第11章弯曲菌
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• 传代培养时可在10%C02环境中生长
不同菌种的最适生长温度不同
空肠、大肠弯曲菌：25℃不生长、42℃生长
胎儿弯曲菌：
25℃生长、42℃不生长
各种弯曲菌37℃均生长
鉴别
布氏肉汤为基础+血液/血清+多种抗生素
• 头孢哌酮—万古霉素—两性霉素琼脂 （CVA）
wenku.baidu.com• 不含血的碳—头孢哌酮—去氧胆酸盐琼 脂（CCDA)
• 悬滴法观察动力（投镖样/螺旋 状运动）
分离培养：
• 选择性平板——Campy-BAP • 标本分别置于37℃和42℃培养 • 微需氧环境培养 • 72h后观察菌落
弯曲菌属的鉴定要点：
• G-、菌体弯曲或呈S形、海鸥展翅形 • 动力（+） • 微需氧环境生长 • 氧化酶、触酶（+） • 脲酶（-）
• 碳基选择性培养基（CSM）
改良弯曲菌培养基(Campy-BAP)
二种形态的菌落： ①灰白、湿润、扁平边缘不整的蔓延生长的 菌落 ②半透明、圆形、凸起、有光泽的细小菌落
均不溶血
生化反应：
• 氧化酶（+）、触酶（+） • 硝酸盐还原（+） • 尿素酶（-） • 不分解糖类
• 弯曲菌属各种间鉴别特征 表11-1
常用鉴别试验：
• 萘啶酸、头孢噻吩敏感试验 • 马尿酸盐水解试验 • 醋酸吲哚水解试验 • 生长温度（25℃、42℃）试验 • 硝酸盐还原试验、H2S等
马尿酸水解试验
• 原理： • 某些细菌具有马尿酸水解酶，可使
马尿酸水解为苯甲酸和甘氨酸，苯 甲酸与三氯化铁试剂结合，形成苯 甲酸铁沉淀
• 方法： 将待检菌接种于马尿酸钠培养基中， 35℃48h，离心沉淀，取上清液 0.8ml，加入三氯化铁试剂0.2ml， 立即混匀，10~15min观察结果
• 抗体检测： ELISA——血清中HP菌体抗体或尿 素酶抗体等
• 碳标记呼吸试验： 用13C或14C标记尿素、测定病人呼吸 中释放的标记CO2的量
复习要点
• 弯曲菌的培养特性及鉴定要点 • 幽门螺杆菌的培养及主要生化特性
41
S形、螺旋形、海鸥展翅形，菌细胞 末端是尖的
• 空肠/大肠弯曲菌的鞭毛——较细且 紧密盘绕的两端单鞭毛
• 胎儿弯曲菌胎儿亚种的鞭毛——波 浪状的一端单鞭毛
• 运动非常活泼——呈投镖样或螺旋 样前进
培养特性： 微需氧菌
• 大多数弯曲菌生长时需氧浓度为5%~10% （V/V）
• 最佳气体环境：5%O2、10%CO2、85%N2
海鸥形
电镜下菌体一端可伸出2~6根带鞘的 鞭毛，在分裂时两端均可见鞭毛， 鞭毛长为菌体1～1.5倍,运动活泼
培养特性：
• 微需氧、5%O2、10%CO2、85%N2 • 最适温度35℃～37℃，25℃、42℃
不生长
• 生长时需一定的湿度（相对湿度98% 以上）
• 营养要求较高，需血液或血清
• 巧克力琼脂、哥伦比亚血琼脂、心 脑浸液血琼脂、布氏血琼脂等
红（+）
（-） （+）
粪便标本抗原检测：
• ELISA——粪便中的抗原 • 适用于不能进行13C或14C标记尿素呼
吸试验或胃镜检查的患者
分离培养：
• 选择性培养基 • 微需氧和湿润的环境中，35℃、
3~5天 10天无生长报告（-）
鉴定要点：
• 培养特性、菌落特征、形态染色 • 37℃生长、43℃和25℃不生长 • 氧化酶（+）触酶（+）脲酶（++） • 对萘啶酸（ R）、头孢噻吩（S）
• 传染源 ——人类 • 传播途径 ——经口感染
• 与慢性胃炎、消化性溃疡，尤其 是十二指肠溃疡有密切关系
• 与胃癌的发生有一定关系
致病机制
可能与下列因素有关： • HP特殊的螺旋状和端鞭毛运动 • 尿素酶 • 细胞毒素相关蛋白（CagA） • 空泡毒素（VacA）
生物学特性
形态染色： G-、菌体细长弯曲呈螺旋形、S形、
所致疾病
• 空肠弯曲菌——散发性细菌性肠炎
血清型(O:19)与人神经组织有共同抗原， 可引起交叉免疫反应导致吉兰-巴雷综合征
• 胎儿弯曲菌胎儿亚种——肠外感染
引起败血症、心内膜炎、脑膜炎、血栓性 静脉炎、关节炎、胸膜炎、腹膜炎、胆囊 炎等
生物学特性
形态染色： • G-菌体细长，弯曲成逗点状、弧形、
抵抗力：
• 较弱，室温下很快死亡 • 56℃5min即被杀死 • 干燥环境中仅存活3h • 培养物放置4℃冰箱中可存活3周
微生物学检验
标本采集与运送： • 根据感染部位采集相应标本 • 立即送检，如不能及时送检，标
本应种入卡-布运送培养基，4℃ 保存
直接镜检：
• 粪便、肛拭涂片G染色镜检，找 G-弧形、S形、螺旋形等细菌
第十一章 弯曲菌属检验、螺杆菌属检验
弯曲菌属检验
微需氧菌
•G-、菌体弯曲呈弧形或螺旋形等 •氧化酶（+）、动力（+） •引起人类肠道感染/肠道外感染的病原 菌
分类
临床常见的有： • 空肠弯曲菌 • 大肠弯曲菌 • 胎儿弯曲菌 • 痰液弯曲菌、简明弯曲菌、红嘴鸥弯
曲菌等
致病因素：
• 鞭毛 • 粘附素 • 肠毒素、细胞毒素、内毒素等 • 仍处研究阶段
• 加入多黏菌素B、万古霉素、两性 霉素、TMP等抑制杂菌生长
• 生长较慢，初次分离需3~4天、少 数7天才能形成菌落，次代培养需 2~3天
• 圆形的小菌落，无色半透明呈露滴 状，直径约0.5~1mm，BAP上有轻度 溶血
哥伦比亚血琼脂
生化反应：
• 氧化酶（+）、触酶（+） • 快速脲酶试验强（+）是其显著特征
• 结果： 出现恒定之沉淀物（+）
弯曲菌鉴定双岐索引 G-弯曲菌
氧化酶（+）
+
尿素酶
-
幽
+ 25℃生长 -
门
胎
螺 杆 菌
儿 弯 曲 菌
+ 马尿酸水解 -
空
大
肠
肠
弯
弯
曲
曲
菌
菌
螺杆菌属（ Helicobacter）
• 37℃生长，25℃和42℃均不生长 • 34种 • 幽门螺杆菌（H.pylori） • 芬纳尔螺杆（H.fennelliae） • 恋螺杆菌（H.cinaedi）
鉴定的主要依据和快速诊断方法 • 不分解糖类
• 生物学特征：表11-2
微生物学检验
标本采集： • 多部位采集胃粘膜活检标本
直接显微镜检查：
• 压滴/悬滴法——形态、运动 • 涂片G染色——形态和染色 • 组织切片染色镜检 • 免疫组化法 • 间接免疫荧光法——快速、敏感、
特异的诊断方法
快速脲酶试验： 尿素培养基——黄
不同菌种的最适生长温度不同
空肠、大肠弯曲菌：25℃不生长、42℃生长
胎儿弯曲菌：
25℃生长、42℃不生长
各种弯曲菌37℃均生长
鉴别
布氏肉汤为基础+血液/血清+多种抗生素
• 头孢哌酮—万古霉素—两性霉素琼脂 （CVA）
wenku.baidu.com• 不含血的碳—头孢哌酮—去氧胆酸盐琼 脂（CCDA)
• 悬滴法观察动力（投镖样/螺旋 状运动）
分离培养：
• 选择性平板——Campy-BAP • 标本分别置于37℃和42℃培养 • 微需氧环境培养 • 72h后观察菌落
弯曲菌属的鉴定要点：
• G-、菌体弯曲或呈S形、海鸥展翅形 • 动力（+） • 微需氧环境生长 • 氧化酶、触酶（+） • 脲酶（-）
• 碳基选择性培养基（CSM）
改良弯曲菌培养基(Campy-BAP)
二种形态的菌落： ①灰白、湿润、扁平边缘不整的蔓延生长的 菌落 ②半透明、圆形、凸起、有光泽的细小菌落
均不溶血
生化反应：
• 氧化酶（+）、触酶（+） • 硝酸盐还原（+） • 尿素酶（-） • 不分解糖类
• 弯曲菌属各种间鉴别特征 表11-1
常用鉴别试验：
• 萘啶酸、头孢噻吩敏感试验 • 马尿酸盐水解试验 • 醋酸吲哚水解试验 • 生长温度（25℃、42℃）试验 • 硝酸盐还原试验、H2S等
马尿酸水解试验
• 原理： • 某些细菌具有马尿酸水解酶，可使
马尿酸水解为苯甲酸和甘氨酸，苯 甲酸与三氯化铁试剂结合，形成苯 甲酸铁沉淀
• 方法： 将待检菌接种于马尿酸钠培养基中， 35℃48h，离心沉淀，取上清液 0.8ml，加入三氯化铁试剂0.2ml， 立即混匀，10~15min观察结果
• 抗体检测： ELISA——血清中HP菌体抗体或尿 素酶抗体等
• 碳标记呼吸试验： 用13C或14C标记尿素、测定病人呼吸 中释放的标记CO2的量
复习要点
• 弯曲菌的培养特性及鉴定要点 • 幽门螺杆菌的培养及主要生化特性
41
S形、螺旋形、海鸥展翅形，菌细胞 末端是尖的
• 空肠/大肠弯曲菌的鞭毛——较细且 紧密盘绕的两端单鞭毛
• 胎儿弯曲菌胎儿亚种的鞭毛——波 浪状的一端单鞭毛
• 运动非常活泼——呈投镖样或螺旋 样前进
培养特性： 微需氧菌
• 大多数弯曲菌生长时需氧浓度为5%~10% （V/V）
• 最佳气体环境：5%O2、10%CO2、85%N2
海鸥形
电镜下菌体一端可伸出2~6根带鞘的 鞭毛，在分裂时两端均可见鞭毛， 鞭毛长为菌体1～1.5倍,运动活泼
培养特性：
• 微需氧、5%O2、10%CO2、85%N2 • 最适温度35℃～37℃，25℃、42℃
不生长
• 生长时需一定的湿度（相对湿度98% 以上）
• 营养要求较高，需血液或血清
• 巧克力琼脂、哥伦比亚血琼脂、心 脑浸液血琼脂、布氏血琼脂等
红（+）
（-） （+）
粪便标本抗原检测：
• ELISA——粪便中的抗原 • 适用于不能进行13C或14C标记尿素呼
吸试验或胃镜检查的患者
分离培养：
• 选择性培养基 • 微需氧和湿润的环境中，35℃、
3~5天 10天无生长报告（-）
鉴定要点：
• 培养特性、菌落特征、形态染色 • 37℃生长、43℃和25℃不生长 • 氧化酶（+）触酶（+）脲酶（++） • 对萘啶酸（ R）、头孢噻吩（S）
• 传染源 ——人类 • 传播途径 ——经口感染
• 与慢性胃炎、消化性溃疡，尤其 是十二指肠溃疡有密切关系
• 与胃癌的发生有一定关系
致病机制
可能与下列因素有关： • HP特殊的螺旋状和端鞭毛运动 • 尿素酶 • 细胞毒素相关蛋白（CagA） • 空泡毒素（VacA）
生物学特性
形态染色： G-、菌体细长弯曲呈螺旋形、S形、
所致疾病
• 空肠弯曲菌——散发性细菌性肠炎
血清型(O:19)与人神经组织有共同抗原， 可引起交叉免疫反应导致吉兰-巴雷综合征
• 胎儿弯曲菌胎儿亚种——肠外感染
引起败血症、心内膜炎、脑膜炎、血栓性 静脉炎、关节炎、胸膜炎、腹膜炎、胆囊 炎等
生物学特性
形态染色： • G-菌体细长，弯曲成逗点状、弧形、
抵抗力：
• 较弱，室温下很快死亡 • 56℃5min即被杀死 • 干燥环境中仅存活3h • 培养物放置4℃冰箱中可存活3周
微生物学检验
标本采集与运送： • 根据感染部位采集相应标本 • 立即送检，如不能及时送检，标
本应种入卡-布运送培养基，4℃ 保存
直接镜检：
• 粪便、肛拭涂片G染色镜检，找 G-弧形、S形、螺旋形等细菌
第十一章 弯曲菌属检验、螺杆菌属检验
弯曲菌属检验
微需氧菌
•G-、菌体弯曲呈弧形或螺旋形等 •氧化酶（+）、动力（+） •引起人类肠道感染/肠道外感染的病原 菌
分类
临床常见的有： • 空肠弯曲菌 • 大肠弯曲菌 • 胎儿弯曲菌 • 痰液弯曲菌、简明弯曲菌、红嘴鸥弯
曲菌等
致病因素：
• 鞭毛 • 粘附素 • 肠毒素、细胞毒素、内毒素等 • 仍处研究阶段
• 加入多黏菌素B、万古霉素、两性 霉素、TMP等抑制杂菌生长
• 生长较慢，初次分离需3~4天、少 数7天才能形成菌落，次代培养需 2~3天
• 圆形的小菌落，无色半透明呈露滴 状，直径约0.5~1mm，BAP上有轻度 溶血
哥伦比亚血琼脂
生化反应：
• 氧化酶（+）、触酶（+） • 快速脲酶试验强（+）是其显著特征
• 结果： 出现恒定之沉淀物（+）
弯曲菌鉴定双岐索引 G-弯曲菌
氧化酶（+）
+
尿素酶
-
幽
+ 25℃生长 -
门
胎
螺 杆 菌
儿 弯 曲 菌
+ 马尿酸水解 -
空
大
肠
肠
弯
弯
曲
曲
菌
菌
螺杆菌属（ Helicobacter）
• 37℃生长，25℃和42℃均不生长 • 34种 • 幽门螺杆菌（H.pylori） • 芬纳尔螺杆（H.fennelliae） • 恋螺杆菌（H.cinaedi）
鉴定的主要依据和快速诊断方法 • 不分解糖类
• 生物学特征：表11-2
微生物学检验
标本采集： • 多部位采集胃粘膜活检标本
直接显微镜检查：
• 压滴/悬滴法——形态、运动 • 涂片G染色——形态和染色 • 组织切片染色镜检 • 免疫组化法 • 间接免疫荧光法——快速、敏感、
特异的诊断方法
快速脲酶试验： 尿素培养基——黄