氨基酸对鲫鱼_泥鳅诱食活性的观察_吴文胜

管在 !" 分钟内匀速地加入试验区，对照用等量蒸馏水
得有关这 5 种单一氨基酸及其混合物对鲫鱼、泥鳅的 代替氨基酸溶液匀速滴加。随机选定迷宫的 ( 或 (F为
诱食情况的资料。
试验区。
! 材料与方法
!3 $ 试验记录
!3 % 试验装置 迷宫 （见图 %），仿伊奈和夫的试验水槽用玻璃制
取 5" 尾鱼放入 E 区，开始加液，两分钟后，撤去入 口处的栅栏。连续记录每两分钟鲫鱼分别进入两区入
表 % 氨基酸浓度配置表
氨基酸
& ’ ()* 低高
浓度 0 摩 1 升 2 "3 "4 "3 %
& ’ (+,
-).
低高低高
"3 % "3 %4 "3 4 %3 "
(+, / -).
(+, / -). / ()*
高浓度体积 高浓度体积比
各半混合
56 56 $
的报导。有鉴于此，笔者作了 5 种氨基酸 （&@()*、&@(),、-).）对鲫鱼、泥鳅的诱食活性试验，以取
嗜水气单胞菌按是否产胞外毒素及毒素的类型分 为高毒株和低毒株两大类。具高毒性的嗜水气单胞菌 对水产养殖动物，包括各种淡水养殖的鱼类、甲壳类、 爬行类等普遍具感染性，同时嗜水气单胞菌也能导致 人类疾病。有关嗜水气单胞菌的分离、分类、毒性检测 及对人类的致病性已有大量的报道和较深入的研究， 但由于不同类型动物的生理差异，有关嗜水气单胞菌 对水生动物生理的影响研究很少。本试验以淡水养殖 的代表动物———鲫鱼为人工感染的实验对象，并以酪 蛋白为酶作底物，检测鲫在人工感染产胞外毒素的嗜 水气单胞菌及菌液上清后，其血清、肝、肾和鳃 ( 种组 织中蛋白酶活性的变化。 % 材料与方法 %) % 实验材料
9 讨论
定的气味有反应，氨基酸诱发的部位在背侧部。钙离
92 + 高浓度，单一情况下对鲫鱼摄食没表现出引诱 子是嗅器官完成机能的必要条件。鱼类每个味蕾约有
作用的 :0;、$=> 其混合液却对鲫鱼产生了显著的引诱 +"" D +3" 个细胞，味细胞缺乏味孔，有一层粘液复盖
效果。这表现出氨基酸间的增效协同作用。伊奈和夫、 着。因此，相比哺乳动物有味物质可更为直接地进到
基酸亦能刺激鱼的嗅觉感受器。%7!$ 年 89+:;<= 第一个 !3 ! 试验鱼
进行了鱼类摄食行为试验。近年来的研究结果证明，
本地鲫鱼、泥鳅。鱼体健康，发育完全，性别不拘。
鱼类的摄饵引诱物中，其活性成份主要是氨基酸。因 鲫鱼全长 # J %" 厘米。泥鳅全长 B J %4 厘米。从市场购
鱼类的不同，氨基酸引诱作用的强弱将因种类和浓度 回的鲫鱼、泥鳅在水簇箱中暂养两天，再做试验。
设定菌细胞悬液、菌液上清、生理盐水 5 个处理方 式，每处理分别按 5" 微升量对鲫进行后腹腔注射感
染，每隔 %! 小时取样 % 次至 6( 小时，样品分血清、肝、 肾和鳃 ( 种组织，采样及样品前处理按文献 7(8进行。蛋 白酶活性测定采用紫外分光光度法检测 &&’，检测波长 !3& 钠米，以 9:!3& 值表示各组织的相对蛋白酶活性。 ! 结果与分析
’
++2 4!# "2 "#3
% 92 "93 % 42 +!6 % 72 "93
+2 +3! % 72 95#
32 4"4
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8"2 "3 < "2 "3
8"2 "+ 8"2 "3 8"2 "+ < "2 "3 8"2 "+ < "2 "+
作用。乡保正等报道 $01 对除 大西洋鲑外，几乎所有的试验 鱼 （包括海、淡水鱼）均可以发 生反应，可以看出 $01 对鱼类 具有强烈的引诱作用。对各种 鱼类有摄饵引诱或刺激作用的 物质中，EF$01 活性物质具有核 心的地位。 92 9 氨基酸作用于鱼类的机 制，目前还不很清楚，但已有人
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+2 !" . "2 9! 32 75 . +2 79 42 63 . +2 3# 62 "" . +2 9! 62 +" . !2 !6 92 53 . +2 4+ 72 ! . !2 4# 42 9" . +2 !#
#2 #3 "2 "3 % !2 "" % +2 7" 32 "" "2 63 % 92 67 !2 49
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8"2 "3 8"2 "3 8"2 "+ < "2 "3 8"2 "3 < "2 "3 8"2 "3 < "2 "3
酸甜菜碱对金鱼的摄食均无作用，而质量浓度 %#C 的 基酸混合液。每次试验取 %"" 毫升氨基酸溶液，用滴定
-)D 和盐酸甜菜碱对金鱼摄食有抑制性作 用。总之，有关促摄物的研究国外做了许多 工作，有些成果已应用于生产，国内有关这 方面的报道很少，有关氨基酸对养殖鱼类 如鲫鱼、泥鳅等的摄饵的影响未见有公开
随浓度升高引诱活性逐渐增大的趋势。宋天复等对红 有效方法。但在实验中，要尽量排除环境因子对试验
鲫 （金鱼）的试验中得出，$=> 随质量浓度的增加 （+C D 9C ）促摄作用也增强，但达到一定浓度后又下降。
鱼行为的影响，如光照，声音干扰等。 另外，对伊奈的迷宫还可作些改进：将 $、$G区的敞口
这是一个浓度影响到其作用的例证。
组成，分别接受氨基酸的 !F 氨基，!F 羧基，!F 氢和 !F 侧链，接受前三个基因的亚结合位的组成方式较适合 于 EF 型氨基酸，第 9 个亚结合位具明显的特殊性，以 分辨不同氨基酸的 !F 侧链。由于嗅上皮存在不同类型 的结合位和结合位数量上的差异不同鱼类对同种氨基
的抑制或引诱作用。
酸具有不同的敏感性。鱼类嗅球上一定的区域仅对一
在这方面作了一些工作。
性作用（! 8"2 "+）。高浓度则对鲫鱼抑制作用不显著；
鱼类嗅上皮存在氨基酸结合位，由四个亚结合位
低 浓 度 $=> 对 鲫 鱼 、 泥 鳅 均 表 现 出 抑 制 性 作 用 （! 8"2 "3），而其高浓度对这两种鱼没表现出显著性的
作用；$=> ? :0; 对泥鳅有抑制性作用 （! 8"2 "+），而对 鲫鱼表现出诱食效果 （! 8"2 "3）；$01 ? $=> ? :0; 对泥 鳅有显著的诱食作用 （! 8"2 "+），而对鲫鱼没有明显
表 4 氨基酸对泥鳅诱食活性观察结果
$$ 浓 度
进入试验区鱼的次数（次）
% &
) 毫摩 * +" 毫升 , 试验组（%- . /&） 对照组（%- . /&）
$01
"2 "3
"2 +
:0;
"2 3
+2 "
$=>
"2 +
"2 +3
:0; ? $=>
:0; ? $01 ? $=>
62 53 . +2 56 32 77 . "2 56 +2 63 . +2 !+ 32 +" . +2 95 !2 +" . "2 ## 32 #" . +2 75 92 64 . +2 +9 32 !9 . +2 6+
$$ 浓 度
进入试验区鱼的次数（次）
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) 毫摩 * +" 毫升 , 试验组（%- . /&） 对照组（%- . /&）
$01
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$01
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32 #! . !2 "4 +!2 3# . 32 #9 62 3" . 42 69 +#2 "4 . 92 35 #2 93 . !2 !7 +42 #7 . 92 73 +52 "4 . 32 49 32 #7 . !2 3+
基础研究"
氨基酸对鲫鱼、泥鳅诱食活性的观察
湖南省岳阳市水产研究所 （$%$""%） 吴文胜
% 引言
进出 (、(F区。迷宫长 %"" 厘米，宽 4" 厘米，高 5" 厘
鱼类具有灵敏的嗅觉与味觉，海、淡水鱼的味觉器 米。试验时水深控制在 %" 厘米左右。采用微流水，流速
官对于氨基酸都具有较强烈的感受性，挥发性弱的氨 #" 毫升 1 秒。试验用曝气自来水，HI 43 B J K3 "。
试验记录经过检验，结果如表 !、表 5。通过此结果 可以看出：()* 对鲫鱼有抑制性作用 （! L"3 "4）M 低浓 度 ()* 对泥鳅的摄食有引诱作用 （! L"3 "%）N -). 对泥 鳅有抑制性作用 （! L"3 "4）其低浓度对鲫鱼亦有抑制
·!"· 《内陆水产》!""! 年第 # 期
表 ! 氨基酸对鲫鱼诱食活性观察结果
人工感染嗜水气单胞菌后，鲫不同组织蛋白酶活 性的相对变化见图 % 2 (。从实验结果中可见测试的 ( 种组织均分布有蛋白酶，但酶活性存在一定差异，其中 鳃和血清中蛋白酶活性相对较高，而且在所测试的时 段内，未经处理的鲫组织蛋白酶活性也呈现出波动状 态，这提示在体质正常的鲫组织中蛋白酶活性会随着 一定的节律波动，这种节律性可能与鱼体内的生物钟 或生理的或环境的变化相一致。
@A&1B1 等都曾作过氨基酸的这种增效协同作用的报 鱼的味觉感受器膜。质子键，盐键、氢键、范德华键的
导。
结构分别是产生酸、咸、甜、苦的定味基。氨基酸是多
92 ! 氨基酸的浓度对其活性有决定性的作用，尤其 官能团分子，具有酸、咸、甜苦、鲜多种滋味。不同的氨
是市售的单一氨基酸，只有在相当高的浓度或与其它 基酸因分子结构上的差异，它们的滋味也是不同的。
作成更狭窄的入口，可减小实验的随机误差。将 $、$G
92 4 宋天复等报道，盐酸甜菜碱与 $=> 或与 :0; 之间 区的隔板完全用不透光材料制成，以免两区鱼相互干
《内陆水产》!""! 年第 # 期 ·!"·
嗜水气单胞菌对鲫组织蛋白酶活性的影响
苏州大学生命科学学院 $ 苏州，!%&""# ’ 朱越雄 曹广力
氨基酸混合时诱食活性才会提高。桥本在对鳗鱼的诱 精氨酸 （$=>）具有碱性侧链结构，其味以苦为主，苦味
引试验及伊奈和夫在对真鲷的试验中分别指出，$=> 是鱼类所厌恶的。
及 :0; 在浓度更高情况下才出现活性。试验证明 $=>、 92 3 本实验 的方法是参考伊奈 和夫等的工 作而建
:0; 高浓度对鲫鱼、泥鳅没表现出引诱活性，但有一种 成，通过实验，认为本法可作为研究鱼类促摄物的一种
无协同作用，与 $=> ? :0; 的混 合物对金鱼的摄食有抑制作 用。本试验中，4 种氨基酸的混 合液对泥鳅有明显的引诱作 用，但对鲫鱼没有作用。4 种氨 基酸中的 $01，在单一情况下， 对这两种鱼作用不同，对鲫鱼 有抑制作用，对泥鳅却有明显 的引诱作用。当 4 种氨基酸混 合时，$01 在其中发挥了主要的
口的次数，泥鳅停留于 ( 和 (F区的尾数。
!3 4 数据处理
低浓度的氨基酸做两次重复试验，高浓度及混合
氨基酸重复 5 次。以两分钟进入或停留的鱼的次数或
尾数的差数作为判别氨基酸对之引诱性大小的标准。
差异显著性检验用 9 检验。
5 结果
成。迷宫用玻璃板隔成五部分，E 区 (F、( 及 G、GF区。） 氨基酸液滴加在 ( 或 (F区，鱼通过 G、GF区可以自由
的不同而不同，()*、(+,、-).、>+? 是对较多鱼类有效应 !3 5 氨基酸
的。伊奈和夫对真鲷的试验中发现，只有 -).、&@A*)、 &@()* 等 5 种氨基酸混合存在时，饵料才能显示活性。 宋天复 （%7B7）报导质量浓度 !C 的 ()*3 A*)3 -)D 和盐
选用上海康达氨基酸厂生产的 5 种结晶氨基酸： &@()*、-).、&@(+,。各配成高低两种浓度的溶液 （见表 %），并将高浓度的 (+, 与 -). 及 (+,、()* 与 -). 配成氨
嗜水气单胞菌为分离自患病池养鲤鱼的高毒菌 株，体外试验中具 ! 和 " 溶血毒素，在 *+ 液体培养基 中培养 !( 小时后无菌操作离心，分离菌细胞和菌液上 清，并将菌细胞以生理盐水洗涤 ! 次后复原至原浓度 $ % , %"-./0 1 毫升 ’ 的菌悬液。体重为 %"" 2 %!" 克的 鲫在水族箱中恒温 $ !34 ’ 充气暂养 5 天后投入试验。 %) ! 实验方法