腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森氏菌检验的价值分析

腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森氏菌检验的价值分析【摘要】目的：研究探讨在腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森氏菌的检验价值。方法：选取笔者所在医院2009年1月-2012年3月收治的1300例腹泻患者作为本次试验的研究对象。所有患者进行

rt-pcr及培养方法进行小肠结肠炎耶尔森氏菌肠炎的检测，对比两种方法的检测价值；总结患者的临床特征。结果：1300例患者rt-pcr 共检出耶尔森氏菌肠炎101例，比培养法检出率更高，差异有统计学意义（p<0.05）；101例阳性患者中以小儿为主，患儿主要表现为胃肠炎、阑尾炎，且有38例出现肠道外并发症。结论：rt-pcr法比培养法对耶尔森氏菌检出率更高；在腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森氏菌的检出率较高，患者肠道外表现多，需要临床引起重视。

【关键词】腹泻；粪便；小肠结肠炎；耶尔森氏菌

中图分类号 r446.13 文献标识码 b 文章编号 1674-6805（2013）4-0072-02

小肠结肠炎耶尔森氏菌是在20世纪80年代受到重视的一种肠道传染疾病，在全世界范围内均有发现，患者有严重的胃肠炎和腹泻，同时多伴有呼吸道、骨骼、胃肠道等疾病，出现败血症的概率较高[1]。病菌可能由家畜、家禽、啮齿动物、爬行动物等传播。本文研究对比了rt-pcr及培养方法对耶尔森氏菌的检出率，分析此类患者的临床特征，报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取笔者所在医院2009年1月-2012年3月收治的1300例腹泻患者作为本次试验的研究对象。其中男799例，女501例；18岁以下762例，18岁以上538例；年龄4个月～78岁，平均（29.98±10.05）岁。患者均有排便次数增加，每日3次以上，且性状改变。

1.2 方法

所有患者进行rt-pcr及培养方法进行小肠结肠炎耶尔森氏菌肠炎的检测，观察对比两种方法的检测价值，总结患者的临床特征。

将所有患者粪便样本放于cary-blair保存液内，样本量为0.5 g，随后加入4.5 ml的生理盐水，混合，放于增菌液内进行培养。

rt-pcr：培养18 h（16 ℃）后取200 μl混合物进行dna提取。扩增产物长度为154 bp，反应体系包括反应预混合液、引物、探针、bsa、模板，在95 ℃下进行反应，并设立对照组。以反应前后的荧光差值作为衡量标准。

培养法：粪便经过18 h（16 ℃）培养后，取5 μl接种到cin 平板上，再进行24 h培养（25 ℃），挑取可疑菌落进行培养后，再初筛，并与标准菌株作为阳性对照。根据初筛结果和生化试验进行阴性判定。

1.3 统计学处理

所得数据采用spss 17.0统计学软件进行处理，计数资料采用字2检验，p<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 rt-pcr及培养方法对小肠结肠炎耶尔森氏菌的检验对比

1300例患者rt-pcr共检出耶尔森氏菌肠炎101例，比培养法检出率更高，差异有统计学意义（p<0.05），详见表1。

2.2 小肠结肠炎耶尔森氏菌阳性与阴性患者特征比较

101例rt-pcr方法监测耶尔森氏菌阳性患者中以小儿为主，患儿主要表现为胃肠炎、阑尾炎，且有38例出现肠道外并发症，与阴性患者比较差异有统计学意义（p<0.05），详见表2。

3 讨论

小肠结肠炎耶尔森氏菌首次提出在1934年，并在20世纪80年代前后引起了几次世界大流行[2]，其临床表现包括胃肠型症状、肠道外感染两种。其中胃肠型症状包括腹泻、腹痛、恶心和呕吐；肠道外感染包括肝脾疾病、关节炎、脑膜炎及自身免疫性疾病。人类可通过进食被污染的猪肉、水等获得感染，甚至可造成医院内感染等[3]。

由于临床对耶尔森氏菌的不重视，使用非敏感性抗生素，可能会导致肠道外并发症日趋严重，甚至出现不良预后。而由于患者的临床表现缺乏特异性，且部分患者类似急性阑尾炎等，易被误诊。

本次试验首先对rt-pcr及培养方法对小肠结肠炎耶尔森氏菌的检验结果进行了对比分析。其中rt-pcr的检出率更高，操作简单，整个过程仅需要2 d左右，反应后不需要进行电泳，因此可减少污

染，并节约时间。同时还能对患者的检测结果进行定量分析，有助于了解患者的感染情况。而培养法操作简单，可减少实验员肉眼判断的难度和主观性[4]，临床可通过两者联合使用提高诊断准确率。但是rt-pcr更有利于疾病的检验和筛查。

随后，本试验还对小肠结肠炎耶尔森氏菌感染的腹泻患者的临床特征进行了研究，其中儿童发生率较高，男女比较无差异，患者假阑尾炎发生率高、肠外感染发生率高。笔者认为，儿童由于缺少较好的饮食卫生习惯，会增加粪口传播感染的机会，因此需要家长提高此方面的健康教育。假阑尾炎发生率高，易导致在急诊条件下医生盲目对患者进行急诊手术，需要医生结合ct或b超等方法给予有效鉴别。

临床研究发现，小肠结肠炎耶尔森氏菌对妥布霉素、庆大霉素、头孢噻肟、环丙沙星和氧氟沙星的敏感性较高，在95%以上；对头孢他啶、头孢呋辛的敏感性较低，为80%以上，而对替卡西林、氨苄青霉素、头孢唑林等敏感性非常低，仅为10%左右[5]。而小肠结肠炎耶尔森氏菌也易发生在秋冬季节，难以与其他腹泻进行鉴别，需要医生引起重视。

综上所述，在腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森氏菌的检出率较高，患者肠道外表现多，需要临床引起重视，早期进行细菌检验，并给予敏感抗生素，以减少疾病对患者的影响，缩短治疗疗程。

参考文献

[1]sorg j a，miller n c，marketon m m，et al.rejection of impassable substrates by yersinia type ⅲ secretion machines[j].journal of bacteriology，2005，187（20）：

7090-7102.

[2]张曼碧，杨华源，刘小华，等.四种耶尔森氏菌的抗原抗体相关性研究[j].中国地方病防治杂志，2006，21（1）：1-3.

[3]顾峰，李宝贵，张贵军，等.吉林省小肠结肠炎耶尔森氏菌脉冲场凝胶电泳分析[j].中国地方病防治杂志，2007，22（2）：

84-85.

[4]程伯鲲，崔树玉，温宪芹，等.我国腹泻病患者和家畜家禽粪便标本中携带小肠结肠炎耶尔森氏菌hpi毒力岛的大肠杆菌的调查[j].中华流行病学杂志，2000，21（2）：130-133.

[5]郑浩轩，姜泊.小肠结肠炎耶尔森氏菌感染在腹泻病人中的临床调查[c].2010年广东省中医、中西医结合脾胃消化病学术会议论文集，2010：167-168.

（收稿日期：2012-08-14）（编辑：何玉勤）