脑脊液总蛋白检测试剂盒(染料结合比色法)
测定总蛋白的参考方法
测定总蛋白的参考方法总蛋白是指物质中所有的蛋白质的总量，是衡量生物体内蛋白质含量的一个重要指标。
测定总蛋白的参考方法有多种，包括比色法、免疫测定法等。
比色法是测定总蛋白的常用方法之一。
比色法利用蛋白质与某些试剂（如比目鱼肝素，布鲁斯基试剂等）反应产生显色反应，通过测量显色产物的光密度，从而确定总蛋白的含量。
其中，布鲁斯基试剂法是一种常用的测定总蛋白方法。
操作步骤如下：1. 准备试液：将布鲁斯基试剂溶液配制为适当浓度，通常为1g/L。
2. 试管预处理：使用清洁的试管，将其进行空白校准，然后标记每个试管的编号。
3. 处理样品：准备待测样品，将其加入相应的试管中。
4. 加样：将布鲁斯基试剂溶液和样品依次加入试管中。
5. 摇匀：用试管摇匀，使试液充分混合。
6. 反应：让试管中的试液在适当的温度下静置，反应一定时间。
7. 比色：使用分光光度计将试管中的反应混合液吸入比色皿中，然后测量其光密度。
同时，使用空白校准和标准样品以及待测样品进行比较。
8. 计算：根据标准曲线（将标准品的光密度与其对应的已知浓度绘制的曲线），将样品的光密度值与标准曲线进行比对，从而确定样品中总蛋白的含量。
除了比色法，免疫测定法也是常用的测定总蛋白的方法之一。
免疫测定法是利用特异性抗体与待测蛋白质发生特异性反应，通过测量抗体与蛋白质结合形成的复合物的信号强度，从而确定总蛋白的含量。
常用的免疫测定法有封闭试剂法、双抗法、酶联免疫吸附试验（ELISA）等。
封闭试剂法是一种常用的免疫测定法。
操作步骤如下：1. 准备试剂：准备特异性抗体、酶联试剂和共价耦合试剂等。
2. 样品处理：将待测样品进行预处理，如稀释、去除干扰物质等。
3. 加样：将已处理的样品和试剂依次加入微孔板中。
4. 反应：在适当的温度和时间条件下，使抗体与样品中的总蛋白相互作用。
5. 清洗：使用洗涤缓冲液洗涤微孔板，去除未结合的物质。
6. 加底物：加入适当的底物，使底物与标记的酶发生反应产生显色物质。
总蛋白测定试剂盒(双缩脲法)产品技术要求zhongshengbeikong
总蛋白测定试剂盒（双缩脲法）适用范围：本产品与ABBOTT ARCHITECT c4000/c8000/c16000全自动生化分析仪配套使用，用于体外定量测定人血清中总蛋白的浓度。
1.1包装规格液体单剂型（液体Ⅰ型）试剂（R）：60mL×4；试剂（R）：80mL×4。
1.2主要组成成分试剂（R）（液体）氢氧化钠0.6mol/L酒石酸钾钠32mmol/L碘化钾20mmol/L硫酸铜12mmol/L2.1 外观试剂（R）应为蓝色溶液，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损。
2.2 净含量液体试剂净含量应不少于标示值。
2.3 试剂空白吸光度在波长546nm（540nm～560nm）（光径1cm）处，试剂空白吸光度（A）应≤0.200。
2.4准确度测定尿素、尿酸和总蛋白复合冰冻人血清国家标准品（编号：360012），相对偏差应不超过±5%。
2.5分析灵敏度对应于浓度为60g/L的TP所引起的吸光度差值（△A）的绝对值应在0.100～0.500的范围内。
2.6重复性重复测试高、中、低浓度样本，变异系数（CV）应≤5%。
2.7批间差测定同一样本，批间差（R）应≤6%。
2.8线性范围在[2，100]g/L范围内，线性相关系数（r）应≥0.990；在(30，100]g/L范围内，线性相对偏差应不超过±10%；在[2，30]g/L范围内，线性绝对偏差应不超过±3g/L。
2.9试剂稳定性2.9.1试剂效期稳定性：原包装的试剂盒在2℃～8℃避光贮存，有效期为36个月。
试剂有效期满后3个月以内，试剂性能应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.8的要求。
2.9.2开盖稳定性：开盖后，在2℃～8℃避光保存，稳定期为30天；稳定期满后1天内，试剂性能应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.8的要求。
脑脊液化学和免疫学检验及意义
脑脊液化学和免疫学检验及意义（1）蛋白质检查：正常脑脊液中蛋白质含量不到血浆蛋白的1%，主要为清蛋白。
1）蛋白质定性试验：①潘迪（Pandy）试验：脑脊液中蛋白质与苯酚结合成不溶性的蛋白盐而产生白色混浊。
②罗-琼试验：正常脑脊液球蛋白质含量很低。
正常定性试验均为阴性。
2）蛋白质定量试验：①磺基水杨酸（SSA）-硫酸钠为比浊法代表方法，特点是简便、快速，无需特殊仪器。
②染料结合比色法以丽春红S和考马斯亮蓝（CBB）法应用较多，CBB法快速、高灵敏度。
比色法的检测灵敏度及结果的重复性优于比浊法，且标本用量少，但对实验条件的pH 值要求较高。
3）参考值：成人，腰池200～400mg/L，脑池100～250mg/L，；脑室内50～150mg/L。
4）临床意义：脑脊液蛋白质含量随着年龄增加而升高。
在新生儿，由于血脑屏障发育尚不完善，脑脊液蛋白质相对较高，6个月后逐步降至成人水平。
脑脊液蛋白质含量见于：血屏障通透性增高性疾病：①脑膜炎：化脓性脑膜炎，蛋白质含量显著增高；结核性脑膜炎，中度增高；病毒性脑炎，轻度增高。
②出血性脑病：脑室及蛛网膜下腔出血，蛋白质含量中度增高。
脑脊液循环障碍：脑部肿瘤或椎管梗阻如脊髓肿瘤、蛛网膜下腔粘连脑脊液蛋白质含量增高。
在蛛网膜下腔梗阻性疾病，蛋白质含量增高到10g/L以上时，脑脊液外观呈黄色胶胨状，且有蛋白-细胞分离现象（Froin综合征），是蛛网膜下腔梗阻的脑脊液特征。
（2）葡萄糖测定：目前常用葡萄糖氧化酶法或己糖激酶法。
1）参考值：2.5～4.4mmol/L2）临床意义：脑脊液中葡萄糖含量与血糖浓度、血脑屏障的通透性及脑脊液中葡萄糖酵解程度有关。
脑脊液葡萄糖减低见于：中枢神经系统细菌性、真菌性感染：主要见于化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎及真菌性脑膜炎等。
当中枢神经系统发生感染性病变时，在病原微生物和破坏细胞释放的葡萄糖酵解酶的作用下，使脑脊液中葡萄糖含量降低。
在化脓性脑膜炎早期，葡萄糖含量即明显降低，疾病高峰期可为零。
总抗氧化能力(T-AOC)比色法测试盒(ABTS酶催化法)
用途本试剂盒适用于检测血清（浆）、尿液、动植物组织、细胞等样本中总抗氧化能力。
检测范围及灵敏度检测范围：0.047-1.50 mmol/L灵敏度：0.047 mmol/L背景介绍机体存在两类抗氧化系统，一类是酶抗氧化系统，包括超氧化物歧化酶(SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px）；另一类是非酶抗氧化系统，包括尿酸、维生素C、维生素E、谷胱甘肽、胆红素、α-硫辛酸、类胡萝卜素[1-3]。
抗氧化能力被认为是血液和体液中所有抗氧化剂的累积效应[3]。
检测原理ABTS在适当的氧化剂作用下氧化成绿色的 ABTS●+，在抗氧化物存在时ABTS●+的产生会被抑制，在414 nm测定ABTS●+的吸光度即可测定并计算出样本中的总抗氧化能力。
Trolox是一种维生素E的类似物，具有和维生素E相近的抗氧化能力，用作其他抗氧化物总抗氧化能力的参考。
例如，Trolox的总抗氧化能力为1，相同浓度情况下，其他物质的总抗氧化能力用其抗氧化能力和Trolox相应的倍数来表示。
本试剂盒测组织和细胞样本时，需测定总蛋白浓度，推荐使用BCA法（货号：E-BC-K318-M）。
提供试剂和物品注：试剂严格按上表中的保存条件保存，不同批次试剂盒中的试剂不能混用。
Focus on your research Service for life science 耗材：枪头（1000 μL ，200 μL ，10 μL ）。
仪器：酶标仪（405-425 nm ）、微量移液器（1000 μL ，200 μL ，100 μL ，10 μL ）。
所需自备物品配制试剂之前，请穿戴好防护装备。
试剂盒中部分试剂含有危险性物质。
禁止食入，吸入，直接接触眼睛、皮肤和衣物。
使用完后的试剂瓶经彻底清洗后再处理。
安全提示试剂：双蒸水、生理盐水（0.9% NaCl ）、PBS （0.01 M，pH 7.4）、80%乙醇。
实验关键点ABTS工作液配制完成后，室温避光保存，在30 min内使用完毕。
植物总抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量检测试剂盒
植物总抗氧化能力（TAC）比色法（ABTS）定量检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途植物总抗氧化能力（TAC）比色法（ABTS）定量检测试剂盒是一种旨在通过过硫酸钾的参与，使染料ABTS 氧化，在抗氧化剂的存在下，通过分光光度仪，观察其峰值下降的变化，来定量检测对应于标准水溶性生育酚Trolox的总抗氧化能力，即抑制氧化等值浓度的权威而经典的技术方法。
该技术经过精心研制、成功实验证明的。
适用于各种体液包括血浆、血清、尿液、脑脊液、唾液、精液等各种体液的总抗氧化能力检测。
产品严格无菌，即到即用，操作简易，性能稳定。
技术背景超氧自由基阴离子（superoxide radical；O2-）、过氧化氢（hydrogen peroxide；H2O2）、羟自由基或氢氧基（hydroxyl radical；OH-）、过氧化基（peroxyl radical；ROO-）、氢过氧自由基（hydroperoxyl；HOO）、烷氧自由基（alcoxyl radical）、氮氧基（nitric Oxide；NO-）、过氧亚硝基阴离子（peroxynitrite anion；ONOO-）次氯酸（hypochlorous acid；HOCl）、半醌自由基（semiquinone radical）、单线态氧气（singlet oxygen）等细胞内活性氧族（Reactive Oxygen Species；ROS）的产生和增多，将导致细胞衰老或凋亡，甚而导致诸如冠心病、风湿性关节炎、肿瘤、退行性病变等各种病理状况。
在生物系统内，通过抗氧化酶例如超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶等，大分子，例如白蛋白、铜蓝蛋白（ceruloplasmin；CER）、铁蛋白（ferritin）和抗氧化因子，例如生育醇、类胡萝卜素、抗坏血酸、还原性谷胱甘肽和尿酸胆红素（bilirubin）等，产生抗氧化能力，即捕获自由基的能力，达到消除或降低ROS的损害。
双缩脲双波长自动分析法测定脑脊液总蛋白含量的临床应用
文章编号:1001-5949(2001)10-0584-02・论 著・双缩脲双波长自动分析法测定脑脊液总蛋白含量的临床应用刘 彤1,刘志浩2 【摘要】 目的 在全自动分析仪上建立一种快速简便的脑脊液蛋白双缩脲测定法。
方法 在日产7170A全自动分析仪上,用双缩脲法测定脑脊液蛋白含量。
结果 双缩脲法测定脑脊液蛋白准确度高,精密度好,与磺基水杨酸比浊法有很好的相关性,而且重现性优于比浊法,两法相比,P<0.01,有较显著的差异。
结论 在全自动分析仪上用双缩脲法测定脑脊液蛋白是一种简使、快速、可靠的方法。
【关键词】 缩二脲反应;脑脊髓液蛋白质类;自动分析【中图分类号】 R446.14 【文献标识码】 ADu al-w avelength automatic analysis of cerebrospinal fluid protein with biuret method L IU Tong.(Beijing China-Japan Friendship Hosp.,Beijing100029,China)【Abstract】 Objective To establish a kind of rapid and simple biuret method for measuring cerebrospinal fluid protein of auto2 matic analyser.Method To use biuret method for measuring cerebrospinal fluid protein of HITACHI71701A automatic analyzer. R esults This method has good accruacy and precision.The relativity between this method and sulfosalicylic acid turbidimetry is very good.The reproducibility of this method is better than turbidimetry(P<0.01).Conclusion To measure cerebros pinal fluid protein with biuret method on automatic analyser is a kind of simple,rapid and reliable method.【K ey w ords】 Biuret reaction;Cerebrospinal f luid proteins;A utoanalysis 双缩脲试剂与各种血清蛋白多肽链产生的紫色非常一致(即几种主要血清蛋白显色后吸光度值相似,且具有稳定的吸光系数),是目前公认的最可靠的总蛋白浓度测定方法之一,多年来广泛用于临床标本分析。
白蛋白检测试剂盒(溴甲酚紫比色法)
白蛋白检测试剂盒(溴甲酚紫比色法)简介：总蛋白(Total Protein ，TP)由白蛋白和球蛋白组成，检测白蛋白的方法有双缩脲法、色氨酸法、染料结合法。
检测白蛋白的染料结合法可采用溴甲酚绿或溴甲酚紫染料结合，上述染料对白蛋白具有高度的亲和力，通常监测染料与白蛋白结合的初速率，该速率与样品中白蛋白浓度成正比。
Leagene 白蛋白检测试剂盒(溴甲酚紫比色法)检测原理是在酸性环境下，白蛋白分子带正电荷，与带负电荷的溴甲酚紫(Bromocresol purple ，BCP)结合生成绿色复合物，在603nm 处有吸收波，该复合物的吸光度与白蛋白浓度成正比，与同样处理的白蛋白标准比较，求得待测样品中白蛋白浓度。
本试剂盒多用于人或动物血清、血浆、组织等样本中的蛋白含量测定，该法操作简单、方法特异，既可手工操作，又可采用自动分析仪检测，对血清清蛋白的特异性比BCG 法(溴甲酚绿法)要好，不易受时间和温度变化的影响。
本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：自备材料：1、 离心管、小试管2、 比色杯3、 分光光度计操作步骤(仅供参考)：1、 取白蛋白标准配制液或稀释液加入到白蛋白标准中，充分溶解后配制成40mg/ml 的白蛋白标准溶液，配制后可立即使用，溶解后的白蛋白标准溶液应-20℃保存。
亦可按自己试验要求继续进行稀释，如稀释至1mg/ml 。
特别提示：待测蛋白溶解于什么样的稀释液中，白蛋白标准也宜溶解于什么样的稀释液中。
例如待测蛋白溶解于蔗糖中，亦取白蛋白标准溶解于蔗糖中。
一般也可以用NaCl 或PBS 作为溶解白蛋白标准品的稀释液。
2、 样本处理：血清、血浆样本直接取检测。
对于组织样本，按组织质量(g)：生理盐水比例，加入生理盐水或PBS ，冰浴下匀浆后，离心，取上清待检。
编号 名称TC0567 100T Storage试剂(A): BCP 试剂 200ml 4℃ 避光试剂(B): 白蛋白标准 20mg RT 试剂(C): 白蛋白标准配制液 100mlRT使用说明书1份3、白蛋白加样操作，按下表依次加入试剂：加入物(ml) 空白管标准管待测管白蛋白标准配制液0.01 −−白蛋白标准溶液(40mg/ml) −0.01 −待检样品(血清、血浆、组织匀浆液) −−0.01BCP试剂 2.0 2.0 2.04、比色杯光径，先在分光光度计以空白管调零，逐管加入BCP试剂，并立即混匀。
脑脊液蛋白质的检测原理
脑脊液蛋白质的检测原理
脑脊液蛋白质的检验有定性和定量两种方法,并可根据需要计算蛋白商(球蛋白/清蛋白)和脑脊液清蛋白指数(Ralb)[脑脊液清蛋白(g/L)/血清清蛋白(g/L)].
1.定性法
(1)Pandy试验:脑脊液中的蛋白质与苯酚结合形成不溶性蛋白盐而出现白色浑浊或沉淀。
(2)硫酸铵试验:包括Ross-Jone试验和Nonne-Apelt试验。
饱和硫酸铵能沉淀球蛋白,出现白色浑浊或沉淀。
若球蛋白增多则Ross-Jone试验阳
性;Nonne-Apelt试验可检测球蛋白和清蛋白医|学教育搜集整理。
(3)Lee-Vinson试验:磺基水杨酸和氯化高汞均能沉淀脑脊液蛋白质,根据沉淀物的比例不同,可鉴别化脓性和结核性脑膜炎。
2.定量法:
利用比浊法、染料结合比色法和免疫学方法检测脑脊液蛋白质含量。
常用的方法为磺基水杨酸-硫酸钠比浊法。
脑脊液总蛋白检测试剂盒(邻苯三酚红钼比色法)
脑脊液总蛋白检测试剂盒(邻苯三酚红钼比色法)简介：脑脊液(Cerebro-Spinal Fluid，CSF)是存在于脑室、蛛网膜下腔和脊髓中央管内的无色透明液体，由脑室中的脉络丛产生，与血浆和淋巴液的性质相似。
正常成年人的脑脊液约100~150ml，弱碱性，不含红细胞。
正常脑脊液具有一定的化学成分和压力，对维持颅压的相对稳定有重要作用，当中枢神经系统受损时，脑脊液的检测成为重要的辅助诊断手段。
总蛋白(Total Protein，TP)由白蛋白和球蛋白组成。
对于生物体液(血清、尿液、脑脊液)中总蛋白质含量的测定，一般要基于如下两个假设：1、所有蛋白质分子由纯多肽组成，含氮量的质量百分比为16%；2、体液中含有数百个蛋白质分子，每个分子对测定反应都具有非常相似的特性。
目前常用的方法有：双缩脲法、紫外分光光度法、染料结合法、凯氏定氮法、沉淀法等。
Leagene脑脊液总蛋白检测试剂盒(邻苯三酚红钼比色法)其检测原理是在酸性条件下，首先邻苯三酚红和钼酸络合形成红色复合物，该复合物与蛋白质形成复合体，其吸收峰移至604nm，通过比色法求出样本中蛋白质的含量。
本试剂盒专门用于人或动物脑脊液样本中的总蛋白含量测定，但易受表面活性剂影响。
本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：自备材料：1、离心管、小试管2、比色杯3、分光光度计操作步骤(仅供参考)：1、取蛋白标准配制液或稀释液加入到蛋白标准中，充分溶解后配制成蛋白标准溶液，配制后可立即使用，溶解后的蛋白标准溶液应-20℃保存。
取蛋白标准溶液用蛋白标准配制液或稀释液继续进行稀释。
特别提示：待测蛋白溶解于什么样的稀释液中，蛋白标准也宜溶解于什么样的稀释液中。
例如待测蛋白溶解于蔗糖中，亦取蛋白标准溶解于蔗糖中。
一般也可以用NaCl或PBS 作为稀释液。
2、TP加样操作，按下表依次加入试剂：3、混匀, 室温孵育。
4、比色杯光径，分光光度计测定波长处的吸光度。
临床生化常用的色原及检测波长
临床生化常用的色原及检测波长Toos 545nm苯酚（对氯苯酚）505nmNAD（P）H指示系统，波长340nm，项目：ALT、AST、GLUC己糖激酶法、C K、UREA、LDH等。
苯衍生物类，波长400-410nm，如ALP、GGT、CHE等。
过氧化物酶指示系统，项目：TG、TCH、HDL-C、LDL-C、UA等。
可见光波长及其互补色：可见光波长及其相应被吸收的颜色依次为：红色（630～700nm）、橙色（600～630nm）、黄色（570～600nm）、绿色（500～570nm）、蓝色（435～500nm）、紫色（400～435nm）。
★540nm：1. 双缩脲测蛋白：所有蛋白质分子都含有肽键。
在碱性溶液中，肽键与铜离子结合，生成蓝紫色化合物，在540nm处吸光度与肽键的数量呈正比关系，可以计算蛋白质含量。
2. 染料结合法测脑脊液蛋白：在柠檬酸存在的酸性条件下，伊红Y燃料离解成阴离子型，染料的黄色消退，使试剂空白吸光度降低；另外，蛋白质多肽链中的精氨酸、组氨酸、赖氨酸和色氨酸残基，离解生成带－NH3+基团，与染料阴离子的羧基和酚基借静电吸引而结合成红色蛋白燃料复合物，其540nm处吸光度大小与蛋白质浓度呈比例。
★628nm：1. 溴甲酚绿法测血清白蛋白：在PH4.2的缓冲液中，白蛋白分子带正电荷，与带负电荷的溴甲酚绿（BCG）生成蓝绿色复合物，在波长628n m处有吸收峰。
复合物的吸光度与白蛋白浓度成正比。
★603nm：1. 溴甲酚紫法（BCP）测血清白蛋白：BCP溶于PH5.2的醋酸缓冲液中，呈黄色。
当它与白蛋白结合后转变为绿色的符合物，在波长603出有最大吸收峰。
★650nm：1. 磷钨酸法测黏蛋白：以0.6mol/L过氯酸沉淀血清中蛋白质时，黏蛋白不被沉淀，仍存留在滤液中，再加磷钨酸使黏蛋白沉淀，然后以酚试剂测定沉淀物中蛋白质的含量。
伊红Y染料结合法测定脑脊液蛋白在全自动生化分析仪上的应用
【 要 】 目的 摘
２ ２０ ） ２ ０ ２
在 Ｂ ｉ３ ｒ一５存 在 下 ， ｊ
在 全 自动 生 化 分 析仪 上 建 立 一 种 测 定 脑 脊 液 蛋 白含 量 的 分析 方 法 。 方 法
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３６ ３ ・
检验 医 学 与临 床 ２ １ ０ ２年 ２月 第 ９卷 第 ３期
Ｌ ｂＭｅ ｌ ， ｅｒａｙ２ １ ， １９ Ｎｏ ３ ａ ｄＣｉ Ｆ ｂｕ ｒ ０２ Ｖｏ． ， ． ｎ
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２５ ４ ０紫外 分 光 光度 计 选 定 波 长 ５０ｎ 测 定 反 应 生成 物 吸 光 ４ ｍ， 度 。结 果 表 明 ： 应 后 １ ｎ 显 色 趋 于 稳 定 ， 稳 定 ２ ｈ 反 ０ ｍｉ， 可
Ｒｅ ｇ ｎ ｌ ０ Ｉ ； ａ ｅ ｔ２ Ｖｏ ０ Ｌ；Ｗ ａ ｅｅ ｇ ｈ Ｐｒ． ａ ｅ ｔ１ Ｖｏ Ｒｅ ｇ ｎ ｌ ０ ３ ３ ｖ ｌｎ ｔ ｉ ５ ０ ｎ ， ｅ ． ６ ｍ ； Ｍ ｅｈ ｄ Ｅ ４ ｍ Ｓ ｃ ６ ０ｎ ｔ ｏ ＮＤ； Ｒｅ ｃ ｉｎ ＋ ａｔ ｏ ； ａｔ ｎ Ｒｅ ｃｉ — ｏ
总蛋白试剂盒双缩脲比色法标准操作程序
总蛋白试剂盒（双缩脲比色法）标准操作程序1. 摘要本试剂盒供医疗机构用于体外定量测定人血清或血浆中的总蛋白含量。
2. 适用范围程序适用于AU5811自动生化分析仪检测人血清或血浆中的总蛋白含量。
3. 职责使用AU5811自动生化分析仪进行测定总蛋白浓度的工作人员要严格按照本SOP 程序进行，室负责人监督管理；本SOP 的改动，可由任一使用本SOP 的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。
4. 检测方法上海科华生物工程股份有限公司生产的总蛋白试剂盒采用的是双缩脲比色法。
5. 原理蛋白质中的肽键在碱性条件下，与铜离子反应生成紫红色络合物，并且引起550nm 处吸光度的上升。
由于反应所产生的化合物在波长550nm 处有吸收峰,所以在一定底物浓度范围内, 550nm 处吸光度的变化值与样本中总蛋白的含量成正比。
紫红色络合物蛋白质中的肽键碱性条件−−−→−++2u C6. 仪器AU5811自动生化分析仪7. 试剂7.1 试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供7.2 试剂瓶内主要成分：测定：酒石酸钾钠≥5g/L试剂：硫酸铜≥2g/L 、碘化钾≥1g/L 、NaOH ≥30g/L校准品：白蛋白 （含量见瓶签）7.3 试剂稳定性：未打开试剂在2-8℃避光保存可至失效期。
校准品使用后应密封保存，以免液体挥发。
8. 标准品和质量控制8.1 校准程序：使用科华公司的校准品对自动分析仪进行校准。
按照公司标准品使用要求，并以9g/L氯化钠溶液或去离子水为空白，经校准测定，仪器自动对标准品通过合适的数学模型绘制校准曲线。
8.2质控品：使用罗氏公司提供的生化复合定值质控血清作为室内质控品。
每日在测定前做一次质控加试剂后做一次质控。
该质控品为干粉包装，在2-8℃冰箱可稳定到失效期，使用前用5ml去离子水复溶，待质控物充分溶解（大约30分钟）后使用。
8.3质控数据管理：按程序对检验后的质控后结果进行转换，及时质控数据进行分析处理，如出现失控值，应及时分析失控原因，并填写好相关失控记录。
脑脊液与尿蛋白测定试剂盒(苄索氯铵法)产品技术要求haifeng
脑脊液与尿蛋白测定试剂盒（苄索氯铵法）适用范围：本产品适用于体外定量测定人尿液或脑脊液中的总蛋白（UTP）含量。
1.1 产品规格1.2 主要组成成分注：校准品具有批间、赋值特异性，具体值详见靶值单。
2.1外观2.1.1试剂盒标签标识清晰，外包装完整无破损；2.1.2试剂1：无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；2.1.3试剂2：无色或浅黄色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；2.1.4校准品：无色或浅黄色液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物。
2.2净含量净含量不低于标示值。
2.3空白吸光度测定待检试剂在主波长505nm、副波长700nm，37℃条件下：A≤1.0。
2.4 线性范围(3,200)mg/dL范围内，相关系数r≥0.990；(3,30]mg/dL范围内，绝对偏差应不大于±3mg/dL；（30,200）mg/dL范围内，相对偏差应不大于±10.0%。
2.5分析灵敏度在产品说明书规定参数设定条件下,样本浓度为100mg/dL时,吸光度变化△A≥0.2。
2.6 精密度2.6.1批内重复性CV≤10.0%。
2.6.2 批间差相对极差R≤10.0%。
2.7 准确度与已上市产品比对：(3,200)mg/dL范围内，相关系数r≥0.990；(3,30]mg/dL时，绝对偏差应不大于±3mg/dL；（30,200）mg/dL时，相对偏差应不大于±10.0%；2.8 校准品2.8.1 均一性：CV≤10.0%；2.8.2 开瓶稳定性：开瓶后3天，校准品1：相对偏差不超过±20.0%；校准品2～5：相对偏差不超过±10%。
2.9稳定性未开封试剂2℃～8℃储存，可稳定12个月。
取到效期后2个月内产品进行检测，检测结果应满足2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7的要求。
2.10溯源性依据GB/T 21415—2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求，校准品溯源至工作校准品，工作校准品经与Audit Diagnostics脑脊液与尿蛋白测定试剂盒比对测量赋值。
临床检验主管技师 临床检验基础 第十二章 脑脊液检验
第十二章脑脊液检验一、标本采集与处理（一）脑脊液检验的适应证和禁忌证（二）标本采集与处理留取脑脊液标本于3个无菌试管中，每个试管1～2ml。
第一管做病原生物学检验；第二管做化学和免疫学检验；第三管做理学和细胞学检验。
标本采集后应立即送检，并于1h内检验完毕。
标本放置过久，可造成细胞破坏、葡萄糖等物质分解、细菌溶解等，影响检验结果。
二、理学检查（一）颜色肉眼观察脑脊液颜色变化，分别以无色、乳白色、红色、棕色或黑色、绿色等描述。
正常脑脊液无色透明，新生儿胆红素较多可呈黄色。
如表：脑脊液常见的颜色变化及临床意义如表：脑脊液新鲜性出血与陈旧性出血的鉴别（二）透明度正常人CSF清晰透明。
病理状态，透明度改变：细胞数量和细菌。
病毒性脑膜炎：清晰透明或微浑。
结核性脑膜炎：毛玻璃样浑浊。
化脓性脑膜炎：脓性、块样浑浊。
当脑脊液白细胞超过300×106-/L时，可呈浑浊。
报告方式：清晰透明、微浑、浑浊三级报告。
（三）凝固性正常人CSF12～24小时以后不形成薄膜。
病理状态，蛋白质＞10g/L，薄膜或凝块。
化脓性脑膜炎静置1～2h即可出现凝块或沉淀物。
结核性脑膜炎静置12～24h内可见有薄膜或纤细的凝块形成。
蛛网膜下腔阻塞黄色胶样状Frion-Nonne（脑脊液同时存在胶样凝固、黄变症和蛋白质-细胞分离）。
神经梅毒有小絮状凝块。
（四）比密脑脊液比密为：腰椎穿刺1.006～1.008；脑室穿刺1.002～1.004；小脑延髓池穿刺1.004～1.008。
凡是脑脊液中的细胞数量增加和蛋白质含量增高的疾病，其比密均增高。
常见于中枢神经系统感染、神经系统寄生虫病、脑血管病、脑肿瘤、脑出血、脑退行性变和神经梅毒等。
三、显微镜检查1.检测原理（1）清亮或微浑的脑脊液标本，可以直接计数细胞总数，或稀释后再直接计数，将结果乘以稀释倍数。
（2）可采用直接计数法计数白细胞，或稀释后再直接计数，将结果乘以稀释倍数。
（3）白细胞直接计数后，在高倍镜下根据白细胞形态特征进行分类计数。
生化免疫试剂及其配套应用介绍
白蛋白诊断试剂盒
Albumin Mod PD R2
丙氨酸氨基转移酶诊断试剂盒 Alanine aminotransferase
丙氨酸氨基转移酶诊断试剂盒 Alanine aminotransferase
11877909216 11877917216 11875540216
不饱和铁结合力诊断试剂盒
Unsaturated Iron-Binding Capacity
CRP Gen、3 TINA-QUANT
C反应蛋白检测试剂盒(免疫比浊法)
CRP Gen、3 TINA-QUANT
低密度脂蛋白胆固醇诊断试剂盒 LDL-C plus Gen、2 UNISYS
11876473316
11730240216 11730711216
11929992216 12016958216 11930010216 11875418216
淀粉酶诊断试剂盒
Amylase
二氧化碳诊断试剂盒 Bicarbonate
•可以互相讨论下，但要小声点
Modular 试剂规格包装
Modular 试剂规格包装 P Modular
11876937216 11970909216 11876805216 12146398216 11491458216
a-羟丁酸脱氢酶检测试剂盒(比色法)
HBDH
白蛋白诊断试剂盒
Albumin
脑脊液蛋白
白蛋白 脑脊液总蛋白
Modular 项目预览
Modular 试剂规格包装
P module
D module
Modular 试剂规格包装
P 800
flexible setting
20 ml
up to 100 tests
总蛋白(TP)测定试剂盒(双缩脲法)产品技术要求sainuopu
总蛋白（TP）测定试剂盒（双缩脲法）适用范围：用于体外定量测定人体血清中总蛋白的含量。
1.1 试剂盒包装规格试剂：1×20ml；2×60ml；3×40ml；4×60ml；4×400ml；2×30ml。
校准品：1×1ml；1×3ml。
1.2 试剂盒主要组成成分2.1 外观试剂：亮蓝色澄清液体。
校准品：无色至浅黄色澄清液体。
2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。
2.3 试剂空白吸光度在37℃、546nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应不大于0.2。
2.4 分析灵敏度测定浓度为50g/L样本时，吸光度变化值（ΔA）应不小于0.2。
2.5 线性范围在（10，100）g/L线性范围内，线性相关系数r应不小于0.990。
在[30，100）g/L范围内的线性相对偏差应不大于±10%；在（10，30）g/L范围内的线性绝对偏差应不大于±3.0g/L。
2.6 重复性重复测试两份高低浓度的样本，所得结果的变异系数（CV%）应不大于3%。
2.7 批间差不同批号试剂测试同一份样本，测定结果的批间相对极差应不大于5%。
2.8 准确度相对偏差：相对偏差应不超过±10%。
2.9 校准品溯源性依据GB/T 21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求，校准品溯源至NIST生产的有证参考物质（SRM927）。
2.10 稳定性效期稳定性：试剂盒在2℃～8℃下有效期为12个月，取失效期的试剂盒进行检测，试验结果应满足2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.8要求。
临床生化常用地色原及检测波长
临床生化常用的色原及检测波长Toos 545nm苯酚（对氯苯酚）505nmNAD（P）H指示系统，波长340nm，项目：ALT、AST、GLUC己糖激酶法、CK、UREA、LDH等。
苯衍生物类，波长400-410nm，如ALP、GGT、CHE等。
过氧化物酶指示系统，项目：TG、TCH、HDL-C、LDL-C、UA等。
可见光波长及其互补色：可见光波长及其相应被吸收的颜色依次为：红色（630～700nm）、橙色（600～630nm）、黄色（570～600nm）、绿色（500～570nm）、蓝色（435～500nm）、紫色（400～435nm）。
★540nm：1. 双缩脲测蛋白：所有蛋白质分子都含有肽键。
在碱性溶液中，肽键与铜离子结合，生成蓝紫色化合物，在540nm处吸光度与肽键的数量呈正比关系，可以计算蛋白质含量。
2. 染料结合法测脑脊液蛋白：在柠檬酸存在的酸性条件下，伊红Y燃料离解成阴离子型，染料的黄色消退，使试剂空白吸光度降低；另外，蛋白质多肽链中的精氨酸、组氨酸、赖氨酸和色氨酸残基，离解生成带－NH3+基团，与染料阴离子的羧基和酚基借静电吸引而结合成红色蛋白燃料复合物，其540nm处吸光度大小与蛋白质浓度呈比例。
★628nm：1. 溴甲酚绿法测血清白蛋白：在PH4.2的缓冲液中，白蛋白分子带正电荷，与带负电荷的溴甲酚绿（BCG）生成蓝绿色复合物，在波长628nm处有吸收峰。
复合物的吸光度与白蛋白浓度成正比。
★603nm：1. 溴甲酚紫法（BCP）测血清白蛋白：BCP溶于PH5.2的醋酸缓冲液中，呈黄色。
当它与白蛋白结合后转变为绿色的符合物，在波长603出有最大吸收峰。
★650nm：1. 磷钨酸法测黏蛋白：以0.6mol/L过氯酸沉淀血清中蛋白质时，黏蛋白不被沉淀，仍存留在滤液中，再加磷钨酸使黏蛋白沉淀，然后以酚试剂测定沉淀物中蛋白质的含量。
2. 米吐尔直接显色法测血清无机磷：利用无机磷在酸性溶液中与钼酸铵反应生成磷钼酸铵复合物，用还原剂对甲氨基酚硫酸盐（米吐尔）还原生成钼蓝。
脑脊液尿液总蛋白(u-TP)测定的标准操作程序
脑脊液/尿液总蛋白（u-TP）测定的标准操作程序【应用范围】体外检测尿液、脑脊液测定。
【适用仪器】Olympus AU-2700全自动生化分析仪。
【程序改变】严格遵循仪器、试剂说明书及校准品使用说明。
【方法学原理】邻苯三酚红与钼酸结合，形成了一种在467nm有最大吸收的红色络合物；当这种络合物在酸性条件下与蛋白质结合时，生成兰紫色络合物，在598nm处有最大吸收。
【试剂】1组成：脑脊液／尿总蛋白显色剂：邻苯三酚红缓冲液（2.4mg/dL）钼酸钠（9.6mg/dL）及表面活性剂，PH2.5。
2.校准品：Electrollyte CAL 1、Electrollyte CAL 2。
3. 质控品：Randox Assayed Multiseral Level 2 and Level 3。
4.试剂稳定性与贮存试剂避光保存于2－8℃，若无污染，可稳定至失效期。
在试验前，应将试剂、标准液及标本放置室温使用。
【标本收集与准备】尿液标本定时或随机尿标本，不可加防腐剂，根据实验室标准采集程序采集标本，室温保存24小时，冷藏7天，冷冻保存6个月。
尿钠高于线性可用双蒸水对倍稀释。
脑脊液标本应是非溶血的，并离心分离血红细胞及其它颗粒物，CSF在2℃～8℃冷藏，直到检测。
【操作步骤】1.仪器测定参数设置Test Name:Sample: Volume L Dilutio LL Dilutio LLSec. ODMethod: First LLast LReaction Slope:Measuring Last LMeasuring LastLinearity ANo-Lag-Time:2.试剂准备：将准备好的试剂置仪器试剂盘中（8℃）。
3.校准校准物的准备：将校准物从冰箱取出，冻干校准物按说明书加入蒸馏水复溶，轻轻颠倒混匀3次，不可用力震摇，室温放置30分钟至完全溶解；液体校准物从冰箱取出，室温放置15分钟以平衡至室温。
校准物的选择尽可能选择配套仪器厂家校准品。
粪便脑脊液浆膜腔积液检测
蛋白质定量试验
1.蛋白沉淀剂比浊法：磺柳酸-硫代硫酸 钠比浊
2.染料结合比色法：丽春红、考马斯亮 蓝
参考值 （成人）
腰池
200—400mg/L
小脑延髓池100—250mg/L
脑室
50—150mg/L
蛋白质检查的临床意义
1. 血脑屏障通透性增加：
脑膜炎，化脓性脑膜炎显著增高、结核性脑 膜炎中度增高，病毒性脑膜炎轻度增高。
出血、内分泌或代谢性疾病：脑室或蛛网膜 下腔出血、糖尿病毒性神经病变、甲状腺功 能减退、尿毒症及脱水
药物中毒如乙醇、酚噻嗪、苯妥因。
蛋白质检查的临床意义
2. 脑脊液循环障碍 ：
脑部肿瘤或椎管梗阻如蛛网膜下腔粘连。 蛛网膜下腔梗阻时，蛋白质10g/L以上，脑
脊液呈胶冻状，有蛋白--细胞分离现象。
进展期升高。
临床常见酶检查
3.CK：
不及血浆1/50，主要是CK-BB， 增高多见于化脓感染、脑梗死、炎症、缺氧、损伤
等。
4.ADA：
结核性脑膜炎时增高明显。
5.溶菌酶：
细菌性脑膜炎时增高， 结核性尤其明显
（三）显微镜检查
1 细胞计数
参考值
1.红细胞：无。 2.白细胞：
成人（0~10）×106/L； 儿童（0~15）×106/L； 新生儿（0~30）×106/L。
凝固性
CSF 的 凝 固 状 况 表 现 形 式 有 ： 薄 膜 形 成 （pellicle formation）、凝块（clot）或沉淀形 成。
正常CSF标本：静置12~24h不形成薄膜、凝块或沉 淀。
化脓性脑膜炎时标本静置1~2h可形成凝块或沉淀； 结核性脑膜炎时静置12~24h标本表面可有纤细网
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脑脊液总蛋白检测试剂盒(染料结合比色法)
简介：
脑脊液(Cerebro-Spinal Fluid ，CSF)是存在于脑室、蛛网膜下腔和脊髓中央管内的无色透明液体，由脑室中的脉络丛产生，与血浆和淋巴液的性质相似。
正常成年人的脑脊液，弱碱性，不含红细胞。
正常脑脊液具有一定的化学成分和压力，对维持颅压的相对稳定有重要作用，当中枢神经系统受损时，脑脊液的检测成为重要的辅助诊断手段。
总蛋白(Total Protein ，TP)由白蛋白和球蛋白组成。
对于生物体液(血清、尿液、脑脊液)中总蛋白质含量的测定，一般要基于如下两个假设：1、所有蛋白质分子由纯多肽组成，含氮量的质量百分比为16%；2、体液中含有数百个蛋白质分子，每个分子对测定反应都具有非常相似的特性。
目前常用的方法有：双缩脲法、紫外分光光度法、染料结合法、凯氏定氮法、沉淀法等。
Leagene 脑脊液总蛋白检测试剂盒(染料结合比色法)其检测原理是在酸性条件下，伊红解离成阴离子型，染料瞌颜色逐渐褪去，使试剂空白吸光度降低；蛋白质多肽中的精氨酸、组氨酸、赖氨酸、色氨酸残基解离成带有-NH3+基团，与伊红结合成红色蛋白复合物，其吸光度与蛋白浓度呈比例，与同样处理的标准液比较，测得样本中蛋白质的含量。
本试剂盒专门用于人或动物脑脊液样本中的总蛋白含量测定。
本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：
自备材料：
1、 离心管、小试管
2、 比色杯
3、 分光光度计
操作步骤(仅供参考)：
1、 取蛋白标准配制液或稀释液加入到蛋白标准中，充分溶解后配制成蛋白标准溶液，配制
编号 名称
TC060350T
TC0603100T Storage 试剂(A): TP 显色液 A1: Eosinsolution 1ml 2ml RT 避光
A2: Acidic buffer
1ml 2ml RT A3: Eosin buffer
100ml
200ml
RT
临用前，A1：A2：A3混合，即为TP 显色液。
试剂(B): TP acidic buffer 3.5ml 7ml RT 试剂(C): 蛋白标准 20mg 20mg RT 试剂(D): 蛋白标准配制液 5ml
5ml
RT
使用说明书
1份
后可立即使用，溶解后的蛋白标准溶液应-20℃保存。
取适量蛋白标准溶液用蛋白标准配制液或稀释液继续进行稀释。
特别提示：待测蛋白溶解于什么样的稀释液中，蛋白标准也宜溶解于什么样的稀释液中。
例如待测蛋白溶解于蔗糖中，亦取蛋白标准溶解于蔗糖中。
一般也可以用NaCl或PBS作为稀释液。
2、TP测定操作，按下表依次加入试剂：
加入物(ml) 空白管标准管待测管
蛋白标准配制液0.0325
蛋白标准溶液(0.7mg/ml) 0.0325
待检样品(脑脊液) 0.0325
TP acidic buffer 0.65 0.065 0.65
TP显色液 1.95 1.95 1.95
3、漩涡混匀, 室温孵育。
4、分光光度计测定波长处的吸光度。
以空白管调零，读取标准管和各待测管的吸光度。
计算：脑脊液总蛋白(mg/L)=(待测管吸光度/标准管吸光度)×700
注意事项：
1、蛋白标准粉末溶解于蛋白标准配制液后，即获得蛋白标准原液，该原液中含有防腐剂，
不影响后续检测，该蛋白标准原液-20℃长期保存。
2、如果没有分光光度计，也可以使用酶标仪测定。
使用酶标仪测定蛋白浓度时，每个试
剂盒可以测定的样品数量可能会显著增加。
3、相同浓度的蛋白质，白蛋白呈色稍强，球蛋白稍低。
4、本方法线性范围可达1000mg/L，若CSF中蛋白含量过高，常规检查时潘氏实验达(2+)
者，测定时CSF用量应适量减少，计算时应相应修正。
5、本方法加入试剂后1~5min内呈进行性缓慢下降，10~30min趋于平稳，可稳定2h。
6、TP acidic buffer加入量应准确，边加边混匀，否则影响结果。
有效期：6个月有效。
蛋白标准配制成溶液后应-20℃冻存。