微生物侵入试验报告

微生物侵入试验

文件编号：SOP-YZ-001-02

小组人员：：

验证时间：2015年3月30日至2015年4月15日

《微生物相关的生产验证》项目任务书

项目名称：注射剂微生物浸入试验项目完成时间：2015年3月30日~4月16日项目负责人：蔡青佑

项目组成员：陈柳谷杨宇康李凌程茜温少威

项目背景：某药品或生物制品企业的GMP认证或复认证工作，按要求需要对注射剂灌封进行挑战试验（微生物浸入试验），本项目结合企业验证工作完成项目任务。

项目目标：利用实训室条件，完成注射剂灌封、灭菌，小组完成一批微生物浸入试验验证。

项目任务及要求序号任务名称任务要求任务成果

1接受项目任务

明确项目内容和要求。

能阅读、分析任务书，根据任务书分

解要完成的任务。

参考资料和文件目

录

微生物浸入试验方

法

2查阅相关资料

了解能获取资料的途径。

查阅注射剂微生物浸入试验相关资

料，了解验证关键技术和知识。

分析项目所涉及的微生物操作技术

要点。

微生物浸入试验

（示意图

菌种传代保存使用

记录

菌液制备方法

3制定计划和方案

实施企业专家现场讲座和指导的方

法。

对实施条件进行分析，并设计方案。

依据方案制定实施计划。

工作分工和计划进

程表。

注射剂微生物浸入

试验方案。

4实施验证操作

备料、器皿灭菌。

培养基配置、灌封、灭菌、菌液制备

和浸泡、外部消毒、培养；

对照接种、培养。

培养、观察、记录。

结果分析和报告。

补充、纠正。

按照验证方案和进

程表完成操作并记

录。

验证结果分析和总

结。

工作日志

5项目总结和报告

项目学习总结的撰写方法。

能撰写项目学习总结

撰写验证总结和报

告。

制作交流用幻灯。6项目资料汇总、存档

学习过程资料的收集、分类方法。

能收集项目学习资料，汇总并存档。

编写目录、文本资

料的汇总与装订。

电子资料的汇总与

存档。

导师：李敏审阅：

1.简介

微生物形体微小，极易通过各种途径入侵、扩散，目前的检疫、检测措施又难以及时发现和阻隔，而微生物入侵对人类健康、经济发展，乃至社会稳定和国家安全均构成严重威胁。因此有必要对注射剂的容器密封系统完好性进行挑战性实验，确定工艺流程的稳固程度，防止微生物入侵以确保产品质量安全可靠。

微生物侵入试验是对最终灭菌容器／密封件系统完好性的挑战性试验。在验证试验中，取输液瓶或西林瓶(小瓶)，灌装入培养基，在正常生产线上压塞、压盖灭菌。此后，将容器密封面浸入高浓度运动性菌液中，取出、培养并检查是否有微生物侵入，确认容器密封系统的完好性。此同时，需作阳性对照试验，确认培养基的促菌生长能力。

2.系统描述

本次密封系统的完好性试验采用灌装大豆胰蛋白胨肉汤培养基，经压塞、轧盖、灭菌、微生物侵入试验，试验分为两组，A组为正常微生物侵入试验，B组为微生物挑战试验，检查产品密封可靠性是否达到要求，并对试验结果进行分析研究。

3.验证目的

通过密封系统的完好性试验确认10ml瓶塞盖组成的密封系统完好性良好，能够保证产品能防止外界污染的工艺要求。

4.验证方案

4.1验证方案起草

验证方案审批

验证方案批准：同意执行此验证方案。

批准人：李敏

日期：2015年3月30 4.2检查确认

确认结论：各项检查合格，实验可进行

检查人：杨宇康日期： 2015 年 3 月 30 日

复核人：蔡青佑日期： 2015 年 3 月 31 日

4.3人员及职责

4.3.1人员培训及健康检查

检查验证小组成员对《密封系统完好性试验验证文件》的培训，要求参与人员熟悉验证的步骤和方法及工作内容。

4.3.1.1人员培训检查记录

确认结论：培训结果合格，可进行验证。

检查人：蔡青佑检查日期：2015年3月31日4.3.1.2参与验证人员健康情况检查表

4.3.2人员职责

6.试验步骤及原始记录

6.1试样制备

6.1 .1培养基的配制：用大豆胰蛋白胨肉汤培养基，按30g加1L注射用水的比例配制1.6L，胶塞、铝盖、西林瓶121℃ 40min灭菌

6.1.2试样密封：在生产线上灌装大豆胰蛋白胨肉汤培养基（或取洁净西林瓶用洁净

注射器灌装），装量为8ml/瓶，灌装130瓶，使用自动压塞和轧盖设备将西林瓶密

封。

6.1.3试样灭菌：将密封后试样于121℃，15min湿热灭菌。[备注;采用加热方式进行最终灭菌，最终灭菌产品中的微生物存活概率（即无菌保证水平， SAL）不得高于10-6。采用湿热灭菌方法进行最终灭菌的，通常标准灭菌时间F0值应当大于8分钟，]

6.1.4试样预培养：从蒸汽灭菌器中取出试样，冷却，将每一试样倒转，使培养基与

西林瓶内表面充分接触，在30～35℃下竖放培养14天。

6.1.5B组试样培养：小心拧松至少50个试样的铝盖，注意不要破坏其密封口，将

拧松铝盖时不慎损坏西林瓶密封性的所有试样剔除；同时挑选至少10个封口处缺损

的西林瓶；两者标记后在30～35℃下倒转竖放培养14天。

6.1.6试样制备统计：

确认结论：试验有效