日本血吸虫新基因Sjnanos的克隆、表达及免疫保护效果评估
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新基 因, 其编 码 序 列 的 开 放 阅读 框 ( F 为 5 5 p,编 码 1 4个 氨 基 酸 , 论 相 对 分 子 量 为 1 . , I 8 2 荧 光 定 量 P R OR ) 2b 7 理 9 9P 为 . 。 C
技 术 分 析 显 示 该 基 因在 7 、3 、8 、3 、2 、2 d 1 d 1 d 2 d 3 d 4 d虫体 均 有表 达 , 在 1d和 1d虫 体 的表 达 量 明 显 高 于 其 他 天 数 的虫 体 , 但 8 3 在 雄 虫 的 表 达 量 高 于 雌 虫 。成 功构 建 了该 基 因 的 重组 表 达 质 粒 p T 8 ( )Snn s并 在 大肠 埃 希 菌 中获 得 表 达 , et nb t E 2 a + 一ja o , W s r—l e o 分 析 表 明 重 组 蛋 白具 有 较 好 的 免 疫 原 性 , 物 免 疫保 护 试 验 获 得 了 3 . 的 减 虫 率 和 5 . 的肝 脏 减 卵 率 。结 论 获 得 日 动 14 38
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W ANG n, O nj, ENG i io, IYe H ONG n Ya GU Fa —iP Jn ba L , Ya g,
王 艳 , 凡 吉 , 郭 彭金 彪 , 李 晔 , 洪 炀 , 陈 实 , 志 强 , 耀 军 , 傅 石 林矫 矫
摘 要 : 的 扩 增 、 达 日本 血 吸 虫 s n n s 码 基 因 并评 估 其 重 组 蛋 白诱 导 的 免 疫 保 护 效 果 。方 法 从 4 d龄 的 日 目 表 jao 编 2 本 血 吸 虫 成 虫 e 扩 增 了一 个 日本 血 吸 虫 性 别 差 异 表 达 的 基 因 , n a k登 录 号 为 AY 1 9 8 并 对 其 进 行 生 物 信 息 学 分 析 。 e Ge B n 844 , 将 该 基 因亚 克 隆入 原核 表达 载 体 p T2 a 转 『 至 大 肠 埃 希 菌 ( . o tB 1 用 异 丙 基 一 硫 代 半 乳 糖 苷 (P E 8, 艺 E cl I , ) 2 D I TG) 行 诱 导 表 进
本血 吸 虫 新 的 抗 原 基 因 S n n s 该 基 因 的 重 组 蛋 白在 小 鼠 中诱 导 了部 分 免 疫 保 护 作 用 。 jao, 关键 词 : 日本 血 吸 虫 ; a o 基 因 ; 原 性 ; 疫保 护 nns 抗 免 中 图 分 类 号 : 3 3 2 文 献标 识 码 : R8. A
2 1 。2 ( ) 0 0 6 7
Chi e e J ur 1o o s s n s o na f Zo no e
中 国 人 兽 共 患 病 学 报
6 31
文 章 编 号 :0 2 6 4 2 1 )7 6 1 7 1 0 —2 9 ( 0 0 0 —0 3 —0
日本 血吸 虫新 基 因 S h l s的克 隆 j al o 表 达 及 免 疫 保 护 效 果评 估 * 、
CHEN h , U iqa g, HIYa —u LI Ja —io S iF Zh— in S oi n, N iHale Waihona Puke Baiduja
( h n h iV trn r sa c n tt t ,C i ee ’d my o r( lu a (e e S a g a ee ia yRee rh I siu e h n s a e J Ag iu tr lS im , A( ’
n ct he pr en, t n nos e a plfe by i iy oft ot i he a g ne m iid PCR fom w o m s’ c r r DN A w a con d n o s l e i t pr onu lus xp e so v c or ce e r s in e t
达 , 纯 化 的 重 组 蛋 白免 疫 小 鼠 , L S 检 测 其 血 清 特 异 性 抗 体 效 价 , 白 印迹 分 析 检 测 其 抗 原 性 , 看 家 基 因 NAD 为 内 用 E IA 蛋 以 H
参, 应用 荧 光 定 量 P R 技 术 分 析 该 基 因在 血 吸 虫 各 个 阶段 的表 达 状 况 。结 果 同 源 性 分 析 表 明 , 基 因 为 日本 血 吸 虫 的 一 个 C 该
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技 术 分 析 显 示 该 基 因在 7 、3 、8 、3 、2 、2 d 1 d 1 d 2 d 3 d 4 d虫体 均 有表 达 , 在 1d和 1d虫 体 的表 达 量 明 显 高 于 其 他 天 数 的虫 体 , 但 8 3 在 雄 虫 的 表 达 量 高 于 雌 虫 。成 功构 建 了该 基 因 的 重组 表 达 质 粒 p T 8 ( )Snn s并 在 大肠 埃 希 菌 中获 得 表 达 , et nb t E 2 a + 一ja o , W s r—l e o 分 析 表 明 重 组 蛋 白具 有 较 好 的 免 疫 原 性 , 物 免 疫保 护 试 验 获 得 了 3 . 的 减 虫 率 和 5 . 的肝 脏 减 卵 率 。结 论 获 得 日 动 14 38
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中 国 人 兽 共 患 病 学 报
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