抗原抗体反应的原理PPT讲稿
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抗原抗体反应的课件ppt
比例性
抗原抗体反应具有比例性，即当抗原和抗体比例适当时，反应最完全，形成的免疫复合物 最多。当抗原或抗体过量时，反应则不完全，形成的免疫复合物也较少。这种比例性是由 抗原和抗体的浓度以及它们之间的比例关系决定的。
02
抗原抗体反应机制
抗原识别与结合机制
抗原表位识别
T细胞通过TCR识别抗原肽-MHC分子复合物，B细胞通过BCR识 别抗原表位。
抗原抗体反应特点
特异性
抗原抗体反应具有高度的特异性，即一种抗体只能与相应的抗原发生反应，形成免疫复合 物。这种特异性是由抗原决定簇和抗体结合部位的互补性决定的。
可逆性
抗原抗体反应是可逆的，即在一定条件下，免疫复合物可以解离成游离的抗原和抗体，再 次相遇时仍可重新结合。这种可逆性是由抗原抗体结合的亲和力决定的，亲和力越高，结 合越牢固，解离越困难。
优化抗体药物设计
通过机器学习技术对抗体进行优化设计，提高抗 体的亲和力和特异性。
抗原抗体反应模拟
利用深度学习技术模拟抗原抗体反应过程，为药 物筛选和开发提供新工具。
THANKS
感谢观看
自身免疫性疾病检测及诊断
01
02
03
检测方法
介绍常见的自身免疫性疾 病相关抗体检测方法，如 ELISA、免疫印迹技术等 。
临床意义
阐述自身抗体检测在自身 免疫性疾病诊断、病情监 测和预后评估中的应用价 值。
病例分析
通过具体病例展示自身免 疫性疾病抗体检测的临床 应用，如系统性红斑狼疮 、类风湿性关节炎等。
药物开发中抗原抗体反应的意义
01
阐述药物开发中抗原抗体反应的研究意义，包括药物安全性、
有效性等方面。
药物抗原性的研究方法
02
抗原抗体反应具有比例性，即当抗原和抗体比例适当时，反应最完全，形成的免疫复合物 最多。当抗原或抗体过量时，反应则不完全，形成的免疫复合物也较少。这种比例性是由 抗原和抗体的浓度以及它们之间的比例关系决定的。
02
抗原抗体反应机制
抗原识别与结合机制
抗原表位识别
T细胞通过TCR识别抗原肽-MHC分子复合物，B细胞通过BCR识 别抗原表位。
抗原抗体反应特点
特异性
抗原抗体反应具有高度的特异性，即一种抗体只能与相应的抗原发生反应，形成免疫复合 物。这种特异性是由抗原决定簇和抗体结合部位的互补性决定的。
可逆性
抗原抗体反应是可逆的，即在一定条件下，免疫复合物可以解离成游离的抗原和抗体，再 次相遇时仍可重新结合。这种可逆性是由抗原抗体结合的亲和力决定的，亲和力越高，结 合越牢固，解离越困难。
优化抗体药物设计
通过机器学习技术对抗体进行优化设计，提高抗 体的亲和力和特异性。
抗原抗体反应模拟
利用深度学习技术模拟抗原抗体反应过程，为药 物筛选和开发提供新工具。
THANKS
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自身免疫性疾病检测及诊断
01
02
03
检测方法
介绍常见的自身免疫性疾 病相关抗体检测方法，如 ELISA、免疫印迹技术等 。
临床意义
阐述自身抗体检测在自身 免疫性疾病诊断、病情监 测和预后评估中的应用价 值。
病例分析
通过具体病例展示自身免 疫性疾病抗体检测的临床 应用，如系统性红斑狼疮 、类风湿性关节炎等。
药物开发中抗原抗体反应的意义
01
阐述药物开发中抗原抗体反应的研究意义，包括药物安全性、
有效性等方面。
药物抗原性的研究方法
02
抗原抗体反应ppt课件
• 抗生素等药物因其分子量较小，不具有抗 原性。与牛血清白蛋白等大分子偶联后才 具有完全抗原的特性。
48
• 来源于自然感染或人工感染以及人工培养 病原生物体的生物大分子物质，如蛋白质 、多肽、酶类等，必须进行分离纯化，才 能作为特异性较好的检测抗原。
• 分离纯化方法有选择性沉淀法、有机溶剂 沉淀法、等电点沉淀法、电泳法、超速离 心法、层析法等。
抗原抗体结合力示意图
5
l. 静电引力
抗原和抗体分子带有相反电荷的氨基和羧 基基团之间相互的引力，称为静电引力， 又称库伦引力。
例如，抗体分子上带电荷的碱性氨基酸的 游离氨基(-NH3+)和酸性氨基酸的游离羧基 (-COO-)可与抗原分子上带相反电荷的对应 基团相互吸引。这种引力的大小与两个相 互作用基团间的距离平方成反比。
30
（3）浓度: 抗体的浓度往往是与抗原相对而言。合 适的浓度才出现明显的反应现象。因此 许多试验应进行抗体预滴定，找出最适 反应浓度。
31
二、环境因素
l.电解质
抗原抗体结合后由亲水性变为疏水性，此时 易受电解质影响，如有适当浓度电解质存在， 就会使抗原抗体失去一部分电荷而相互凝集或 沉淀，出现可见反应;若无电解质存在，则不 出现可见反应。通常在血清学试验中，以8.5% NaCl溶液作为抗原抗体的稀释液及反应液，其 中Na+和Cl-可分别中和胶体颗粒上的电荷，使 胶体颗粒的电势下降，形成可见的沉淀物或凝 集物。但如果电解质浓度过高，则会出现非特 异性蛋白质沉淀，即盐析。
13
三、亲水胶体转化为疏水胶体
抗体和大多数抗原同属蛋白质。在通常的 血清学反应条件下均带有负电荷，使极化 的水分子在其周围形成水化层，成为亲水 胶体，因此蛋白质不会自行凝集出现沉淀。 当Ag与Ab结合后，表面电荷减少，水化层 变薄；而且由于Ag-Ab复合物形成后，与水 接触的表面积减少，由亲水胶体转化为疏 水胶体。此时在电解质(如NaCl)的作用下， 使各疏水胶体之间进一步靠拢、沉淀，形 成可见的Ag-Ab复合物。
48
• 来源于自然感染或人工感染以及人工培养 病原生物体的生物大分子物质，如蛋白质 、多肽、酶类等，必须进行分离纯化，才 能作为特异性较好的检测抗原。
• 分离纯化方法有选择性沉淀法、有机溶剂 沉淀法、等电点沉淀法、电泳法、超速离 心法、层析法等。
抗原抗体结合力示意图
5
l. 静电引力
抗原和抗体分子带有相反电荷的氨基和羧 基基团之间相互的引力，称为静电引力， 又称库伦引力。
例如，抗体分子上带电荷的碱性氨基酸的 游离氨基(-NH3+)和酸性氨基酸的游离羧基 (-COO-)可与抗原分子上带相反电荷的对应 基团相互吸引。这种引力的大小与两个相 互作用基团间的距离平方成反比。
30
（3）浓度: 抗体的浓度往往是与抗原相对而言。合 适的浓度才出现明显的反应现象。因此 许多试验应进行抗体预滴定，找出最适 反应浓度。
31
二、环境因素
l.电解质
抗原抗体结合后由亲水性变为疏水性，此时 易受电解质影响，如有适当浓度电解质存在， 就会使抗原抗体失去一部分电荷而相互凝集或 沉淀，出现可见反应;若无电解质存在，则不 出现可见反应。通常在血清学试验中，以8.5% NaCl溶液作为抗原抗体的稀释液及反应液，其 中Na+和Cl-可分别中和胶体颗粒上的电荷，使 胶体颗粒的电势下降，形成可见的沉淀物或凝 集物。但如果电解质浓度过高，则会出现非特 异性蛋白质沉淀，即盐析。
13
三、亲水胶体转化为疏水胶体
抗体和大多数抗原同属蛋白质。在通常的 血清学反应条件下均带有负电荷，使极化 的水分子在其周围形成水化层，成为亲水 胶体，因此蛋白质不会自行凝集出现沉淀。 当Ag与Ab结合后，表面电荷减少，水化层 变薄；而且由于Ag-Ab复合物形成后，与水 接触的表面积减少，由亲水胶体转化为疏 水胶体。此时在电解质(如NaCl)的作用下， 使各疏水胶体之间进一步靠拢、沉淀，形 成可见的Ag-Ab复合物。
《抗原抗体反应本科》课件
抗原抗体反应的机制
• 抗原与抗体的结合方式：抗原与抗体通过特定的结合位点相互作用， 形成稳定的免疫复合物。
• 免疫应答的过程：抗原进入机体后，免疫系统将启动一系列的免疫反 应，包括抗体的产生和特异性细胞介导的免疫应答。
抗原抗体反应的限制因素
• 抗原多样性：由于病原体的多样性，抗体可能无法覆盖所有的抗原。 • ...更多限制因素等待你的探索！
• 自身抗原与自身抗体反应：机体产生的抗体错误地攻击自身组织，导 致自身免疫性疾病的发生。
• 引起疾病的外源性抗原与抗体反应：机体产生的抗体与外源性抗原结 合，通过中和、沉淀等方式对抗外来病原体。
抗原抗体反应的应用
1. 临床诊断：通过检测体内产生的抗体来判断是否存在某种疾病。 2. 免疫检测技术：利用抗原抗体反应原理进行疾病诊断、药物检测等。 3. 免疫治疗：利用体外合成的特定抗体进行各种免疫相关疾病的治疗。
《抗原抗体反应本科》 PPT课件
抗原抗体反应是免疫学中非常重要的一个概念，通过本课件，我们将对抗原 抗体反应进行全面而深入的探讨。
什么是抗原抗体反应
抗原抗体反应是指在机体内，抗原与抗体结合而发生的特异性免疫反应。抗原是能够诱导机体免疫应答的物质， 而抗体则是由机体产生的一种特异性蛋白质。
抗原抗体反应的类型
临床免疫学检验 抗原抗体反应PPT
4. 疏水作用力 抗原抗体分子侧链上的非极性氨基酸（亮、缬、丙）在 水溶液中与水分子间不 形成氢键。当抗原表位与抗体结合点靠近时，相互间正、负极性消失，静电引力 形成的亲水层也消失、排斥两者之间的水分子，促进抗原抗体结合。疏水作用提 供的作用力最大，约占总结合力的50%。
第二节 抗原抗体反应的特点
抗原抗体复合物浓度 亲和常数=
游离抗原浓度×游离抗体浓度
K值表示亲和力，大表示结合牢固，不易解离。
二、亲水胶体转化为疏水自然沉淀， 其蛋白质含大量氨基与羧基残基，带电荷，静电作用下，其 周围形成带相反电荷的电子云、水化层，不致自行聚合、产 生沉淀。疏水胶体 — 抗原抗体结合 — 电荷减少，电子云消 失，再加入电解质，使疏水胶体相互靠拢，形成可见抗原抗 体复合物。
抗体预滴定，找出最适反应浓度。
二、环境因素
1.电解质 Ag+Ab结合后无电解质参与，不出现可见反应 常用0.85%的Nacl促使沉淀和凝集物的形成。 2. 酸硷度 抗原抗体反应一般在pH 6~8间。 pH达到或接近抗原的等电点，即使无相应抗体，也会引起颗粒性抗原非特异 的凝集，造成假阳性反应。 3. 温度 温度升高，分子运动加速，碰撞机会增多，抗原抗体反应加速 常为37℃，高于56℃，抗原抗体解离，甚至变性或破坏。 有 些 有 独 特 的 最 适 反 应 温 度 ， 如 冷 凝 集 素 在 4℃ 左 右 与 细 胞 结 合 最 好 ， 20℃ 反而解离。
溶性复合物，大多数动物属比型，家兔为代表。
H型抗体 — 合适比例较窄，抗原抗体过量均可形成可溶性复合物，人 和大动物属此型，马免疫血清为代表。
三、可递性（reversibility）
Ag + Ab
Ag + Ab
第二节 抗原抗体反应的特点
抗原抗体复合物浓度 亲和常数=
游离抗原浓度×游离抗体浓度
K值表示亲和力，大表示结合牢固，不易解离。
二、亲水胶体转化为疏水自然沉淀， 其蛋白质含大量氨基与羧基残基，带电荷，静电作用下，其 周围形成带相反电荷的电子云、水化层，不致自行聚合、产 生沉淀。疏水胶体 — 抗原抗体结合 — 电荷减少，电子云消 失，再加入电解质，使疏水胶体相互靠拢，形成可见抗原抗 体复合物。
抗体预滴定，找出最适反应浓度。
二、环境因素
1.电解质 Ag+Ab结合后无电解质参与，不出现可见反应 常用0.85%的Nacl促使沉淀和凝集物的形成。 2. 酸硷度 抗原抗体反应一般在pH 6~8间。 pH达到或接近抗原的等电点，即使无相应抗体，也会引起颗粒性抗原非特异 的凝集，造成假阳性反应。 3. 温度 温度升高，分子运动加速，碰撞机会增多，抗原抗体反应加速 常为37℃，高于56℃，抗原抗体解离，甚至变性或破坏。 有 些 有 独 特 的 最 适 反 应 温 度 ， 如 冷 凝 集 素 在 4℃ 左 右 与 细 胞 结 合 最 好 ， 20℃ 反而解离。
溶性复合物，大多数动物属比型，家兔为代表。
H型抗体 — 合适比例较窄，抗原抗体过量均可形成可溶性复合物，人 和大动物属此型，马免疫血清为代表。
三、可递性（reversibility）
Ag + Ab
Ag + Ab
抗原抗体反应ppt课件
抗原抗体反应 Antigen-Antibody Reaction
microbe/exotoxin
Inject
serum
agglutinin/antitoxin？？
antibody，Ab！ antigen，Ag！
1890年，德国学者E von Behring 和日本学者北里（S Kitasato）在 Koch研究所应用白喉外毒素给马 免疫制抗血清
抗原抗体特异性结合的基础： 抗原决定簇与抗体超变区分子间的 结构互补性与亲和性，决定于抗原抗体 分子空间构型
抗原抗体结合过程示 意图
分两个阶段：
抗原抗体特异性结合阶段 可见反应阶段
1
抗原抗体结合力
静电引力：带相反电荷的氨基和羧基， 与距离有关 范德华力：原子与原子、分子与分子相 互接近时分子极化发生的引力 氢键结合力：氢原子与氢受体原子间的 引力 疏水作用力：两个疏水基团对水排斥而 趋向聚集
木瓜蛋白酶
Fab，Fc
胃蛋白酶
F(ab’)2，Fc
Fragment crystallizable
domain
2
Antigenicity of immunoglubin
对异种动物或同种异体来说，免疫球蛋 白有抗原性
3
Biological Effects of Antibody
特异性结合抗原 活化补体 亲细胞性（Fc受体）： 介导I型变态反应 调理吞噬作用 抗体依赖的细胞介导细胞毒作 用 通过胎盘
合成部位 通过胎盘
20-23
脾、淋巴 结浆细胞 +
5.8
粘膜相关 淋巴样组 织 -
5.1
脾、淋巴 结浆细胞 -
2.8
扁桃体、脾 浆细胞 -
microbe/exotoxin
Inject
serum
agglutinin/antitoxin？？
antibody，Ab！ antigen，Ag！
1890年，德国学者E von Behring 和日本学者北里（S Kitasato）在 Koch研究所应用白喉外毒素给马 免疫制抗血清
抗原抗体特异性结合的基础： 抗原决定簇与抗体超变区分子间的 结构互补性与亲和性，决定于抗原抗体 分子空间构型
抗原抗体结合过程示 意图
分两个阶段：
抗原抗体特异性结合阶段 可见反应阶段
1
抗原抗体结合力
静电引力：带相反电荷的氨基和羧基， 与距离有关 范德华力：原子与原子、分子与分子相 互接近时分子极化发生的引力 氢键结合力：氢原子与氢受体原子间的 引力 疏水作用力：两个疏水基团对水排斥而 趋向聚集
木瓜蛋白酶
Fab，Fc
胃蛋白酶
F(ab’)2，Fc
Fragment crystallizable
domain
2
Antigenicity of immunoglubin
对异种动物或同种异体来说，免疫球蛋 白有抗原性
3
Biological Effects of Antibody
特异性结合抗原 活化补体 亲细胞性（Fc受体）： 介导I型变态反应 调理吞噬作用 抗体依赖的细胞介导细胞毒作 用 通过胎盘
合成部位 通过胎盘
20-23
脾、淋巴 结浆细胞 +
5.8
粘膜相关 淋巴样组 织 -
5.1
脾、淋巴 结浆细胞 -
2.8
扁桃体、脾 浆细胞 -
抗原抗体反应知识讲义PPT(63张)
•
5、世上最美好的事是：我已经长大，父母还未老;我有能力报答，父母仍然健康。
•
6、没什么可怕的，大家都一样，在试探中不断前行。
•
7、时间就像一张网，你撒在哪里，你的收获就在哪里。纽扣第一颗就扣错了，可你扣到最后一颗才发现。有些事一开始就是错的，可只有到最后才不得不承认。
•
8、世上的事，只要肯用心去学，没有一件是太晚的。要始终保持敬畏之心，对阳光，对美，对痛楚。
范德华引力
概念：抗原和抗体相互接近时，由于分子的 极化作用而出现的引力。
• 结合力的大小与两个相互作用基团的极化程 度的乘积成正比、与它们之间距离的7次方 成反比，键能约为4.2～12.5kJ／mol。
• 这种引力的能量小于静电引力。 • 具有特异性。
氢键结合力
• 概念：供氢体上的氢原子与受氢体原子 间的引力。
二、环境条件： *电解质：0.85%NaCl *酸碱度：pH6～9 *温度：15～40℃
*酸凝集：当pH为3左右时，接 近细菌Ag的等电点，可出现非 特异性凝集。
• 作用时间
• 抗原抗体反应应有足够的时间，不同反应时间不 同。
第四节 抗原抗体反应类型
1.沉淀反应 2.凝集反应 3.补体参与的反应 4.中和反应 5.免疫标记
1．抗原决定簇又称表位（epitope），是指抗原性物质 表面决定该抗原特异性的特殊化学基团，是免疫应答和免 疫反应具有特异性的物质基础。
2．抗原决定簇是很小的，其大小相当于相应抗体的 结合部位，它们可由5-7个氨基酸、单糖或核苷酸残基组成。
3．抗原结合价：是指能与抗体分子结合的抗原决定 簇的总数。每一种半抗原可理解为单一的抗原决定簇，而 天然抗原含有很多不同的抗原决定簇，它是带有大量多种 "天然"半抗原的大分子。
《抗原抗体反应》课件
夹心反应
总结词
指抗原和抗体结合后，其复合物可与其 他物质结合，形成夹心结构所引发的反 应。
VS
详细描述
在夹心反应中，抗原和抗体结合后，其复 合物可以与另一种物质结合，形成一种夹 心的结构。这种反应可以显著增加反应的 灵敏度，常用于检测低浓度的抗原。例如 在酶联免疫吸附试验（ELISA）中，酶标 板上的抗体与抗原结合后，再与酶标记的 抗体结合，形成夹心结构。
抗体
指由抗原刺激机体免疫系统产生的，能与相应抗原特异性结合的 球蛋白。
抗原抗体的特性
特异性
抗原和抗体之间的结合具有高度的特异性，即一种 抗原只能与相应的抗体发生结合反应。
亲和力
抗原和抗体之间的结合力称为亲和力，亲和力的大 小决定了抗原抗体反应的强弱。
可逆性
抗原抗体结合后形成的复合物在一定条件下可以解 离，即抗原抗体反应具有可逆性。
凝集反应
观察抗原抗体结合后颗粒物的凝集情况，判断反 应结果。
荧光免疫技术
利用荧光物质标记抗体或抗原，通过荧光信号的 强弱判断反应结果。
06
抗原抗体反应的注意事项
实验前的准备
实验材料准备
确保抗原和抗体溶液的浓 度和纯度，选择适当的标 记物如荧光染料、酶等。
实验设备检查
检查实验所需仪器设备， 如离心机、显微镜、酶标 仪等，确保其正常运行。
02
抗原抗体反应的原理
抗原抗体的结合力
02
01
03
静电吸引
抗原和抗体带有相反的电荷，通过静电吸引相互结合 。
氢键
抗原和抗体中的极性基团形成氢键，增强结合力。
疏水相互作用
抗原和抗体的非极性基团相互靠近，形成疏水键。
抗原抗体的亲和力
《抗原抗体反应》课件
免疫测定技术
酶联免疫吸附试验（ELISA）
01
利用抗原抗体反应的原理，通过酶标记技术检测样本中微量抗
原或抗体的方法。
免疫荧光技术
02
利用抗原抗体反应标记荧光物质，通过荧光显微镜观察荧光信
号，对细胞或组织中的抗原进行定位和定性分析。
免疫印迹技术
03
将抗原抗体反应与电泳技术结合，分离并检测复杂样本中的抗
免疫学领域的发展趋势
免疫疗法
随着免疫疗法的发展，抗原抗体反应在肿瘤、感染等疾病的治疗中具有广阔的应用前景。
免疫预防
利用抗原抗体反应，研发新型疫苗，提高预防传染病的效果。
THANKS
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亲和力定义
抗原和抗体结合时，它们 之间的亲和力是指它们相 互吸引的强度和稳定性。
亲和力常数
亲和力常数是用来描述抗 原和抗体结合强度的物理 量，其值越大表示结合越 稳定。
亲和力影响因素
亲和力受到多种因素的影 响，如抗原抗体的结构、 电荷分布、溶剂环境等。
抗原抗体反应的动力学
反应速率
抗原抗体反应的动力学特征包括 反应速率和反应机制。
等。
05
抗原抗体反应的实验操作
抗原抗体的制备
抗原的制备
选择适当的抗原物质，经过适当的处理和纯化，确保抗原的纯度和特异性。
抗体的制备
免疫动物以产生特异性抗体，通过细胞培养或杂交瘤技术制备单克隆抗体。
抗原抗体的纯化
亲和层析
利用抗原抗体特异性结合的特性，通 过亲和层析介质分离纯化抗体。
凝胶过滤层析
利用分子大小差异进行分离，排除杂 质，纯化抗原抗体。
详细描述
当抗原和抗体结合后，由于分子量增 大，可形成肉眼可见的沉淀物。这种 沉淀反应可用于检测抗原或抗体的存 在，如免疫比浊法测定抗原的浓度。
《抗原抗体反应原理》课件
免疫应答机制研究
通过研究抗原与抗体的相互作用，深 入了解免疫应答的机制和过程，为疫 苗研发、免疫治疗等提供理论基础。
自身免疫性疾病机制研究
通过对自身抗体与自身抗原的反应进 行研究，揭示自身免疫性疾病的发病 机制，为治疗提供新思路。
免疫细胞功能分析
利用抗原抗体反应检测免疫细胞表面 的抗原标志，分析免疫细胞的功能和 亚型，为免疫学研究提供有力工具。
抗体的纯化
通过一系列分离纯化技术，去除血清中的其 他成分，提高抗体的纯度，常用的方法有离 心、凝胶电泳、亲和层析、离子交换层析等 。
抗原抗体反应的检测方法
沉淀反应
抗原和抗体结合后，在一定条 件下形成肉眼可见的沉淀物， 常用的方法有单向免疫扩散、 双向免疫扩散、对流免疫电泳 等。
凝集反应
抗原和抗体结合后，引起颗粒 性抗原的凝集现象，常用的方 法有直接凝集、间接凝集等。
Байду номын сангаас
抗原抗体的分类
按作用对象分类
外源性抗原和内源性抗原。外源性抗原是指来自机体外部的抗原，如细菌、病 毒等；内源性抗原是指来自机体内部的抗原，如变性或损伤的组织细胞。
按功能分类
完全抗原和半抗原。完全抗原是指具有免疫原性和反应原性的抗原物质，能够 刺激机体产生免疫应答；半抗原是指仅有反应原性而无免疫原性的抗原物质， 不能刺激机体产生免疫应答。
影响因素
亲和力受到抗原和抗体分子间的电荷分布、空间构象、结合位点数目以及溶液环 境等多种因素的影响。
抗原抗体的特异性
特异性的含义
特异性是指抗原和抗体结合的专一性，即一种抗原只能与相 应的抗体发生特异性结合。
决定因素
抗原抗体的特异性是由其分子表面的化学基团决定的，这些 化学基团在空间构象上互补，使得抗原和抗体能精确地结合 在一起。
抗原抗体检测技术ppt课件
目前应用最广的是人O型红细胞和绵羊红细胞。后 者应用更广，因为其来源方便，另外，绵羊红细胞 的表面有大量糖蛋白受体，极易吸附某种抗原物质， 吸附性能好，且大小均匀一致 。
采用PP管及配件：根据给水设计图配 置好PP管及配 件，用 管件在 管材垂 直角切 断管材 ，边剪 边旋转 ，以保 证切口 面的圆 度，保 持熔接 部位干 净无污 物
凝集实验是一个定性检测方法，即根据凝 集现象的出现与否判定结果阳性与阴性。
也可以进行半定量检测，即将标本作一系 列对倍稀释后进行反应，以出现阳性反应 的最高稀释度作为滴度。
间接凝集反应中所用与免疫无关的颗粒称为载 体（carrier）。
将抗原（或抗体）吸附或偶联于颗粒表面的过 程称为致敏（sensitization）。
吸附有已知抗原（或抗体）的颗粒称为致敏颗 粒（sensitized particle）。
敏感度比直接凝集反应高2~8倍，适用于各种可 溶性抗原（或抗体）的检测，敏感度也高于沉 淀反应。
环境条件
电解质
抗原抗体结合后由亲水胶体变为疏水胶体，易受电 解质影响。
若无电解质存在，则不出现可见反应。 但如果电解质浓度过高，则会出现非特异性蛋白质
沉淀，即盐析。
采用PP管及配件：根据给水设计图配 置好PP管及配 件，用 管件在 管材垂 直角切 断管材 ，边剪 边旋转 ，以保 证切口 面的圆 度，保 持熔接 部位干 净无污 物
采用PP管及配件：根据给水设计图配 置好PP管及配 件，用 管件在 管材垂 直角切 断管材 ，边剪 边旋转 ，以保 证切口 面的圆 度，保 持熔接 部位干 净无污 物
凝集反应的类型
直接凝集反应
颗粒性抗原在适当电解质参与下，直接与相应 抗体结合出现肉眼可见的凝集现象，成为直接 凝集实验（direct agglutination test）。
采用PP管及配件：根据给水设计图配 置好PP管及配 件，用 管件在 管材垂 直角切 断管材 ，边剪 边旋转 ，以保 证切口 面的圆 度，保 持熔接 部位干 净无污 物
凝集实验是一个定性检测方法，即根据凝 集现象的出现与否判定结果阳性与阴性。
也可以进行半定量检测，即将标本作一系 列对倍稀释后进行反应，以出现阳性反应 的最高稀释度作为滴度。
间接凝集反应中所用与免疫无关的颗粒称为载 体（carrier）。
将抗原（或抗体）吸附或偶联于颗粒表面的过 程称为致敏（sensitization）。
吸附有已知抗原（或抗体）的颗粒称为致敏颗 粒（sensitized particle）。
敏感度比直接凝集反应高2~8倍，适用于各种可 溶性抗原（或抗体）的检测，敏感度也高于沉 淀反应。
环境条件
电解质
抗原抗体结合后由亲水胶体变为疏水胶体，易受电 解质影响。
若无电解质存在，则不出现可见反应。 但如果电解质浓度过高，则会出现非特异性蛋白质
沉淀，即盐析。
采用PP管及配件：根据给水设计图配 置好PP管及配 件，用 管件在 管材垂 直角切 断管材 ，边剪 边旋转 ，以保 证切口 面的圆 度，保 持熔接 部位干 净无污 物
采用PP管及配件：根据给水设计图配 置好PP管及配 件，用 管件在 管材垂 直角切 断管材 ，边剪 边旋转 ，以保 证切口 面的圆 度，保 持熔接 部位干 净无污 物
凝集反应的类型
直接凝集反应
颗粒性抗原在适当电解质参与下，直接与相应 抗体结合出现肉眼可见的凝集现象，成为直接 凝集实验（direct agglutination test）。
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半抗原与载体的联接
1、连接方式：物理法（吸附） 化学法
2、化学连接方法： 直接联接法： 间接联接法：
碳化二亚胺法
蛋白质-COO— + R-N+=CN-R` H-N+-R
蛋白质-COO-C-NH-R` + 半抗原-NH2 O
蛋白质-C-NH-半抗原 + R-NH-CO-NH R`
半抗原与载体直接联接
一氯醋酸钠法
半抗原-
- OH + Cl- CH2 - COONa
半抗原-
- CH2 - COOH
半抗原与载体间接联接
重氮化的对氨基苯甲酸法
HOOC-
-NH2 + NaNO2
HOOC-
-N=N
半抗原-
- OH + HOOC-
-N=N
半抗原-
-N=N-
OH
-COOH
半抗原与载体间接联接
本章小结
1、免疫学技术的应用范畴 2、免疫学的基本概念 3、抗原抗体反应的原理、特点、影响因素 4、抗原制备的方法
处理与粉碎
组织粉碎：机械、生物 细胞破碎：物理、化学、生物
蛋白质分离
选择性沉淀：盐析 有机溶剂沉淀 水溶性非离子型聚合物沉淀
透析技术：
超滤技术：
单一组分提取
层析技术：凝胶过滤 离子交换 亲和层析
离心技术：差速离心 密度梯度离心
电泳技术：电泳洗脱 等电聚焦
凝胶层析（分子筛）
— —
+ + ++
一、抗原抗体反应的原理 二、抗原抗体反应的特点 三、影响抗原抗体反应的因素
抗原抗体反应的原理
1、抗原抗体结合的作用力 2、抗原抗体结合物析出原因
引起抗原抗体结合的作用力
1、电荷引力（库仑引力） 2、电子云引力（Van der Waals力） 3、氢键结合力 4、疏水作用力
抗原抗体结合物析出的原因
抗原抗体反应的原理课件
第一节 免疫学技术的范畴与应用
一、免疫学技术的范畴 二、免疫学技术的应用特点
免疫学技术的范畴
1、对具有免疫活性物质的定性、 定量测定
2、对免疫系统的组成成分的数量、 状态的测定
免疫学技术的应用特点
1、对象——“包罗万象” 2、方法——“兼容并蓄”
第二节 有关免疫学基本概念
+++ +——— —
+ + + ———
———+++
——— —+++ +
电解质
析出
抗原抗体反应的特点
1、特异性 2、可逆性 3、适合比例性
特异性
特异性反应
交叉反应
无反应
抗原A
抗原B
抗原C
可逆性
K（亲和常数）=
Ag+Ab Ag Ab
适合比例性
抗体含量
抗原含量
前带
等价带
后带
抗体过剩
抗体抗体比例合适
抗原过剩
网格学说（lattice theory）
抗原抗体反应的影响因素
1、电解质 2、酸碱度（pH值6-8） 3、温度（37-42。C）
第四节 免疫学检测技术的评价
一、评价标准 二、特异性与敏感性的关系
评价标准
Specificity（特异） Sensitivity（敏感） Simplicity（简便） Safety（安全） Saving（节约）
免疫活性细胞（Immune competent cell，ICC） 能够接受抗原刺激、产生特异性的活化、增殖、分化并形成效
应产物的淋巴细胞。
免疫细胞的类型
红细胞 血小板 肥大细胞 中性粒细胞 巨噬细胞 树突状细胞 浆细胞 T细胞 NK细
免疫应答的概念与过程
免疫应答（immune response） 免疫系统接触抗原后，免疫细胞对抗原进行识别；并使特异性淋巴细胞
特异性与敏感性的关系
特异性高、敏感性低 敏感性高、特异性低
第一节 抗原/免疫原制备的基本概念
一、抗原制备的目的 二、抗原的“纯度” 三、抗原制备的主要技术途径
抗原制备的目的
免疫原：激活T、B细胞 半抗原：检测相应抗体
抗原的“纯度”
免疫原：保留足够的可被T、B细胞 识别的抗原决定簇
半抗原：尽可能减少影响反应特异 性的抗原决定簇
戊二醛法
蛋白质- NH2 + 半抗原-NH2 + COH-（CH2 ） 3 - COH 蛋白质-N=CH-（CH2 ） 3 – CH=N-半抗原
半抗原与载体直接联接
氯甲酸异丁酯法
半抗原-COOH + Cl-COO-CH2 CH（CH3）2 OO
半抗原-C-O-C-O-CH2CH（CH3）2 + 蛋白质- NH2 半抗原-CO- NH -蛋白质 + HO-CH2CH（CH3）2
活化、增殖；表现出免疫效应的过程。
免疫应答的阶段 1、抗原识别阶段（antigen-recognizing phase） 2、淋巴细胞活化阶段（lymphocyte-activating phase） 3、抗原清除阶段（antigen-eliminating phase）
第三节 抗原抗体反应的基本原理
抗原制备的主要技术途径
天然抗原——分离、纯化 半抗原——人工合成、载体联接 抗原肽—— 合成、基因工程制备
第二节 完全抗原/免疫原的制备方法
一、颗粒性抗原的制备 二、可溶性抗原的制备
颗粒性抗原的制备
1、采集、分离抗原 2、无害化处理
可溶性抗原的制备与纯化
1、处理与粉碎 2、蛋白质分离 3、单一组分提取 4、抗原纯度鉴定
一、抗原的概念与属性 二、免疫细胞的概念与分类 三、免疫应答的概念与过程
抗原的概念与属性
免疫原性——可识别、可反应性 （诱导机体产生免疫应答的特性）
免疫反应性 ——选择结合性 （和免疫应答产物特异性结合的特性）
免疫细胞的概念与分类
免疫细胞（Immune cells） 泛指所有参与免疫应答及与免疫应答活动相关的细胞。
半抗原与载体直接联接
琥珀酸酐法
OO 半抗原-CH2 –OH + C-O-C
CH3 CH3
O 半抗原-CH2 –O-C-(CH2 ) 2-COOH
半抗原与载体间接联接
O-（羟甲基）羟胺法
半抗原-C=O +H2 N-O- CH2 - COOH 半抗原-C=N-O- CH2 - Байду номын сангаасOOH
半抗原与载体间接联接
— —+
+ —
—
+
+
+ +
+
— —
—
— —
+ +
+ + +
离子交换层析
亲和层析
抗原纯度鉴定
方法：层析性质测定 电泳法 免疫法
指标：电泳纯 免疫纯
第三节 半抗原免疫原制备的方法
一、载体的选择 二、半抗原与载体的联接
载体的选择
蛋白质载体：BSA、HAS、OVA、KLH 聚合多肽载体：多聚赖氨酸 高分子聚合物载体：PVP、羧甲基纤维素