台式在位灭菌发酵罐操作流程

台式在位灭菌发酵罐操作流程

1、分别开启蒸汽发生器、空气压缩机、发酵罐的电源开关。

2、首次使用PH、DO电极之前，要把PH、DO电极放在纯净水

带电进行活化12小时左右。

3、PH、DO电极活化好之后，就要对PH电极和DO电极分别进

行标定。首先对PH电极进行中性溶液6.86的标定，等测量值稳定或变化很小之后，再把光标移到中性溶液6.86标定的位置按下标定即可。中性溶液6.86标定完成之后，再进行酸性溶液4.00或碱性溶液9.18的标定，标定方法与上面所说一样。两点标定完成之后，再进行自检。看标定是否成功，如自检结果与标定值差距较大，可再按照上述方法重新标定即可。DO电极零点的标定是在灭菌升温过程中，当温度超过100℃后，作为溶氧标定的零点值；

DO电极100％的标定是在正式发酵前（接种之后），设定发酵初始温度、搅拌转速、通气量和罐压（0.05—0.1Mpa）,以该初始状态下的溶氧作为溶氧标定的100％值，进行溶氧100％标定。

4、分别把标定好的PH、DO电极插入发酵罐并旋紧，再接上对

应的电极导线。

5、打开发酵罐的投料口，将培养基倒入发酵罐中（培养基必须没

过PH、DO电极，温度电极），然后盖上投料口准备灭菌。

6、在进入灭菌界面之前，先设定电机转速（让培养基受热均匀），

进入灭菌界面设定灭菌温度和灭菌时间（灭菌时间一般30min）。

然后关掉发酵罐所有的阀门，再选择性开最上面（发酵罐放空阀

304）、最下面（夹套排水、排气阀302）。最后再按键盘上的S/E 健。

7、打开蒸汽发生器的出汽阀门。

8、随着灭菌温度的升高，当培养基的温度到六七十度左右的时

候，夹套排水、排气阀302要适当的关小（提高蒸汽的使用效能）。

当灭菌温度超过90℃之后，搅拌电机自动停止运转（程序设定好的）。当灭菌温度快到100℃左右的时候，发酵罐放空阀304要适当的关小（提高蒸汽的使用效能）。当温度超过100℃之后，马上对DO电极进行零点的标定。

9、当灭菌温度达到设定的温度之后，首先打开空气过滤器排水针

形阀303，再开进过滤器蒸汽球阀401，控制好过滤器压力表的压力（范围在0.1—0.2Mpa之间）。之后再开进罐空气隔膜阀206（对罐内的空气分布器进行灭菌，但要保证过滤器的压力比罐内的压力高），开度不要太大，有少量蒸汽进入即可。

10、当灭菌运行时间快到25min左右的时候，先关掉进罐空气隔膜

阀206（防止培养基倒吸到过滤器中），再关进过滤器蒸汽球阀401，然后打开空气过滤器进气球阀207（吹滤芯）。

11、当培养基灭菌运行时间30min结束后，迅速关上夹套排水、排

气阀302，打开进水球阀202和夹套溢流放空阀301。关上蒸汽发生器的出汽阀门。

12、进入控制界面，设定转速（一般200—300）、设定温度（工艺

上的温度）。随着温度的下降罐内的压力也随之下降。当罐压跌倒

0.05Mpa左右的时候，先关上空气过滤器排水针形阀303（保证关

上303之前，滤芯已吹干），再开进罐空气隔膜阀206（保持有罐压，压力范围控制在0.05—0.1Mpa之间）。

13、当温度、转速、空气的流量、罐压达到工艺上的要求之后，把

罐压调节到0.02—0.03Mpa之间准备火焰接种（火焰接种圈内放上棉花倒上酒精）。首先把点燃的火焰接种圈套在投料口处，再在有火焰的条件下打开投料口盖子，然后把种子液倒入培养基中。再盖上投料口的盖子，移除火焰接种圈并使之熄灭。

14、培养基接完种之后，调节罐压到工艺上需要的压力，再对DO

电极100％进行标定。

15、培养基进行发酵，设定PH值、调节罐内的溶氧量。

16、发酵一段时间之后，插入取样针可以取少量的物料，取完料之

后，可以用止水嵌夹住取样硅胶管。把取出来的物料放在显微镜下进行观察，看菌生长的情况。

17、试验做完之后，关掉所有的执行件（电机、电磁阀、蠕动泵）。

先把罐压调到零，再装上放料阀门，然后加罐压，排出罐内的物料。最后才能关掉机箱的红色电源开关。