微生物生长繁殖五
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对数生长期的细菌个体形态、化学组成和生理特性等均较一致，代谢旺盛、生长 迅速、代时稳定，所以是研究微生物基本代谢的良好材料。它也常在生产上用作 种子，20使20/6微/28生物发酵的迟缓期缩短，提高经济效益。
稳定生长期(Stationary phase)：
稳定生长期又来自百度文库恒定期或最高生长期，此时培养液中活细菌数 最高并维持稳定。 由于营养物质消耗，代谢产物积累和pH等环境变化，逐步不适宜 于细菌生长，导致生长速率降低直至零(即细菌分裂增加的数量等 于细菌2020死/6/28亡数)。
在一定波长下，测定菌悬液的光密 度，以光密度(optical density, 即O.D.) 表示菌量。
实验测量时应控制在菌浓度与光密度 成正比的线性范围内，否则不准确。
2020/6/28
2、 生理指标法
微生物的生理指标，如呼吸强度，耗氧量、酶活性、 生物热等与其群体的规模成正相关。
样品中微生物数量多或生长旺盛，这些指标愈明显， 因此可以借助特定的仪器如瓦勃氏呼吸仪、微量量 热计等设备来测定相应的指标。
衰亡期(Decline或Death phase)：
一个菌落可能是多个细胞一起形成，所以在科研中一般用
菌落形成单位（colony forming units， CFU）来表示，而
2020/6/28
不是直接表示为细胞数。
2、膜过滤培养法
当样品中菌数很低时，可以将一定体积的湖水、海水或饮用水等样 品通过膜过滤器，然后将将膜转到相应的培养基上进行培养，对形 成的菌落进行统计。
在高等生物里这两个过程可以明显分开，但在低等特别是在单 细胞的生物里，由于细胞小，这两个过程是紧密联系又很难划
分的过程。
2020/6/28
一个微生物细胞
合适的外界条件，吸收营养物质，进行代谢。 如果同化作用的速度超过了异化作用
个体的生长 原生质的总量（重量、体积、大小）就不断增加
如果各细胞组分是按恰当的比例增长时，则达到一定程度后就 会发生繁殖，引起个体数目的增加。
第五章 微生物的生长 繁殖与生存因子
第一节 微生物的生长繁殖
生长：
生物个体物质有规律地、不可逆增加，导致个体 体积扩大的生物学过程。
繁殖：
生物个体生长到一定阶段，通过特定方式产生新的 生命个体，即引起生命个体数量增加的生物学过程。
生长是一个逐步发生的量变过程， 繁殖是一个产生新的生命个体的质变过程。
2020/6/28
3、The most probable number method（液体稀释法）
主要适用于只能进行液体培养的微生 物，或采用液体鉴别培养基进行直接 鉴定并计数的微生物。
对未知样品进行十倍稀释，然后根据估算取三个连续的稀释度 平行接种多支试管，对这些平行试管的微生物生长情况进行统 计，长菌的为阳性，未长菌的为阴性，然后根据数学统计计算 出2样020品/6/28中的微生物数目。
细胞内RNA，尤其是rRNA含量增高，合成代谢活跃，核糖体、 酶类和ATP的合成加快，易产生诱导酶。
对外界不良条件反应敏感。
细胞处于活跃生长中，只是分裂迟缓 在此阶段后期，少数细胞开始分裂，曲线略有上升。
2020/6/28
对数生长期(Log phase)：
又称指数生长期(Exponential phase) 以最大的速率生长和分裂，细菌数量呈对数增加， 细菌内各成分按比例有规律地增加，表现为平衡生长。
4、显微镜直接计数法 1）常规方法：
缺点： 不能区分死菌与活菌； 不适于对运动细菌的计数； 需要相对高的细菌浓度； 个体小的细菌在显微镜下难以 观察；2020/6/28
2）其它方法：
比例计数：
将已知颗粒浓度的样品（例如血液）与待测细胞细胞浓度的样品混匀 后在显微镜下根据二者之间的比例直接推算待测微生物细胞浓度。
生长曲线(Growth Curve)：
细菌接种到定量的液体培养基中，定时取样测定细胞数量， 以培养时间为横座标，以菌数为纵座标作图，得到的一条反映细 菌在整个培养期间菌数变化规律的曲线。
2020/6/28
细菌的生长曲线一般用菌数的对数为纵坐标作图
2020/6/28
一条典型的生长曲线至少可以分为 迟缓期，对数期，稳定期和衰亡期等四个生长时期
常用于对微生物的快速鉴定与检测
2020/6/28
二、细菌的群体生长繁殖
微生物的特点： 个体微小
肉眼看到或接触到的微生物是成千上万个 单个的微生物组成的群体。
微生物接种是群体接种，接种后的生长是微生物群体繁殖生长。
对细菌群体生长规律的了解是对其进行研究与利用的基础
2020/6/28
一、生长曲线 在微生物学中提到的“生长”，均指群体生长。
群体内各个个体的进一步生长
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群体的生长
一、微生物生长的测定:
微生物生长：
单位时间里微生物数量或生物量（Biomass）的变化
微生物生长的测定：
个体计数 群体重量测定 群体生理指标测定
评价培养条件、营养物质等对微生物生长的影响；
评价不同的抗菌物质对微生物产生抑制(或杀死)作用的效果； 客观地反映微生物生长的规律；
2020/6/28
（一）以数量变化对微生物生长情况进行测定 1、培养平板计数法
2020/6/28
采用培养平板计数法要求操作熟练 、准确，否则难以得到正确的结果：
样品充分混匀；
每支移液管及涂布棒只能接触一个 稀释度的菌液；
同一稀释度三个以上重复,取平均 值；
每个平板上的菌落数目合适，便于 准确计数；
2020/6/28
迟缓期(Lag phase)：
将少量菌种接入新鲜培养基后，在开始一段时间内菌数不立即增加， 或增加很少，生长速度接近于零。也称延迟期、适应期。
2020/6/28
迟缓期的特点： 分裂迟缓、代谢活跃
细胞形态变大或增长，例如巨大芽孢杆菌，在迟缓期末，细胞 的平均长度比刚接种时长6倍。一般来说处于迟缓期的细菌细胞 体积最大
过滤计数：
当样品中菌数很低时，可以将一定体积的湖水、海水或饮用水等样品 通过膜过滤器。然后将滤膜干燥、染色，并经处理使膜透明，再在显 微镜下计算膜上(或一定面积中)的细菌数；
活菌计数：
采用特定的染色技术也可分别对活菌和死菌进行分别计数
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（二）以生物量为指标测定微生物的生长
1、比浊法
稳定生长期(Stationary phase)：
稳定生长期又来自百度文库恒定期或最高生长期，此时培养液中活细菌数 最高并维持稳定。 由于营养物质消耗，代谢产物积累和pH等环境变化，逐步不适宜 于细菌生长，导致生长速率降低直至零(即细菌分裂增加的数量等 于细菌2020死/6/28亡数)。
在一定波长下，测定菌悬液的光密 度，以光密度(optical density, 即O.D.) 表示菌量。
实验测量时应控制在菌浓度与光密度 成正比的线性范围内，否则不准确。
2020/6/28
2、 生理指标法
微生物的生理指标，如呼吸强度，耗氧量、酶活性、 生物热等与其群体的规模成正相关。
样品中微生物数量多或生长旺盛，这些指标愈明显， 因此可以借助特定的仪器如瓦勃氏呼吸仪、微量量 热计等设备来测定相应的指标。
衰亡期(Decline或Death phase)：
一个菌落可能是多个细胞一起形成，所以在科研中一般用
菌落形成单位（colony forming units， CFU）来表示，而
2020/6/28
不是直接表示为细胞数。
2、膜过滤培养法
当样品中菌数很低时，可以将一定体积的湖水、海水或饮用水等样 品通过膜过滤器，然后将将膜转到相应的培养基上进行培养，对形 成的菌落进行统计。
在高等生物里这两个过程可以明显分开，但在低等特别是在单 细胞的生物里，由于细胞小，这两个过程是紧密联系又很难划
分的过程。
2020/6/28
一个微生物细胞
合适的外界条件，吸收营养物质，进行代谢。 如果同化作用的速度超过了异化作用
个体的生长 原生质的总量（重量、体积、大小）就不断增加
如果各细胞组分是按恰当的比例增长时，则达到一定程度后就 会发生繁殖，引起个体数目的增加。
第五章 微生物的生长 繁殖与生存因子
第一节 微生物的生长繁殖
生长：
生物个体物质有规律地、不可逆增加，导致个体 体积扩大的生物学过程。
繁殖：
生物个体生长到一定阶段，通过特定方式产生新的 生命个体，即引起生命个体数量增加的生物学过程。
生长是一个逐步发生的量变过程， 繁殖是一个产生新的生命个体的质变过程。
2020/6/28
3、The most probable number method（液体稀释法）
主要适用于只能进行液体培养的微生 物，或采用液体鉴别培养基进行直接 鉴定并计数的微生物。
对未知样品进行十倍稀释，然后根据估算取三个连续的稀释度 平行接种多支试管，对这些平行试管的微生物生长情况进行统 计，长菌的为阳性，未长菌的为阴性，然后根据数学统计计算 出2样020品/6/28中的微生物数目。
细胞内RNA，尤其是rRNA含量增高，合成代谢活跃，核糖体、 酶类和ATP的合成加快，易产生诱导酶。
对外界不良条件反应敏感。
细胞处于活跃生长中，只是分裂迟缓 在此阶段后期，少数细胞开始分裂，曲线略有上升。
2020/6/28
对数生长期(Log phase)：
又称指数生长期(Exponential phase) 以最大的速率生长和分裂，细菌数量呈对数增加， 细菌内各成分按比例有规律地增加，表现为平衡生长。
4、显微镜直接计数法 1）常规方法：
缺点： 不能区分死菌与活菌； 不适于对运动细菌的计数； 需要相对高的细菌浓度； 个体小的细菌在显微镜下难以 观察；2020/6/28
2）其它方法：
比例计数：
将已知颗粒浓度的样品（例如血液）与待测细胞细胞浓度的样品混匀 后在显微镜下根据二者之间的比例直接推算待测微生物细胞浓度。
生长曲线(Growth Curve)：
细菌接种到定量的液体培养基中，定时取样测定细胞数量， 以培养时间为横座标，以菌数为纵座标作图，得到的一条反映细 菌在整个培养期间菌数变化规律的曲线。
2020/6/28
细菌的生长曲线一般用菌数的对数为纵坐标作图
2020/6/28
一条典型的生长曲线至少可以分为 迟缓期，对数期，稳定期和衰亡期等四个生长时期
常用于对微生物的快速鉴定与检测
2020/6/28
二、细菌的群体生长繁殖
微生物的特点： 个体微小
肉眼看到或接触到的微生物是成千上万个 单个的微生物组成的群体。
微生物接种是群体接种，接种后的生长是微生物群体繁殖生长。
对细菌群体生长规律的了解是对其进行研究与利用的基础
2020/6/28
一、生长曲线 在微生物学中提到的“生长”，均指群体生长。
群体内各个个体的进一步生长
2020/6/28
群体的生长
一、微生物生长的测定:
微生物生长：
单位时间里微生物数量或生物量（Biomass）的变化
微生物生长的测定：
个体计数 群体重量测定 群体生理指标测定
评价培养条件、营养物质等对微生物生长的影响；
评价不同的抗菌物质对微生物产生抑制(或杀死)作用的效果； 客观地反映微生物生长的规律；
2020/6/28
（一）以数量变化对微生物生长情况进行测定 1、培养平板计数法
2020/6/28
采用培养平板计数法要求操作熟练 、准确，否则难以得到正确的结果：
样品充分混匀；
每支移液管及涂布棒只能接触一个 稀释度的菌液；
同一稀释度三个以上重复,取平均 值；
每个平板上的菌落数目合适，便于 准确计数；
2020/6/28
迟缓期(Lag phase)：
将少量菌种接入新鲜培养基后，在开始一段时间内菌数不立即增加， 或增加很少，生长速度接近于零。也称延迟期、适应期。
2020/6/28
迟缓期的特点： 分裂迟缓、代谢活跃
细胞形态变大或增长，例如巨大芽孢杆菌，在迟缓期末，细胞 的平均长度比刚接种时长6倍。一般来说处于迟缓期的细菌细胞 体积最大
过滤计数：
当样品中菌数很低时，可以将一定体积的湖水、海水或饮用水等样品 通过膜过滤器。然后将滤膜干燥、染色，并经处理使膜透明，再在显 微镜下计算膜上(或一定面积中)的细菌数；
活菌计数：
采用特定的染色技术也可分别对活菌和死菌进行分别计数
2020/6/28
（二）以生物量为指标测定微生物的生长
1、比浊法