全血水杨酸钠药物代谢动力学参数测定
【最新精选】水杨酸钠药代动力学实验分析
全血水杨酸钠药物代谢动力学参数的测定一、实验目的：掌握药物代谢动力学参数的意义及其测定方法，掌握用分光光度法测定水杨酸钠（sodium salicylate）的血药浓度。
二、实验动物：家兔体重2.585kg 性别：雌三、实验药品：20%乌拉坦、生理盐水、0.5%水杨酸钠、0.06%水杨酸钠标准液、10%三氯醋酸、10%三氯化铁、蒸馏水水杨酸钠在酸性环境中成为水杨酸（salicylic acid），与三氯化铁生成一种紫色络合物。
该络合物在520nm 波长下比色，其光密度与salicylic acid 浓度成正比。
反应式为：四、实验器材：电子天平、兔台、5ml和1ml枪头、5ml注射器、6号针头、手术器械、动脉插管、棉球、头皮针、10ml离心管、722分光光度计、离心机、涡旋混匀器五、实验方法1、取10支10ml试管，用0.5%肝素润湿管壁。
2、家兔称重，从兔耳缘静脉注射20%乌拉坦（1g/kg体重，注射了13ml），待兔麻醉后，将其仰卧，先后固定四肢及兔头(此时家兔惊醒，补助乌拉坦6ml)。
3、剪去颈前部兔毛，正中切开皮肤5-6cm，用止血钳纵向分离软组织及颈部肌肉，暴露器官及与气管平行的颈动脉。
分离颈动脉，行颈动脉插管。
手术完毕后，用温热的生理盐水纱布覆盖手术创口。
静脉注射肝素，剂量为1000U/kg体重（约为2.58ml）。
4、取1支10ml试管，家兔颈动脉取血1.5ml，摇匀试管内血液，防止凝血。
5、沿对侧耳缘静脉缓慢注射10%水杨酸钠150mg/kg（因注射过程中发现部分药品漏出，补注了一部分，估计约为3.9ml）。
于注射后1、3、5、10、20、50、80、110min分别颈动脉放血1.5ml入相应的试管并摇匀。
6、取10支10ml离心管，水杨酸注射前取血管子标为“对照”，水杨酸注射之后不同时间取血管标为相应“取血时间”，另有1个管子没有取血，直接加入配置好的0.06%水杨酸钠标准液标为“标准”，按下表加入样品及试剂：7、8、各试管取上清液3ml加入另一套干净试管中，再加入10%三氯化铁0.3ml，混匀显色。
讲稿水杨酸钠半衰期测定
川北医学院讲稿水杨酸钠半衰期（t1/2）的测定【实验前预习】药物代谢动力学。
【实验目的】用比色法测定水杨酸钠的血药浓度并计算半衰期。
【实验原理】药物血浆半衰期（或称消除半衰期，elimination half-life time，t）1/2是指血浆药物浓度下降一半所需的时间。
绝大多数药物是按一级动力学的规律消除，其血浆半衰期的数值是固定的。
水杨酸钠在酸性条件下与三氯化铁反应生成一种紫色络合物。
该络合物在波长510nm下比色，其光密度与水杨酸浓度成正比。
利用比色法测定药物在血中两个以上浓度值，即可求得药物的血浆半衰期。
【实验器材与药品】V1100分光光度计，离心机，10m1试管，试管架，5ml注射器及针头，吸耳球，计算器，10%水杨酸钠溶液，10%三氯醋酸溶液，10%三氯化铁溶液，0.1%肝素(heparin)溶液，蒸馏水。
【实验对象】家兔。
【实验方法与步骤】1．取离心管3支，分别标记为A、B、C，各加入10%三氯醋酸7ml。
2．取家兔1只，称重后由心脏(或颈动脉、耳缘静脉)取血2ml，置A管中(注射器内壁用0.5%肝素生理盐水溶液润湿)。
3．由耳缘静脉缓慢注射10%水杨酸钠2 ml/kg，并记录注射完毕的时间。
4．给药后10min和40min，先后自心脏取血2 ml，分别置入离心管B及C 中,记录取血的准确时间。
5．将3支离心管摇匀，以2000转/min的转速离心5 min。
准确吸取离心后的上清液各6 ml分别置入编号的试管中，每管加10%三氯化铁溶液0.5 ml，摇匀，显色。
6．以A管为对照，用V1100分光光度计在510nm波长处分别测定B管和C管的光密度值D1和D2，测定方法如下：1.接通V1100分光光度计电源，打开检测室盖板，调整波长为510mm；2.合盖→拉滑杆3.将黑体放入光路中→按MODE键到T档→按0%T键校零；4.将A管对准光路→按MODE键到A档→按100%T键调零；5.将B、C管依次对准光路→测出D1和D2值7．根据K＝CD将测得的D1和D2代入下面的公式计算水杨酸钠的血浆半衰期。
药理学实验讲义
药理学实验讲义南方医科大学药学院２０１０－７目录实验一实验动物操作的基本机能 (2)实验二不同给药途径对药物作用的影响 (4)实验三全血水杨酸二室模型药物代谢动力学参数测定 (5)实验四肝肾功能对药物作用的影响 (6)实验五药物镇痛实验 (7)实验六巴比妥类药物的抗惊厥作用 (9)实验七利多卡因对抗氯化钡引起的心律失常实验 (13)实验八有机磷酸酯类中毒及解救 (14)附录1 药理学实验基本要求 (19)附录2 药理学在新药研究中的应用 (22)实验一、实验动物操作的基本机能一、目的：学习实验动物编号、捉持、给药、采血等基本操作方法。
二、实验材料（一）动物：小白鼠10只，雌雄各半，体重18g ~ 22g。
家兔1只，雌雄均可。
（二）器材：1 ml注射器，5 ml注射器，针头，灌胃针头，大烧杯，天平。
三、方法1. 性别鉴别小鼠的性别鉴别通常以肛门与生殖孔之间的距离来判断，距离近者为雌性，距离远者为雄性。
家兔可以从生殖器分辨其性别。
2. 编号可根据情况和习惯而定，符合清晰易辨、简便耐久的要求即可。
例如小鼠，右前肢皮肤外侧涂色标记为1号，腹部右外侧皮肤涂色标记为2号，右后肢皮肤外侧涂色标记为3号，头部皮肤涂色标记为4号，背部正中皮肤标记为5号，尾巴根部标记为6号，7、8、9号在左侧同1、2、3号，第10号不色。
3.捉持右手提起鼠尾，放在粗糙物（如鼠笼）上面，轻轻向后拉其尾，此时小鼠前肢抓住粗糙面不动；用左手的拇指和食指捏住其头部皮肤和双耳；其余三指和掌心夹住其背部皮肤及尾部。
这样小鼠便可被完全固定在手中。
4. 给药(1)小鼠的给药方法①灌胃（po）：将小鼠固定后，右手持装有灌胃针头的注射器，自口角处插入口腔，沿上腭插入食道。
如遇阻力，可将灌胃针头抽出再另插，以免穿破食道或误入气管，造成动物死亡。
灌注量一般为0.1～0.2ml/10g，不超过0.5ml/只。
②肌内注射（im）：两人合作，注射部位多选后腿上部外侧。
药物代谢和药动学参数的测定和评价
药物代谢和药动学参数的测定和评价药物代谢和药动学参数对于药物的研究和应用过程中至关重要。
药物代谢主要包括药物在体内的吸收、分布、代谢和排泄过程。
药动学参数则包括药物的半衰期、最大浓度、峰时间、面积积分等指标。
这些参数的测定和评价是有很多细节和方法的。
一、药物代谢的测定1.药物吸收的测定药物的吸收是药物进入体内的第一步，其测定方法多种多样。
其中，最常用的方法是口服给药后测定血浆药物浓度，通过测定药物在体内的代谢和排泄过程来计算其吸收速率和吸收率。
2.药物分布的测定药物在体内的分布对于药物的效果、安全性等方面至关重要。
药物分布的测定方法包括动物实验、分布/Fu值法、药物致融解分析法等。
其中，动物实验法是最常用的方法，通过在动物实验中，给药物标记放射性同位素，进而测定药物在不同体组织中的分布，得出药物分布规律和药物在体内的留存时间。
3.药物代谢的测定药物在体内被代谢和转化成的代谢产物对于药物的疗效和安全性有着至关重要的作用。
药物代谢的测定方法包括体外试验和动物实验，其中体外试验可以测定药物在人体内的代谢途径和代谢产物的结构等，而动物实验则可以在体内测定药物在肝脏等器官中的代谢酶活性和代谢产物的浓度等。
4.药物排泄的测定药物在体内的排泄过程对于药物的效果和安全性也具有影响。
药物排泄的测定方法包括动态分析法、动物实验法、单次静脉注射法等。
其中，动物实验法是最常用的方法，通过测定药物在体内的消失速率和排泄清除率等指标，得出药物在体内中的留存时间和药物在尿液和粪便中的排泄情况等。
二、药动学参数的测定1.药物的半衰期药物的半衰期是指药物在体内分解降解的时间，通常用于预测药物在体内的留存时间和药物的清除速率。
药物的半衰期的测定方法包括单次静脉注射法、动态分析法等。
2.药物的最大浓度和峰时间药物的最大浓度是指药敏感感受器觉察到药物浓度最高的时间点，通常用于预测药物的吸收速度。
药物的最大浓度通常会与药物的峰时间同步。
血药浓度测定及药动学参数的计算
1
实验原理
水杨酸钠可与氯化高铁产生显色反应， 其光密度与水杨酸钠浓度成正比）×标准管浓度
2
实验目的
1.测定血药浓度 2.制作时量曲线，计算半衰期
3
实验步骤
1.家兔称重，麻醉，固定
2.颈总动脉插管供采血
3.耳缘i.v. 肝素1ml/kg全身肝素化
分别测量各采血点和标准管的药物 吸光度值 不要触碰比色皿的光面
7
实验结果
1.计算各采血点的血药浓度
2.制作时量曲线
3.计算半衰期
8
①各管搅拌1min； ②加蒸馏水2.5ml，搅拌1min； ③离心10
min， ④上清比色
注意事项
采血、混合液和离心
采血前须放血1毫升 放血0.5毫升，移液管吸取0.3毫升
和混合液搅拌后应立即离心测量
一般可采血2次后再分别混合、离心
采血时间间隔可增加或缩小
6
分光度计测量
已制作好空白管，已用空白管调零
4.耳缘i.v. 10％水杨酸钠溶液2ml／kg
5.颈总动脉采血0.3ml
4
全血水杨酸钠浓度测定步骤（ml） 给药前 5分 10分 20分 35分 50分 70分 90分 标准 空白
混合液 2 全血 0.3 0.04%水杨酸 0 蒸馏水 0 2 0.3 0 0 2 2 0.3 0.3 0 0 0 0 2 0.3 0 0 2 0.3 0 0 2 0.3 0 0 2 2 0.3 0 0 0.3 0 0 2 0 0 0.3
机能实验学
南方医科大学本科专业教学大纲机能实验学Functional Experimentation基础医学专业临床医学专业医学实验技术专业等医学相关专业执笔人：李明，金春华审定人：金春华学院负责人：冯天元南方医科大学教务处二○○六年十二月课程代码：B010010 (机能实验学一)/ B010011 (机能实验学二)一、课程简介机能实验学是一门主要研究机体功能变化规律的实验课程，主要涉及生理学、病理生理学和药理学这三门课程的实验内容，从正常-病理状态-药物影响三个不同角度系统地观察和探讨机体器官功能的变化规律。
教学的基本要求和目的是使学生学习和了解生理学、病理生理学和药理学这三门课程的经典实验内容，比较系统地学习和掌握以生理实验技术为基础的各种动物实验知识和操作技能，学习和模拟科研的基本过程，初步培养学生的综合实验能力和创新思维能力。
本课程的先修课程是解剖学、组织胚胎学、生理学、病理学、病理生理学、药理学、统计学等课程。
后续课程为诊断学及临床课程。
本课程适用基础医学、临床医学、医学实验技术、中医药学及其它医学相关专业。
教学时数为100学时，分成第四、第五两个学期上课，分别称为机能实验学(一)和机能实验学(二)。
第四学期主要上基础性实验，42学时，1.5学分；第五学期主要上综合性和探索性实验，58学时，1.5学分。
“Functional Experimentation” is an integrated experimental course with 3 credits and 100 class hours for the undergraduate students who are major in medicine-related subjects. The contents of the course consists of three levels of experiments, e.g. the basic and classical experiments of physiology, pathophysiology and pharmacology, the integrated experiments from those subjects and the self-designed experiments by students themselves. The aims of the course is to train the students to have a good command of the common animal experimental techniques and methods for determining the organ and system functions in animals, so as to enhance their experimental skills remarkably and study the research principles and methods to cultivate their preliminary innovative idea in medical science research.二、教学内容与要求本课程主要包括三部分的内容：第一部分，介绍实验基本知识、技术和方法。
全血水杨酸钠药物代谢动力学参数测定
水杨酸钠药物代谢动力学参数测定前言：本实验通过测定不同时间点的血药浓度，作出相应的药-时曲线，用一定的数学方法对曲线加以拟合，根据相关统计学指标最终确定药物的房室模型，并计算主要药代动力学参数。
1、实验目的掌握药物代谢动力学参数的意义及其测定方法2、实验动物家兔，体重2.5～3kg，性别不拘。
3、实验药品10%水杨酸钠、0.06%水杨酸钠标准液、10%三氯醋酸、10%三氯化铁、0.5%肝素、生理盐水、盐酸利多卡因注射液、蒸馏水。
4、实验器材电子天平、兔手术台、试管架、10ml试管、10ml离心管、5ml和1ml加样枪及枪头、5ml注射器、6号针头、722分光光度计、离心机、涡旋混匀器、手术器械、动脉插管、棉球、烧杯、头皮针。
5、实验方法 1. 取10支10ml试管，用0.5%肝素润湿管壁。
2. 家兔称重，固定于手术台，剪去颈部前被毛。
在盐酸利多卡因局部麻醉下作一侧颈动脉插管，取血3ml，摇匀试管内血液，防止凝血，血管钳夹闭导管，生理盐水纱布覆盖手术部位。
3. 沿对侧耳缘静脉缓慢注射10%水杨酸钠150mg/kg，于注射后1、3、5、10、20、50、80、110min分别动脉放血1.5ml入相应的试管并摇匀。
4. 取10支10ml离心管，分别标为“对照”、“标准”及相应“取血时间”，按下表加入样品及试剂。
试管号10%三氯醋酸（ml）全血（ml）0.06%水杨酸钠（ml）蒸馏水（ml）对照 4 1 0 1标准 4 1 1 0各取血时间 4 1 0 15. 各管用涡旋混匀器充分混匀，2000rpm，离心10min。
6. 各管取上清液3ml加入另一套干净试管中，在各加入10%三氯化铁0.3ml，混匀显色。
以对照管调零，在722分光光度计上读取520nm的OD值。
7. 求出水杨酸钠在家兔体内各时间点的血药浓度（Y）。
先求出标准管浓度（Y0）与OD值（X0）的比值（K），K=Y0/X0 ，Y=XK。
8. 绘出时-药曲线，以水杨酸钠浓度的对数值作为纵坐标，对应时间为横坐标作图，分析水杨酸钠动力学模型及药动学参数计算。
家兔血浆中水杨酸钠浓度测定与药代动力学参数测定-文档资料
测定和药代动力学参数测定
【相关理论知识】
药理学研究的内容 药效学 药物 药动学 机体
【药代动力学参数】
（１）药物消除半衰期 （ t1/2 ） ：是血药浓度下降一半 所需要的时间。反映了药物在体内的消除速度。 （２）表观分布容积 （Vd ）：当血浆和组织内药物分 布达到平衡后，体内药物按此时的血浆药物浓度在体 内分布时所需体液容积称表观分布容积。
计算结果
动脉插管时
插管后固定
【注意事项】
1. 注意颈总动脉插管术。 2. 取血时，要先用0.1%肝素润湿注射器和针头，取血 后用肝素封管，避免血液凝固，每次取出血第1ml 弃去不用，再吸取2ml置于离心管内。 3. 给药时间及给药后取血时间要记清。 4. 取上清夜时，要先将上清液倒入编号相对应的试管 中，再吸取所需的ml数，以免吸入沉淀影响比色， 注意吸管要对号使用。 5. 计算Vd、CL时注意单位换算。
（3）清除率 （ CL ）：是机体消除器官在单位时间内 清除药物的血浆容积。是另一个常用来表示药物消ຫໍສະໝຸດ 过程特征的参数。【实验目的】
1．以水杨酸钠为例了解血浆药物 浓度随时间变化的时量关系。
2．了解药代动力学参数的临床意义。
【实验动物】 家兔， 体重2~2.5kg， 雌／雄
【实验材料】 1.器材 试管5支、离心管3支、试管架、 小玻棒、10ml吸管、注射器(１ml、5ml、 10ml）、手术器械、动脉插管、动脉夹、 721分光光度计、离心机 2.试剂和药品 25％氨基甲酸乙酯、10％ 及0.02％水杨酸钠溶液、10％三氯醋酸 溶液、10％三氯化铁溶液
3、清除率(CL)
CL=0.693／t1/ 2× Vd （单位：ml/min.kg） 注：Vd单位L／kg
药理学-药理实验2水杨酸钠半衰期的测定
半衰期计算与结果分析
半衰期计算
根据血药浓度随时间变化的曲线图，计算出水杨酸钠的半衰期。
结果分析
分析实验结果，比较不同个体或不同条件下的血药浓度和半衰期，探讨水杨酸钠在体内的代谢和排泄规律。
结果解释与讨论
结果解释
根据实验结果解释水杨酸钠在体内的代谢和排泄机制，以及影响半衰期的因素。
讨论
结合实验结果和相关文献，探讨水杨酸钠的药理作用、临床应用和不良反应，为进一步的药理学研究 和临床用药提供参考。
问题3
实验操作过程中存在误差。
解决方案
加强实验操作培训，提高实验人员的操作技能和责任心 。
对实验的改进建议与展望
建议1
优化动物模型的生理特征，使其更接近人类。
建议2
采用更准确的血药浓度测定方法。
建议3
加强实验操作培训，提高实验结果的可靠性。
展望1
将本实验方法应用于其他药物的药代动力学研究。
展望2
探索更多种动物模型在药代动力学研究中的应用。
通过测定水杨酸钠的半衰期，可以了解该药物的消除速度 ，从而为制定合理的给药方案提供依据。同时，半衰期也 是评估药物疗效和安全性的重要参考指标。
水杨酸钠半衰期的意义
水杨酸钠半衰期是评价药物在体内消除速度的重要指标， 对于指导临床用药、制定给药方案以及评估药物疗效等方 面具有重要意义。
通过测定水杨酸钠的半衰期，可以了解该药物的消除速度 ，从而为制定合理的给药方案提供依据。同时，半衰期也 是评估药物疗效和安全性的重要参考指标。
掌握药理学实验的基本操作流程
实验前准备
准备实验器材、试剂，确保实 验环境符合要求。
数据处理
对采集的数据进行处理和分析 ，计算水杨酸钠的半衰期。
药代动力学参数测定
药代动力学参数测定水杨酸钠血浆半衰期的测定 【目的和原理】掌握用分光光度法测定水杨酸钠（sodium salicylate）的血药浓度,并学会用公式计算半衰期。
水杨酸钠在酸性环境中成为水杨酸（salicylic acid），与三氯化铁生成一种紫色络合物。
该络合物在520nm 波长下比色，其光密度与salicylic acid 浓度成正比。
反应式为：OH CO O H【实验对象】【实验器材和药品】 722分光光度计、离心机、50ml 烧杯、effendorff 管、加样器（1000μl）、试管、试管架、记号笔、兔手术台、手术器械一套、动脉插管、注射器（2ml、5ml、10ml）、BL-410生物机能实验系统。
10%水杨酸钠，0.02%水杨酸钠标准液，10%三氯醋酸，10%三氯化铁，0.3%肝素生理盐水，1%普鲁卡因等。
【实验步骤和观察项目】1. 取兔一只，称重，然后将其固定在兔手术台上。
2. 颈总动脉插管：用1%普鲁卡因在颈部正中局麻后，在气管上方将皮肤剪一纵向开口，用止血钳钝性分离皮下筋膜及肌肉组织，将气管暴露，在气管旁边可见较粗大的颈总动脉，将其与周围的组织分离，然后将充满肝素生理盐水的动脉插管插入，固定确切。
由颈总动脉缓慢给入0.2%肝素生理盐水，1ml/kg，防止凝血。
3. 取试管5只编号，各管中加入10%三氯醋酸3.5ml。
4. 由颈总动脉放血2ml，分别放入1号管（对照管）和2号管（标准管）内各1.0ml,摇匀静置。
5. 由耳缘静脉缓慢注射10%水杨酸钠，2ml/kg，给药后开始计时。
6. 给药后10min、25min、40min，先后取血1ml，分别置于3 、4、5号试管内，摇匀静置。
7. 以0.02%水杨酸钠标准液1ml 放入2号管内，其余各管加入蒸馏水1ml，摇匀。
8. 将5支试管离心5分钟（2000转/分），精确吸取上清液3.0ml，分别放入另一编号的试管中，每管加10%三氯化铁0.5ml，摇匀显色。
全血水杨酸钠二室模型药动力学参数测定
(β
/2.3026)
=
0.0022
β=
0.00506572
3
LOG10(B)=2.57
B=
371.5352291
T1/2β=0.693/β
T1/2β=
136.686391 min
0.1336x + 2.9183 R²= 0.7424
系列1)
y=0.1336x 1 + 2.9183
lgCr=(α 2 /2.3026)
试管号 吸光度
测定管水杨酸钠光密度
全血水杨酸钠二室模型药动力学参数测定
0
1
2
3
4
5
0.03
0.81
0.29
0.24 0.22 Dn=dn-d0
0.185
—
D1
D2
D3
D4
D5
—
0.78 0.26 0.21 0.19 0.155
测定管水杨酸钠浓度（单位μ
g/ml）
—
—
采血时间（分钟）
—
取对数
—
预测血药浓度
2.42
1
2.4
2
2.38 0
20
40
60
80
100
T（min）
3
消除相曲线
3.5 3
2.5 2
1.5 1
0.5
y = -0.1336x + 2.9183 R²= 0.7424
系列1 线性 (系列1)
β= B=
α= A=
LOG（C）0.50024
6
8
10
12
T（min）
4——10 Vc=
4——11
1.5 1
全血水杨酸钠二室模型药动学参数测定
全血水杨酸钠二室模型药动学参数测定[目的] 用比色法测定水杨酸钠浓度，并用测得的血药浓度数据计算二室模型药动学参数。
[器材] 大试管（10ml×11）、小试管（6ml×9）、刻度吸管（10ml×2、2ml、5ml×1）、注射器（1ml×2、2ml、5ml×1）、小玻棒、试管架、玻璃蜡笔、移液吸管、普通剪刀与手术刀（各1）、弯曲管钳、坐标纸、线与棉花少许。
粗天平、分光光度计、离心机、计算器（CASIOfx-180P或CASIO-3600P）。
[药品] 1％盐酸普鲁卡因溶液、10％及0.04％水杨酸钠溶液、三氯化铁和三氯醋酸混合液（5g三氯化铁加10％三氯醋酸溶解至100ml）、100u/ml肝素生理盐水。
[动物] 家兔[方法]一、比色法测定全血水杨酸钠浓度1. 取10m1大试管11支，以 0－10编号，每管均加入三氯化铁和三氯醋酸混合试液2m1，9号管再加0.04％水杨酸钠标准液0.6m1，10号管再加蒸馏水0.6m1。
取兔1只，称体重，仰缚兔板上，于兔颈部皮下注射1％盐酸普鲁卡因溶液1-2m1，局麻后分离一侧颈外静脉并在其下方横穿一根细线，供采血时固定静脉用。
2. 以100u／m1肝素生理盐水润湿1m1注射器，从该侧颈外静脉采血0.6m1加入0号大试管中，用干棉球轻压针孔处以防止出血。
从已分离出的颈外静脉的对侧耳缘静脉推注10％水杨酸钠溶液2ml/kg。
准确记录给药完毕时间，在给药完毕后的第1、3、5、10、20、50、80和110分钟从颈外静脉分别采血0.6m1，依次加入第1-8号大试管中（每次采血后要洗净注射器，以肝素生理盐水润湿备用）。
3. 振摇0-8管各1分钟，分别加入蒸馏水5m1再充分振摇1分钟，过滤至小试管中取滤液备用。
9、10两管加蒸馏水5m1，摇匀待用。
4. 在分光光度计上，用波长510nm，1cm光径比色杯，以蒸馏水调零，测0-10号管光密度得d-d。
第十章 药理学基础性实验实验一 体液pH对药物吸收的影响塑料板
第十章药理学基础性实验_实验一体液pH 对药物吸收的影响_塑料板第十章药理学基础性实验实验一体液pH对药物吸收的影响大多数药物均为弱酸性或弱碱性电解质,在体液内均有不同程度地解离.分子状态药物疏水而亲脂,易通过细胞膜;离子状态药物极性高,不易通过细胞膜的脂质层,这种现象称为离子障.弱电解质的解离程度在pH变化较大的体内对药物吸收有重要的影响,胃液pH变化范围为1.5~7.0,尿液为5.5~8.0,如此大的pH变化范围对脂溶性适中的药物可能产生显著的临床意义.本实验通过大鼠惊厥发生的时间、死亡率及惊厥症状来反映药物的药效,惊厥发生时间早、死亡率高、惊厥症状明显者说明药物的药效较强,药效强者说明药物吸收率较高.通过本实验:1.掌握大鼠捉拿及灌胃方法.2.了解体液pH对药物吸收影响的原理和测定方法,并结合原理对实验结果进行分析判断.1.动物大鼠.2.器材大鼠灌胃器、鼠笼、天平.3.药品与试剂0.15 mol/L NaHCO3溶液、0.2 mol/L HCl溶液、2%士的宁溶液.1.取大鼠两只,称重,随机分为甲鼠与乙鼠.2.甲鼠由胃灌入0.15mol/L NaHCO3和2%士的宁的等量混合液30 mL/kg;乙鼠由胃灌入0.2 mol/L HCl和2%士的宁的等量混合液30 mL/kg.3.观察甲、乙鼠惊厥发生时间、死亡率及惊厥症状.纪录观察到的结果,并汇总整个实验室各组数据,然后对实验结果进行统计学处理.1.大鼠容易激怒咬人,捉持时左手应戴防护手套或用厚布盖住大鼠,注意不要用力过大,切勿捏其颈部,以免窒息致死.2.固定动物要牢固,不能随意变动动物的体位.3.动物的头部和颈部应保持在一条直线的位置.4.进针方向要正确,一般是沿着右口角进针,再顺着食管的方向插入胃内,决不可盲目进针,更不能硬性将导管推入.防止由此将导管送入到肺内造成动物死亡.1.弱酸性环境下弱酸性药物易被吸收还是弱碱性药物易被吸收?为什么?2.体液pH对弱酸性药物及弱碱性药物跨膜转运的影响有何临床意义?实验二药物的局部作用和吸收作用药物的基本作用除包括药物作用和药理效应外,还包括局部作用和吸收作用.药物作用结果又包括治疗效果和不良反应两方面.总之药物基本作用的本质是使机体器官原有功能水平发生改变,表现为机体功能提高或降低.功能提高称兴奋或亢进,功能降低称抑制或麻痹.具有兴奋作用的药物称为兴奋药,具有抑制作用的药物称为抑制药,但有些药物可作用于不同器官,引起性质完全相反的效应.此外,药物还可产生局部作用、吸收作用.药物未吸收之前,在用药局部发生的作用为局部作用;药物如果被机体吸收入血,随体液分布到各组织、器官后发生作用为吸收作用.普鲁卡因是最常用的局部麻醉药,通过局部给药可阻断神经细胞膜上的钠通道而抑制神经冲动的传导,由此产生局部麻醉作用.当其进入血液后可引起心肌、骨骼肌细胞膜钠通道阻断,导致心血管抑制毒性以及中枢脱抑制的兴奋反应,出现兴奋不安、骨骼肌震颤,进一步出现意识错乱和全身强制痉挛性惊厥,最后转为昏迷和呼吸麻痹而死亡.地西泮是苯二氮类常用的镇静催眠药.其中枢神经系统作用是通过增强氨酪酸对中枢的抑制作用而产生.其作用机制是与中枢相应部位的苯二氮受体结合,由此激活蛋白激酶,解除GABA调控蛋白对GABA受体的掩盖,使更多的GABA受体易于与之结合,氯离子通道开放增加,突触后抑制效应增强.同时该药还可阻止中枢异常放电向皮质下中枢扩散,终止或减轻惊厥发作.通过本实验,了解药物的局部作用和全身作用的基本实验方法.1.动物家兔,体重2.0~3.0 kg,雌雄不限.2.器材注射器3.药品与试剂5%盐酸普鲁卡因溶液、0.5%地西泮溶液和2%硫喷妥钠溶液.1.取兔1只称重,先观察其正常活动情况,如四肢站立和行走姿态,并用针刺其后肢,测试有无痛觉反射.2.由一侧坐骨神经周围注入5%盐酸普鲁卡因溶液1mL/kg.2~3 min后观察和测试同侧后肢有无运动和感觉障碍,并与对侧相比较.3.待局部作用明显后,肌内注射5%盐酸普鲁卡因1mL/kg,观察中毒症状出现与否.4.待出现明显中毒症状时,立即由耳缘静脉注射0.5%地西泮溶液0.5mL/kg 或2%硫喷妥钠溶液0.5~1 mL/kg,直到肌肉松弛为止.记录观察结果,并分析其作用机制.1.本实验中,药物兴奋作用、抑制作用、局部作用、吸收作用与选择作用表现在哪些方面?你是否观察到药物间的对抗作用?2.本实验中,哪些是普鲁卡因和地西泮的治疗作用?哪些是它们的不良反应?药物的局部作用和吸收作用药物在吸收入血液之前,在用药部位直接作用叫做局部作用,如口服硫酸镁在肠道内不易吸收,有导泻作用;局麻药注射于神经末梢或神经干可阻断神经冲动的传导等.药物进入血液循环后分布到机体各部位发挥作用称之为全身作用,如药物从胃肠道吸收后由肠系血管膜经门静脉进入肝脏,再进入血液循环;少数药物可用舌下给药或直肠给药,分别通过口腔、直肠和结肠粘膜直接吸收入血液;皮下或肌肉注射,药物先沿结缔组织扩散,再经毛细血管或淋巴内皮细胞进入血液;静脉注射,药物不经吸收,直接进入血液循环.口服和注射给药分别属于消化道和注射部位的吸收.局部用药主要是引起局部作用,例如涂擦、撒粉、喷雾、含漱、湿敷、洗涤、滴入等,灌肠、吸入、植入、离子透入、舌下给药、肛门阴道给药等方法,虽用于局部,目的多在于引起吸收作用.通过本实验,了解药物的局部作用和全身作用的基本实验方法.1.动物小鼠2只,体重18~22g,雌雄不限.2.器材鼠笼,烧杯,玻璃平皿,止血钳,棉球等.3.药品与试剂氯乙烷喷射剂.1.取小白鼠2只,以甲、乙编号.观察两鼠的活动情况和尾部皮肤的色泽.分别以止血钳夹两鼠的尾部和后肢,观察其痛反应,然后做下述处置.2.甲鼠,以氯乙烷喷其尾部,或在尾部滴加氯乙烷约1mL,观察尾部皮肤的色泽变化.立即用止血钳夹其尾部和后肢观察其痛反应,并与用药前的情况作比较,此时小白鼠的活动能力有无明显改变.3.乙鼠,将该鼠放在烧杯内.放入吸有氯乙烷约1mL的棉球团,用玻璃皿盖上.密切注意小白鼠的反应,如见到小白鼠麻醉翻倒.就将它从烧杯内取出,检查其尾部是否有与甲鼠相似的色泽变化.并以止血钳夹该鼠的尾部和后肢.观察其痛反应.将实验观察的结果填入表10-2中,并加以分析.表10-2 药物的局部作用和吸收作用实验记录小鼠编号用氯乙烷方式用药后反应是局部作用还是吸收作用尾部皮肤色泽变化夹尾部时的痛反应夹后肢时的痛反应全身活动能力甲乙1.以上止血钳夹其尾部或后肢试验痛反应时必须轻重适度.前后一致.不要用力过大以致夹伤组织.2.密切观察小鼠的反应,氯乙烷的局部作用和吸收作用在停止给药后都易消失,因此检查小白鼠用药后的反应迅速进行.1.何谓药物的局部作用和全身作用?它们各有何特点,进一步举例说明.2.试从氯乙烷在甲、乙两鼠身上所产生的作用中,分析哪些属于局部作用,哪些属于全身作用,并推测氯乙烷的药理作用.实验三药物的反射作用药物对所接触的组织器官直接产生的作用称为直接作用,由直接作用所引起的其他器官的效应称为反射作用.例如:抗酸药→胃酸减少→胃痛减轻;强心苷→心力加强→循环改善→利尿等,这些就是药物的间接作用.本实验方法简单,但易于说明药物的间接作用及其影响环节.通过本实验,了解药物的反射作用.1.动物家兔1只,体重1.8~2.2kg,雌雄不限.2.器材BL-420生物机能实验系统,胶布、棉棒、吸管、导管.3.药品与试剂3%氨水,2%盐酸的卡因,液体石腊.1.取家兔1只仰缚于手术台上,以免头固定夹固定兔头.2.将与BL-420生物机能实验系统相连的细导管涂以少量液体石腊轻插入一侧鼻孔约2cm,然后描记一般正常呼吸曲线.3.用棉棒蘸3%氨水置于兔鼻孔处.刺激鼻粘膜约l0秒钟,令其吸入氨气,观察呼吸幅度和频率有何变化.4.撤去氨水棉球,待呼吸稳定后,用棉棒蘸有2%盐酸的卡因溶液涂抹鼻粘膜,另一侧插管的鼻粘膜可滴入适量.5分钟后以同法给家兔嗅氨水观察呼吸的影响.比较用的卡因前后家兔吸入氨气时反应之不同.记录呼吸曲线,并加文字说明.讨论吸入氨气为什么会引起家兔的呼吸变化.1.兔要固定住,使它不能挣扎,否则影响呼吸曲线的描记.2.前后两次嗅氨水的条件尽可能相同,如蘸氨水的量和嗅的时间以及棉球与鼻子的距离.3.丁卡因需均匀地涂抹在两个鼻孔的粘膜上,深度约1cm.反射作用的定义为何?试另举药物反射作用的例子.实验四药物的对抗作用两种或两种以上药物合并应用所产生的效应,包括药效增强或药效减弱,也可出现不良反应,甚至中毒反应或使不良反应减轻.作用增加的称为药效的协同或相加作用,作用减弱的称为药效的拮抗或对抗.硫酸镁产生箭毒样骨骼肌松弛作用,机制除抑制中枢神经的作用外,主要由于Mg2+与Ca2+性质相似,可特异性地竞争Ca2+结合部位,抑制Ach释放,降低Ach致运动终板去极化作用和降低骨骼肌的兴奋性,从而阻断神经肌肉接头的传递过程.这一作用可被Ca2+拮抗. 通过本实验,了解钙镁药物的对抗作用.1.动物家兔1只,雌雄不限.2.器材10mL注射器1支,20mL注射器1支.3.药品与试剂25%硫酸镁溶液,5%氯化钙溶液.1.取家兔一只,称体重,观察正常活动状态,呼吸频率,肌紧张和翻正反射.2.用注射器吸取25%MgSO4生理盐水溶液,按0.7~1.0mL/kg左右的剂量缓缓经耳缘静脉注射.当发现兔腹肌及四肢肌肉松弛,俯伏不能行动,兔耳开始发绀,呼吸和心跳减弱,翻正反射消失后,即停止注射,并改注5%氯化钙3~5mL/kg,如果兔耳发绀缓解,心跳以及呼吸均有恢复,肌张力增强,翻正反射恢复为有效的表现,耳廓血管开始转红,即可停止注射.个别家兔,对硫酸镁比较敏感,剂量未达到3mL/kg即出现明显的骨骼肌麻痹及发绀,应及时停止注射,并进行抢救;有的却需要很大剂量的硫酸镁才出现麻痹,可继续静脉注射,直至达到预期效果为止.文字说明给药后家兔活动状态的改变,包括.并对实验现象进行分析讨论.1.硫酸镁静脉注射必须缓慢,全药量约于2~3分钟内注完.2.氯化钙应事先抽在注射器内,同时将注射用静脉暴露好,或仍从注射硫酸镁的静脉给药不拔出针头,只换注射器.1.硫酸镁的药理作用有哪些?不同的给药途径在临床上有什么应用?2.氯化钙对硫酸镁的拮抗作用有什么实用意义.实验五肝脏对药物代谢的影响药物的生物转化又称药物的代谢,生物转化本质上是药物在体内温和的环境中经酶作用产生生物化学反应形成新的化合物.使药物进行生物转化的器官主要是肝脏,药物经过生物转化其药理活性发生改变,大多数药物的代谢产物的药理活性减弱或消失,称为灭活.少数药物经生物转化后可以被活化而出现药理活性.如抗癌药环磷酰胺在肝脏氧化生成醛磷酰胺,再在肿瘤细胞内分解出磷酰胺氮芥而生效;再如催眠药地西泮的代谢产物去甲基地西泮具有与原形药物相似的活性,而其药物效应时间更长;脂溶性强的抗结核药经肝脏生物转化的代谢产物可引起肝损害等.可见,原形药物经过生物转化后生成的代谢产物有多种形式,有的活性减弱或消失,有的活性增强或转化成活性物质,有的甚至产生毒性代谢产物.肝药酶主要是指肝细胞的微粒体混合功能氧化酶系统.肝药酶由许多结构和功能类似的cytochrome P450同工酶组成.P450同工酶受药物等因素的影响可引起酶活性的改变.能够增强CYP酶活性的药物称为酶诱导剂;能够减弱CYP酶活性的药物称为酶抑制剂.酶诱导剂和酶抑制剂可增强或减弱自身的转化导致效应强弱变化.肝组织内含有细胞色素P450混合功能氧化酶,致戊巴比妥钠代谢失活,影响其催眠作用.通过本实验,了解肝脏对药物代谢的影响.1.动物小白鼠8只.2.器材手术刀、眼科剪、眼科镊各1把,天平一台,量筒1个,大试管3个,漏斗1个,培养皿1个,滤纸2张,注射器2个,试管架,恒温水浴,鼠笼,搅棒.3.药品与试剂0.5%戊巴比妥生理盐水溶液.1.用颈椎脱臼法处死小白鼠两只,取出肝脏,称取2g肝组织切碎,放入甲试管中,用玻璃棒轻捣.2.在甲、乙两试管中加入0.5%戊巴比妥钠生理盐水溶液各5mL并置于37℃恒温水浴中保温1小时然后取甲试管滤液备用.3.取正常小白鼠6只,称体重,随机分作两组.甲组按0.08 mL/10g剂量腹腔注射甲试管滤液.乙组按0.08 mL/10g剂量腹腔注射乙试管药液.4.观察并记录开始麻醉的时间及麻醉持续时间.表10-5 肝脏对药物代谢的影响组别小鼠编号给药时间开始麻醉时间开始苏醒时间麻醉持续时间甲乙1.肝组织分离操作应迅速,以免延误时间影响药酶活性.2.肝组织保温过程中应经常用玻璃棒搅动试管中的内容物,使肝组织与药物充分发挥作用.1.戊巴比妥钠经肝组织孵育保温后,对小鼠的睡眠发生什么影响?2.药物在肝内转化有哪些类型?戊巴比妥钠属何种类型的转化?药物转化发生哪些后果?3.戊巴比妥钠在肝内代谢对药物相互作用有何影响?实验六全血水杨酸二室模型药物代谢动力学参数测定药物代谢动力学是研究机体对药物的作用过程及体内药物浓度随时间动态变化的规律,包括药物在体内吸收、分布、代谢和排泄的特点及影响因素,以及运用数学方法定量地阐明机体内药物浓度随时间变化的规律,求出药物的药代动力学参数如半衰期、分布容积、生物利用度、吸收速率常数、消除速度常数等,为临床用药方案的制定、用药剂量的调控、治疗效果及不良反应的监测等提供理论依据,有利于更好地发挥药物的防治作用,尽量减少和避免不良反应.药物在体内的变化过程可以用药-时曲线来表示,即以时间为横坐标,血药浓度为纵坐标绘出曲线.利用曲线可以分析并最终阐明该药的药动学特征.从单次口服后时量曲线,可以看出该药物的体内过程对血浆浓度变化的影响.曲线升段反映药物吸收与分布过程,坡度反映该过程的速度.坡度陡,则吸收快、分布慢,曲线的峰值反映给药后所达到的最高血药浓度.曲线降段反映药物的消除速度,坡度陡则消除快,坡度平则消除慢.当然,在药物吸收过程中药物消除过程已经开始,血药浓度达到峰值时吸收过程也未完全停止,只是在曲线升段时吸收快于消除,在曲线降段时消除快于吸收.峰浓度表示吸收与消除速度相等.半衰期指血浆药物浓度下降一半所需的时间,是表示药物消除速度的参数.药物的半衰期长表示它在体内消除慢,滞留时间长.绝大多数药物是按一级动力学的规律消除,其血浆半衰期的数值是固定的;而半衰期的任何变化,可反映消除器官的功能状态.半衰期可从血药时间曲线上查到,即血浆浓度下降一半所对应的时间,也可以应用公式t1/2=0.693/Ke求出.半衰期是药动学参数中最基本的参数,它对制订和调整给药方案具有重要作用.一般情况下,一次给药后经过5个t1/2,约有96%以上的药物被消除;每隔一个半衰期给药1次,约经5个t1/2可达稳态浓度.房室模型:药物分子分布于各器官、组织的特点各不相同,为便于分析,可将分布特点相同,且药物浓度同步增减的器官、组织简化为一个或几个”房室”,这种数学分析模式称房室模型.一室模型:将集体看作一个房窒,给药后药物可立即均匀地分布在整个房室,并以一定速率从该室消除.将属于一室模型的药物单次静脉注射,用血药浓度对数值与时间作图可得到一直线,即药物-时间曲线呈指数消除.二室模型:将集体看作两个房室即中央室与周边室,并有两种转运速率,药物进入体内几乎立即分布到中央室,然后缓慢地分布到周边室.中央窒包括血液与能瞬时取得平衡的组织,如心、肝、肾、脑、腺体、肌肉等组织即细胞外液,周边室包括血液灌注贫乏的难以瞬时取得平衡的组织,如骨、脂肪、皮肤等.将属于二室模型的药物单次快速静脉注射后药物进入中央室,一面消除,一面向周边室分布,称之为α相.分布平衡后,曲线进入下降较慢的β相,主要反映药物的消除过程.通过本实验观察和了解药物代谢动力学实验方法和相关参数的计算方法.1.动物家兔,体重2.0~3.0 kg.2.器材10 mL试管,10 mL离心管,1 mL、2 mL、5 mL 刻度吸管.l mL、2 mL、5 mL注射器,移液吸管,普通剪刀与手术刀,弯血管钳,坐标纸,粗天平,分光光度计,离心机,计算器,兔手术台,纱布,滤纸.3.药品与试剂三氯化铁,三氯醋酸,10%水杨酸钠,0.04%水杨酸标准液,1%盐酸普鲁卡因等.1.分光光度计测定全血水杨酸钠浓度取离心管11支,编为0~10号.每管加入三氯化铁和三氯醋酸液 2 mL,9号管再加0.04%水杨酸标准液0.6 mL,10号管另加蒸馏水0.6 mL.取家兔1只称重,将其于仰卧位固定在兔手术台上,于兔颈部皮下注射1%盐酸普鲁卡因溶液1~2mL.待兔局部麻醉后,分离一侧颈外静脉,并在其下方横穿一根细线,供采血时固定静脉用. 用0.1U/L肝素润湿的l mL注射器采集该侧颈外静脉血0.6 mL,加入0号管中,用干棉球轻压针孔处以防止出血.从已分离出的颈外静脉的对侧耳缘静脉注射10%水杨酸钠溶液2 mL/kg.准确记录给药完毕时间.给药完毕后的第l min,3min,5 min,l0 min,20 min,50 min,80 min和110 min从颈外静脉分别采血0.6 mL,依次加入1~8号管中.用小玻棒搅拌0~8号管各1min,分别加入蒸馏水5mL 并搅拌l min,以3 000 r/min离心10min,用移液吸管各取上清液6mL备用.9号和10号两管各加蒸馏水5mL,摇匀待用.在分光光度计上用波长为510nm.光径为1cm比色皿,蒸馏水调零,测0~10号管光密度d0~d10.各测试管水杨酸钠光密度与水杨酸钠浓度按下列公式计算:标准管水杨酸钠光密度测定管水杨酸钠光密度测定管水杨酸钠浓度2.绘出药物-时间曲线按测得的血中水杨酸钠浓度取对数,以对数值为纵坐标,对应时间为横坐标作点图,或直接以浓度对数值与时间在半对数纸上作图.结果可见首段对数血药浓度下降很快,后段下降缓慢,则呈直线关系符合二室模型.1.采血量要准确.2.以开始采血时间为血样本时间,若未能按时采血,则以实际采血时间参数计算.3.注射水杨酸钠溶液时动物会挣扎.注意固定兔头.注射要一次成功,否则影响α相结果.1.说明实验中测定药物代谢动力学参数的意义?2.房室模型的含义是什么?实验七药物血浆半衰期的测定多数药物在体内按一级动力学的规律消除,静脉注射给药后,测定不同时间的血浆药物浓度,并以血浆药物浓度的对数值为纵坐标,时间为横坐标,其时量关系常呈直线.该直线的方程式为:血药浓度的半衰期:通过测定水杨酸钠的血浆浓度并计算半衰期的实验,加深理解药物血浆半衰期的概念并了解其测定方法.1.动物家兔1只,雌雄不限.2.器材721型分光光度计、离心机各1台,烧杯,试管,试管架1个,注射器,长针头1个,吸管,玻璃记号笔1支,洗耳球1个,计算器1个,纱布若干.3.药品与试剂10%水杨酸钠溶液,0.02%水杨酸钠标准溶液,10%三氯醋酸溶液,10%三氯化铁溶液,0.5%肝素钠溶液,蒸馏水.1.取家兔1只,称重,充分拔去耳缘静脉处被毛,剪去家兔左胸及剑突下被毛.2.取试管4只,按1、2、3、4的顺序编号,并各加入10%三氯醋酸3.5mL.3.用0.5%肝素钠溶液润湿注射器和长针头的内腔后,心脏穿刺取血2mL,l号管和2号管各推入lmL,摇匀静置.4.由耳缘静脉缓慢注射10%水杨酸钠溶液2mL/kg.5.静脉注射水杨酸钠后的0~10min和30~60min期间,从心脏或其他血管各取血lmL,分别置于3号管和4号管,摇匀静置,记录取血的准确时间.6.在2号管内加入0.02%水杨酸钠1mL,其他3支管各加入蒸馏水1mL,摇匀静置.7.对4只管进行离心5min,转速2500r/min,然后从每一个管精确吸取上清液3mL,分别置于另一组有相对应编号的试管中,每管各加入10%三氯化铁0.5mL,摇匀后可显色.8.在分光光度计520nm波长下,以1号管为对照校零,然后测定其余各管的光密度值.9.由标准管的光密度值和浓度求比值K,即K=X/Y,再根据X=KY,由Y1和Y2求得X1和X2,然后代入公式求出.1.将测定数据及计算数据填入下表:表10-7 血浆半衰期的测定数据及计算数据试管号光密度K值实测浓度1号2号3号4号2.根据公式计算:式中X1和X2分别为两次的血药浓度值,t为两次取血的间隔时间.3.做图法求:在半对数坐标纸上,以时间为横坐标,血浆药物浓度对数值为纵坐标,将两次测算的X1和X2作点连线,既为药物时量曲线,在此线上找出血浆药物浓度下降一半所对应的时间,即为该药的半衰期.求半衰期公式来源.根据:按照药物消除一级动力学方式,以血药浓度的自然对数为纵坐标,单位时间为横坐标,则血药时程关系呈一直线.衰减一半的时间为:将k代入则:1.本实验系定量比较,故每次抽取血样或试液的容量必须准确.2.顺利地采集足够量的血液是保证实验成功的关键,应具备娴熟的取血技术.3.如从家兔耳缘静脉取血,可使用二甲苯涂擦耳部皮肤,充分扩张家兔耳血管.4.取血时可用0.5%肝素钠溶液湿润针管,以免凝血,但抗凝剂的量可影响比色,故各管应尽量一致.1.测定血药浓度的一般步骤有哪些?2.如何根据两次不同时间测定的血药浓度计算药物的血浆半衰期?3.知道药物的半衰期有何临床意义?实验八给药途径对药物作用的影响大多数药物需进入血液,分布到作用部位才能发生作用.药物自给药部位进入全身血液循环的过程为吸收.吸收速度的快慢及吸收数量的多少直接影响药物的起效时间及强度.其中给药途径是决定药物起效时间及强度的重要因素之一.给药途径不同,则药物吸收快慢亦不同,其吸收快慢顺序是:腹腔注射>吸入>舌下>直肠>肌内注射>皮下注射>口服>皮肤.给药途径不同,其吸收程度又不同,由此使药物作用强度不同.药物经不。
全血水杨酸钠二室模型药动力学参数测定
1
3
5
10
20
3.226983 2.749862 2.657108 2.613642 2.52522
2.5678 2.5634 2.559 2.548
369.6579 365.9317 362.243 353.1832
1316.829 196.2305 91.81106 57.62764
1
3
5
10
3.119529 2.292766 1.962895 1.760631
LOG（C）
3.5 3
2.5 2
1.5 1
0.5 0 0
时 量曲
20
40
60
80
采血时间（单位min）
系列 100
消除相曲线
y = -0.0022x + 2.57
2.54
R²= 0.9982
LOG（C）
消除相曲线
y = -0.0022x + 2.57
2.54
R²= 0.9982
2.52
2.5
2.48
(β
/2.3026)
=
0.0022
β=
0.00506572
3
LOG10(B)=2.57
B=
371.5352291
T1/2β=0.693/β
T1/2β=
136.686391 min
0.1336x + 2.9183 R²= 0.7424
系列1)
y=0.1336x 1 + 2.9183
lgCr=(α 2 /2.3026)
散点图 ——2
系列1
制图
022x + 2.57
1 选取 20 50 80 min 及浓度对数值作图
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水杨酸钠药物代谢动力学参数测定
前言：本实验通过测定不同时间点的血药浓度，作出相应的药-时曲线，用一定的数学方
法对曲线加以拟合，根据相关统计学指标最终确定药物的房室模型，并计算主要药代动力学
参数。
1、实验目的掌握药物代谢动力学参数的意义及其测定方法
2、实验动物家兔，体重2.5〜3kg,性别不拘。
3、实验药品10%水杨酸钠、0.06%水杨酸钠标准液、10%三氯醋酸、10%三氯化铁、0.5%
肝素、生理盐水、盐酸利多卡因注射液、蒸馏水。
4、实验器材电子天平、兔手术台、试管架、10ml试管、10ml离心管、5ml和1ml加样
枪及枪头、5ml注射器、6号针头、722分光光度计、离心机、涡旋混匀器、手术器械、动
脉插管、棉球、烧杯、头皮针。
5、实验方法 1.取10支10ml试管，用0.5%肝素润湿管壁。
2. 家兔称重，固定于手术台，剪去颈部前被毛。
在盐酸利多卡因局部麻醉下作一侧颈动脉插
管，取血3ml，摇匀试管内血液，防止凝血，血管钳夹闭导管，生理盐水纱布覆盖手术部
位。
3. 沿对侧耳缘静脉缓慢注射10%水杨酸钠150mg/kg，于注射后1、3、5、10、
20、50、80、110min分别动脉放血1.5ml入相应的试管并摇匀。
4. 取10支10ml离心管，分别标为“对照”、“标准”及相应“取血时间”，
按下表加入样品及试剂。
5. 各管用涡旋混匀器充分混匀，2000rpm，离心10min。
6. 各管取上清液3ml加入另一套干净试管中，在各加入10%三氯化铁0.3ml ,
混匀显色。
以对照管调零，在722分光光度计上读取520nm的ODf直。
7. 求出水杨酸钠在家兔体内各时间点的血药浓度（丫）。
先求出标准管浓度（Y0）与0D值（X））的比值（K）, K=Y/X o , Y=XK
8. 绘出时-药曲线，以水杨酸钠浓度的对数值作为纵坐标，对应时间为横坐标
作图，分析水杨酸钠动力学模型及药动学参数计算。
6、实验结果
各时间点取出血样离心后的上清液加三氯化铁显色后，用分光光度计所测出其0D值。
由标准组0D值X o和标准组血药浓度Y0,求出K= 0.7634。
用此比值，可得到各组血药浓度（表1）。
时间（h）OD值浓度（mg/L）
0.0166670.10580.157
0.050.11789.3178
0.0833330.08262.5988
0.1666670.07658.0184
0.3333330.07254.9648
0.8333330.07557.255
1.3333330.02216.7948
1.8333330.003
2.2902
表1.各时间点血药浓度
水杨酸钠C-T 曲线
图中上升支为最初几分钟药物在体内的吸收分布相， 的代谢排泄相。
以T 为横坐标、lnC 为纵坐标，作InC-T 曲线
4.B 1
+
4 ' * * *
3.2 -
+
2.4 - 1.6 - OB -
*
Q Q 2 0.4 0.6 O.B 1 1.2 1.4 1,6 l.S Z
Ln-T 散点图
初步观察可知，散点图形在10min 处出现转折，血药浓度呈现先快后慢的衰减曲线，
r — A P - a, _|_ D e - P l
r
可初估为二室模型，试拟合双指数方程 ’ 「
' 。
其中「为血药浓度，t 为时
间，a 、B 分别为二室模型中分布速率常数和消除速率常数。
A 、B 为延伸线在纵轴的截
距。
实验数据处理采用“残差法”来计算双指数方程有关系数以及药物动力学参数，直 线拟合采用最小二乘法，具体步骤由计算机软件
Excel2007完成。
拟合的结果为:
0.4
0.8 1.2
持续较长时间的下降支为药物
9C
A=20.905 , B=97.319 , a=33.082 , 3=4.141。
拟合药-时方程为
c r = 20.905厂貂吨+ 97.3 血⑷4"
利用以上参数，代入以下计算公式可进一步求出水杨酸钠各药代动力学参数。
G)=A+B V=D/ C o
(a=0.693/ a, ( 3)=0.693/ 3
K2l=(A 3+Ba)/(A+B), K e= a 3K21 , K i2= a+3-K2i-K e
AUC=A/a+ B/ 3 V d=D o/ 3 " ： , V2=V d-V i
其中，V d表示表观分布容积，V1表示中央室表观分布容积，V2表示外周室表观分布容积
1 - (a为药物分布半衰期，•(3)为药物消除半衰期。
各参数值见表2。
参数单位数值参数单位数值
A mg/L20.905Ke1/h 4.825
a1/h33.082K121/h 2.280
B mg/L97.319Vd L/Kg 2.957
31/h 4.141V1L/Kg 2.537
t1/2(a h0.0331V2L/Kg0.419
t1/2(3)h0.167AUC mg/h24.133
K211/h17.941CL L/(Kg?h)12.244
表2.二室模型拟合方程及药动学主要参数
7、实验讨论
以上计算是基于散点图的形状拟估计的二室模型拟合方程及药代动力学参数，为验证
室模型的正确性，下面通过统计学方法，对一室模型和二室模型作一比较。
对血药浓度进行单指数拟合，得一室模型拟合方程:
= 89.61c -1.7441
通过拟合方程分别计算一室模型、二室模型下的统计学指标，加权残差平方和Sw,拟
2
合优度：及AIC （表3）。
表一室、二室模型下的统计学指标
由以上计算结可知，一室和二室模型比较后发现Sw值、AIC值以一室为小，而拟合优
2
度.以二室为大，彼此矛盾。
作F值检测得出，F i2=0.53，小于界值，P值〉0.05，故实
际上，这组数据作一室模型和二室模型拟合没有显著性差异。
以一室模型拟合方程计算
得到的药动学参数如下（表4）。
参数单位数值
t l/2h0.397362
Ke1/h 1.744
Vd L/Kg 3.349
AUC mg/h172.018
CL L/(Kg?i) 5.841
表4. 一室模型药动学参数。