七章
芳香胺类 药物的分析
学习要求
❖ 了解：
❖ 苯丙胺类的鉴别试验、特殊杂质检查和含量测定。 ❖ 芳香胺类药物的体内分析方法。
❖ 理解：
❖ 苯乙胺类药物鉴别反应。 ❖ 非水溶液滴定法、比色法、紫外分光光度法和高效液相
色谱法测定本类药物的原理及应用。
二、酰胺类
对乙酰氨基酚(paracetamol)
第一节 芳胺类药物的分析
二、酰胺类
醋氨苯砜(acedapsone)
第一节 芳胺类药物的分析
二、酰胺类
盐酸利多卡因
(lidocaine hydrochloride)
第一节 芳胺类药物的分析
二、酰胺类
盐酸布比卡因
(bupivacaine hydrochloride)
S O
paracetamol
acedapsone
（二）主要性质(Feature)
N H C O C H 3
2.水解产物易酯化： 水解产物(醋酸)+乙醇/硫酸→醋酸乙酯
特殊香味
第一节 芳胺类药物的分析
二、酰胺类
HO
N C CH3 HO
paracetamol
（二）主要性质(Feature)
（二）主要性质(Feature)
4. 溶解性： ➢游离碱，油状液体或低熔点固体难溶于水，易溶于
有机溶剂； ➢盐酸盐白色结晶粉末，具一点的熔点，易溶于水和
乙醇，难溶于有机溶剂。
第一节 芳胺类药物的分析
二、酰胺类 （一）基本结构与典型药物
R3
R1
NH C R2
O R4
第一节 芳胺类药物的分析
Analysis of Aromatic amines
第七章
芳香胺类 药物的分析
学习要求
❖ 了解：
❖ 苯丙胺类的鉴别试验、特殊杂质检查和含量测定。 ❖ 芳香胺类药物的体内分析方法。
❖ 理解：
❖ 苯乙胺类药物鉴别反应。 ❖ 非水溶液滴定法、比色法、紫外分光光度法和高效液相
色谱法测定本类药物的原理及应用。
二、酰胺类
对乙酰氨基酚(paracetamol)
第一节 芳胺类药物的分析
二、酰胺类
醋氨苯砜(acedapsone)
第一节 芳胺类药物的分析
二、酰胺类
盐酸利多卡因
(lidocaine hydrochloride)
第一节 芳胺类药物的分析
二、酰胺类
盐酸布比卡因
(bupivacaine hydrochloride)
S O
paracetamol
acedapsone
（二）主要性质(Feature)
N H C O C H 3
2.水解产物易酯化： 水解产物(醋酸)+乙醇/硫酸→醋酸乙酯
特殊香味
第一节 芳胺类药物的分析
二、酰胺类
HO
N C CH3 HO
paracetamol
（二）主要性质(Feature)
第七章芳香胺类药物的分析PPT课件
.
30
四、特殊杂质检查
（一）对乙酰氨基酚的杂质检查
本品是以对硝基氯苯或 酚为原料，
得对氨基酚后，再乙酰化得对乙酰氨
基酚。
Chp规定除一般杂质（酸度、氯化
物、硫酸盐等）外，还需检查：
.
31
1、乙醇溶液的澄清度与颜色 本品外观应为白色结晶或结晶性粉末，
易溶于乙醇。 2、有关物质
杂质来源 中间体、副产物及分解产物
物 素、盐酸去氧肾上腺素、盐酸多巴
胺等。
.
3
第一节 芳胺类药物的分析
一、对氨基苯甲酸酯类药物
1、基本结构：均具有对氨基苯甲
酸酯的母核。
O
H
R1N
C OR2
.
4
H2N
COOC2H5
苯佐卡因
H2N
COOCH2CH2N(C2H5)2 HCl 盐酸普鲁卡因
.
5
CH3(CH2)3NH
COOCH2CH2N(C2H5)2 HCl
.
×100％
53
（四）比色法
采用重氮化－偶合反应进行测定（略）
（五）盐酸普鲁卡因胺的快速荧光测定
（略）
（六）高效液相色谱法
用高效液相色谱法，以苯甲酸为内标，可
以同时测定盐酸普鲁卡因注射中的普鲁卡因
及其降解产物对氨基苯甲酸（PABA），不需
分离提取，方法准确简便。
（七）体内药物分析
应用示例 对乙酰氨基酚急性中毒的血药
.
36
（二）盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯 甲酸的检查
杂质来源 ─ 水解产生，影响因素如灭 菌温度、时间、溶液pH值、贮藏时间 及光线、金属离子均可加速水解。
检查方法 TLC 杂质对照品法
7-芳胺及芳烃胺类药物的分析 new
杂质来源 检查方法 对氯乙酰苯胺 其他杂质
中间体、副产物及分解产物 TLC 杂质对照品法 参比杂质对照品法
TLC法 ① 样品液
乙醚5ml 离心 样品（对乙酰氨基酚）g 上清液 1 溶解
② 对照液 对氯乙酰苯胺乙醚溶液（50g/ml） ③ 分离系统 硅胶GF254 氯仿-丙酮-甲苯（13∶5∶2）
快
N N Cl
+
-
HNO 2 HBr
HNO 2 HCl
∵ K1 ≈
NOBr H 2 O （1）K1
NOCl H 2 O（2）K2
300 K2
加入KBr，可增大被测溶液中NO+ 的
浓度，所以能加快重氮化反应速度。
（2） 溶液的酸度 在不同酸中重氮化反应的速度为： HBr＞HCl ＞ H2SO4 ＞ HNO3
（五）制备衍生物测熔点
1、测三硝基苯酚衍生物的熔点
盐酸利多卡因 熔点为228～232℃，熔融时同 时分解 盐酸布比卡因与三硝基苯酚反应生成的衍生物， 熔点约为194℃。
2、测硫氰酸盐衍生物的熔点
盐酸丁卡因溶于醋酸钠溶液后，加硫氰酸铵溶 液，即析出结晶性白色沉淀，熔点约为131℃ 。
（六）UV
盐酸布比卡因 ChP（2000）
橙黄～猩红色
1、直接：盐酸普鲁卡因、苯佐卡因、
盐酸普鲁卡因胺
盐酸普鲁卡因 ChP（2000）
[鉴别] （1）本品显芳香第一胺类的鉴别反应
取供试品约50mg，加稀盐酸1m1，必要时缓缓 煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L亚硝酸钠溶液数滴， 滴加碱性β-萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由 橙黄到猩红色沉淀。
N
N Cl
COOCH2CH2N(C 2H5)2
芳香胺类药物的分析
第七章芳香胺类药物的分析芳香胺类药物涉及面较广包括芳胺类、芳烃胺类和芳氧丙醇胺类药物，国内外药典收载的品种也较多，本章重点介绍芳胺类药物的分析方法及有关药物质量控制的方法。
芳胺类药物的基本结构有两类：其中一类为芳伯氨基未被取代，而在芳环对位有取代的对氨基苯甲酸酯类。
代表性药物有苯佐卡因、盐酸普鲁卡因和盐酸丁卡因等局部麻醉药；另一类则为芳伯氨基被酰化，并在芳环对位有取代的酰胺类药物。
代表性药物有对乙酰氨基酚（解热镇痛药）、盐酸利多卡因、盐酸布比卡因（局部麻醉药）和醋氨苯砜（抗麻风药）等。
一、对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构与主要化学性质（一）基本结构与典型药物本类药物主要包括苯佐卡因、盐酸普鲁卡因和盐酸丁卡因等常用局部麻醉药。
它们的分子结构中都具有对氨基苯甲酸酯的母体，基本结构如下：典型药物结构为：苯佐卡因（benzocaine）盐酸普鲁卡因（procaine hydrochloride）盐酸丁卡因（tetracaine hydrochloide）若将盐酸谱鲁卡因分子结构中的酯键改为酰胺健时，则成为抗心律失常药盐酸普鲁卡因胺，其结构如下：它虽然不属于本类药物，因其化学性质与本类药物很相似，也在此一并列入讨论。
（二）主要化学性质1、芳伯氨基特性本类药物因其结构中的芳伯氨基，故显重氮化-偶合反应；与芳醛缩合成Schiff碱的反应；易氧化变色等。
盐酸丁卡因则无此特性。
2、水解特性因分子结构中有酯键（或酰胺键），使其容易水解。
其水解的快慢受光线、温度或酸碱性条件的影响。
除盐酸丁卡因水解产物对丁氨基苯甲酸（BABA）外，上述其余药物的水解产物主要为对氨基苯甲酸（PABA）。
3、弱碱性除苯佐卡因外，因其脂烃胺侧链为叔胺氮原子，故具有弱碱性。
因此能与生物碱沉淀剂发生沉淀反应；但在水溶液中不能用标准酸直接滴定，在非水溶剂中则能滴定。
4、其它特性本类药物因苯环上具有芳伯氨基或同时具有脂烃胺基侧链，其游离碱多为碱性油状液体或低熔点固体，难溶于水，可溶于有机溶剂。
《药物分析学》第七章芳香胺类药物的分析复习检测题及答案
《药物分析学》第七章芳香胺类药物的分析复习检测题一、选择题1．盐酸普鲁卡因常用鉴别反应有（）A、重氮化－偶合反应B、氧化反应C、磺化反应D、碘化反应2．不可采用亚硝酸钠滴定法测定的药物是（）A、Ar－NH2B、Ar－NO2C、Ar－NHCORD、Ar－NHR3．亚硝酸钠滴定法测定时，一般均加入溴化钾，其目的是（）A、使终点变色明显B、使氨基游离C、增加NO+的浓度D、增强药物碱性E、增加离子强度4．亚硝酸钠滴定指示终点的方法有若干，我国药典采用的方法为（）A、电位法B、外指示剂法C、内指示剂法D、永停滴定法E、碱量法5．关于亚硝酸钠滴定法的叙述，错误的有（）A、对有酚羟基的药物，均可用此方法测定含量B、水解后呈芳伯氨基的药物，可用此方法测定含量C、芳伯氨基在碱性液中与亚硝酸钠定量反应，生成重氮盐D、在强酸性介质中，可加速反应的进行E、反应终点多用永停法指示6．对乙酰氨基酚的化学鉴别反应，下列哪一项是正确的（）A、直接重氮化偶合反应B、直接重氮化反应C、重铬酸钾氧化反应D、银镜反应E、以上均不对7．用外指示剂法指示亚硝酸钠滴定法的终点，所用的外指示剂为（）A、甲基红—溴甲酚绿指示剂B、淀粉指示剂C、酚酞D、甲基橙E、以上都不对8．亚硝酸钠滴定法中将滴定尖端插入液面下约2/3处，滴定被测样品。
其原因是（）A、避免亚硝酸挥发和分解B、防止被测样品分解C、防止重氮盐分解D、防止样品吸收CO2E、避免样品被氧化9．肾上腺素中酮体的检查，所采用的方法为（）A、HPLC法B、TLC法C、GC法D、UV法E、IR法10．用外指示剂法指示亚硝酸钠滴定法的终点，所用的外指示剂为（）A、甲基红—溴甲酚绿指示剂B、淀粉指示剂C、酚酞D、甲基橙E、碘化钾—淀粉指示剂11．用永停滴定法指示亚硝酸钠滴定法的终点，所用的电极系统为（）A、甘汞—铂电极系统B、铂—铂电极系统C、玻璃电极—甘汞电极D、玻璃电极—铂电极E、银—氯化银电极12．盐酸普鲁卡因注射液易水解产生特殊杂质（）A、ASANB、EATCC、ASAD、SAE、以上都不对13．盐酸普鲁卡因注射液易水解产生特殊杂质（）A、PABAB、ASANC、EATCD、ETCE、ASA14．对乙酰氨基酚由于贮存不当发生水解或酰化不定全均易引入对氨基酚。
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四、含量测定
(一) 非水溶液滴定法 本类药物的原料药多采用此法。本法重点将在第八章讨论。 1. 重酒石酸去甲肾上腺素的测定 相当于［B］的有机酸盐可直接滴定。 2.盐酸克仑特罗的测定 相当于［B］的HX酸盐不能直接滴定，需加Hg(Ac)2处理后滴定。 3.硫酸沙丁醇的测定 相当于［B］的H2SO4盐可直接滴定, 也可处理后滴定。
第七章
芳香胺类药物的分析
基本要求
第一节 芳胺类药物的分析
第二节 苯乙胺类药物分析
练习与思考
基本要求
一、掌握芳胺类、苯乙胺类药物的鉴别 和含量测定的基本原理与方法。
第一节 芳 胺类药物的分析
芳伯氨基未被取代 芳胺类药物分为两类 芳伯氨基被酰化
一、对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构与主要化学性质
（一）基本结构与典型药物
H C CH2NHCH3 HCl OH HO 盐酸去氧肾上腺素
HO HO
H C CH2NHCH(CH3)2 HCl OH 盐酸异丙肾上腺素
（二）主要化学性质
1.弱碱性 本类药物结构中有烃氨基侧链，为仲胺氮 显弱碱性。 2.酚羟基特性 本类药物结构中有酚羟基，可与 FeCl3;发生氧化。 3.光学活性 多数药物结构中有手性碳原子，具有旋 光性。
NH2
COOCH2CH2N(C2H5)2
OH
OH
[H 2O]
Ar-NH 2
NaNO 2+HCl
+ Ar-N 2 Cl
OH-
Ar-N=N OH
猩红或红色
NHCOCH3
NHC4H9 + HNO2 COOCH2CH2(C2H5)2
C4H9N-NO + H2O COOCH2CH2(C2H5)2 乳白色
（二）与三氯化铁反应
第二节 苯乙胺类药物的分析
一、苯乙胺类药物的基本结构与主要化学性质
（一）基本结构与典型药物
* CH NH R2 R1 CH OH R3
常见的苯乙胺类药物
OH C CH2NHCH3 H HO 肾上腺素
HO
HO HO
COOH OH H C OH C CH2NH2 HO C H H COOH 重酒石酸去甲肾上腺素
丁卡因外水产物为对丁基氨基苯甲酸外，上述均
为对氨基苯甲酸。 3. 弱碱性：除苯佐卡因外，其余均含有叔胺氮的侧链，故具
有弱碱性。 4. 其它特性：因结构中有 芳伯氨基或同时具有脂烃胺侧链，其
游离碱多为碱型油状液体或低熔点固体，难溶于
水，可溶于有机溶剂。其盐酸盐则易溶于水。
二、酰胺类药物的基本结构与主要化学性质
3.酚羟基特性：对乙酰基酚有游离酚羟基，可与FeCl3 发生显色反应。 4.弱碱性：利多卡因和布比卡因烃胺侧链有叔胺氮，显 碱性，可与生物碱沉淀剂发生沉淀反应，可 相互区别。 5.与金属离子发生沉淀反应：利多卡因和布比卡因酰氨 基上氮可与Cu2+,Co2+生成 有色配位化合物沉淀。
三、鉴别试验
(三）氧化反应
本类药物具有Ar-OH，易被氧化剂I2, H2O2, K3Fe(CN)6氧化而显色， 例如：肾上腺素在中性或酸性条件下，被I2, H2O2 氧化后，生成肾上腺素红；
盐酸异丙肾上腺素在酸性条件下，被I2氧化，
生成异丙肾上腺素红。
(四）紫外特征吸收与红外吸收光谱
例如：
盐酸异丙肾上腺素 0.05mg/ml λmax = 280nm A =0.50
这一类药物均可采用红外吸收光谱进行鉴别
三、特殊杂质检查
(一) 酮体检查
本类药物在生产过程中多采用酮体氢化制得，若氢 化不完全，易引入酮体杂质。 采用UV法检查：
利用酮体在310nm有吸收，本类药物无吸收。
例如：肾上腺素本项检查 配2.0mg/ml
盐酸去氧肾上腺素 配2.0mg/ml 盐酸异丙肾上腺素 配2.0mg/ml
H2N COOH -CO2 H2N [O] O= 黄色 =O
怎样检查？ 原中国药典采用TLC法中的杂质对照品法进行 检查。（现行中国药典采用HPLC法检查）
五、含量测定
（一）亚硝酸钠滴定法 Ar-NH2; Ar-NHCOR; Ar-NO2均可采用此法
Ch.P中的苯佐卡因；盐酸普鲁卡因和盐酸普鲁卡
因胺及其制剂可直接采用本法。
λ=310nm
λ=310nm λ=310nm
A＜0.05
A＜0.02 A＜0.15
肾上腺酮及肾上腺素的紫外吸收曲线
HO HO O C CH2NHCH3
HO HO
OH CH CH2NHCH3
λmax310nm
220 nm
260
300
(二) 有关物质的检查
采用TLC法（或HPLC）中的高低浓度对比法进行检查。 (三) 盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查 采用PC法中的杂质对照法进行检查。
(二) 溴量法
本类药物重酒石酸间羟胺、盐酸去氧肾上腺素及 其注射液用此法。 基本原理：
二、鉴别试验
(一)与三氯化铁反应
Ar-OH＋FeCl3
络合显色 ＋ 碱液
紫红色
。
(二）甲醛－硫酸反应
在此试剂中形成醌式结构而显色。
药 物 三氯化铁 0.1mol/LHCl显绿色,甲氨试液显红－紫红 绿色,加NaCO3试液显紫色－红色 紫色 深绿色,加5％NaCO3试液显蓝紫色－红色 甲醛－硫酸 红色 淡红色 玫瑰红橙红棕红 棕色暗紫色 肾上腺素 重酒石酸去甲肾上腺素 盐酸去氧肾上腺素 盐酸异丙肾上腺素
(六)红外吸收光谱法（略）
四、特殊杂质检查
（一）对乙酰氨基酚中的特殊杂质检查
1.乙醇溶液的澄清度与颜色：因其生产工艺用铁粉作还原剂，可 能带入，致使乙醇溶液产生混浊，中间体对氨基酚易氧化产生 有色化物，在乙醇溶液中显橙红色或棕色。
1.乙醇溶液的澄清度与颜色：
检查方法：配制0.1g/ml本品乙醇溶液，溶液应澄清，无色； 如显混浊，与1号浊度标 准液比较，不得更浓；
如显色，与棕红色2号或橙红色2号 标准液比较， 不得更深。
2. 有关物质检查：Ch.P是以对氯苯乙酰胺为对照品，
采用TLC 法中的杂质对照品法。 3. 对氨基酚检查：利用对氨基酚在碱性条件下可与
亚硝基铁氰化钠生成蓝色配位化
合物，采用比色法。
(二)盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸 的检查
为什么要检查？
COOCH2CH2N(C2H5)2.HCl
NH2
HCl COONa
NH2
HCl COOH
NH2. HCl
COOH
2. 苯佐卡因的鉴别
苯佐卡因 + NaOH
乙醇 + I2 + NaOH
乙醇
CHI3（碘仿臭气，黄色 沉淀）
(五) 紫外特征吸收光谱法
1. 在λmax 处测定供试液的百分吸收系数。 例如：对乙酰基酚在0.4%NaOH中于λmax =240nm;E1%1cm = 715 在HCl(0.1nol/L)-甲醇于λmax =249nm; E1%1cm = 880 2. 在规定的浓度测定λmax 例如：盐酸普鲁卡因胺5μg/ml; λmax = 280nm
重氮化的反应历程为：
NaNO2 + HCl HNO2 + HCl
HNO2 NOCl
+ +
NaCl H2O
KHCl
NH2
NO Cl 慢
+
-
H N NO
快
N N OH
快
N N Cl
+
-
KBr + HCl
HBr + KCl
HNO2 + HBr
NOBr + H2O
KHBr
∵ KHBr 比KHCl大300倍
V V
G
有电流（使指针偏离零 永停在某一位置）
2NO + I2 + 2KCl + 2NaCl +
(二）非水溶液滴定法(略)
（三）分光光度法
1. 对乙酰基酚原料的含量测定 在0.4%NaOH介质中；257nm D%＝［E1%1cm]样／ ［E1%1cm]标×100％ ；E1%1cm＝715 2. 对乙酰基酚片溶出度测定 （测定条件同上） 1片＋稀HCl 24ml + H2O + 0.4%NaOH10ml + H2O W(g) = 200 ×C; 1000ml 精密量 取5ml 100ml λ257nm测定A。
（一）重氮化-偶合反应
分子结构中含有芳伯氨基或潜在芳伯
氨基的药物，均可发生此反应。
Ar-NH2 HCl NaNO2 重氮盐
OH-
-萘酚
橙黄~猩红色
直接反应：苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、 盐酸普 鲁卡因胺 间接反应：对乙酰氨基酚
利多卡因和布比卡因由于空间位阻很难发 生此反应。 丁卡因虽无芳伯氨基，但可与NaNO2反 应生成N－亚硝基化合物的乳白色沉淀。
（一）基本结构与典型药物
R3 R1 NH C R2 O
R4
HO
NHCOCH3
对乙酰氨基酚（扑热息痛）
CH3 NHCO CH3
C4H9 N HCl
盐酸布比卡因
CH3
NHCOCH2N(C2H5)2 CH3
HCl
盐酸利多卡因
（二）主要化学性质
1.水解后显芳伯氨基特性：分子结构中含有芳酰氨基，酸
水解后显芳伯氨基的特性反应。 注意空间位阻的影响。 2.水解产物易酯化：对乙酰氨基酚，酸水解生成 醋酸，在硫酸中与乙醇反应，发出醋 酸乙酯香味。
(4) 滴定管尖端插入液面下滴定
Ar-OH + N2 &. 指示终点的方法
(1) 永停滴定法 溶液 终点前： 无过量 HNO2 终点时：有过量 HNO2 (2) 外指示剂法 用KI-淀粉指示剂 指示终点的原理： 2NaNO2 + 2KI + 4HCl 2H2O 检流计 无电流