实验一 鸡胚接种
鸡胚接种实验步骤
鸡胚接种实验步骤
鸡胚接种实验是一种常用于研究病毒感染和疫苗研发的方法。
以下是一般的鸡胚接种实验步骤:
1. 准备工作:
- 确保实验室卫生条件良好,并进行必要的消毒处理。
- 准备所需材料,包括鸡蛋(受精后的鸡蛋)、病毒样品或疫苗、适当的培养基等。
2. 取出鸡蛋:
- 使用无菌器具将鸡蛋从孵化器中取出。
- 用消毒剂擦拭鸡蛋表面,确保表面无菌。
3. 制备操作区域:
- 在实验室台面上准备一个无菌操作区域。
- 使用无菌器具将所需工具(如注射器、刀片)摆放在操作区域上。
4. 接种操作:
- 在无菌操作区域上,使用无菌器具在鸡蛋的空气室区域确定一个合适的接种点。
- 使用无菌注射器将病毒样品或疫苗注入鸡蛋内。
- 注意避免对鸡蛋内的胚胎造成机械损伤。
5. 封蛋:
- 使用无菌聚乙烯封膜或其它适当的封蛋材料将接种点封住,以防止污染和脱水。
6. 孵化:
- 将接种后的鸡蛋放回孵化器中,并根据所研究的病毒或疫苗的特性设定合适的温度和湿度。
- 根据实验需求,确定孵化时间,通常为数天至数周。
7. 结果观察:
- 在孵化结束后,取出鸡蛋,观察胚胎的发育情况。
- 根据研究的目的,可以进行进一步的分析、检测和测量。
需要注意的是,鸡胚接种实验需要在合适的实验室条件下进行,严格遵守实验室安全操作规范,并获得相关机构的许可和伦理审批。
此外,具体的实验步骤可能会因研究目的和病原体的不同而有所变化,所以在进行实验前最好参考相关的专业文献或咨询专业人士。
《鸡胚接种技术》课件
卫生管理
保持接种器具和操作区域的清 洁,防止细菌或病毒的污染。
鸡胚接种后的常见问题与处理方法
问题 鸡胚死亡 细菌感染 发育异常
处理方法
检查温度、湿度和操作技术是否合适,并调整相 应参数。
进行必要的消毒处理,更换培养基,增加卫生管 理措施。
观察并记录发育情况பைடு நூலகம்与预期结果进行对比,调 整相关因素。
总结与展望
鸡胚接种技术是一项重要的科研工具,通过研究鸡胚的发育过程,可以获得 对生命科学和医学领域的重要启示。未来,我们将继续探索和优化鸡胚接种 技术,为科学研究做出更大的贡献。
《鸡胚接种技术》PPT课件
鸡胚接种技术简介 影响鸡胚成活的因素 鸡胚接种前的准备工作 鸡胚接种过程详解 鸡胚接种后的管理要点 鸡胚接种后的常见问题与处理方法 总结与展望
鸡胚接种技术简介
鸡胚接种技术是一种重要的研究工具,用于研究鸡胚在发育过程中的变化。 研究人员可以通过接种不同物质来观察鸡胚的反应和发育情况,从而获得重 要的科学发现。
鸡胚接种前的准备工作
1 设备准备
确保接种所需的设备和材料已准备齐全,包括培养皿、接种针和培养基等。
2 培养基准备
根据实验需求制备适当的培养基,确保其成分和浓度符合实验要求。
3 消毒处理
对接种器具和操作区域进行彻底的消毒处理,以避免细菌或病毒的污染。
鸡胚接种过程详解
1
接种准备
2
将鸡胚放置在适当的接种器具中,准备
好需要使用的培养基和接种针。
3
鸡胚获取
选择具有良好质量的鸡胚,并在适当的 环境中进行保持,以避免其受到外界环 境的影响。
接种过程
使用接种针将所需物质接种到鸡胚中, 确保操作的准确性和稳定性。
鸡胚接种技术ppt课件.ppt
篮球比赛是根据运动队在规定的比赛 时间里 得分多 少来决 定胜负 的,因 此,篮 球比赛 的计时 计分系 统是一 种得分 类型的 系统
接种步骤与方法
取9~11日龄的鸡胚,标记气室与胚胎位置,并在胚胎面 与气室交界之边缘上约1mm处避开血管作一标记,此即为 注射点。
将鸡胚竖放在卵杯上,钝端向上。消毒气室的蛋壳,用 开孔器钻开一长约2mm小口。
第三节 鸡胚接种途径及方法
(一)羊膜腔接种
应用于从临床材料中分离流感病毒等,病 毒感染后可收集羊水和尿囊液。
篮球比赛是根据运动队在规定的比赛 时间里 得分多 少来决 定胜负 的,因 此,篮 球比赛 的计时 计分系 统是一 种得分 类型的 系统
接种步骤与方法
将10~12日龄的鸡胚在检卵灯上照视,标记气室及胚胎的位置。 消毒气室部位的蛋壳,在气室顶端钻出一约10mm×6mm的长方
接种步骤与方法
取5~8日龄鸡胚,标记气室和胚胎位置,垂直放置在卵 架上,钝端朝上,消毒气室端。
用开孔器在气室中央的卵壳上钻一小孔,用带有6号针头 的1m1注射器将样品从小孔处沿胚的纵轴迅速刺入约3cm, 注入0.2~0.5ml待接种的病毒于卵黄囊内,随后用胶带 或溶化的石蜡封孔。
置孵化箱内继续孵育3~8d,时间长短应根据病毒或立克 次体的种类而定,每天翻卵2次,弃掉24h内死亡的鸡胚 (但东方型和西方型马脑炎可能在接种后15~24h内死亡)。
篮球比赛是根据运动队在规定的比赛 时间里 得分多 少来决 定胜负 的,因 此,篮 球比赛 的计时 计分系 统是一 种得分 类型的 系统
(四)卵黄囊接种
主要用于虫媒病毒、衣原体及立克次体 等的分离和繁殖。这些大的病原体主要 在卵黄囊的内皮细胞生长,且生长速度 很快,立克次体染色后也可看到。
抗酸染色鸡胚接种
2. 消毒
• 气室向上放置鸡胚于卵架上; • 先后用碘酊和酒精棉球消毒蛋壳所标记的位置。
距气室底边0.5cm
3. 打孔
• 在所标记注射部位用剪刀尖端打孔; • 注意用力要稳,恰好使蛋壳打通而不伤及壳膜。
3、油镜观察
三、抗酸染色结果
抗酸菌呈红色, 常堆积成团, 排列无序, 偶呈分枝状生长。 背景及非抗酸性细菌呈兰色。
注意事项:
1、无菌操作 2、菌种管摇匀后取菌 3、涂片均匀 4、初染加热维持3~5分钟,勿沸腾烧干 5、冷却后冲洗 6、油镜下从视野中找红色抗酸菌
鸡胚培养与病毒滴度检测
一、目的要求
2. 新城疫病毒
① 副粘病毒科/副粘病毒亚科/禽腮腺炎病毒属。 ② 新城疫的病原体。 ③ 形态:
• 病毒子多呈球形; • 单股负股RNA; • 核衣壳螺旋形对称; • 有囊膜; • 囊膜表面有纤突。
④ 血凝性:可凝集人、鸡、豚鼠和小白鼠的红细胞。 ⑤ 病毒分离培养:9~11日龄鸡胚尿囊腔接种。
三、实验材料
⑤ 取出鸡胚胎,于平皿内观察胚胎有无病 理变化,如出血、蜷缩、侏儒胚等。
8. 新城疫病毒滴度的检测 血凝试验(HA)
编码
NS
病毒液
RBC
效价
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
0.4 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25
0.1
倍比稀释
0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25
④ 鸡胚接种的方法:
• 尿囊腔接种 • 绒毛尿囊膜接种 • 卵黄囊接种: • 羊膜腔接种 • 静脉接种
鸡胚接种实验报告
一、实验目的1. 掌握鸡胚接种病毒的方法和步骤。
2. 了解病毒在鸡胚中的生长和繁殖情况。
3. 学习病毒分离和培养的基本原理。
二、实验原理鸡胚接种是一种常用的病毒分离和培养方法。
病毒接种于鸡胚后,能够在鸡胚中繁殖,从而便于观察和分析病毒的生物学特性。
本实验主要采用尿囊腔接种法,将病毒接种于鸡胚尿囊腔内,观察病毒在鸡胚中的生长和繁殖情况。
三、实验材料1. 实验动物:9-11日龄的鸡胚。
2. 实验试剂:新城疫病毒悬液、生理盐水、碘酒、酒精、消毒棉球等。
3. 实验仪器:照蛋器、无菌手术刀、镊子、注射器、剪刀、平皿等。
四、实验方法1. 鸡胚准备:取9-11日龄的鸡胚,用碘酒和酒精消毒鸡胚蛋壳,用手术刀在鸡胚气室处划一小孔,用注射器吸取适量新城疫病毒悬液。
2. 尿囊腔接种:将鸡胚置于卵盘上,气室端向上,用注射器将病毒悬液注入鸡胚尿囊腔内,注入量约为0.1-0.2ml。
3. 孵育:将接种后的鸡胚放入37℃孵卵箱中孵育48-72小时。
4. 观察:定期观察鸡胚的生长发育情况,记录死亡、畸形等现象。
5. 病毒分离:取出死亡鸡胚,无菌操作下取出尿囊液,进行病毒分离和培养。
五、实验结果1. 接种后,部分鸡胚出现死亡现象,死亡时间集中在接种后24-48小时。
2. 死亡鸡胚的尿囊液中检测到新城疫病毒。
3. 成活鸡胚生长发育正常,未出现明显异常。
六、实验讨论1. 鸡胚接种是一种简单、有效的病毒分离和培养方法,适用于多种病毒的研究。
2. 尿囊腔接种法是一种常用的鸡胚接种方法,适用于新城疫病毒、流感病毒等多种病毒。
3. 本实验结果表明,新城疫病毒能够在鸡胚中繁殖,为新城疫病毒的研究提供了有力支持。
七、实验结论1. 鸡胚接种是一种简单、有效的病毒分离和培养方法。
2. 尿囊腔接种法适用于新城疫病毒等多种病毒的分离和培养。
3. 本实验成功分离和培养了新城疫病毒,为新城疫病毒的研究提供了有力支持。
八、实验心得1. 实验过程中,无菌操作至关重要,需严格按照无菌操作规程进行。
实验鸡胚接种
实验鸡胚接种
xx年xx月xx日
CATALOGUE
目录
实验准备实验步骤实验数据分析实验结论实验讨论与展望
01
实验准备
1
实验人员要求
2
3
了解微生物的种类、特点、致病性及检验方法等。
具备微生物学基础知识
熟悉接种、分离、培养、鉴定等实验操作规范,并能够熟练操作。
掌握实验操作技能
遵守实验室的各项安全规章制度,注意个人防护和实验室废弃物的处理。
培养时间
根据实验需要,确定鸡胚培养的时间,以便观察和记录实验结果。
鸡胚培养
03
实验数据分析
数据记录
记录实验进行的日期。
实验日期
记录所使用鸡胚的编号,方便追踪。
鸡胚编号
记录接种的病毒或细菌剂量。
接种剂量
记录鸡胚在实验过程中表现出的症状和时间。
症状表现
数据转换
将非数值型数据进行转换,以便进行数学分析。
多样性
根据实验需求,选择不同品种、来源的鸡胚,以满足实验的多样性和代表性。
鸡胚选取
选用精细、锋利的接种针,灭菌烘干后备用。
鸡胚接种
准备接种工具
将鸡胚固定在操作台上,用接种针在鸡胚的尿囊膜上选择适宜的位置,进行无菌接种。
接种操作
接种后对鸡胚进行密封处理,以防止外界微生物的侵入。
接种后处理
培养环境
为鸡胚提供适宜的温度、湿度和气体环境,以保证鸡胚的正常发育和繁殖。
数据清洗
去除异常值、缺失值和重复数据,确保数据准确性。
数据聚合
将多个数据源的数据聚合在一起,以便更全面地评估实验结果。
数据处理
03
结论提取
基于分析和解释,提取有关实验的结论,为后续研究提供参考。
实验一 鸡新城疫疫苗(一)
尿囊膜贴在卵壳内壁上,用镊子夹住将其撕脱下来即
可。
胚胎:消毒、打开气室卵壳后,用镊子撕破卵壳膜和
绒毛尿囊膜,夹起胚胎,用剪刀剪断卵黄带,将胎儿
放灭菌容器内即可。
8.鸡胚接种注意事项
(1)接种材料一般都应按每毫升1000IU或μg加入 青、链霉素。
(2)接种位点应避开鸡胚、血管和胚头,以免针头 刺伤鸡胚而造成接种后的损伤性死亡。
实验一 鸡新城疫油乳剂灭活苗的制备技术(一)
新城疫病毒可以在鸡胚中大量增殖,收获的鸡胚
尿囊液中即含有新城疫活病毒,将收获的尿囊液经过
灭活,并加入佐剂,便制成了新城疫灭活疫苗。
目的和要求:
1.掌握鸡胚的孵化过程和鸡胚的接种途径、接 种方法; 2.掌握新城疫病毒在鸡胚尿囊腔的增殖过程, 掌握接毒和收毒的方法。
头约1cm左右。
4.病料接种:
若用鸡胚分离、培养病毒,则应选9~12日龄之
间的发育鸡胚。许多病毒,特别是大多数禽病毒都能
在鸡胚或鸭胚中生长繁殖。接种时应先在照蛋器下检 查鸡胚是否健康、活泼,并划出气室和接种部位。然 后严格消毒接种部位和气室(先用碘酊消毒,再用 70%酒精消毒),用打孔器打孔后,每胚接种处理好
水瓶中,使两种抗生素在生理盐水中的含量均
达到1000-2000 IU(μg)/ml。将注射用生理盐
水3-4ml注入一瓶新城疫Ⅳ系弱毒疫苗中,稀释。
3.照蛋定位 : 接种前应在照蛋器下检查鸡胚,挑出死胚 和弱胚。对所有健康胚应先用红铅笔画出气室 位臵,再于胚胎侧画出接种位点(进针点), 接种点应避开大血管,靠近气室边缘处,离胚
此法适用于马立克氏病毒、披膜病毒、衣
原体及立克次氏体的分离、培养。接种方法:
气室端蛋壳消毒后,在气室中央打一小孔,用
鸡胚接种实验报告
鸡胚接种实验报告引言鸡胚接种实验是一种常见的生物学实验,通过将病毒或细菌接种于鸡胚中,我们可以观察到它们对胚胎发育的影响。
这种实验能够帮助我们了解病原体的传播途径、感染机制以及鸡胚对外界刺激的响应能力。
本文将就鸡胚接种实验的过程和观察结果展开论述,以期更好地了解和探索生命的奥秘。
实验材料和方法材料:新鲜鸡胚、病毒/细菌培养液方法:1. 准备培养基:将培养基配制好,并加热灭菌。
2. 取出鸡胚:在无菌条件下,取出新鲜的鸡胚,约为8-10天,保证胚胎仍处于发育阶段。
3. 接种病原体:在鸡胚卵黄囊的顶部,用无菌针缓慢注入病原体培养液。
4. 封胚:用胶带或蜡封好孔洞,保持接种处的无菌状态。
5. 孵化:将接种后的鸡胚放入孵化器中,保持适当的温度和湿度。
6. 观察:根据实验设计,每隔一段时间观察鸡胚的发育情况。
实验结果通过观察病原体接种后的鸡胚,我们可以得出一些有趣的结果。
1. 反应变化:不同病原体对鸡胚的反应变化具有差异。
一些病原体可能导致胚胎发育减缓或停滞,而另一些病原体可能导致胚胎畸形或死亡。
这些结果提供了关于病原体对于胚胎发育的影响的线索。
2. 免疫响应:鸡胚对病原体的接种可能会触发免疫响应。
我们可以观察到鸡胚的免疫系统是否能够有效地对抗病原体的入侵。
免疫细胞的增多、炎症反应的出现都可能是这一免疫响应的体现。
3. 病变形态:观察鸡胚的病变形态对于了解病原体的感染机制和病变过程非常重要。
我们可以观察到病原体在鸡胚中的定位、侵入细胞的方式以及细胞破坏的情况。
这些观察结果有助于研究病原体的致病机制,并为预防和治疗提供依据。
4. 实验变量:在鸡胚接种实验中,还可以引入一些实验变量,比如改变接种浓度、不同时间点的接种等,以观察这些变量对实验结果的影响。
通过对变量的控制和对比,可以更加准确地判断病原体对鸡胚的影响。
结论鸡胚接种实验是一种有效的方法,可以研究病原体与胚胎发育之间的关系。
通过观察鸡胚的发育情况和病变形态,我们可以了解病原体的感染机制以及胚胎对外界刺激的响应能力。
实验一-鸡新城疫疫苗一
胚胎:消毒、打开气室卵壳后,用镊子撕破卵壳膜和 绒毛尿囊膜,夹起胚胎,用剪刀剪断卵黄带,将胎儿 放灭菌容器内即可。
8.鸡胚接种注意事项
(1)接种材料一般都应按每毫升1000IU或μg加入 青、链霉素。
(2)接种位点应避开鸡胚、血管和胚头,以免针头 刺伤鸡胚而造成接种后的损伤性死亡。
羊水:吸完尿囊液后,可用镊子夹住羊膜,将巴氏吸 管直接插入羊膜腔吸取羊水,然后再用镊子提起羊膜 或压住胎儿,直至羊水收获干净。相当一部分病毒其 羊水和尿囊液可以混合,如新城疫,支气管炎、法氏 囊病毒等。有些不能混合,则应将两者单收、单放。
绒毛尿囊膜:如要收获整个尿囊膜,则在消毒、打开 蛋壳、撕去壳膜后,将整个卵内容物倒出,这时绒毛 尿囊膜贴在卵壳内壁上,用镊子夹住将其撕脱下来即 可。
7.收毒
接种鸡胚孵化到规定时间后,应从孵化器中取出 放4℃环境冷冻36h左右,或在-10℃以下速冻4h左 右,但不得使鸡胚冻结,否则易发生溶血。冷冻完 毕按下列步骤收毒:
(1)鸡胚放于蛋盘或蛋架上,气室向上,用碘酊、 酒精消毒后,以无菌镊子敲开气室蛋壳或去掉人工 卵窗的透明胶纸,暴露卵膜。注意不要让卵壳碎屑 掉入鸡胚内。
活胚可看到清晰的血管和鸡胚的暗影,比 较大一些的可以看见胚动,随后每日观察一次, 将胚动呆滞或没有运动的、血管昏暗模糊者,即 可能是已死或将死的鸡胚,要随时加以淘汰。生 长良好的蛋胚一直孵育到接种前,具体胚龄视所 拟培养的病毒种类和接种途径而定。
2.接种材料的制备 :
将青霉素和链霉素分别注入注射用生理盐水 瓶中,使两种抗生素在生理盐水中的含量均达 到1000-2000 IU(μg)/ml。将注射用生理盐水 3-4ml注入一瓶新城疫Ⅳ系弱毒疫苗中,稀释。
目的和要求:
实验一 鸡胚接种 ppt课件
病毒培养的宿主系统: ✓ 本动物 ✓ 实验动物:家兔、小
白鼠、大白鼠、豚鼠、 鸡胚 ✓ 体外培养的器官、组 织细胞
实验一 鸡胚接种
实验一 鸡胚接种
实验一 鸡胚 接种
1. 鸡胚 10日龄 2. 病毒 鸡新城疫病毒(NDV) 3. 照蛋灯 4. 打孔器 5. 石蜡 6. 注射器 7. 蛋座 8. 酒精棉球、碘酊棉球
实验一 鸡胚接种 3. 将卵横放在卵座上,胚胎位置向下。在卵长
径的1/2处用碘酊和酒精消毒。 4. 用钢锥打一小孔,将针头刺入约1.5cm,注
入病毒液0.1-0.5ml。
5. 用熔化的石蜡封孔, 置孵卵箱内继续孵育, 24h内死亡者废弃。
实验一 鸡胚接种
1. 取10-12日龄鸡胚,画出气室部,消毒。 2. 在气室端的卵壳上开一1.5×1.5cm的口
32. 必相须对保湿证度具:有50充%-60% 分的新鲜空气流 通,特别是在孵 化5-6天以后。
4. 从孵育后第3天 开始,每天翻卵 一次。
六、 检卵
实验一 鸡胚接种 ➢ 未受精卵:只见模糊的卵黄阴影,不见
血管和鸡胚痕迹。 活胚:具有清晰的血管和鸡胚暗影,较 大鸡胚还可见到胚动,但孵育14、15天 以后胎动不明显,甚至无胎动。 死胚:血管昏暗模糊,没有胚动。
7. 卵黄 在胚胎发育早期供给鸡胚营养。 8. 卵白 在胚胎发育晚期供给鸡胚营养。
实验一 鸡胚接种
四、பைடு நூலகம்精卵的选择
1. 最好是来自SPF鸡群,以降低母源抗体 的影响
2. 受精卵的壳最好是白色的 3. 受精卵必须新鲜,保存在5-20℃不要
超过10天,保存一个月的受精卵,孵 化率将近于零。
接种
1. 孵卵箱内的温度应保持在37.538.5℃
鸡胚接种实验报告
鸡胚接种实验报告
本次实验旨在观察鸡胚在不同条件下的发育情况,以及探讨不同因素对鸡胚发育的影响。
通过本实验的开展,我们希望能够更深入地了解鸡胚的发育过程,为相关领域的研究提供参考和支持。
首先,我们在实验室中准备了一批健康的鸡蛋,并将它们放置在适宜的温度和湿度条件下进行孵化。
在鸡蛋孵化的过程中,我们进行了一系列的观察和记录,包括鸡胚的发育情况、胚胎膜的形成、器官的发育等。
同时,我们还设置了不同的实验组,分别在不同的环境条件下进行观察和比较。
在实验过程中,我们发现了一些有趣的现象。
首先,我们发现在恒温恒湿的条件下,鸡胚的发育速度更快,胚胎膜的形成也更加完整。
而在温度或湿度波动较大的条件下,鸡胚的发育情况则明显受到影响。
其次,我们还观察到在不同营养条件下,鸡胚的发育情况也存在差异。
营养充足的情况下,鸡胚的发育速度更快,器官的发育也更加完善。
通过本次实验,我们得出了一些初步的结论。
首先,恒温恒湿的条件对鸡胚的发育至关重要,温度和湿度的波动会严重影响鸡胚的发育情况。
其次,营养充足也是保证鸡胚正常发育的重要条件,缺乏营养会导致鸡胚的发育受到影响。
总的来说,本次实验为我们提供了一些有益的启示,对于鸡胚的发育规律有了更深入的了解。
在今后的研究中,我们将进一步探讨鸡胚发育的机制,以及寻找更好的方法来促进鸡胚的健康发育。
希望通过我们的努力,能够为相关领域的发展做出一些贡献。
通过本次实验,我们对鸡胚的发育过程有了更深入的了解,也为相关领域的研究提供了一些有益的参考。
希望我们的努力能够为鸡胚发育的研究和应用提供一些有益的支持。
实验一鸡胚接种课件
06 参考文献
参考文献
书籍名称:《实验动物学》 作者:XXX
出版年份:XXXX年
感谢您的观看
THANKS
实验一鸡胚接种课件
目录
CONTENTS
• 实验目的 • 实验材料 • 实验步骤 • 实验结果与分析 • 注意事项与安全防护 • 参考文献
01 实验目的
掌握鸡胚接种技术
掌握鸡胚接种的基本操作流程: 包括对鸡胚的选择、处理、接种
和观察等步骤。
Байду номын сангаас
熟悉接种工具的使用:如接种环、 注射器等,并了解其消毒和保养
病原体繁殖情况统计
繁殖数量
繁殖条件
通过显微镜观察和计数,统计了病原 体在鸡胚内的繁殖数量。发现病原体 在适宜条件下繁殖迅速。
分析了病原体繁殖所需的温度、湿度 等条件,有助于了解病原体的生态学 特性。
繁殖周期
记录了病原体从开始繁殖到达到一定 数量所需的时间,即繁殖周期。这对 于了解病原体生长特性和制定防治措 施具有重要意义。
方法。
了解不同接种方法的适用范围和 注意事项:如滴注法、注射法等。
了解鸡胚对不同病原体的反应
1 2
观察鸡胚对不同病原体的反应
如细菌、病毒等,记录其症状和病变。
分析鸡胚对不同病原体的抵抗力
了解哪些病原体能够引起鸡胚死亡或异常发育。
3
比较不同病原体对鸡胚的致病力
为研究病原体致病机制和疫苗研发提供参考。
数据分析与结论
数据处理
对实验数据进行整理、统计和分 析,以表格、图表等形式呈现实
验结果。
对比分析
将实验组与对照组的数据进行对 比分析,以评估实验效果和病原
体对鸡胚的影响。
病毒学实验一鸡胚接种培养
• 出勤率 • 实验过程中安静、有序、认真、无污染 • 实验报告书写 • 值日生打扫卫生
实验一 鸡胚接种培养
鸡胚结构
• 2、接种方法
• 病毒的鸡胚培养法主要有四种接种途径,即尿囊 腔、绒毛尿囊膜、羊膜腔和卵黄囊,不同的病毒
应选择各自适宜的接种途径,并根据接种途径确 定鸡胚的孵育日龄。
• 例:
实验器材
• 鸡胚、孵化设备、检卵器、钻孔器、蛋托、 超净台、冰箱、酒精灯、碘酒、酒精棉球、 注射器、蜡烛
实验方法
鸡胚孵化 • 将鸡卵气室向上放于蛋托上,置孵化器内,温度
37.5℃,相对湿度(45%~60%)条件下孵育, 从第3天开始每隔4~6h翻蛋一次。 • 第7~8天集中用检卵器验蛋一次,受精卵可见有 鸡胚,发育良好的胚胎可见清晰的血管及活的胚 胎,血管及其主要的分枝均明显,呈鲜红色,鸡 胚可以活动。未受精和死胚胚体固定在一端不动, 看不到血管或血管消散。剔除未受精卵和死胚。
痘类病毒
绒~11
嗜神经性病毒 卵黄囊
5~6
• 实验目的:掌握鸡胚的孵化和观察方法, 掌握尿囊腔接种与收获方法,了解鸡胚培 养的结果观察方式。
• 实验原理:尿囊腔接种法广泛应用于病毒 的适应和传代培养,病毒被注射到尿囊腔 后,可在内皮细胞中被复制,复制的病毒 被释放到尿囊液中,因此,在尿囊液中含 有大量的病毒。
注意事项
1 最好选用SPF鸡胚。 2 受精卵入孵后要注意翻蛋。 3 检卵时避免照蛋时间过长引起鸡胚温度下
降过大。 4 接种鸡胚时应尽可能避开血管丰富区域。 5 温箱底盘中要加入足够量的蒸馏水以保持
一定的湿度。
思考题
为什么要将接种后孵化24h内死亡的鸡胚剔除?
鸡胚接种
1 选用9~11日龄发育良好的鸡胚。 2 在接种前用检卵器观察并标记出胚胎的气室及胚胎位置,
鸡胚尿囊腔接种实训报告
一、实验目的1. 掌握鸡胚尿囊腔接种的基本操作技术。
2. 熟悉鸡胚尿囊腔接种在病毒分离与培养中的应用。
3. 了解鸡胚尿囊腔接种对病毒分离与培养的重要性。
二、实验原理鸡胚尿囊腔接种是一种常用的病毒分离与培养方法。
该法利用鸡胚尿囊腔作为病毒培养的场所,使病毒在尿囊腔内繁殖,从而获得病毒培养物。
鸡胚尿囊腔接种适用于多种病毒,如新城疫病毒、流感病毒等。
三、实验材料1. 9-11日龄健康鸡胚。
2. 病毒悬液(如新城疫病毒、流感病毒等)。
3. 无菌操作工具:无菌镊子、无菌剪刀、无菌注射器、无菌吸管、无菌培养皿、无菌滤纸等。
4. 无菌消毒剂:碘酊、酒精棉球等。
5. 温箱、孵化箱等。
四、实验步骤1. 鸡胚准备- 将鸡胚置于温箱中孵化,保持温度37.5-38.0℃,湿度60-70%。
- 在孵化过程中,每日翻动鸡胚2-3次,以防止粘连。
- 在孵化第5-6天,用照蛋器检查鸡胚发育情况,挑选发育良好的鸡胚。
2. 病毒悬液准备- 将病毒悬液置于无菌操作台中,用无菌吸管吸取适量病毒悬液。
3. 鸡胚尿囊腔接种- 将鸡胚取出,用无菌滤纸吸去表面水分。
- 在鸡胚气室部位,用碘酊和酒精棉球进行消毒。
- 用无菌剪刀在鸡胚气室部位剪一小孔,露出尿囊。
- 用无菌注射器吸取病毒悬液,注入尿囊腔内。
- 用无菌滤纸吸去多余病毒悬液。
4. 鸡胚孵育- 将接种后的鸡胚放回孵化箱中,继续孵化。
- 每日观察鸡胚的生长发育情况,记录死亡、病变等。
5. 收获病毒- 在接种后48-72小时,取出死亡鸡胚。
- 用无菌剪刀剪开鸡胚气室部位,撕去卵壳膜。
- 用无菌吸管吸取尿囊液,进行病毒分离与培养。
五、实验结果与分析1. 鸡胚尿囊腔接种成功后,大部分鸡胚在接种后48-72小时内死亡。
2. 死亡鸡胚尿囊腔内可见病毒繁殖的典型病变,如尿囊液增多、尿囊膜增厚等。
3. 收获的尿囊液经病毒分离与培养,可得到纯化的病毒。
六、实验总结1. 鸡胚尿囊腔接种是一种简单、实用的病毒分离与培养方法,适用于多种病毒。
《鸡胚接种技术》课件
该技术广泛应用于生物医学、农 业、食品工业等领域,具有较高 的实用价值。
鸡胚接种技术的历史与发展
鸡胚接种技术最早可追溯到19 世纪末期,当时主要用于疫苗 生产。
随着科技的不断进步,鸡胚接 种技术在20世纪得到了迅速发 展,应用范围不断扩大。
目前,鸡胚接种技术已经成为 一种成熟的实验和生产手段, 为科学研究和技术创新提供了 有力支持。
鸡胚接种技术的应用领域
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04
生物医学
用于疫苗生产、药物筛选、疾 病模型构建等。
农业
用于育种、品种改良、动物疫 病防治等。
食品工业
用于生产某些酶制剂、生物活 性物质等。
其他领域
如环保、生物安全等也涉及到 鸡胚接种技术的应用。
02
鸡胚接种技术的基本原理
鸡胚的结构与发育
鸡胚的结构
鸡胚由卵黄囊、羊膜、绒毛膜和 尿囊等组成,具有完整的胚胎发 育过程。
VS
病原鉴定
通过鸡胚接种技术,可以对分离出的病毒 进行生物学鉴定,确定病毒的种类、毒力 等。
抗体的制备与检测
抗体制备
利用鸡胚接种技术,可以制备针对各种病毒 的特异性抗体,用于治疗或诊断疾病。
抗体检测
通过鸡胚接种技术,可以检测血清中的抗体 水平,了解免疫状态或评估疫苗免疫效果。
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鸡胚接种技术的应用实例
疫苗的研发与生产
疫苗研发
利用鸡胚接种技术,可以研发针对各种病毒性疾病的疫苗,如流感疫苗、狂犬病疫苗等。
疫苗生产
鸡胚是生产疫苗的重要原材料,通过鸡胚接种技术,可以大量繁殖病毒,为疫苗生产提供足够的原材 料。
病原的分离与鉴定
病原分离
鸡胚接种的方法与步骤
鸡胚接种的方法与步骤
鸡胚接种是一种常用的病毒分离和培养方法,其基本步骤如下:1. 选择合适的鸡胚:通常选择9-12 日龄的鸡胚,此时鸡胚的免疫系统尚未完全发育,适合病毒的生长和繁殖。
2. 准备接种材料:将待接种的病毒样品稀释到适当的浓度,并准备好接种工具,如吸管、针头、注射器等。
3. 接种鸡胚:将稀释后的病毒样品接种到鸡胚的尿囊腔、卵黄囊或绒毛尿囊膜等部位。
接种时要注意操作规范,避免污染和损伤鸡胚。
4. 孵化鸡胚:将接种后的鸡胚放入孵化箱中,在适当的温度和湿度条件下孵化,让病毒在鸡胚中生长和繁殖。
5. 观察和检测:在孵化过程中,定期观察鸡胚的生长情况和病变特征,如鸡胚是否死亡、是否出现出血点、是否出现痘斑等。
同时,可以进行病毒的分离和鉴定,以确定病毒的种类和特性。
6. 收获病毒:当病毒在鸡胚中生长和繁殖到一定程度时,可以收获病毒。
收获病毒的方法包括离心、过滤、沉淀等,具体方法取决于病毒的种类和特性。
7. 保存病毒:收获的病毒可以保存在适当的温度和湿度条件下,以备后续的实验和研究使用。
需要注意的是,鸡胚接种是一项技术性较强的操作,需要严格遵守实验操作规范和安全注意事项,以确保实验的准确性和安全性。
同
时,在进行鸡胚接种实验时,应该遵循相关的法律法规和伦理规范,确保实验的合法性和道德性。
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造成气室内负压,使卵窗部位的绒毛尿囊
膜下陷而形成人工气室,此时可见滴于壳
膜上的生理盐水迅速渗入。
6、用1ml注射器滴2-3滴接种物于绒毛尿囊
膜上。
7、用透明胶纸封住卵窗,或用玻璃纸盖 于卵窗中,周围涂上熔化的石蜡密封,气 室中央的小孔用石蜡密封。
8、胚横卧于卵箱中,不许翻动,保持卵
窗向上。
(三) 尿囊腔接种 主要用于正粘V和副粘V,如流感V、新城 疫V的分离和增殖。
三、实验材料
1、鸡胚 9-11日龄
2、病毒 新城疫病毒
3、照蛋灯
4、打孔器
5、石蜡
6、注射器
7、蛋座
8、酒精棉球、碘酊棉球
四、鸡胚接种方法
实验前准备
1、用检卵灯检查鸡胚活力。 2、用铅笔画出气室和胚胎的位置,并在 将要接种的部位做好记号。 3、对鸡胚进行消毒。
(一)卵黄囊接种法
主要用于虫媒披膜病毒以及 鹦鹉热衣原体和立克次氏体等 的分离和增殖。 方法一: 1)取6-8日龄鸡胚,用检卵灯 照视画出气室和胚胎位置后, 垂直放置在卵座上(大头向上) 2)用碘酊和酒精消毒气室端 3)用钢锥在气室中央锥一小孔 4)用注射器吸取病毒悬液,沿 气室端所穿小孔垂直刺入3cm, 注入0.1-0.5ml病毒液。 5)用熔化的石蜡封孔,置孵卵 箱内继续孵育,每天翻卵1-2次, 24h内死亡者废弃。
5、尿囊腔
胚胎的排泄器官,内含有尿囊液,
初为透明液体,是单纯生理盐溶液,以后尿
囊液中尿酸盐迅速增加,胚胎发育到第12-13
天后,尿囊液开始变得混浊。
6、羊膜与羊膜腔 其中盛有羊水,胎体浸泡于
其中
7、卵黄 在胚胎发育早期供给鸡胚营养。
8、卵白 在胚胎发育晚期供给鸡胚营养。
接种途径
1、绒毛尿囊膜接种 2、尿囊腔接种 3、卵黄囊接种 4、静脉接种 蓝舌病毒 5、羊膜腔接种 正粘病毒和副粘病毒 6、脑内接种 狂犬病毒 7、眼球接种
1、胚内可能污染细菌和病毒 沙门氏菌、禽白血病病毒、新城疫、 禽脑脊髓炎病毒 2、母源抗体 3、许多病毒在鸡胚中增殖缺乏特异性的 感染指针
二、鸡胚的结构与功能
1、卵壳 2、壳膜
上有细孔,进行气体交换
使气体分子和液体分子在内外两方面进行交换。
3、气室
呼吸和调节压力
4、绒毛尿囊膜 起胚胎呼吸器官的功能, 氧气的交换是在膜的血管内通过卵壳孔 而进行的。
方法二: 1)2)同一 3)将卵横放在卵座上,胚 胎位置向下。在卵长径的 1/2处用碘酊和酒精消毒。 4)用钢锥打一小孔,将针 头刺入约1.5cm,注入病毒 液0.1-0.5ml。 5)用熔化的石蜡封孔,置 孵卵箱内继续孵育,24h内 死亡者废弃。
(二)绒毛尿囊膜接种
主要用于痘V和疱疹V的分 离和增殖。 方法一: 1)取10-12日龄鸡胚, 画出气室部,消毒 2)在气室端的卵壳上开 一1.5×1.5cm的口 3)用灭菌眼科镊子撕去 一小片内壳膜。 4)滴入接种物。 5)用胶布或透明胶纸封 闭切口。
六、收毒
收毒前将鸡胚直立放置于4冰箱半小 时以上,冻死胚胎,防止出血。 根据接种途径的不同,收获相应的材 料
1、绒毛尿囊膜接种 收获接种部位绒毛尿 囊膜 2、尿囊腔接种 收获尿囊液(5~8ml) 3、卵黄囊接种 收获卵黄囊或胚体 4、羊膜腔接种 收获羊水(0.5~1ml)
七、实验报告
(一)、实验目的 (二)、主要实验步骤 (三)、实验结果 (四)、讨论与分析
1、选用10-11日龄的鸡胚,画出气室和胚位
2、在气室接近胚体处用碘酊和酒精进行消毒
3、用钢锥穿一小孔
4、将注射器沿小孔插入0.5-1.0cm,注入0.1-
0.2ml接种物
5、用石蜡封口,并置孵卵箱中孵育,每天翻卵
并检卵一次,24h内死亡者废弃。
五、新城疫病毒接种鸡 胚后病变
1、鸡胚停止生长。 2、全身出血(头颈部,背部等)。 3、尿囊液增量。 4、病毒经尿囊腔接种后36h,最高滴度可 达107个鸡胚致死量。 5、鸡胚死亡(病毒接种量大)。
实验一 鸡胚接种
一、实验目的
了解鸡胚接种的优缺点。 掌握鸡胚接种病毒操作方法。
鸡胚用于病毒培养的优缺点
(一)优点
1、组织分化程度低 2、可选择不同的日龄和接种途径 3、病毒易于增殖 4、感染病毒的组织和液体中含大量病毒 5、容易采集和处理 6、来源充足 7、设备和操作简便易行
(二)缺点
方法二:(要做人工气室) 1、在胚胎附近近气室处,选择 血管较少的部位,用电烙器在卵 壳上烙一个直径约3-4mm的烤焦 圈。 2、用碘酊和酒精消毒后,小心 用刀尖撬起卵壳,造成卵窗。 3、在气室端中央钻一个小孔。 4、用针尖挑破卵窗中心的壳膜,
切勿损伤其下的绒毛尿囊膜,滴
加生理盐水于刺破处。
5、用橡皮乳头紧贴于气室中央小孔上吸气,